中国人群葡萄糖磷酸变位酶基因频率测定及PGM18-1表型检出

葡萄搪磷酸变位酶(phosphoglucomutase, PGM）是糖元代谢中十分重要的酶,它可逆地 催化下列反应：a-D-葡萄搪-1一磷酸二兰生全 G-1,6-2P a-D-葡萄糖-6-磷酸盐。该酶是由定位于1,4, 6染色单体上PGM PGM PGM,位点上的 等位基因所控制。PGM 广泛分布于体内各种 组织中,其中80-90多为PGM,的基因产物。 红细胞中PGM,编码的同工酶活性与PGM, 活性各占50多,在红细胞中检测不出PG嶙基 因的活性产物。 1964年Spencer等人(47先后证明PGM：具 有多态性。采用淀粉凝胶法检测出PGM, 1, PGM, 2-1和PGM, 2三种遗传表型,它们是 由第1对染色体上PGM,位点上的两个常见 的等位基因PGMi和PGM,所决定。高分辨 的等电聚焦电泳可检出PG城有10种亚型, 是由PGM,位点上的4个等位基因PGMi十、 PGM犷、PG叫十和PG域一所编码121。本文报 告我们应用国产淀粉,采用混合淀粉凝胶方法 测定中国（北京地区）人群的基因频率分布,同 时报道对PGM, 8-1表型的检出。     

鄂温克人红细胞ESD和PGM、表型分布及基因频率的研究

人类红细胞醋酶D(ESD）和葡萄糖磷酸变 位酶-1(PGM,）的多态性及其基因足位已被阐 明〔1,4.5,6]。由于它们按孟德尔定律进行遗传,现 已成为群体遗传学、法医学等方面重要的基因 标志。用来进行个体识别,亲权鉴定及探讨族 源、民族融合、迁移都具有重要价值。在我区自 然科学基金资助下,我们对鄂温克族人红细胞 ESI）和PGM,分型进行了调查。     

田菁胶生物合成中的甘露糖磷酸变位酶

用 DE-52和磷酸纤维素亲和层析分离和纯化了甘露糖磷酸变位酶(PMM),非 SDS 凝胶电泳为一条带,但 SDS 凝胶电泳则有三条带,分子量为41500,66000和74000。测定了田菁(Sesbania cannabina)种子的子叶和胚乳中的甘露糖磷酸变位酶和葡萄糖磷酸变位酶(PGM)的活性,并进行了比较,讨论了两种酶的耐温性与田菁胶合成生理活动的相关性。     

柚品种的等位酶变异研究

研究了柚的48个品种的等位酶变异,利用等位酶分析技术对柚的酯酶（EST）,6－磷酸葡萄糖异的酶（PGI）,6－磷酸葡萄糖变位酶（PGM）,莽草酸脱氢酶（SKD）,超氧化物歧化酶（SOD）共5个酶系统的10个等位酶基因座进行了分析,除PGI－1,PGI－2两个基因座外,其它8个均为多态性基因座;10个等位酶基因座共观察到的等位基因25个,平均每个基因座的有效等位基因数目为1．55,基因多样度0．2805,柚的品种间具有较为丰富的等位酶标记遗传多样性,但柚类种质资源群体总的遗传多样性水平偏低。柚的较低的有效等位基因数目与基因多样度可能由于人工选择及资源流失造成。     

中国人红细胞PGM(PGM位点1)多态性的等电聚焦电泳研究

用等电聚焦电泳技术对北京地区180人进行红细胞葡萄糖磷酸变位酶(PGM_1)遗传表型的分析鉴定。共检测出九个PGM_1亚型,可能由于检测样本数还不够多,目前尚未检测到PGM_1 2-亚型。根据测定结果,观察了我国人群中PGM_1亚型的分布情况,并计算出决定PGM_1亚型的四个等位基因频率为:PGM~(1+)_10617,PGM~(1-)_1 0.100,PGM~(2+)_1 0.236,PGM~(2-)_10.047。采用等电聚焦电泳可将PGM_1的个体识别能力(DP值)由用普通淀粉胶电泳分型的0.558提高到0.742。结果与世界上其他国家和地区人群相似,PGM_1在我国人群中同样是一个个体识别能力很高的多态性酶类。     

