肝细胞癌中HIF-1α与PHD2的表达及临床意义

目的 研究HIF-1α和PHD2在肝细胞癌（HCC）组织中的表达,并分析其与临床病理特征间的相关性及临床意义.方法 应用免疫组化Envision法检测103例HCC组织、14例癌旁组织及13例正常肝组织中HIF-1α和PHD2的表达.结果在HCC、癌旁组织、正常组织中HIF-1α阳性表达率分别为63.1%、35.7%、0%,差异显著（P≤0.05）,其阳性表达与肿瘤大小、脉管瘤栓、分化程度、TNM分期均有显著差异 （P〈0.05）.PHD2在HCC组织中表达阳性率明显低于正常肝组织 （P≤0.05）.HCC中PHD2表达水平下调与肿瘤大小、分化程度、TNM分期的差异有统计学意义（P〈0.05）.生存分析显示HIF-1α阳性组与阴性组2年生存率分别为53.8%（35/65）、81.6%（31/38）,差异有统计学意义（P〈0.05）.Cox多因素分析显示肿瘤大小、脉管瘤栓、HBsAg阳性及HIF-1α的表达是影响HCC的独立预后因素.HIF-1α和PHD2表达呈正相关（r=0.219,P〈0.05）.结论 HIF-1α和PHD2的异常表达与HCC的一些恶性进展临床病理特征相关,提示其可能参与肝癌的发生、发展、侵袭,有助于肿瘤的预后分析.     

应用组织芯片技术检测果糖二磷酸醛缩酶在肝癌与胰腺癌组织中的表达

目的探究果糖二磷酸醛缩酶ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法采用组织芯片和免疫组织化学方法检测ALDOA在肝癌、胰腺癌及其相应的正常组织中的表达.结果ALDOA在肝癌组织中的阳性表达率为80%（24/30）,在正常肝组织中的阳性表达率为33.3%（2/6）,二者之间表达差异具有统计学意义（P〈0.05）.ALDOA在胰腺癌组织中的阳性表达率为66.7%（20/30）,在正常胰腺组织中的阳性表达率为0%（0/6）,二者之间表达差异具有统计学意义（P〈0.01）.ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度无关（P〉0.05）;胰腺癌组织中的ALDOA高表达与淋巴结转移无关（P〉0.05）.结论ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中表达上调.     

Bmi1在肝癌组织中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨Bmi1在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及与增殖和凋亡的关系。方法：收集HCC标本54例及相应的癌旁组织,10例正常肝组织标本,采用免疫组织化学EnVision二步法显示Bmi1的表达并结合增殖与凋亡特征进行分析。结果：在肝癌组织、癌旁组织细胞中Bmi1表达定位于胞核中,阳性表达率分别为79.6%（43/54）,31.2%（17/54）,10例正常肝组织未见表达,3组差异有统计学意义（P〈0.005）。HCC中Bmi1的高表达与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目、临床TNM分期、是否有肝硬化及是否有HBsAg感染无显著相关（P〉0.05）,但与组织学分级有关,高、中分化组Bmi1表达率显著高于低分化组（P〈0.05）。肝癌Bmi1阳性组增殖指数（PI）（50.3±21.4）%显著高于阴性表达组（17.3±7.1）%（P〈0.05）,凋亡指数（AI）无明显差异（P〉0.05）。结论：Bmi1在HCC中高表达,其表达增高可能与HCC的进展相关。     

食管癌组织中HIF-1α、Survivin、CyclinD 1蛋白的表达及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、生存蛋白（survivin）、细胞周期蛋白D1（cyclinD 1）在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术检测50例食管癌组织和10例手术切除的远端正常食管组织中HIF-1α、Survivin、CyclinD 1蛋白的表达。结果：食管癌组织中HIF-1α、Survivin、CyclinD 1蛋白阳性表达率均与肿瘤浸润深度以及淋巴结转移相关（P〈0.05）,Survivin阳性表达率与肿瘤分级相关（P〈0.05）,HIF-1α与CyclinD 1的表达呈显著正相关（P〈0.05）。结论：检测HIF-1α、Survivin、CyclinD 1的蛋白的表达有助于判断食管癌的恶性程度以及推断其临床预后。     

