大柴胡汤调控TGF-β/Smad信号通路对DBTC联合乙醇诱发小鼠胰腺纤维化的防治作用

目的:探讨大柴胡汤对二丁基二氯化锡(DBTC)联合乙醇所致小鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化中TGF-β/Smad信号通路的影响及大柴胡汤防治胰腺纤维化的作用机制。方法:昆明小鼠96只,随机分成空白组(Con组)、慢性胰腺炎组(CP组)、大柴胡汤治疗组(DCHD组)(n=32)。一次性尾静脉注射DBTC(8 mg/kg)联合10%乙醇饲喂代替正常饮水复制小鼠CP模型。注射DBTC 3 d后小鼠又随机分为CP组和DCHD组,DCHD组予大柴胡汤(1 g/ml,6 g/kg·d)灌胃,并伴随10%乙醇饲喂代替正常饮水。各组在1、2、4、8周分批处死小鼠(n=8),观察胰腺组织的形态学变化及血清淀粉酶、透明质酸的变化;检测胰腺组织MMP-1/TIMP-1 mRNA的表达以及胰腺组织Ⅰ型胶原、TGF-βRⅠ、p-Smad 2/3、Smad 7蛋白的表达。结果:与空白组相比,CP组2周、4周血清淀粉酶及透明质酸处于较高水平,8周时淀粉酶明显降低,而透明质酸水平进一步升高(P0.05);DCHD组血清淀粉酶及透明质酸含量明显低于CP组(P0.01)。与空白组相比,CP组胰腺组织COLA1、TGF-βRⅠ、p-Smad 2/3表达持续升高,Smad7蛋白表达明显减少;DCHD治疗组可降低COLA1的表达水平有效抑制CP小鼠胰腺TGF-βRⅠ、p-Smad 2/3表达,使Smad7蛋白表达升高。与空白组相比,CP 2周、4周胰腺MMP-1 mRNA表达持续降低,TIMP-1 mRNA表达随造模时间延长明显升高(P0.01);DCHD组各时间点胰腺MMP-1表达明显增多,TIMP-1表达减少(P0.05)。结论:大柴胡汤通过抑制TGF-β/Smad信号通路活化,调节MMP-1/TIMP-1的平衡,发挥防治慢性胰腺炎胰腺纤维化的作用。     

禹州漏芦醇提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的影响

探讨禹州漏芦乙醇提取物对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用。以CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,同时测定肝匀浆中的超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)的水平。将肝大叶HE染色,观察各组小鼠的肝组织病理改变。结果表明,同模型组比较,禹州漏芦乙醇提取物各剂量组均能降低小鼠血清中ALT、AST及MDA活性,升高肝组织中GSH-Px和SOD的活性,并能明显改善肝组织的病理学损伤。禹州漏芦乙醇提取物对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有较好保肝作用,其作用可能与清除体内自由基和抗氧化的作用有关。     

巨噬细胞在小鼠肾纤维化恢复期的研究

目的:观察巨噬细胞在小鼠肾纤维化进展期和恢复期的作用。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)肾纤维化模型和输尿管再通模型(RUUO)进行试验研究;用Masson染色和HE染色观察肾脏纤维化程度和炎症变化趋势;流式分析肾脏中巨噬细胞细胞群的比例变化。结果:Masson染色显示肾脏纤维化程度在梗阻解除后胶原沉积面积减轻从80%降到46%,差异有统计学意义(P0.05)。HE染色显示梗阻解除后肾间质炎症减轻,且有新生小管形成。流式结果显示梗阻解除后巨噬细胞细胞群比例由19%降到2.6%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:巨噬细胞可能在肾纤维化恢复期发挥一定作用。     

