中华猕猴桃采后处理对昆士兰果蝇的防治

将被感染的中华猕猴桃果实浸在300p.p.m.乐果中半分钟;或冷藏在1.5℃,8-10天;或在20℃以下,以二溴乙烷(19克/立方米)熏蒸2小时,对防治为害中华猕猴桃果实的果蝇(Dacus tryoni)效果很好。     

对弹性组织的选择性染色 (俄西印——新复红法)

1)切片脱蜡,入100%酒精.2)以俄西印——新复红(orcinol-new fuchsin)液于37℃染15分钟。染液配法为:新复红(new fuchsin)(C.I.,No.678)2克俄西印(orcinol)4克蒸馏水 200毫升上液煮佛5分钟,加37.2%三氯化铁溶液(ferricchloride)25毫升,再煮5分钟,待凉,过滤,其沉淀收集于滤约上,并须洗净晾干,将沉淀溶于95%酒精100     

显示环氧树脂厚切片中多糖,蛋白质和脂类的细胞化学方法

用花生(Arachis hypogaea L.)种子的子叶组织作为模式材料,Epon 812包埋的组织进行厚切片后,按下列三步染色。第一步,PAS 反应:(1)在0.5%高碘酸(0.3%硝酸配制)中10分钟;(2)自来水洗1—2分钟,蒸馏水经过;(3)锡夫试剂中30分钟;(4)偏亚硫酸氢钠溶液三次洗涤,每次2分钟;(5)自来水洗5分钟,蒸馏水经过。第二步,苏丹黑 B 液染色:(1)70%酒精中1—2分钟;(2)新鲜配制的0.3%苏丹黑 B 液(70%酒精配制)中染色,40—60℃,30分钟至1小时;(3)70%酒精中分色1分钟;(4)自来水冼,蒸馏水经过。第三步,考马斯蓝染色:(1)7%醋酸中1—2分钟;(2)1%考马斯蓝(7%醋酸配制)中染色,60℃,20分钟;(3)0.1%醋酸液中分色1分钟;(4)自来水冼5分钟,蒸馏水经过;(5)自然干燥或在40℃电热温箱中烘干。干燥后的切片用甘油胶封固。经这三步染色的切片,细胞内的多糖、脂类和蛋白体同时被显示:淀粉粒及纤维素的细胞壁为樱红色,油滴为黑色,蛋白体为蓝色。制片能长期保存。     

一种快速观察四膜虫纤毛的方法

器材与药品离心机,三用水箱,天平,染色缸。席夫试剂(schiff reagent),漂白液,乙醇二甲苯,磷酸缓冲液(PH7.2)。亮绿(溶剂是95％的乙醇) 步骤 1.取四膜虫浮液3—5ml,离心5分钟(800—1000转/分),去上清液,留沉淀物0.3—0.5ml。 2.用PH7.2磷酸缓冲液洗涤,离心5分钟(800—1000转/分),去上清液,留沉淀物0.3—0.5ml。 3.涂片。用甲醇固定液固定。 4.水解处理。室温下先在1NHCl中处理1分钟,后移至1NHCl(60℃)中处理7—9分钟(水解     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

热激促进水稻细胞和原生质体增殖

台湾大学的林明玉、林楚云和陈茵明(音译)报道、将离体培养的水稻细胞和原生质俸在45℃下处理8分钟后再在冰水浴中放置10秒钟,可提高其生长速度和活力。经热激处理的原生质体的植板率比28℃的对照高1.8倍。热处理原生质体植板率的增加伴随着3H-亮氨酸掺入蛋白质增加1.5～2.0倍及诱导合成7种新蛋白(热激蛋白)。45℃的温度和8分钟的处理时间均是增高植板率的关键。在40℃下处理8分钟或在45℃下处理5分钟的细胞植板率均与28℃对照相同。     

极端嗜热性微生物纤维素酶的活性

极端嗜热厌氧菌H173羧甲基纤维素酶的最适pH为6.5-7.0.加入二硫苏糖醇(DTT)和CaCl_2.2H_2O能使酶活稳定.80℃酶活非常稳定,放置120分钟仍保留原酶活的77%,90℃9分钟保留50%的活性,120分钟仅保留3%的原始酶活.在缓冲溶液中该酶能将微晶纤维素水解成葡萄糖和纤维二糖.培养基中含有最高至50mm葡萄糖时,对溶解微晶纤维素的活性不敏感.HPLC分析表明葡萄糖是该酶在液体培养基中的主要水解终产物.     