Snail基因及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的观察Snail mRNA及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系,并探讨它们在胃癌发生、发展中的作用及其临床应用价值。方法收集96例手术切除胃癌标本,同时取80例癌旁组织作为对照。应用免疫组织化学S-P法检测胃癌组织、癌旁组织中snail蛋白、E-cadherin蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测胃癌组织、癌旁组织中Snail mRNA的表达。结果（1）Snail蛋白在胃癌组织阳性率（83.3%）显著高于癌旁组织（41.25%）（P〈0.05）;高、中分化组Snail蛋白阳性表达率显著低于低分化组（P〈0.05）;Snail蛋白的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;Snail蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及临床分期无关（P〉0.05）;（2）胃癌组织中snail mR-NA的阳性率（76%）显著高于癌旁组织（30%）（P〈0.05）;高、中分化组Snail mRNA阳性表达率显著低于低分化组（P〈0.05）;Snail mRNA的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;Snail mRNA的表达与浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及远处转移无关（P〉0.05）;（3）E-cadherin蛋白在胃癌组织阳性率（37.5%）显著低于癌旁组织（100%）（P〈0.05）;高、中分化组E-cadherin蛋白阳性率显著高于低分化组（P〈0.05）;E-cadherin蛋白阳性率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性（P〈0.05）;E-cadherin蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位均无关（P〉0.05）;（4）胃癌组织中snail mRNA和snail蛋白的表达呈正相关（r=0.594,P〈0.05）;Snail蛋白和E-cadherin蛋白的表达呈负相关（r=-0.234,P〈0.05）。结论（1）E-cadher-in蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志;联合检测E-cadherin蛋白与Snail蛋白对预测胃癌浸润转移有重要意义。（2）Snail蛋白可能在转录水平上调控E-cadherin蛋白的表达。     

宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4A mRNA的表达及其临床意义

目的：检测宫颈癌组织中微小染色体维持蛋白-5（minichromosome maintenance protein 5,MCM5）与P16^INK4AmRNA的表达,并探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测40例宫颈鳞状细胞癌、15例低度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）、20例高度宫颈上皮内瘤变（CINⅡ-Ⅲ）中MCM5和P16^INK4AmRNA的相对表达量,并以20例正常宫颈组织作为对照,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。结果：（1）随着宫颈病变程度的加重,MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量逐渐增高。宫颈癌组织中MCM5和P16^INK4AmRNA的表达量分别是正常宫颈组织的（3.026±1.210）倍和（2.540±0.718）倍,差异具有统计学意义（P〈0.05）。宫颈癌组织中MCM5 mRNA的表达量明显高于CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ（P〈0.05）,CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中MCM5 mRNA的表达量均显著高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而CINⅠ与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）;宫颈癌组织中P16^INK4AmRNA的表达量为正常宫颈组织的（2.54±0.86）倍,差异有统计学意义（P〈0.05）,亦显著高于CINⅠ,差异具有统计学意义（P〈0.05）,但与CINⅡ-Ⅲ比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在宫颈癌组织中,MCM5 mRNA的表达量与肿瘤的临床期别、分化程度显著相关（P〈0.01）,但与患者的年龄无关（P〉0.05）;P16^INK4AmRNA的表达量与肿瘤的临床期别、年龄均无关（P〉0.05）,但与肿瘤的分化程度相关（P〈0.01）。结论：MCM5、P16^INK4A的高表达可能在宫颈癌的发展中起重要作用。MCM5基因检测有助于区分癌前病变和宫颈癌,有望成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物。P16^INK4A的检测在宫颈病变筛查中具有重要意义,有助于CIN的分级并预测转归,从而提高宫颈癌筛查率。     

RADS1和BRCA1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的观察结直肠癌中RAD51和BRCA1基因的表达,探讨二者与结直肠癌发生发展及治疗的关系。方法收集结直肠癌癌灶及癌旁正常组织各42例,采用免疫组织化学法及逆转录一聚合酶链反应（reverse transeription-PCR,RTPCR）检测标本组织中RAD51、BRCA1蛋白和mRNA的表达水平。分析RAD51、BRCA1在结直肠癌中的表达水平与临床病理特征的关系以及二者之间的相互关系。结果在结直肠癌组织中RAD51（33例,78．6％）、BRCA1（30例,71．4％）的表达较癌旁正常组织RAD51（7例,16．7％）、BRCA1（18例,42．9％）高（P〈0．05）;结直肠癌中RAD51mRNA（0．51±0．26）和BRCA1 mRNA（O．70±0．96）的值较两者在正常组织中mRNA（0．10±0．22）高（P〈0．01）;两者蛋白及mRNA的表达水平与性别、年龄、分化程度、TNM分期等均无统计学差异（P〉0．05）;BRCA1与RAD51在结直肠癌中的表达水平成明显正相关（蛋白：r=0．731,P〈0．01mRNA：r=0．572,P〈0．01）。结论BRCA1与RAD51在结直肠癌组织中高表达,且二者的表达水平呈明显正相关;BRCAl与RAD51的表达异常可能与结直肠癌的发生发展有关。     

