血红素蛋白疏水性的毫微秒荧光的研究

应用毫微秒荧光技术结合荧光探针方法研究牛血红蛋白、豆血红蛋白和辣根过氧化物酶同功酶等血红素蛋白辅基结合区域的疏水特性和构象变化,过氧化物酶活性中心的疏水性,构象变化和活性的关系.     

辣根过氧化物酶同功酶B、C构象的毫微秒萤光研究

本文利用1,8-ANS作萤光探针,通过毫微秒萤光技术研究了辣根过氧化物酶的同功酶B、C(文中以HRP(B)、HRP(C)表示)的构象,测得ANS和脱辅基HRP(B)、HRP(C)复合物的萤光寿命分别为19.6毫微秒和17.7毫微秒(即10~(-9)秒,用ns表示),从而证实同功酶B、C分子中确有较强的疏水区域,且这个疏水区域就在分子中血红素(heme)的结合区附近。通过萤光寿命的测定和研究,我们发现,HRP(B)、HRP(C)分子中的疏水区域的疏水性比牛血红蛋白分子中的要弱,比肌红蛋白分子中的要强;HRP(B)的疏水区的疏水性要略强于HRP(C)的。我们还研究了溶液的pH条件及不同浓度的脲对该疏水区构象的影响,观察到一个颇有意思的现象,即和牛血红蛋白一样,1Mal.的脲使血红素结合区的疏水性增强,1Mal.以上浓度的脲却使该区域疏水性减弱。在不同的pH条件下,血红素结合区域的疏水性亦有变化,其中,pH7条件下该区的疏水性最强。     

毫微秒荧光谱仪光学机械系统的设计

本文介绍我们研制的毫微秒荧光谱仪中的光学机械系统,重点介绍在灯室和样品室的设计中为提高仪器灵敏度和光收集效率而采取的措施以及安装调试方法。使用结果表明该系统设计合理、使用方便。     

细菌视紫红质的构象与介质pH依赖关系的荧光寿命研究

本文采用荧光探针的方法,通过测量与紫膜结合后的荧光探针ANS的荧光寿命随介质pH的变化,研究了介质pH对bR的构象的影响.结果表明:在pH4～11范围内ANS的荧光寿命呈U字形分布;其荧光寿命中含有快慢两种衰减成分;随着介质pH的变化;这两种成分的含量所占比例也有很大变化.说明介质pH能够引起蛋白构象的变化.     

一种毫微秒荧光谱去卷积处理方法及其在生物膜研究中的应用

本文介绍了在大分子荧光寿命测量中,为消除测量系统响应时间的影响,对荧光谱进行去卷积处理的一种方法.该方法由实测的响应函数和荧光函数计算出响应矩阵和荧光矩阵,再用单指数函数拟合实测荧光谱的尾部,用迭代法求解.方法比较简单,也比较实用.我们用自制的NSY-1毫微秒荧光谱仪及所设计的微机程序,测试了荧光探剂Merocyanine 540(MC540)标记的脂质体以及重设线粒体H—ATP酶脂酶体的荧光寿命ι.它们的寿命分别为1.63ns和1.30ns.这一明显差别提示测量荧光寿命可作为研究生物膜膜脂—蛋白质相互作用的一种手段.     

毫微秒脉冲萤光计

本文描述了测量毫微秒数量级萤光寿命的仪器——毫微秒脉冲萤光计。它的光源——自由放电灯是我们自己研制的,它的脉宽短(约5ns)、光谱分布宽(2000～6000(?))、重复频率高(每秒钟数十千周)、光脉冲波形稳定(幅度变化小于百分之五),每次光脉冲可发出10~8～10~(11)个光子。用本仪器测定了一些化合物的萤光寿命,其结果与已发表的数据非常一致。     

氨基酸修饰及荧光光谱分析研究黄花石蒜凝集素生物学活性与构象的关系

本文通过对黄花石蒜凝集素(Lycoris aurea Agglutinin,LAA)进行特殊氨基酸的化学修饰,显示一个LAA分子一共有8个色氨酸分子,其中有3个位于分子表面或近表面,Trp、Tyr和Ser/Thr不是LAA凝集活性所必需的氨基酸,而Asp/Glu的羧基和凝血活性密切相关,对其修饰后导致凝血活性丧失50%.通过荧光淬灭的方法对LAA分子中色氨酸所处微环境进行了研究.结果显示中性淬灭剂丙烯酰胺对LAA分子中色氨酸的淬灭作用最强可以淬灭100%的色氨酸荧光,其次是离子型淬灭剂碘化钾,能淬灭62.9%的色氨酸荧光,而氯化铯对LAA色氨酸的淬灭最弱,几乎不能淬灭LAA的荧光.     

