蛇毒纤溶酶的神经生长因子活性

目的证明蛇毒生长因子具有神经生长因子活性,并初步探讨其原因.方法分实验组和对照组,定量和定性测定两组的神经生长因子活性,对比蛇毒纤溶酶和神经生长因子的氨基酸序列.结果蛇毒纤溶酶在20U/ml时具有明显的神经生长因子活性,N-末端氨基酸序列与神经生长因子同源性达80～90%.结论蛇毒纤溶酶具有明显的神经生长因子活性,其结构与神经生长因子相似.     

蛇毒神经生长因子促进周围神经再生的诱发电位观察

目的：研究蛇毒神经生长因子（sNGF)对大鼠坐骨神经损伤后诱发电位的影响,评价蛇毒神经生长因子在促进周围神经再生中的作用。方法：建立大鼠坐骨神经钳夹模型,局部滴加药物和术后肌注sNGF,通过脊髓诱发电位（SEP）,运动诱发电位（MEP）评定,观察坐骨神经修复情况。结果：sNGF治疗后可使伤后SEP,MEP提早出现,结论：蛇毒提取的NGF对大鼠坐骨神经损伤修复具有促进作用。     

白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子的研究Ⅰ.神经生长因子(NGF)的纯化及其生物学活性鉴定

研究白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子纯化方法并行生物学活性鉴定。方法从白眉蝮蛇乌苏里亚种蛇毒中,经硫酸胺分段盐析,提取含有神经生长因子的粗制品,再经二乙氨基乙基纤维素离子交换层析和羧甲基纤维素离子交换层析,分离出蛋白质纯品,经十二烷基磺酸钠——聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定,结果纯化的纯品为单一区带,分子量为４３ｋｕ。生物学活性鉴定证明分离出的该蛋白质纯品可促进神经细胞突起密集生长。     

白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子的研究：Ⅰ.神经生长因子（NGF）的纯化及其生物学？

研究白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子纯化方法并行生物学活性鉴定。方法 从白眉蝮蛇乌苏里亚种蛇毒中,经硫酸胺分段盐析,提取含有神经生长因子的粗制品,再经二乙氨基乙基纤维素离子交换层析和羧甲基纤维素离子交换层析,分离出蛋白质纯品,经十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定。     

蛇毒制剂在治疗糖尿病性神经病变中的应用新进展

20世纪70年代以来,国内外对蛇毒的研究及应用进展很快,80年代开始广泛用于血栓病防治且取得良好效果.随着对蛇毒研究拓展,蛇毒在治疗糖尿病性神经病变方面取得了诱人疗效.蛇毒的成分很复杂,含有多种蛋白质,十多种酶,非酶活性蛋白质或多肽素等,因此,蛇毒具有多种多样的毒理和药理效应[1,2].蛇毒除具有去纤、降粘、解聚、溶栓、扩张血管功能外,蛇毒中还含有丰富的神经生长因子,神经生长因子是一种内源性可溶性蛋白家族,具有调节神经元的生长、存活、分化所需蛋白质的合成及影响神经元的形态可塑性的功能[3].     

眼镜蛇毒抗炎成分研究概况

<正>蛇毒是一种天然的生物学资源,是由蛇毒腺分泌的混合物,主要用于防卫和消化捕获的食物。蛇毒具有特殊的腥味,弱酸,其中含有多种生物活性物质,属于生物毒素。主要含神经毒素、心脏毒素、蛇毒因子和神经生长因子等,不同蛇种分泌的蛇毒成分也有所差异。蛇毒含水量在70%左右,每100ml毒汁中可得干毒20~29g。蛇毒的干物质中90%以上是蛋白质,是其毒性和生物学活性的主要成分。祖国传统医学认为,眼镜蛇及其毒性成分可通经络,祛风湿,并具有强     

蛇毒神经生长因子诱导PC12细胞分化超微结构的观察

目的观察蛇毒神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系（Pheo—chromocytoma cells。PC12）细胞分化后,细胞超微结构的改变。方法取对数生长期PC12细胞接种24孔板,设200ng／ml NGF实验组和对照组。培养72h,离心,分别收集细胞制成电镜标本,镜下观察各组细胞超微结构的改变。结果与对照组细胞相比,实验组细胞长出大量突起．并且胞质的细胞器逐渐消失．出现较多的脂滴。结论广西眼镜蛇毒神经生长因子可以促进PC12细胞增殖．并诱导其向神经样细胞分化,长出突触。     

蛇毒NGF对PC12细胞MAPK表达的影响

有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）是磷酸化瀑布中涉及的一类重要蛋白激酶.阐明各种胞外因素对MAPK的调节,以及各种外界信息所经历的具体过程是摆在研究者面前的挑战性任务.用含有长白白眉蝮蛇（A.halys）蛇毒神经生长因子(NGF)的培养基培养PC12细胞, 观察MAPK和MAPK激酶(MAPKK)表达及MAPK的活性.结果表明,A.halys蛇毒NGF使PC12细胞的MAPK和MAPKK的表达及MAPK活性明显增加.当蛇毒NGF浓度在25～100 μg/L时,随浓度的增加,酶的表达和活性呈线性增加.由A.halys蛇毒NGF诱导的MAPK和MAPKK表达的增加依赖于蛋白激酶C(PKC).     

