药用昆虫蜣螂对灵芝发酵产物体外抗肿瘤活性的影响

采用体外高通量筛选技术检测了补加药用昆虫蜣螂前后灵芝发酵产物的体外抗肿瘤活性。结果表明,补加和不补加蜣螂发酵后所得的胞内和胞外三萜样品对肉瘤细胞L290、肠癌细胞SW620、血癌细胞K562和肝癌细胞BEL7402都有显著的抑制作用(P<0.05)。在补加蜣螂发酵后,灵芝胞内三萜的抑制作用没有得到增强;但胞外三萜样品对BEL7402细胞的抑制作用得到了增强,补加和不补加蜣螂发酵后所得胞外三萜的抑制率分别为41.74%和32.37%(P<0.05)。由于补加蜣螂发酵后,新生成了胞外三萜lucidone C,因而对lucidone C的抗BEL7402肝癌活性进行了试验。结果显示,lucidone C在100μg/mL时,对BEL7402的抑制率为50.37%,提示lucidone C可能增强了补加蜣螂后灵芝胞外总三萜对BEL7402细胞的抑制作用。     

药用昆虫蜣螂对灵芝多糖生物合成的影响

采用液体深层发酵方式,研究了几种药用昆虫对灵芝多糖生物合成的影响。结果表明,药用昆虫蜣螂在添加量为5g/L时能显著促进灵芝胞内多糖(IPS)和胞外多糖(EPS)的形成(P<0.05)。胞内多糖和胞外多糖的产量分别由对照的(1.93±0.09)g/L和(520.3±20.2)mg/L提高到(2.41±0.12)g/L和(608.9±20.2)mg/L。灵芝胞内多糖和胞外多糖在DEAE纤维素柱上都可分离得到5种主要组分,其中IPS-1和EPS-1分别为2类多糖的主要组分。进一步用凝胶柱分离显示,IPS-1由3个单个的组分组成,EPS-1由2个单个的组分组成。添加蜣螂发酵后,灵芝胞内多糖和胞外多糖中没有出现新的组分,且各组分的相对含量也没有显著变化(P>0.05),提示添加蜣螂发酵后,灵芝胞内多糖和胞外多糖主要组分的合成途径并未改变。     

虫药蜣螂对灵芝发酵物风味组成的影响

采用顶空-气相色谱-质谱联用对虫药蜣螂和添加蜣螂发酵后的灵芝发酵物的风味物质进行了测定,进而分析了添加蜣螂对灵芝发酵物风味组成的影响。结果表明,虫药蜣螂和灵芝发酵物(添加蜣螂)中分别含有40和30多种风味物质。添加蜣螂发酵后,灵芝发酵物跟对照相比新出现了5种风味物质,分别为苯甲醛、α-松油醇、苯乙醇、唑苯并噻和桃金娘烯醇。其中α-松油醇、苯乙醇和唑苯并噻是蜣螂中的风味成分,苯甲醛和桃金娘烯醇为新产生成分。所有5种风味物质均为食品香料物质。蜣螂中其它风味成分经灵芝发酵转化或降解后,未出现在灵芝发酵物中。因此,添加蜣螂发酵对灵芝发酵物的风味无不良影响。结果还提示灵芝细胞可生物转化或降解虫药蜣螂中的部分风味物质。     

灵芝多糖的生物合成和发酵调控

灵芝多糖是灵芝的关键药效成分之一。从灵芝多糖的结构和构效关系、灵芝多糖的单糖组成,灵芝主要多糖IPS-1-1的基本合成途径,以及灵芝多糖的深层发酵调控策略和方法等方面,综述了灵芝多糖生物合成和发酵调控方面的新进展。并对今后的主要研究方向进行了展望。     

灵芝三萜的生物合成和发酵调控

灵芝作为一种名贵的药用真菌,在我国已有2 000多年的利用历史。灵芝三萜是灵芝的关键药效成分之一。从灵芝三萜的结构和构效关系、灵芝三萜的合成途径和相关关键酶,以及灵芝三萜的深层发酵调控策略和技术等方面,综述了灵芝三萜生物合成和发酵调控方面的新进展,进一步提出了当前存在的主要问题,并对今后的主要研究策略和研究方向进行了分析与展望。     

灵芝深层发酵生产四环三萜酸的研究

从灵芝深层发酵产物中分离得到三种四环三萜酸,命名为灵芝酸Ｍ１,Ｍ２,Ｍ３,在２５Ｌ发酵罐上研究了发酵条件对灵芝酸产量的影响,以及灵芝酸的代谢形成特征。结果表明最适发酵条件是：温度３０℃;通风量１：０．７５ｖ／ｖ／ｍ;搅拌转速１８０ｒ／ｍｉｎ;发酵时间８０ｈ,此时灵芝酸的最高产量是０．３６ｇ／Ｌ发酵液。抑菌实验表明上述灵芝酸能够抑制大肠杆菌,产气杆菌、肠炎杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长。     

药用真菌灵芝液体培养过程中的抗氧化活性研究

灵芝Ganoderma lingzhi是一种重要的药用真菌,已被《中国药典》正式收录。本研究主要以菌丝体干重、多糖含量、多酚含量、黄酮含量、抗坏血酸（ascorbic acid,AA）含量、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、2,2′-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2′-azino-bis(3- ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid),ABTS]自由基清除能力、铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）和亚铁离子螯合能力为测定指标,对灵芝液体培养过程中的抗氧化活性进行了评价。结果显示,该菌具有较高的抗氧化活性,体现在液体培养过程中生长代谢旺盛,可分泌大量多糖、多酚、黄酮、AA等物质和SOD等酶类,对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基及ABTS自由基等的清除效果显著,且具有较强的铁离子还原能力和亚铁离子螯合作用,这也说明该菌的抗氧化活性与其自身的生长状况、次级代谢产物分泌及还原能力等密切相关。此外,一定的环境胁迫压力也可以激发该菌启动自身的抗氧化系统以保护机体免受氧化损伤。     