昆明小鼠体内发育早期胚胎葡萄糖代谢关键酶转录产物的分析

首次报道了昆明小鼠体内发育的早期胚胎1-细胞至桑椹期阶段葡萄糖代谢的3种关键酶-6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）、6-磷酸果糖激酶（PFK）和磷酸葡萄糖变位酶（PGM）的基因转录情况,其分别体现了磷酸戊糖、糖酵解、糖原的合成和分解等途径,根据G6PDH、PFK、PGM的cDNA序列分别设计和合成3套共6对内、外引物,采用巢式RT-PCR方法对其进行检测。结果表明：早期胚胎1-8细胞阶段均有G6PDH基因的转录,叠椹期胚胎不存在该基因的转录,说明早期胚胎1-8细胞阶段可能存在磷酸戊糖,而桑椹期则不存在;1-细胞至桑椹期均存在PFK基因的转录,说明该阶段的胚胎可能存在糖酵解代谢途径;1-细胞至桑椹期均不存在PGM基因的转录,说明该阶段的胚胎可能不存在糖原的合成与分解代谢途径。     

葡萄糖-1-磷酸对灵芝多糖合成的影响

在以葡萄糖为唯一碳源进行灵芝液态发酵时,通过添加不同浓度的代谢中间产物葡萄糖-1-磷酸,研究其对灵芝胞外多糖产量、单糖组成、合成途径相关酶的影响,从而确定影响灵芝多糖单糖组成的关键酶。结果显示,添加葡萄糖-1-磷酸对灵芝多糖产量和多糖的单糖组成并无明显影响。在检测的3种灵芝多糖合成关键酶中,葡萄糖-1-磷酸的添加抑制磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、磷酸葡萄糖异构酶(PGI)的酶活,对磷酸甘露糖异构酶(PMI)无明显影响。此外,通过相关性分析后发现,发酵过程中半乳糖和甘露糖比例的变化分别与PGM和PGI、PMI具有相关性。本文结果对实现灵芝多糖代谢的灵活调控提供有益的参考。     

中国汉族人群红细胞ADA 6-PGD同工酶多态性的研究

腺昔脱氨酶(Adenosine deaminase，以下简 称ADA）和6一磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6一phosphogluconate dehydrogenase，以下简称6-PGD) 是两类有重要生物学意义的同工酶。在法医学， 群体遗传学和在为骨髓移植植活提供证据等应 用方面，同红细胞酸性磷酸酶(EAP),醋酶 D(EsD)、葡萄糖磷酸变位酶(PGM)、乙二醛 酶(GLO）等同工酶一样，是重要而有用的遗传标记［(11。现将我们完成的中国汉族人群（北 京）ADA, 6-PGD 的基因频率结果简报如下。     

云南省元江县白族人红细胞E$D和PGM，分型的调查

柔用淀粉／琼脂糖混合凝胶同步电泳法,对云南省元江县126例白族人红细胞EsD和PGM,作了 分型调查,计算出这两种红细胞同乙酶的基因频率及识别能力,结果表明云南省元江县白族与上述两地 居民（汉族）的红细胞EsD和PGM：表型分布无显著性差异。     

中国广东人红细胞PGM_1亚型遗传性多态现象

采用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术,调查了中国(广东)406名无亲缘关系的正常人红细胞磷酸葡萄糖变位酶-1(PGM_1)亚型的遗传多态性。除了常见的10种亚型外,还发现了由一个新的变异型等位基因和常见的4个等位基因杂合产生的9例变异型。PGM_1位点的等位基因频率PGM_1~(1+)、PGM_1~(1-)、PGM_1~(2+)、PGM-1~(2-)和PGM_1~(V丰)(变异型等位基因)分别为0.5973、0.1256、0.1724、0.0936和0.0111;群体处于Hardy-Weinberg式平衡状态。变异型等位基因以多态频率出现,可能成为该群体的一个重要的遗传性特征。     

磷酸甘油酸变位酶

磷酸甘油酸变位酶(phosphoglycerate mutase,PGM)是糖代谢过程中的关键酶,催化3-磷酸甘油酸和2-磷酸甘油酸之间的相互转换。根据催化反应中对辅因子2,3-二磷酸甘油酸的依赖关系分为两种类型:辅因子依赖型PGM(dPGM)和辅因子非依赖型PGM(iPGM)。本文对PGM的分类、结构及功能进行了详细介绍。     

