简易平板聚丙烯酰胺凝胶干燥及保存装置

平板(Slab)聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)与含有十二烷基磺酸钠的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种重要的生化技术,在蛋白质与多肽的分析鉴定上,应用十分普遍。但电泳后的凝胶脆弱易碎,难长期保存。近年来,国外已有凝胶干燥保存装置的商品,但价格较贵,效果也不很理想。在干燥过程中有时胶片会干裂,尤其是对一些含聚丙烯酰胺浓度较高(20％以上)的胶或较厚的胶片(1.5—2mm)。在工作中,我     

快速简易凝胶板干燥方法

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳广泛应用于生物化学及免疫化学等研究方面。人们希望能将电泳凝胶板制成干片,以便进行放射自显影或使电泳结果可以长期保存。国内外已有凝胶真空干燥器生产,可以使凝胶板在加热和真空情况下迅速干燥。但价格昂贵,而且每次只能干燥1—2片,不能适应大量干燥凝胶板的需要。虽然Ginlian和王育东在室温下用简易方法干燥凝胶板,但凝胶板需先用甘油预处理     

一种简便经济的薄层凝胶电泳保存方法——滤纸转移自干法

在分析性聚丙烯酰胺凝胶电泳特别是平板等电聚焦电泳中,薄层凝胶越来越被广泛采用,它有节省试剂、加样量少、电泳时间短、分辨率高及冷却效果好等优点。分析者都希望能将电泳染色后的凝胶理想地保存下来,目前所采用的方法均是直接将凝胶干燥在玻璃板或凝胶支持膜上(由于凝胶太薄不能转移),或者使用专用的透明保存膜,有时还要用真空干燥器干燥。     

聚丙烯酰胺板状凝胶的简单干燥方法

我们依据组织逐级脱水的原理,经过摸索得到一种经济简单的凝胶干燥方法,特别是解决了浓度较高(10％—15％)凝胶和3％—25％梯度凝胶的干燥,可将聚丙烯酰胺板状凝胶干燥成一张平整、透明的干胶片,可直接照相或用感光胶片直接印制成负片。现将方法介绍如下:     

蛋白电泳铜染色后胶中生物活性IL-2的回收

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)已广泛用于蛋白质样品组分分析。通常的方法染色后蛋白质和肽即固定在凝胶上,尽管凝胶用SDS平衡后可对蛋白质进行洗脱或转移,但由于回收率低、耗时,同时回收的蛋白只能保存其抗原性而生物活性丧失,因而限制了SDS-PAGE在蛋白质回收领域中的应用。最近     

聚丙烯酰胺凝胶电泳脂蛋白带的耐尔氏蓝染色法

目前聚丙烯酰胺凝胶电泳用考马斯亮蓝G或R染蛋白带、用过碘酸-Schiff试剂染糖蛋白带,均取得了满意的结果.至于用油红(OR)、苏丹黑(SB)对琼脂、醋酸纤维膜等凝胶中的脂蛋白带的染色鉴定是成功的,但对聚丙烯酰胺凝胶中的脂蛋白带的染色则不够满意.我们应用耐尔氏蓝[Nile’s blue] 染色法染盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的脂蛋白带取得了较好的结果.现介绍如下:     

垂直平板凝胶真空干燥的简易方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳已被广泛应用于生物化学的各个领域。因垂直平板凝胶电泳和圆盘凝胶电泳相比,具有实验误差小、效率高、操作方便等优点,近年来发展较快。对于平板凝胶图谱,一般保存在7%的乙酸溶     

微量聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

聚丙烯酰胺凝胶作为电泳分离的支持物于1959年首次得到应用,而聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳则是于1964年发展起来的。同年在分离脑蛋白时,首先应用了微量聚丙烯酰胺凝胶电泳。1965年有人将毛细管用于微量盘状电泳技术并报道了毫微克(ng)蛋白的分离及定量。     

一种新的制备酸性聚丙烯酰胺凝胶的引发系统

一种新的制备酸性聚丙烯酰胺凝胶的引发系统孙新立＊孙海虹王友爱（河北师范大学生物系,石家庄０５００１６）关键词引发系统;转化率;聚合;酸性凝胶;成胶时间碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳已经广泛应用于生化分析的各个领域。但酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳、过硫酸铵（ＡＰ）－...     