灵芝液体深层发酵研究进展

用液体深层发酵技术进行工业化培养以获取灵芝活性多糖和三萜是灵芝研究和生产中的热点和方向。本文介绍了近年来灵芝液体发酵技术在培养基的组成、菌种选育、接种量、温度以及发酵模式和动力学方面的研究进展。并探讨了当前灵芝液体发酵研究中的一些问题,为今后进一步深入研究提供思路。     

灵芝液体深层发酵工艺研究初报

灵芝液体深层发酵工艺研究初报王淑华，孙翠焕，朱万琴，王恒新，冯健（辽宁省微生物研究所，朝阳１２２０００）灵芝｛ＧａｎｏｄｅｒｍａＣａｐｏｎｓ（Ｌｈｙｄ）Ｔｅｕｇｊ是祖国中医药学宝库中占有重要地位的真菌类药物。自古以来被视为“扶正固本、滋补强身”的珍品...     

不同植物药提取物对灵芝细胞生长和胞内三萜产物形成的影响

研究了不同植物药的水提和醇提物对灵芝深层发酵过程中菌丝量和胞内三萜产量的影响。将不同植物药的水提物和醇提物分别加入到发酵基础培养基中,培养7d后检测灵芝生物量和胞内三萜含量。结果表明,金银花和枸杞子水提物添加浓度为100mg/L时,可促进灵芝细胞的生长（p＜0.05）。连翘水提物对灵芝生长和胞内三萜的形成都有显著促进作用,当连翘水提物浓度为400mg/L时,胞内三萜产量从对照的（192.54±8.99）mg/L提高到（302.52±3.79）mg/L。金银花和枸杞子醇提物浓度为200mg/L时能显著促进灵芝细胞生长;枸杞子醇提物在同样浓度下还能促进灵芝胞内三萜的形成。但板蓝根和银杏叶水提物和醇提物都对灵芝的细胞生长和胞内三萜形成有较强的抑制作用。     

灵芝三萜酸分批发酵的非结构动力学模型

研究了灵芝胞内和胞外三萜酸在30L发酵罐中分批发酵的动力学特征。利用Sigmoid函数构建了灵芝细胞生长、底物消耗、胞内和胞外三萜酸的非结构动力学模型,并根据Boltzmann拟合求解出各模型参数。结果表明,各模型预测值能够较好地吻合实验实测值。灵芝细胞比生长速率在第2.5天达到最大值（μmax）,为0.700d?1;葡萄糖比消耗速率在第2.4天达到最大值（qS, max）为1.060d?1;胞内三萜酸比合成速率在第4.7天达到最大值（qITA, max）为11.345mg/(g·d);胞外三萜酸比合成速     

蜣螂对灵芝发酵菌丝体生长和三萜产物形成的影响

研究了几种药用昆虫对灵芝深层培养过程中细胞生长和三萜产物形成的影响。结果表明,添加不同药用昆虫对灵芝细胞生长和细胞内三萜的形成无显著促进作用(P>0.05),但蜣螂虫粉的添加,能显著促进灵芝胞外三萜的形成(P<0.01)。在添加浓度为5g/L时,胞外三萜的产量从对照的220.2±9.7mg/L提高到304.3±11.8mg/L。结果提示药用昆虫蜣螂虫粉中含有促进灵芝胞外三萜形成的功能因子。     

玉米水解糖液体培养灵芝发酵条件的优化

目的：优化液体培养灵芝的发酵条件,提高多糖产量。方法：采用玉米水解糖为主要成分的培养基,通过单因素和正交实验,对赤芝G22菌株液体培养过程中影响多糖产量的发酵温度、摇床转速等工艺条件进行了研究。结果：经极差分析和方差分析确定了多糖高产的最佳发酵条件为：发酵温度27℃、摇床转速170r/min、培养基初始pH值6.5、发酵时间144 h。结论：通过优化液体发酵条件,可显著提高灵芝多糖的产量。在最佳发酵条件下液体培养G22菌株,灵芝总多糖产量由1.851g/L提高到2.439g/L,提高了31.0%。     

灵芝液体发酵清除自由基活性产物发酵条件的优化

以红灵芝(Ganoderma.lucidum)为实验菌株,对其液体发酵活性产物清除自由基的发酵条件进行了研究。实验考察了培养基成分对灵芝液体发酵所产生的有效产物清除自由基能力的影响。结果表明,葡萄糖、酵母粉分别为灵芝发酵活性产物清除自由基效果较合适的碳源、氮源,最佳质量浓度分别为40 g.L-1和3 g.L-1,清除自由基的能力分别为55.7%、40.8%和66.5%、50.6%;铁离子对灵芝发酵产物清除超氧阴离子具有明显的效果,适宜质量分数为70×10-6;清除超氧阴离子的能力为54.6%,而硒离子对灵芝发酵产物抑制羟自由基有明显的促进作用,最适的质量分数为90×10-6清除羟自由基的能力为67.7%。油酸能促进灵芝发酵产物的清除超氧阴离子和羟自由基的能力,适宜的质量分数为0.1%,清除两种自由基的能力分别为:73.7%,53%。