新的生化试剂——碱性蛋白酶

碱性蛋白酶(Proteinase BP),是由短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)产生的。它的最适pH为8.5—9.5,稳定pH范围为6—10,最适作用温度为40—50℃,50℃处理10分钟,或50℃处理60分钟     

球形芽孢杆菌对淡色尖音库蚊的毒性及新分离株

1980年秋我们从Myers和Yousten博士处引入蚊虫病原菌球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)1593及SSII-1菌株,与天津市卫生防疫站协作在筛选对淡色库蚊(Culex pipiens varpallens Coq.)高效菌的同时,对B.s-1593和苏云金杆菌以色列变种1897(Bacillus thuringiensis var.israelensis 1897)进行培养特性、热处理、冷藏、超声等对毒力影响的对比。发现B.s-1593和B.t-1897对上述处理稳定性相似,容易培养;对65℃下30分钟;80℃下12分钟;0°—4℃贮存15天均不丧失杀虫活性。1593对淡色库蚊3龄幼虫的LC_(50)为原液稀释349万倍(1.17×10~3菌/毫升),B.s-1593有别于B.t-1897的特点是:它毒杀蚊虫的死亡高峰比B·t-1897慢8—12小时,详细内容另文发表。     

DNA分析与扩增

924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu…     

桑疫病菌噬菌体的分离及其特性

从一些省市的桑叶,土壤中分离到29株桑疫病菌噬菌体,根据噬菌斑的大小、潜伏期长短、平均裂解量和血清学差异等可以分成三种类型:(1)大斑型(MF-Ⅰ):培养24小时的噬菌斑直径为6.5mm,血清中和反应速度常数K值(600×)为552,潜伏期60分钟,上升期50分钟,平均裂解量为37个,最适生长温度为28℃,(2)中斑型(MP-Ⅱ),直径2.1mm,K值(400×)为233,潜伏期90分钟,上升期90分钟,平均裂解量为18个,最适生长温度25℃,(3)小斑型(MP-Ⅲ):直径1.4mm,K值(200×)为146,潜伏期为390分钟,上升期280分钟,平均裂解量为22个,最适生长温度20℃。 MP-Ⅰ和MP-Ⅱ噬菌体形态都具有等轴多面体的头部和短尾,MP-Ⅲ噬菌体为蝌蚪形,有等轴多面体的头部,尾部细长,直而不收缩。     

对日光氨酸生产技术交流会资料

<正> 日方工厂生产胱氨酸的详细工艺参数及操作过程一胱氨酸及氨基酸液工程图(调味液) 二各工序详细今数(一)水解1.配比:人发:盐酸二1; I.s c w/ir)(每料人发400ogg); HC16000L)2.水解缸:F.R.P或H.R I3mex23.工艺操作:先将人发直接投入水解缸内(投料时间约2小时)然后将所需盐酸经\"石墨交换器\"予热至60℃送至水解缸内,立即用吹入蒸汽方式(5Kg}/cm2)在40分钟内将缸内水解液温度上升至103 C,待液温稳定在I08℃---110℃,水解6小时,然后停止吹入蒸     

涡虫神经纤维的硫酸铜-硝酸银显示法

整体染色:(1)在10毫升福末林(普通的);45毫升95％乙醇;2毫升冰醋酸組成的混合剂內固定24—48小时。(2)不用洗滌,轉入70％乙醇內3—10天。(3)在蒸餾水內洗滌一小时。(4)在50℃下,在10％硫酸銅(CuSO_4·5H_2O)內浸3小时。(5)不經洗滌,在50℃下,轉入1％硝酸銀內1.0—1.5小时。(6)在蒸餾水內洗3分钟,連續三次,每次一分钟。(7)在40—45℃时水浴內,在下述显影剂內还原,显影剂配法:1％連苯三酚10毫升;56％乙醇(一般为60％)     

核酸及蛋白质合成、提取、纯化

923505快速简便地从产阮假丝醉母制备ONA〔英〕/Krizk-ova,L.…/Folia Mierobiol一1092,36(4)。一406~407[译自DBA,1992,11(7),92-03633〕 从产阮假丝酵母(Ca介己云da”云玄“s)工业菌株IRBMCS分离DNA,步骤如下:将指数I期的细胞悬浮于原生质球形成液(1.2M硫酸镁、20mM柠檬酸、pHS.s)中,5分钟后,加人Zymolase一5。。。(50g/l,溶于10倍稀释的原生质球形成液加10%a一疏基乙醇溶液中)。37℃半小时后,离心收集原生质球,悬浮于盐酸肌溶液(4.5MGuHCI,o.iM EDTA、o.15M NaCI、soopPmSDS、pHs)中,在65℃下温育10分钟。室温冷却后,…     