MiR-706通过TAOK1信号通路抑制小鼠肝纤维化

目的探讨mi R-706介导的TAOK1信号通路在小鼠肝纤维化进程中的作用及分子生物学机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)肝纤维化模型组(BDL组)和假手术组两组,小鼠造模4周后取材,HE、Masson染色及Western blot分析检测小鼠肝纤维化造模是否成功;Real-time PCR检测肝组织内mi R-706的表达含量;免疫组织化学染色检测肝组织内TAOK1和TAOK1下游促使肝纤维化发生的MAPK通路相关基因的蛋白表达含量的变化。结果 HE及Masson染色显示胆总管结扎肝纤维化模型组中纤维间隔增多,同时,Western blot显示BDL组中α-SMA及collagen I含量增加,说明肝纤维化造模成功;Real-time PCR显示BDL组中mi R-706含量显著下降,同时,免疫组织化学染色显示,BDL组中TAOK1和其下游MAPK通路中P38与MEK3免疫反应性明显增强。结论肝纤维化组中可能由于mi R-706表达的下调,mi R-706对其下游TAOK1信号通路加重小鼠BDL所导致的肝纤维化进程。     

牛磺酸对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中IL-6影响

目的:观察牛磺酸对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化模型血清中IL-6的影响。方法:将30只雄性SPF级C57B/L小鼠随机分为空白对照组,模型组和牛磺酸组,每组各10只。空白对照组给予100%花生油1 m L/Kg腹腔注射,每周2次,共10周;模型组给予含20%CCl4的花生油1 m L/Kg腹腔注射,每周2次,共10周;牛磺酸组给予含20%CCl4的花生油1 m L/Kg腹腔注射,每周2次,共10周,并从第3周起给予牛磺酸500 mg/Kg/d灌胃至第10周。在第10周通过摘除眼球取血,检测小鼠血清中的透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、三型前胶原(PCⅢ)、四型胶原(Ⅳ-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、IL-6的含量;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;计算肝脏指数;观察小鼠肝脏的HE染色病理组织学改变。结果:模型组与空白对照组相比小鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、ALT、AST和IL-6水平显著升高(P0.05),肝脏组织中SOD和MDA水平显著升高(P0.05),肝脏指数增加(P0.05),病理检查显示肝细胞坏死并出现脂肪空泡、纤维组织增生和炎细胞浸润;牛磺酸组与模型组相比小鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、ALT、AST和IL-6的水平显著降低(P0.05),肝脏组织中SOD显著升高(P0.05),MDA水平显著降低(P0.05),肝脏指数降低(P0.05),病理检查显示肝脏组织中无炎性浸润、脂肪空泡和无纤维组织沉积。结论:牛磺酸可以降低肝纤维化小鼠血清中IL-6的含量,减轻CCl4诱导小鼠肝纤维化程度。     

藏红花酸抗小鼠肝纤维化的实验研究

目的:通过观察藏红花酸对肝纤维化小鼠肝组织病理学改变及p38MAPK蛋白表达的影响,探讨其抗肝纤维化作用及可能的机制。方法:36只6周龄雄性昆明小鼠随机分为3组:藏红花酸组、模型组、正常组。除正常对照组外,其余两组小鼠给予30%四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射,首次注射5 m L/Kg,以后每次3 m L/Kg,每3日1次,连续12周。同时藏红花酸组给予藏红花酸5mg/Kg灌胃,每日1次,连续12周。实验过程中,观察各组小鼠的一般状态。12周末处死小鼠,肝组织切片行HE、Masson染色,显微镜下观察病理改变,免疫组化检测小鼠肝组织p38MAPK蛋白的表达。结果:实验过程中,模型组小鼠一般状态较差,体重增长缓慢;藏红花酸组小鼠一般状态尚可,体重较模型组增长明显(P0.05)。肝组织HE、Masson染色结果显示:模型组小鼠肝纤维化程度较重(造模成功),与其相比,藏红花酸组小鼠肝纤维化程度有所改善,差异有统计学意义。与模型组相比,藏红花酸组肝组织p38MAPK表达显著下降(P0.05)。结论:藏红花酸能有效减轻小鼠肝损伤及纤肝维化程度,其抗肝纤维化的机制可能与下调p38MAPK蛋白的表达有关。     