迪庆藏猪的遗传多样性研究

采用水平板淀粉凝胶电泳法检测了52头迪庆藏猪的13个血液蛋白座位的多态性,并计算各座位等位基因的频率及其估计误差以及基因频率估计值的精确度和可靠性。结果发现,迪庆藏猪在Tf、Cp、Am、Hp、6PGD、CEs、Ca共7个座位表现出多态性,并分别受控于3、2、5、5、2、2、3个常染色体等位基因。其余6个座位(Pa 、EsD、 PHI、 PGM、 G6PD、 MDH)未检测出多态性。     

富民枳的分类地位及其在进化中的作用研究——叶片同工酶证据

富民枳(Poncirus polyandra S.Q.Ding et al.)是分布于云南省富民县的一个新枳属类型。在形态上,它不同于普通枳(P.trifoliata Raf.)。富民枳为常绿类型,子房10室,花瓣5—9,花丝35—43,一年开花2—3次。通过对富民枳、普通枳、金柑属及柑桔属的叶片谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)、6-磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、6-磷酸葡萄糖异构酶(PGI)、过氧化物酶(PX)、苹果酸酶(ME)、超氧化物歧化酶(SOD)以及四唑氧化酶(TO)同工酶的比较后发现,富民枳独具Sod-1-M基因,具有稀有的To-2-R基因,在To-1及Got-3位点上,存在无效基因,这些结果表明,富民枳能够以种的地位存在于枳属中。在进化过程中,富民枳可能是联结枳属与柑桔属的“桥梁”。     

人磷酸葡萄糖变位酶5对肝癌细胞生长和迁移的影响

目的:构建带有Flag标签的人磷酸葡萄糖变位酶5(PGM5)基因的真核表达载体,研究PGM5对肝癌细胞生长、迁移的影响。方法:以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增PGM5基因编码序列,酶切后插入pcDNA3.0-Flag载体;将空载体与重组质粒分别转染293T细胞,Western印迹检测PGM5的表达;CCK8生长曲线实验研究PGM5对肝癌细胞生长的影响,细胞划痕实验检测PGM5对肝癌细胞迁移的影响。结果:双酶切及测序结果显示pcDNA3.0-Flag-PGM5真核表达载体构建成功;Western印迹表明PGM5在293T细胞中获得表达;生长曲线和划痕实验显示PGM5可以显著抑制肝癌细胞的生长和迁移。结论:构建了pcDNA3.0-Flag-PGM5表达载体,并发现PGM5可以抑制肝癌细胞生长和迁移,为进一步研究PGM5在癌症发生发展中的作用奠定了基础。     

畲族Ge,PGM1,AcP1,6—PGD,ADA和AK1的遗传多态性

对畲族血浆组特异性成分、红细胞磷酸葡萄糖变位酶１（ＰＧＭ１）、酶性磷酸酶（ＡｃＰ１）、６－磷酸葡萄糖酸氢酶（６－ＰＧＤ）、腺苷脱氨酶（ＡＤＡ０、腺苷酸激酶（ＡＫ１）的遗传多态性进行了研究。Ｇｃ与ＰＧＭ１是用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚集分析的,ＡｃＰ１、６－ＰＧＤ、ＡＤＡ及ＡＤ１是用淀粉凝胶电泳分析的。各基因座的基因频率分别为Ｇｃ１Ｆ０．４７２２、Ｇｅ１Ｓ０．２４２１、Ｇｃ２０．２７３８;ＰＧＭ１１Ａ     

妊娠早期产前诊断的研究——绒毛六种酶的测定

以妊娠6.5—10周经人工流产后完全发育的叶状绒毛为材料,用等电聚焦和淀粉凝胶电泳方法分析了绒毛的磷酸葡萄糖变位酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶、腺苷激酶、酸性磷酸酶、酯酶D和腺苷脱氨酶探讨了这些酶活性定量测定的方法,报道了绒毛6种酶活性的正常值,为某些代谢病的孕早期产前诊断奠定了基础。     