蛇毒神经生长因子基因表达系统的探讨

神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)最早是20世纪50年代初由Levi-Montalcini在小鼠肉瘤中发现的,自从获得诺贝尔奖的Cohens从蛇毒中首次分离了NGF突破了资源关后,使得NGF得以进行开拓性的研究.     

蛇毒神经生长因子生物活性研究

从蛇毒中分离的神经生长因子（ＮＧＦ）,经用鸡胚背根神经节做生物活性测定,发现能促进神经节树突最大生长的最小ＮＧＦ浓度为２．５ｎｇ／ｍｌ。半成品的毫克蛋白（ｍｇＰ）比活性在１．５４×１０５～５．３５×１０５Ｕ／ｍｇＰ之间。经用ＨＰＬＣ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳做纯度分析,主峰面积在９５％以上。并从四种ＮＧＦ成品赋形剂中选出了理想的配方     

蛇毒神经生长因子对大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达影响

目的 探讨大鼠脊髓损伤后应用蛇毒神经生长因子对Caspase-3表达的影响.方法 将55只成年SD雄性大鼠随机分为蛇毒神经生长因子组（A组）、生理盐水组（B组）、假手术组（C组）,按改良Allen打击法建立大鼠脊髓不完全损伤模型,通过动物神经运动功能BBB评分评价神经损伤程度及神经功能恢复情况;脊髓损伤后不同时间点（6 h、1 d、3 d、7 d、14 d）取材,HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组化染色检测Caspase-3阳性细胞的表达,来比较分析两组的差异性.结果 HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变A组明显轻于B组;BBB评分A组相对B明显提高,差异有显著性意义（P〈0.05）.A组和B组均发现凋亡细胞及Caspase-3表达,神经细胞凋亡指数及Caspase-3表达均为B组〉A组（P〈0.05）.结论蛇毒神经生长因子能抑制大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达及细胞凋亡,能改善脊髓损伤后的功能表现.     

小鼠颌下腺粗提物中神经生长因子活力的测定

神经生长因子(Nerve Growth Factor,简称 NGF)系1951年 Levi-Montalcini 发现。大量的体内外实验证明,它对交感神经细胞和感觉神经细胞有促进成熟与分化的作用。NGF 广泛存在于动物体内,以成年雄性小鼠颌下腺中含量最高,其次是豚鼠前列腺和蛇毒中。它为一蛋白质,分子量130000,通常称为7S NGF,由5个亚基组成,只有β亚基具有促进神经生长的特性。用不同方法提取,可     

蛇毒神经生长因子的研究

神经生长因子 ( Never growth factor,NGF)是神经营养因子家族中非常重要的一员。神经营养因子是一种内源性的可溶性蛋白家族 ,具有调节神经元的生长、存活、分化所需蛋白质的合成及影响神经元形态可塑性的功能。目前已发现的有神经生长因子 ,神经营养因子 - 3、 4、 5 ( NT- 3、 4、 5) ,脑源性神经营养因子 ( BDNF) ,睫状节神经营养因子( CNTF) ,以及胶质细胞源性神经营养因子( GDNF)。NGF是神经营养因子中第一个被发现和确认的 ,它的活性最早报道存在于两种肉瘤组织和蛇毒中 [1]。多年来 ,人们对蛇毒 NGF分离纯化、结构、生理…     

蛇毒中的神经生长因子（综述）

蛇毒中的神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是一组活性蛋白质,分子量最小的为20000,最大的为35000。它能够特别地刺激交感神经细胞和感觉神经细胞的生长,促进神经细胞的分化。NGF也与人类的某些疾病,如嗜铬细胞瘤、遗传性感觉神经宿等有关,NGF可能还具有抗炎作用。对NGF的研究,引起了生物化学、神经生理学和临床医学工作者的极度关注。Bueker1948年在进行小鼠肉瘤组织移植到鸡胚胎的实验时发现,鸡胚周围感觉神经和交感神经变得粗大。1959年,Cohen从食鱼蝮蛇(Agkistrodon pisckorus)蛇毒中分离出一种蛋白质,该物质在     

"蛇毒替代戒毒及蛇毒抗老年痴呆药物及制备方法"获第七届中国专利奖优秀奖

由中国科学院昆明动物研究所熊郁良、王婉瑜研究员等主持的“蛇毒替代戒毒及蛇毒抗老年痴呆药物及制备方法”获2 0 0 1年由国家知识产权局和世界知识产权组织联合颁发的第七届中国专利奖优秀奖。中国专利奖创立于 1989年 ,每两年评选一次 ,是我国唯一对授予专利权的发明创造专利进行奖励的政府部门奖 ,在国际上颇有影响。到目前为止 ,获得中国专利金奖的项目有 82个 ,获得中国专利优秀奖的项目有 436个。该项专利利用眼镜蛇科蛇毒和蝮蛇亚科蛇毒 ,经纯化、酶和基因工程处理 ,获得神经毒及神经生长因子。然后将其用于制作以阻断神经肌肉突触…     