PTEN与P-糖蛋白在肺鳞癌与肺腺癌组织中的表达及其意义

目的通过检测突变型PTEN、P-糖蛋白在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达差异,探讨肺鳞癌和肺腺癌在肿瘤发生及预后方面出现差异的有关机制,并探讨这两种蛋白表达在肺癌病理临床方面的意义。方法利用免疫组织化学方法对65例肺癌患者手术切除的肺癌组织进行染色,镜下观察PTEN、P-糖蛋白的表达并分析其阳性表达率在肺鳞癌和肺腺癌组织中的差异及与这两种类型肺癌有关生物学行为之间的相关性。结果PTEN在肺腺癌组织中的表达明显高于肺鳞癌组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）。PTEN的表达随肿瘤分化程度降低而逐渐降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。P-糖蛋白在肺腺癌组织的表达率明显高于肺鳞癌,差异具有统计学意义（P〈0.05）。P-糖蛋白的表达在高分化肺癌组织中的表达明显高于低分化肺癌,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论PTEN在肺鳞癌和腺癌的演进过程中,可能起到一定作用,与肿瘤细胞,尤其与肺腺癌的的分化调节有关;P-糖蛋白表达可能与肺鳞癌、肺腺癌的耐药性有关,并可能是肺腺癌及高分化肺癌对化疗药物不敏感的原因之一。     

MPO和CD24在食管癌组织中的表达及相关性研究

目的：探讨MPO和CD24在食管癌组织中的表达及其意义。方法：通过免疫组织化学染色法检测食管癌组织及Barrett食管组织中MPO和CD24的表达及其相互关系。结果：MPO和CD24阳性表达在食管癌组织中为（80.39%,45.09%）,均显著性高于Barrett食管组织（62.74%,14.28%）,其差异有统计学意义（P〈0.01）。MPO和CD24在食管癌组织中表达有正相关性（r=0.29,P〈0.05）。结论：MPO和CD24可能参与了食管癌的启动及发生过程,在食管癌的发生、发展和转移过程中起着重要作用。     

P16、P27蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的为探讨P16、P27蛋白在食管鳞状上皮、增生上皮和癌变上皮中表达状况及其与鳞状细胞癌发生、进展和转移的相关性.方法采用SP免疫组织化学方法,检测72例(其中活检标本13例)食管癌组织中P16、P27蛋白的表达情况.结果 P16、P27在食管癌和增生性上皮均有阳性表达,但两者相比均无统计学意义(P>0.05),在正常上皮组均无阳性表达;P16、P27在高分化鳞癌组阳性表达率均显著高于低分化鳞癌组(P<0.05);P16、P27在伴有淋巴结转移的食管癌组与不伴有淋巴结转移组比较差异显著(P<0.05).P16在原发食管癌组阳性表达率和淋巴结转移癌中比较具有显著性差异(P<0.05).结论 P16、P27基因蛋白在食管癌组织中的表达与病理分化程度有关;P16的表达与转移癌的形成有关;P16、P27表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、浸润深度无明显相关性.     

LaminB1蛋白在食管鳞癌组织中表达的形态学观察

目的探讨laminB1蛋白在食管鳞癌患者的癌组织及上切缘正常粘膜上皮中表达的形态变化。方法制备组织切片原位核基质,应用免疫组化的方法检测核基质制备前后正常粘膜上皮及癌组织中laminB1的表达;同时提取组织核基质蛋白,应用Westen blot检测核基质蛋白中laminB1的表达。结果正常食管粘膜上皮及食管鳞癌组织核基质制备前后laiminB1表达的阳性率分别为:正常粘膜上皮93.3%、正常粘膜上皮核基质86.7%、癌组织96.7%、癌核基质86.7%。正常粘膜上皮laminB1表达阳性细胞从基底层至颗粒层逐渐减少,制备核基质后正常粘膜上皮核基质laminB1表达阳性细胞数目减少、强度明显减弱,阳性细胞集中于基底层,多数细胞整个胞核着色。癌组织laminB1表达阳性细胞散在分布,无规律;癌核基质laminB1表达阳性强度减弱,阳性颗粒在核周较集中。癌核基质laminB1表达的阳性强度比正常粘膜上皮核基质高,差异有显著性(x2=5.042,P<0.05)。Western blot检测显示正常粘膜核基质的laminB1条带比癌核基质弱。结论laminB1蛋白在食管正常粘膜上皮及食管鳞癌组织中广泛存在。制备核基质后,laminB1蛋白在癌核基质的表达比正常粘膜上皮核基质强;且癌核基质中laminB1的分布与正常粘膜上皮核基质存在差异。     