毫微秒脉冲萤光计

本文描述了测量毫微秒数量级萤光寿命的仪器——毫微秒脉冲萤光计。它的光源——自由放电灯是我们自己研制的,它的脉宽短(约5ns)、光谱分布宽(2000～6000)、重复频率高(每秒钟数十千周)、光脉冲波形稳定(幅度变化小于百分之五),每次光脉冲可发出10~8～10~(11)个光子。用本仪器测定了一些化合物的萤光寿命,其结果与已发表的数据非常一致。     

多粘菌素-B的溶液构象研究

利用核磁共振技术对多粘菌素－Ｂ在溶液中的构象进行测定。多粘菌素－Ｂ的全部质子信号及３ＪＨＮα均得到归属和确认。大部分存在于环肽及侧链的分子间ＮＯＥ得到归属,并以此为依据对多粘菌素－Ｂ的溶液构象进行了计算     

DNA超螺旋构象的理论研究

本文总结了近年来描述DNA超螺旋结构的基本关系式和各种参量,综述了计算超螺旋的几何参数,定量分析DNA分子与蛋白质结合时的特殊构象,以及基于物理模型解释和预见精确的超螺旋空间构象等方面的理论研究进展。     

蛋白质溶液中构象,构象组装及构象动态学

蛋白质结构与功能关系的研究一直是生物化学和分子生物学领域内的一个主要课题。蛋白质分子结构的最重要特点是它不仅有一定的化学结构,而且有特定的空间结构,即构象。蛋白质的功能与特定的构象紧密相关,而且在蛋白质发挥功能的过程中常常伴随有构象的动态变化过程。由于生物体内蛋白质发挥作用的环境是生理pH条件下的水溶液,因此研究蛋白质在溶液状态下的构象及构象变化,对阐明蛋白质结构与功能关系是至关重要的。     

蛋白质溶液构象的研究方法

蛋白质的结构决定其功能。研究蛋白质溶液构象的手段日新月异,文章介绍了近年来研究蛋白质在溶液中三级结构、二级结构和基团微环境的常用手段。     

毫微秒荧光谱仪的自动数据处理系统

本文描述了时间相关单光子毫微秒荧光谱仪的自动数据处理系统,介绍了它的工作原理、设计特点及其应用。     

毫微秒电磁脉冲的生物效应实验研究和机理分析

采用宽频带横电磁场传输室(BTEM cell)从实验方面研究了细胞在瞬态电磁场作用下产生的非热生物学效应,并初步提出了其作用机理.     

细菌的血红蛋白研究

在人和动物体的血液中存在着大量的血红蛋白。这些蛋白质行使着向组织运输和贮存氧的功能。同样,在植物体内也有这种蛋白质,如豆血红蛋白(Leg Hb)。它的光吸收特性与动物血红蛋白的几乎完全相同,功能是为植物贮存和传递分子氧。在生物进化过程中,细     

裂褶菌多糖的构象研究

从裂褶菌中提取一水溶性多糖Sci.气相色谱,高碘酸盐氧比,甲基化分析等确定它为葡聚糖.1-3糖苷键构成其主链,平均三分之一的主链残基在6位带有分枝,红外光谱和三氧化铬氧化表明Scl全部残基为β构型,在不同的温度和不同的酸碱浓度状态下,检查糖链与刚果红形成络合物的能力以及Scl水溶液的粘度和旋光值.推测低温近中性Scl主要呈单股螺旋构象.升温或提高酸碱浓度导致有规则的螺旋构象转变成无规则的线团.高碘酸盐氧化去掉分枝则多股螺旋比例在构象中增加.