黄葵素抑制巨噬细胞浸润和活化改善db/db小鼠肾纤维化实验研究

为探讨黄葵素对糖尿病肾病肾纤维化治疗作用及机制,采用SPF级C57BLKS/J db/db雄性小鼠20只,随机分为黄葵素低、中、高剂量(97.5、195、390 mg/kg/d)给药组和模型组4组,以同背景的5只db/m小鼠为空白对照组,分别用黄葵素混悬液及等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,连续16周,第24周处死,收集血和肾脏。检测尿ACR、血肌酐、血尿素氮,HE和Masson染色观察肾脏形态学改变和纤维化程度,免疫组化染色检测肾组织巨噬细胞标记F4/80表达情况,Western blot法检测肾组织F4/80蛋白、胶原蛋白III、波形蛋白表达情况,qPCR法检测肾组织TNF-α、IL-1β和iNOS的mRNA水平。结果显示:与模型组相比,黄葵素可以降低db/db小鼠尿ACR、血肌酐、血尿素氮水平,减轻肾脏病理损伤及胶原纤维的沉积,降低肾组织胶原蛋白III、波形蛋白及F4/80蛋白表达,减少肾组织F4/80标记巨噬细胞浸润;并下调了肾组织TNF-α、IL-1β、iNOS的mRNA水平。综上表明黄葵素可有效缓解db/db小鼠肾脏炎症反应,改善肾功能及肾纤维化,发挥肾保护作用,其机制与减少肾组织内巨噬细胞浸润及抑制促炎的M1型巨噬细胞极化相关。     

胰腺p-STAT3在急性胰腺炎危重演变中的表达变化

目的：检测信号转导与转录激活因子3（STAT3）在不同程度胰腺炎模型小鼠胰腺组织中表达的变化,探讨其在急性胰腺炎危重演变中的作用。方法：48只健康雄性balb/c小鼠随机分为3组（n=16）：对照组（Con）、轻症急性胰腺炎（MAP）组、重症急性胰腺炎（SAP）组。Con组腹腔注射0.9% NaCl;MAP组腹腔注射雨蛙素;SAP组腹腔注射雨蛙素联合脂多糖;分别于造模后2 h、6 h检测血清淀粉酶的活性;分离胰腺、称重,计算胰腺湿重比;检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性,评估炎细胞浸润肺组织的程度;HE染色切片,光镜下观察胰腺、肺组织病理学改变; Western blot法检测磷酸化STAT3（p-STAT3）的变化。结果：与Con组比较, MAP组和SAP组在各时间点血清淀粉酶活性和胰腺组织湿重比均升高（P<0.05）;肺组织MPO活性显著升高（P<0.05）,且SAP组肺MPO含量明显高于MAP组（P<0.01）。MAP组和SAP组,在造模后2 h,胰腺和肺均可见不同程度的病理学改变; SAP组在造模后2 h胰腺p-STAT3的表达最高,6 h表达有所减弱;MAP组各时间点仅有微量表达;Con组在各时间点为阴性表达。结论：p-STAT3在轻症急性胰腺炎和重症急性胰腺炎模型小鼠胰腺中的表达差异明显,说明重症急性胰腺炎的重症化与STAT3的活化关系密切;抑制STAT3活化将成为阻止急性胰腺炎重症化的靶点之一。     

黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠肝功能及MPO,MDA,TGF-β的影响

目的:探究黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠血清髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)及转化生长因子β(TGF-β)的影响及肝功能的保护作用。方法:将健康的Wistar大鼠30只随机分为3组:对照组、模型组、黑木耳多糖提取物组,利用胆总管结扎术制备肝纤维化动物模型,术后分别用生理盐水0.1 m L/(kg·d)、黑木耳多糖提取物0.1 mg/(kg·d)灌胃1次/d。21 d后腹主动脉采血,测肝功能指标,取肝组织测MDA、MPO、TGF-β,Masson染色。结果:肝纤维化动物模型成功制备。黑木耳多糖提取物组总胆红素(STB)、谷氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、MPO、MDA较模型组明显降低,TGF-β含量降低。Masson染色可见:模型组肝小叶结构破坏,较对照组汇管区可见大面积胶原纤维的形成;黑木耳多糖提取物组肝细胞轻度水肿、肝索排列欠整齐,肝汇管区及各部位胶原纤维形成量略少。结论:黑木耳多糖提取物可减轻胆总管结扎大鼠脂质过氧化损伤,MPO含量使TGF-β因子释放减少,从而减少胶原纤维形成,减轻或延缓大鼠肝纤维化。     

黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠肝功能及MPO, MDA, TGF-beta的影响

目的：探究黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠血清髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)及转化生长因子beta(TGF-beta)的影响及 肝功能的保护作用。方法：将健康的Wistar大鼠30 只随机分为3 组：对照组、模型组、黑木耳多糖提取物组,利用胆总管结扎术制 备肝纤维化动物模型,术后分别用生理盐水0.1 mL/(kg·d)、黑木耳多糖提取物0.1 mg/(kg·d)灌胃1 次/d。21 d后腹主动脉采血,测 肝功能指标,取肝组织测MDA、MPO、TGF-beta,Masson 染色。结果：肝纤维化动物模型成功制备。黑木耳多糖提取物组总胆红素 (STB)、谷氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、MPO、MDA较模型组明显降低,TGF-茁含量降低。Masson 染色可见：模型 组肝小叶结构破坏,较对照组汇管区可见大面积胶原纤维的形成;黑木耳多糖提取物组肝细胞轻度水肿、肝索排列欠整齐,肝汇 管区及各部位胶原纤维形成量略少。结论：黑木耳多糖提取物可减轻胆总管结扎大鼠脂质过氧化损伤,MPO 含量使TGF-beta因子 释放减少,从而减少胶原纤维形成,减轻或延缓大鼠肝纤维化。     

子宫内膜异位症纤维化小鼠模型构建方法及其应用

目的探索一种高效的子宫内膜异位症纤维化小鼠模型建立方法及其评价方法。方法改良的腹腔注射法构建BALB/c小鼠子宫内膜异位症纤维化模型;收集小鼠腹腔灌洗液,ELISA试剂盒检测灌洗液TGF-β1水平;对小鼠腹腔粘连程度进行评分; HE染色验证子宫内膜异位症模型是否成功; Masson染色检测异位灶胶原纤维沉积情况,评估其胶原沉积程度;免疫组化法检测纤维化相关蛋白E-cadherin、Collagen I、α-SMA、smooth muscle myosin heavy chain II (SMMHC-II)的表达情况,评估异位灶纤维化程度。结果改良腹腔注射法构建小鼠子宫内膜异位症纤维化小鼠模型成功率可达到100%。小鼠腹腔灌洗液TGF-β1水平随造模时间延长有明显升高。Masson染色和纤维化相关蛋白免疫组化染色观察到子宫内膜异位症小鼠腹腔存在纤维化表型。结论改良的腹腔注射法构建小鼠子宫内膜异位症纤维化模型成功率高,腹腔灌洗液TGF-β1水平、Masson染色和纤维化相关蛋白E-cadherin、Collagen I、α-SMA、SMMHC-II免疫组化染色能够评价小鼠子宫内膜异位症盆腔纤维化程度。     

益气化湿通络方对实验性肾功能衰竭大鼠肾脏氧化应激损伤及纤维化的改善作用

目的:观察益气化湿通络方对5/6肾切除肾衰竭模型大鼠残留肾脏氧化应激损伤及纤维化的改善作用。方法:采用Platt法建立5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠模型。术后2周抽检大鼠确认造模成功后,将大鼠随机分为:模型组(Model)、益气化湿通络方组(YHT)、贝那普利组(BH)、假手术组(Sham),每组8只。每日灌胃治疗1次(YHT组免煎颗粒水溶液0.276 g/100 g;BH组盐酸贝那普利片剂水溶液0.09 mg/100 g灌胃;Sham及Model 1 ml/100 g生理盐水灌胃),连续治疗12周。12周末用代谢笼收集24 h尿液,检测尿蛋白含量。之后麻醉大鼠腹主动脉取血、摘取肾脏,检测血清血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)含量;HE、Masson染色观察左肾病理改变;检测肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,检测肾组织中核因子NF-E2相关因子(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、NADPH氧化酶4(Nox4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原蛋白(Collagen1)的表达以及Nrf2在肾组织细胞核内的表达。结果:与Sham组比较,Model组大鼠肾小球损伤较重,纤维化明显;Scr、BUN、MDA水平和24 h尿蛋白的排出量,Keap1、Nox4、TGF-β1、Collagen1的蛋白表达均明显升高(P＜0.01),SOD活性、Nrf2表达明显降低(P＜0.01);与Model组比较,经YHT或BH干预后肾小球病变程度减轻,纤维化较少,Scr、BUN、MDA水平和24 h尿蛋白的排出量,Keap1、Nox4、TGF-β1、Collagen1的蛋白表达均明显减少(P＜0.01),SOD活性、Nrf2表达明显升高(P＜0.01)。结论:益气化湿通络方通过影响Nrf2/Keap1信号通路、下调TGF-β1蛋白表达,从而改善肾衰竭模型大鼠残留肾脏的氧化应激损伤及纤维化程度。     