基因标记、转化、表达与检测

再于72℃下放置2.5分钟;用2种BLB引物对共扩增时,94℃1分钟(第一次循环3.5粉爹钟),在65922074利用pCR检测牛淋巴瘤中的牛白血病病那〔英〕/Rasmussen,H.B.…了Bioteeh。ForumEur一2991,s(9)一527~519〔译自DBA,1901,10(23),91一13308〕 利用聚合酶链反应(PCR)从含30只雌牛淋巴瘤样品的材料中将由牛白血病病毒(BLV)引起的肿瘤与其它病因的肿瘤区分开。设计了两种扩增DNA BLV一专性片段的引物对,还设计了第三种识别牛K一酪蛋白基因启动子区的引物对,以控制模板的质量。利用Taq DNA一聚合酶扩增DNA(0 .25件g),条件如下:用1种BLV…     

栝楼核糖核酸酶的性质研究

关于栝楼核糖核酸酶的性质已经研究.它对核糖核酸和多聚尿嘧喧核苷酸所显示的酶活性,有很大的相似性:(1)栝楼核糖核酸酶的最适度应pH在5左右;(2)稳定的pH范围在5-12之间;(3)最佳反应温度为55℃左右;(4) 热稳定性:在15分钟内,60℃以下酶活性基本稳定,在65℃左右时大约有50%的活性丧失;(5)金属离子中,除CU~(2+)和Ag~+有明显的抑制作用外、一般作用不明显.另外,酸对其它合成的多聚核苷酸的水解作用,显示有碱基特异性;对双链RNA(CPV RNA)也显有活性.实验中未发现该酶有磷酸单酯酶的活性及降解DNA的活性.因此,该酶可能是一种具有碱基特异性的核糖核酸酶.     

氨基酸的气相色谱(续四)

<正> 4.8.2.微量合成步骤4 可以在一种免除手工转移的仪器中合成小量样品(图8)。将已知量的氨基酸溶液(0.5-2μmoles)放在这支管子中,在100℃用干燥N_2的蒸气流中进行干燥。干燥以后,停止N_2气流,注入含有8MHCl的n丙醇0.2—0.4ml。升高密闭的蒸气套管使反应管在100℃保温10分钟。用干燥N_2气蒸发     

稻米赖氨酸快速测定条件的探讨

以氨基酸自动分析仪测定稻米赖氨酸含量为参照标准。在“茚三酮测定赖氨酸含量”(A法)的基础上,对该法中大米蛋白质的提取温度和时间、色温度和时间及茚三酮用量等条件进行了探讨,提出了稻米赖氨酸含量快速测(B法)。提取条件为90℃5分钟,显色条件为90℃20分钟;茚三酮试剂用1 ml。用B法对10个大米样品进行测定,赖氨酸含量与氨基酸分析仪测得的赖含量基本上一致,无显著差异(P>0.05)。     

果蝇唾腺染色体的观察和制片方法的改进

几年来我们在教学中进行了多方面的实验探索,在果蝇唾腺制片方法上加以改进,采用加蔗糖液保色,树脂胶封边,制备一种半永久制片标本。操作过程如下: 1.取出唾腺,在其上加2滴(37℃)蒸馏水低渗处理10～20分钟,使唾腺细胞涨大有利于染色体的分散。 2.用滤纸吸去蒸馏水,加1滴1N HCl解离8～15分钟(时间随当时的温度而定),吸去解离液,用蒸馏水轻轻冲洗2～3次,将水吸净。     

蔗糖酶和葡萄糖氧化酶的共固化

＃ 本文研究了用吸附交联技术共固定化蔗糖酶和葡萄糖氧化酶(GOD)的方法,考查了共固定化酶的动力学性质。试验结果表明:与溶液酶相比较,固定化蔗糖酶和GOD的响应滞迟期分别为3分钟和2分钟,稳态响应时间增加了6分钟和4分钟,Km值增大,pH—活力曲线变宽,最适pH值分别增大0.7和0.64,最适温度则降低7.3℃和16℃。 以活性氧化铝作载体,戊二醛作交联剂制备的共固定化蔗糖酶和GOD,其蛋白质固定化率为62.9％,分解葡萄糖的总速度为441.6IU,当蔗糖浓度为0.2％,以内时其反应速度与蔗糖的浓度呈正相关(r=0.996),使用半衰期1623次,在4℃下保存120天活力残存为83.7％。