Tw近交系小鼠的遗传鉴定和罕见基因分析

目的通过等位基因酶的生化多态性可以发现小鼠DNA的序列多态性,为人类疾病基因鉴定和动物实验的研究提供丰富的动物基因库,为科研工作提供宝贵资源。方法应用国产生化标记检测试剂盒,采用遗传生化检测方法,对天津市卫生防病中心自主培育的近交系小鼠进行Akp-1(碱性磷酸酶-1)等二十五个生化位点标记基因检测。结果经检测发现TW(Tianjin wild)小鼠在Amy1(淀粉酶-1),Es2(酯酶-2),Es3(酯酶-3),Es10(酯酶-10),Gpd1(葡萄糖磷酸脱氢酶-1),Hbb(血红蛋白β链),Np1(核苷酸磷酸化酶-1),Pgm2(磷酸葡萄糖变位酶-2)共八个生化位点发现罕见基因。结论检测国内新品系的遗传生化基因位点,发现罕见基因型。     

不同产地大熊猫红细胞同工酶的比较研究

本文对饲养在国内几家动物园内的不同性别及不同产地的十六只大熊猫的红细胞乳酸脱氢酶(LDH),苹果酸脱氢酶(MDH),G-6-PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)以及葡萄糖磷酸异构酶(GPI或PGI)四种同工酶进行了淀粉凝胶电泳分析。确定了大熊猫红细胞上述四种同工酶的酶谱,从而在生化水平上对我国不同产地的大熊猫进行了初步研究和探讨。     

柑桔同工酶及其在分类中应用的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了柑桔类３属１０５个生物型以及１个自交和２个杂我组合后代的谷氨酸草酰乙酸转氨酶、６－磷酸葡萄糖异构酶、６－磷酸葡萄糖变位酶、苹果酸酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、四唑氧化酶等７种酶系统同工酶;并研究研究了它们的遗传控制,发现这７种酶系统同工酶至少由１４个基因位点控制,柑桔类３属之间的同工酶基因型差异十分明显,各属都有独特的基因。两个物型之间,相同基因数目越多,则亲缘关     

广西区西南桦天然居群遗传多样性的研究

 以采自广西区11个西南桦(Betula alnoides)天然居群的种子培育出的幼苗为材料,取其嫩叶开展21种酶系统的水平切片淀粉凝胶电泳实验,运用作者改进的Tris-马来酸提取缓冲液 (含30%PVP 40 000和1%2-巯基乙醇),筛选出AMP(氨基肽酶Aminopeptidase)、FBA(果糖二磷酸酶Fructose-bisphosphate aldolase)、GDH(谷氨酸脱氢酶Glutamate dehydrogenase)、G6PD(6-磷酸葡萄糖脱氢酶Glucose-6-phosphate dehydrogenase)、IDH(异柠檬酸脱氢酶Isocitrate dehydrogenase)、MDH(苹果酸脱氢酶Malate dehydrogenase)、PGD(6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶Phosphogluconate dehydrogenase)、PGI(磷酸葡萄糖异构酶Phosphoglucoisomerase)、PGM(磷酸葡萄糖变位酶Phosphoglucomutase)和SKD(莽草酸脱氢酶Shikimate dehydrogenase)等10种酶,获得了清晰且可重复的酶谱。通过谱带遗传分析确定了15个位点,其中有6个单态位点,9个多态位点 (0.95标准),具40个等位基因。在居群水平上,西南桦的多态位点百分数 (P) 为55.2%,平均每个位点的等位基因数 (A) 为2.00,平均预期杂合度 (He) 为0.204。均超过Hamrick (1992)等提出的远交风媒木本植物的平均值(53.0%,184%和0154),表明西南桦的遗传变异水平高。在11个西南桦居群内,实际杂合度 (Ho)均高于预期杂合度,出现杂合子过量,可能存在利于杂合子的自然选择。西南桦遗传多样性与地理位置相关不显著。居群2 (靖西地州)、5 (平果海城)、9 (田林者苗) 包含绝大部分的等位基因,而且具较高的遗传多样性,应加以保护和管理,作为其基因资源就地保存的基地。本研究解决了以西南桦嫩叶为材料进行等位酶分析的关键技术,为进一步开展西南桦乃至桦木属树种的遗传结构和遗传多样性等提供了技术基础;同时掌握了西南桦天然居群的遗传多样性现状,为其有效保护和合理经营以及西南桦的遗传改良提供了理论依据。