2型糖尿病模型小鼠造模时间的选择

目的:分析不同时期的2型糖尿病小鼠血生化指标及心肌和肾脏的病理变化情况,为选择2型糖尿病模型小鼠造模时间提供依据。方法:32只健康雄性ICR小鼠高脂饲料喂养6周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg),连续5d,制备糖尿病模型。9d后测空腹血糖(FBG),高于11.1mmol/L视为糖尿病模型。分别于成模后第4、6、8周处死一组小鼠。另取8只雄性ICR小鼠作为对照组,常规饲料喂养,于糖尿病组小鼠成模后第8周处死。分析小鼠生化及病理情况:①心脏、肾脏脏器系数计算;②血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量测定;③HE染色观察心肌和肾脏组织病变的整体情况;Masson染色观察心肌组织纤维化情况;PAS染色观察肾脏组织病理变化。结果:与对照组小鼠进行比较,第4、6、8周的糖尿病小鼠心脏器系数升高,血清LDH、CK升高,病理组织学见心肌细胞肥大,纤维化;肾脏脏器系数升高,肾功能肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)显著升高,病理组织学见肾小球肥大,肾小管基底膜增厚,管腔萎缩。结论:第6周糖尿病小鼠相关生化病理指标改变相对明显且饲养时间相对较短,故2型糖尿病模型小鼠造模后第6周是进行药物干预和病理、生理、生化等研究的最佳时间。     

地鳖肽对CCl_4诱导的慢性肝损伤小鼠的抗氧化保护作用的研究

目的探讨地鳖肽对CCl4致诱导的慢性肝损伤小鼠的抗氧化保护作用。方法小鼠随机分为正常组、模型组、地鳖肽组(50、100、200 mg/kg)及阳性药组,正常组小鼠灌服生理盐水,地鳖肽组小鼠每天灌服不同剂量地鳖肽、阳性药组小鼠每天灌胃水飞蓟素(100 mg/kg),连续6周,同时除正常组小鼠腹腔注射花生油溶液外,其余组小鼠腹腔注射0. 1%CCl4花生油溶液10 m L/kg,每周2次连续6周,末次给药24 h后小鼠称重处死取肝组织,HE染色观察肝组织学变化,分光光度法检测肝功能酶(AST、ALT)、抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)、过氧化物(MDA),荧光定量PCR法测定炎症因子、凋亡因子、纤维化因子基因表达,ELISA测定炎症因子蛋白水平。结果显微镜观察结果正常组小鼠肝细胞未见异常,模型组小鼠肝细胞出现充血、坏死、纤维化现象、肝小叶消失,地鳖肽组小鼠肝细胞形态结构损伤,随地鳖肽剂量增加肝细胞损伤程度明显减弱,小鼠肝脾指数明显低于模型组;与模型组比较,地鳖肽组小鼠血清中AST、ALT活力显著降低、肝中MDA含量明显降低、抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活力显著提高,炎症因子(IL-6、TNF-α、i NOS)蛋白与基因表达水平均显著降低,促凋亡因子(Bax、Caspase-3)和纤维化因子(α-SMA、TGF-β)基因水平表达也明显降低。结论地鳖肽可有效改善CCl4致小鼠慢性肝损伤,其保护效应可能与地鳖肽抗氧化作用密切相关。     