神经生长因子促进坐骨神经再生修复的酶组织化学研究

目的研究对兔右坐骨神经损伤后局部给予蛇毒神经生长因子(NGF),观察坐骨神经酶活性变化和超微结构的恢复情况,探讨NGF对神经再生的影响.方法乙酰胆碱酯酶(AChE)、酸性磷酸酶(ACPase)的酶组织化学技术和电镜技术.结果神经损伤后:AChE活性明显下降,NGF组的AChE活性恢复快于盐水对照组;ACPase活性逐渐增高,NGF组的ACPase活性恢复时间短于盐水对照组.坐骨神经的超微结构在神经损伤后也发生变化,NGF组的变化程度小于盐水对照组,恢复时间短于对照组.结论NGF可通过影响酶物质的代谢而起到加快受损神经恢复的作用.为临床上应用蛇毒NGF治疗周围神经损伤提供形态学依据.     

蛇毒素蛋白毕赤酵母表达进展

蛇毒是许多具有独特生物活性的蛋白质与酶的混合物,在基础科学研究和临床上有重大应用价值,但是通过从蛇毒中分离获取活性组分具有局限性。巴斯德毕赤酵母表达系统是最为常用的真核表达系统之一,其真核加工、折叠、翻译后修饰等能力使得所表达的重组蛋白具有与天然蛋白近似的生物活性,因而该系统在富含二硫键或糖基化的蛇毒素蛋白表达中被广为采用。迄今为止,已经有12个属的25种蛇毒素蛋白(包括蛇毒丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶/去整合素、L-氨基酸氧化 酶、C-型凝集素和神经毒素、血管收缩因子、神经生长因子等家族)在毕赤酵母中获得成功表达,蛇毒富半胱氨酸蛋白、缓激肽增强肽(BPP)等至今尚未见酵母表达的报道。毕赤酵母表达蛇毒素蛋白失败的原因可能在于,有关密码子偏爱性、目的基因转录出的RNA二级结构特征、糖基化程度不均一及糖型差异、所表达毒素对酵母细胞的毒性等方面,并对解决的方法进行了讨论。     

蛇毒凝血酶原激活组分的研究概况

<正>蛇毒是一类复杂的具有多种生物学活性的蛋白质和蛋白多肽。目前已经分离纯化出许多作用于血液凝固酶促级联反应过程中的一个或多个环节的蛇毒组分,包括FⅡ、FⅤ、FⅦ、FⅩ等激活剂以及直接使纤维蛋白原凝聚的蛇毒凝血酶样酶。蛇毒蛋白中有一类凝血毒素作用于血液凝固酶促级联反应,发挥止血作用,作用方式:(1)激活内源性和外源性凝血途径中的各种凝血因子,从而促进血液凝固。(2)激活凝血酶原,从而发挥凝血作用。(3)直接使纤维蛋白原变成纤维蛋白,即类似凝血酶样作用[1]。现已在临床上广泛     

舟山眼镜蛇毒神经生长因子的亲和层析分离

用层析和制备SDS-PAGE法纯化舟山眼镜蛇(Najanajaatra Cantor)毒神经生长因子(NGF),免疫家兔获得抗血清。用辛酸-硫酸铵沉淀法初步纯化IgG,蛋白A-Sepharose亲和层析进一步纯化IgG,并与CNBr活化的Sepharose4B偶联,采用亲和层析法对舟山眼镜蛇毒神经生长因子进行分离纯化。产物经过SDS-PAGE检测呈一条带,并显示了良好的生物学活性。纯化NGF最大比活性为5.0×104U/mg蛋白,亲和常数为4.35×108L/mol,亲和层析分离NGF得率比传统分离方法得率提高35.2%,该方法为NGF的大量提取提供了技术支持。     

神经生长因子启动哮喘神经-内分泌-免疫网络功能失衡

神经生长因子是一种对神经生长、分化起到营养作用的肽类,其在哮喘发病过程中被认为是连接神经-内分泌-免疫网络的桥梁,作用机制可能如下:a.神经生长因子引起气道神经解剖结构和功能变化,促进气道神经末梢合成和释放递质,有助于气道重构的形成;b.神经生长因子能够增强变应原特异性IgE抗体的表达,促进肥大细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等在气道聚集,诱导其释放炎症介质,改变免疫应答平衡状态;c.神经生长因子可能启动肾上腺髓质细胞冗余性,使其向神经细胞转变,导致髓质细胞内分泌功能削弱,使肾上腺素合成、释放和再摄取功能障碍,最终导致循环中肾上腺素达不到维持气道舒张状态所需水平.