胎儿血红蛋白~Gγ丁与~Aγ电泳区带的双波长扫描法定量

用双波长扫描法测定改良Triton X-100酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离的~Gγ和~Aγ链比值,具有准确、快速和步骤简便等优点。将凝胶干燥后作区带的双波长扫描定量,不影响测定结果,有利于标本的长期保存和进行大量的筛选工作。     

BamHI DNA甲基化酶的提纯及物理化学性质

 通过硫酸铵盐析,DEAE-纤维素柱层析,磷酸纤维素亲和层析及SephadexG-100凝胶过滤法,从噬淀粉芽孢杆菌HI(Bacillus amyloliguefaciens HI)提纯了DNA甲基化酶。用聚丙烯酰胺凝胶电泳检查,已达电泳均一,比活力提高了326倍。并用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和Sephadex G-100凝胶过滤法测得其天然酶的分子量为273000,又用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它的亚基分子量为34500,故该酶有8个分子量相同的亚基。用凝胶电聚焦法测得其pI_(22 c)=9.0。     

LDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析植物过氧化物酶同工酶

以高粱和甘蓝型油菜叶片为材料,用十二烷基磺酸锂不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（LDS-PAGE）检测过氧化物酶同工酶的结果表明,LDS-PAGE的酶带条数比非变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（native PAGE）明显增加,分辨率大大提高,上样量少,胶片易保存;比复性电泳（G-PAGE）的步骤简单,电泳后无需除去LDS即可直接按常规活性染色方法染色。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳胶板干燥保存法

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定核酸及蛋白质等生物高分子,甚多优点,可惜胶板不易保存,稍为干燥,即成粉末。文献报道用多孔硅橡胶夹于板两侧,负压吸干。也有人用纤维素薄膜覆盖后,置室温自然干燥,但费事费     

凝胶板速快干燥方法

作为分析蛋白质和酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳,已广泛地应用于医学和生物学的各个领域。垂直平板凝胶电泳与圆盘电泳相比有其独特优点:(1)操作方便,效率高;(2)数个样品同在一平板便于对比,也减少了实验过程中的系统误差;(3)结果分析方便,并可在必要时将所需酶带洗脱分析。经染色、固定、漂洗之后的凝胶图谱记载,目前通常采用扫描记录,摄影或直接保存凝胶干板等方法。关于制备干板的方法虽有报道,但由于条件和操作复杂,往往不     

一种检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质免疫活性的方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)已成为最有效的分离蛋白质手段。在免疫学研究中,经常遇到的问题是从聚丙烯酰胺凝胶中回收被分开的蛋白质组分,然后测其免疫活性。从聚丙烯酰胺凝胶中回收蛋白质的方法已有许多报道,其中以Hartvig的方法为最简便。该法以溴酚蓝为指示剂,利用电泳系统本身使     

一种简便的凝胶干燥法

SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)已成为分析蛋白质核酸等样品的一种常用方法。为使染色后的凝胶长期保存,需制成干胶。下面介绍一种比已报道的更为简便易行的凝胶干燥方法。取一块如电泳用大小的玻璃扳,将二张略大于玻璃板的玻璃纸浸于脱色液中。先取一张玻璃纸平铺于玻璃板上,从一端向另一端平铺,抚平去气泡,涂一层50%甘油。将凝胶放其上,在凝胶面上也涂一层50%甘油。将另一张玻璃纸覆盖在凝胶上从一端开始慢慢平铺,抚平赶尽气泡,将大于玻璃板的玻璃纸向玻璃板     

胎儿血红蛋白 Gγ丁与 Aγ电泳区带的双波长扫描法定量

用双波长扫描法测定改良Triton X-100酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离的 ^Gγ和 ^Aγ链比值,具有准确、快速和步骤简便等优点。将凝胶干燥后作区带的双波长扫描定量,不影响测定结果,有利于标本的长期保存和进行大量的筛选工作。     

凝胶干板的制作保存与拍摄

凝胶干板的制作保存与拍摄聚丙烯酰胺凝胶干板的制作是电泳中常遇到的一个难题,许多学者曾对此进行过研究,其方法各具特色,但效果不甚理想．通常使用ＧＢ２１°全色胶卷直接拍摄凝胶板,其区带与背景之间反差小．笔者在实验中将聚丙烯酰胺凝胶板微缩后制成干板,方法较...     

植物组织中蛋白质及同功酶的聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳是鉴定蛋白质、酶的有力工具,是生物化学研究上不可缺少的实验技术。聚丙烯酰胺凝胶是一种合成的凝胶,是由丙烯酰胺单体和交联剂甲义丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合而成的大分子。不同的甲义丙烯酰胺在和丙烯酰胺浓度可制成孔径不同大小的电泳基质。电泳时蛋白质混     

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组DNA RAPD扩增产物的方法学比较

通过20%(wv)的琼脂糖凝胶和5%(wv)的聚丙烯酰胺凝胶电泳对小麦白粉病抗、感特性品种基因组DNA的RAPD检测结果表明:5%聚丙烯酰胺凝胶对线性DNA分子(01～20kb)和长度相差100bp以下的DNA分子的分离较20%的琼脂糖凝胶电泳效果好。因此,我们研究出了一项利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测小麦白粉病抗、感特性的新技术,在工作中建立了一种适合于检测小麦基因组DNA结构差异的电泳方法。该方法主要包括:(1)丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的新配比;(2)分离DNA片段的最佳凝胶浓度;(3)电泳条件;(4)脱色、漂洗、银染、显色过程。实验发现,该技术对于小麦白粉病抗、感特性检测中的小片段和长度相差100bp以下的线性DNAPCR扩增结果的分辨效果较好。应用该技术在抗感品种间已经发现了DNA水平上的差异。