西格列汀对糖尿病小鼠心肌重构和自噬的影响及其机制

目的: 探讨西格列汀对糖尿病小鼠心肌重构和自噬的影响和可能的机制。方法: 10周龄的C57小鼠腹腔注射STZ 50 mg/(kg·d),连续注射5 d,7 d测血糖浓度＞16.7 mmol/L视为糖尿病小鼠造模成功,造模成功4周后给与药物干预。本实验分四组,对照组(control, 腹腔注射等体积的缓冲液, n=10)、模型组(Streptozocin, STZ腹腔注射诱导糖尿病模型,n=8)、处理组(在模型组基础上给与西格列汀灌胃10 mg/(kg·d),n=8)、抑制剂组(在处理组的基础上给与腹腔注射Compound C (AMPK通路抑制剂,10 mg/(kg·d),n=8),对照组腹腔注射等体积缓冲液,6周后称体重,处死,取小鼠心脏并分离心室称重,计算心室/体重比,HE染色观察心肌细胞形态,Masson染色观察纤维化程度,Western blot 检测心肌脑钠肽(BNP)、转化生长因子β(TGF-β)、缝隙连接蛋白43(Cx43)、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、LC3B蛋白表达。结果: 给药6周后,与对照组相比,模型组小鼠体重没有明显改变,心室/体重比明显增加(P＜0.05),苏木素-伊红(HE)染色显示细胞增大,Masson染色显示心肌间隙纤维化增多,BNP、TGF-β蛋白明显升高,Cx43、LC3B、AMPK蛋白下降(P＜0.05)。与模型组相比,西格列汀组BNP、TGF-β蛋白明显下降,Cx43、LC3B、AMPK蛋白增多(P＜0.05)。然而Compound C会抑制Cx43、LC3B、AMPK蛋白表达的上调(P＜ 0.05)。结论: 西格列汀可以改善糖尿病小鼠心肌肥厚和纤维化,并且可以通过AMPK相关通路调节Cx43和自噬。     

不同剂量雨蛙素诱导小鼠急性胰腺炎模型的对比研究

目的:探究相同频次、不同剂量雨蛙素腹腔注射诱导急性胰腺炎小鼠模型轻重程度的差异。方法:雨蛙素腹腔注射法诱导胰腺炎C57小鼠模型,共注射12次,每次间隔1 h,分别设置单次剂量为10μg/kg、50μg/kg、250μg/kg三个梯度。检测模型的血清淀粉酶、脂肪酶、胰腺组织水含量,以及胰腺组织HE染色、病理学评分和肺组织HE染色。结果:①雨蛙素造模组小鼠淀粉酶、脂肪酶和胰腺组织水含量均较正常组明显升高(P0.05),50μg/kg剂量组各项数值达最大,250μg/kg剂量组无再明显升高(P0.05)。②造模组与对照组相比,胰腺组织和肺组织炎细胞浸润明显,低剂量(10μg/kg)注射胰腺组织呈水肿性改变,无出血坏死;常规剂量(50μg/kg)注射引起胰腺组织片状坏死出血;大剂量(250μg/kg)注射引起胰腺组织大范围坏死出血(P0.05)。结论:10μg/kg雨蛙素12次腹腔注射可诱发小鼠急性水肿性胰腺炎,50μg/kg雨蛙素12次腹腔注射能诱导出小鼠急性重症胰腺炎。     

贝母提取物对异丙肾上腺素致小鼠心肌纤维化的作用

目的：观察贝母提取物（FE）对异丙肾上腺素（Iso）致小鼠心肌纤维化的作用。方法：昆明种小鼠40只,雌雄兼用,随机分为4组（n=10）：对照组、模型组、FE 900 mg/kg、300 mg/kg剂量组,每只i.h Iso1.5 mg/kg （0.3 ml/d）造模,持续14 d;高、低给药组造模同时分别0.9 ml/d,0.4 ml/d灌胃FE,对照组s.c.等量生理盐水,连续30 d。实验结束,测定小鼠心重指数,血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量,HE和Masson染色分析心肌组织病理改变,免疫组化法检测心肌转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达。结果：与对照组相比,模型组SOD活性显著性下降,MDA含量显著升高（P<0.05）;显微镜下,心肌组织间隙变大,炎性细胞浸润,出血坏死细胞增加,TGF-β₁表达明显增加（P<0.05）;与模型组比较,FE组小鼠心重指数明显下降,SOD活性显著提高,MDA含量明显下降（P<0.05）,心肌组织病理学改变缓解,TGF-β₁表达明显下调（P<0.05）,且呈一定剂量依赖性。结论：FE治疗对抗Iso诱导心肌纤维化,其机制可能与清除氧自由基,减轻脂质过氧化损伤及抑制TGF-β1表达有关。     