Down-regulation of BRCA2 expression by collagen type I promotes prostate cancer cell proliferation

BRCA2 is a tumor suppressor gene that when mutated confers an increased susceptibility to developing breast and prostate carcinoma. Besides its role in mediating DNA repair, new evidence suggests that BRCA2 may also play a role in suppressing cancer cell growth. Because altered interactions between neoplastic cells and the surrounding extracellular matrix (ECM) play a pivotal role in unchecked cancer cell proliferation and metastatic progression, we hypothesized that the ECM may have an effect in BRCA2 expression. By using normal and prostate carcinoma cell lines, we demonstrated that although normal cells transiently increase BRCA2 protein levels when adhering to the ECM protein collagen type I (COL1), carcinoma cells exhibit a significant reduction in BRCA2 protein. This aberrant effect is independent from de novo protein synthesis and results from COL1-beta(1) integrin signaling through phosphatidylinositol (PI) 3-kinase leading to BRCA2 ubiquitination and degradation in the proteasome. BRCA2 protein depletion after cancer cell adhesion to COL1 or in small RNA interference assays triggers new DNA synthesis, a trophic effect that is abrogated by recombinant BRCA2 expression. Blocking or inhibiting beta(1) integrin, PI 3-kinase, or proteasome activity all have a negative effect on COL1-mediated DNA synthesis in cancer cells. In normal cells, the transient increase in BRCA2 expression is independent from beta(1) integrin or PI 3-kinase and has no effect in cell proliferation. In summary, these results unravel a novel mechanism whereby prostate carcinoma cell proliferation is enhanced by the down-regulation of BRCA2 expression when interacting with COL1, a major component of the ECM at osseous metastatic sites.     

110例维吾尔族及汉族乳腺癌中BRCA1基因突变及P53蛋白表达的研究

目的研究维吾尔族及汉族乳腺癌患者BRCA1基因突变及P53蛋白的表达。方法选取70例维吾尔族和40例汉族乳腺癌根治标本,对照组为32例维汉族乳腺良性病变(纤维腺病及纤维腺瘤)及乳腺癌旁非癌组织;运用PCR-SSCP和DNA序列测定的方法检测BRCA1基因突变及Evision二步法检测P53蛋白的表达。结果(1)110例维吾尔族及汉族乳腺癌中发现BRCA1突变的14个新位点。(2)110例维吾尔族及汉族乳腺癌BRCA1的突变率为10%,其中22例维吾尔族早发性乳腺癌(≤35岁)BRCA1突变率为31.82%,高于维吾尔族晚发性乳腺癌(P<0.01)。(3)110例维吾尔族及汉族乳腺癌中发现11例BRCA1基因核苷酸多态性位点。(4)BRCA1基因突变相关性乳腺癌中P53蛋白阳性表达率高于对照组,其淋巴结转移率高于对照组,其发病年龄小于对照组(P<0.01)。结论BRCA1基因突变与新疆维吾尔族早发性乳腺癌密切相关,且BRCA1突变相关性乳腺癌具有P53阳性率高、发病年龄趋于年轻化、淋巴结转移率高的趋势,这些特点有可能为基因检测前的筛选提供参考依据。     

GRP78 在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮 组织中的表达

目的:检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated proteins 78,GRP78)在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达,研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在,用免疫组化的方法 ,检测GRP78在3种不同组织中表达的情况,分析GRP78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果:GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7.8%、85.6%、47.8%,GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义(P<0.01)。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者,年龄较阳性者大;GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论:GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。     

GRP78在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮组织中的表达

目的：检测葡萄糖调节蛋白78（glucose—regulated proteins78,GRP78）在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达,研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法：取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在,用免疫组化的方法,检测GRP78在3种不同组织中表达的情况,分析G史P78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果：GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7．8％、85．6％、47．8％,GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义（P〈0．01）。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者,年龄较阳性者大;GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论：GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。     

p53、survivin在食管癌中的作用

目的:检测p53和survivin蛋白在食管癌组织中的表达,探讨其意义。方法:应用免疫组织化学法检测食管癌及正常食管粘膜组织中p53、survivin蛋白的表达情况。结果:p53、survivin在食管癌组织中的表达量均高于正常食管粘膜组织(P<0.05),p53、survivin高表达与食管癌淋巴结转移状况差异有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤长度、浸润深度、分化程度无关(P>0.05)。p53和survivin蛋白在食管癌中表达呈明显正相关性(R=0.218,P<0.05)。结论:p53、survivin在食管癌中高表达(82.1%&71.9%),二者在食管癌的淋巴结转移中发挥重要作用,并具有协同作用。