制备低剂量四氯化碳诱导小鼠慢性肝损伤模型的探讨

目的：通过注射低剂量四氯化碳（ carbon tetrachloride ,CC14）建立B/C小鼠肝损伤模型。方法正常B/C小鼠随机分为正常对照组、油对照组、CCl4模型组。正常对照组常规饲养;油对照组腹腔注射鲁花花生油（10μL/g,1次/3天,连续6周）;CC14模型组腹腔注射0.5％CC14（10μL/g,1次/3天,连续6周）。第6周,各组小鼠检测血清AST、ALT浓度,HE及Masson染色后观察小鼠肝脏结构、细胞形态及纤维化程度。结果第6周CCl4模型组小鼠血清ALT（P＝0.00）、AST（P＝0.00）浓度极显著性增高,HE及Masson染色显示CCl4模型组小鼠肝上皮细胞呈广泛性空泡样变及大量坏死,肝小叶内出现明显的条索样纤维增生,其纤维化程度评分显著性升高（P ＝0.00）,纤维显色积分光密度值极显著性增高（P ＝0.00）。结论注射低剂量CCl4可以诱导B/C小鼠肝损伤模型,实验模型具备肝损伤和肝纤维化病理特征。     

不同能量CO2点阵激光对博来霉素诱导的小鼠增生性瘢痕的作用及Hedgehog信号通路的影响

目的:探讨不同能量CO_2点阵激光对博莱霉素诱导的小鼠增生性瘢痕模型的作用及其对瘢痕组织中Hedgehog信号通路的影响。方法:于雄性C57BL/6J小鼠背部皮肤注射博来霉素(1 mg/d,4周)制作增生性瘢痕模型,另取4只小鼠背部注射PBS缓冲液作为对照。造模成功之后,随机将小鼠分为瘢痕对照组(模型组),10 mj激光治疗组(10 mj组)和20 mj激光治疗组(20 mj组),每组6只小鼠。10 mj组小鼠给予10 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周);20 mj组小鼠给予20 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周)。治疗结束后,处死小鼠,取瘢痕全层标本进行病理组织学染色观察(HE、Masson染色)以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、GLi1免疫荧光观察。结果:①我们成功复制出小鼠增生性瘢痕模型;②20 mj CO_2点阵激光治疗可有效修复瘢痕组织,经治疗后皮肤瘢痕程度显著减轻,同时可降低真皮层厚度和减轻瘢痕组织的纤维化程度;③免疫荧光染色结果提示,CO_2点阵激光可显著减少小鼠皮肤增生性瘢痕中α-SMA、GLi1表达。结论:于小鼠的背部皮肤注射博莱霉素可建立增生性瘢痕模型。CO_2点阵激光为治疗增生性瘢一种有效的治疗方式,其作用可能与其对Hedgehog信号通路的抑制有关。     

雨蛙素联合脂多糖致小鼠重症急性胰腺炎模型的建立及其机理的探讨

为建立一种快速、简便、无创伤性的小鼠重症急性胰腺炎模型。本实验运用雨蛙素联合脂多糖小鼠腹腔内给药;血淀粉酶和胰腺湿重测定;胰腺和胰外器官病理学检查;腺泡细胞透射电镜观察;血清NO浓度测定;胰腺组织SOD和MDA测定。结果发现,雨蛙素联合脂多糖组血淀粉酶、NO浓度和胰腺湿重均增高,SOD活力降低,MDA含量升高,胰腺间质水肿、实质出血坏死、炎症细胞浸润,腺泡细胞受损严重,胰外多器官受到不同程度的损害;雨蛙素组胰腺无明显出血坏死,胰外器官正常;脂多糖组胰腺基本正常,胰外器官轻微炎症浸润。由本实验结果显示,雨蛙素联合脂多糖致小鼠重症急性胰腺炎模型具有人类重症急性胰腺炎的病理特征,为非创伤性,成模快速稳定,重复性好;脂多糖促使雨蛙素诱导的急性水肿型胰腺炎重症化的机理与自由基释放-清除机制和氧化-抗氧化机制紊乱有关。