变形虫细胞生长和分裂过程的研究

1.应用单细胞分离培养和连续观察的方法,研究了紫外辐射、切割细胞质对变形虫Amoeba discoides细胞生长和分裂过程的各种效应:分裂延迟及随后的分裂加速现象,巨细胞、小细胞和双核细胞的形成; 2.根据本实验获得的种种细胞分裂的异常,并结合文献讨论后认为,细胞的分裂周期与生长周期,是两个既可区分又相联结的生命过程:当细胞分裂周期被阻断时,在一定范围内细胞仍可继续生长;一些细胞在没有或很少生长的情况下仍可通过分裂。细胞分裂周期的启动,需要细胞生长达到临界体积,而细胞可生长的最大体积,受染色体的倍数性所控制。通常情况下,细胞繁殖的限速因子是细胞的生长,而细胞的重复生长有赖于细胞分裂周期的完成。 细胞分裂周期是一个顺次依赖程序,然而各过程间又可相对的区分。当染色体复制或核分裂完毕,而后一过程又被阻断,有时可启动细胞周期的部分重复,以至形成巨细胞和多核细胞。     

牵牛花和空心莲子草是观察叶绿体的好材料

曾经观察过桂花、六月雪、蚕豆和牵牛花等多种植物的叶肉细胞 ,发现牵牛花、空心莲子草的叶肉细胞是观察叶绿体的上等材料。牵牛花 ( Pharbitisnil)原产热带地区 ,现在我国各地广泛分布 ,尤以夏秋季最为繁盛。空心莲子草 ( Alternanthera philoxeroides)又名水花生、革命草、空心苋和水蕹菜等。用牵牛花和空心莲子草制备叶绿体临时装片的方法步骤如下 :1 )用洁净的纱布擦净载玻片和盖玻片。2 )置载玻片于实验台上 ,在载玻片中央滴 1滴蒸馏水(或清水 )。3)取绿色、无斑点的、生长良好的野生牵牛花叶 (或空心莲子草叶 ) ,洗净 ,一手捏住叶的…     

基因缺失造成无脑小鼠

基因缺失造成无脑小鼠美国休斯顿安德森癌症研究中心的Ｓｈａｗｌｏｔ博士与ＲｉｃｈａｒｄＲ．Ｂｅｈｒｉｎｇｅ最近发现,发育中的小鼠胚胎有一个与爪蟾相似的基因Ｌｉｎ１,其缺失会形成无脑小鼠胚胎。他们用无功能基因替换小鼠胚胎于细胞中的Ｌｉｎ１基因,而后将这种...     

UBAP1 基因真核表达载体的构建 及对人鼻咽癌细胞生长的影响

为研究鼻咽癌相关新基因 UBAP1 的功能,探讨其对鼻咽癌细胞生长特性的影响,构建了 UBAP1 真核表达载体并转染到鼻咽癌细胞株 HNE1 中,借助细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验、裸鼠接种和流式细胞计数方法对转染细胞的生物学行为进行了检测 . 结果显示, UBAP1 基因转染细胞生长速度明显减慢,在软琼脂中集落形成率较对照组显著下降,裸鼠接种试验显示, UBAP1 基因转染细胞 HNE1 生长速度受到抑制,流式细胞计数分析发现, UBAP1 基因表达升高能延缓细胞由 G0-G1 期进入 S 期 . 因此, UBAP1 基因的表达有助于 HNE1 恶性表型的逆转,初步证明 UBAP1 是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因 .     

完全水淹条件下空心莲子草的生长、存活及出水后的恢复动态研究

为了判断入侵植物空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)能否在河岸带的水淹环境中生存,实验研究了空心莲子草在30、60、90 d和120 d的完全水淹条件下的形态变化、生物量变化、存活及出水后的恢复生长状况.结果发现,空心莲子草在完全水淹条件下分枝的伸长生长加剧,并能快速产生新的叶片,但总生物量及地下部分生物量显著降低.空心莲子草在完全水淹处理后有很高的存活率,淹没120 d后存活率仍高达90%.水淹处理结束后,植株能够迅速地开始恢复生长,但恢复生长能力随着水淹持续时间的延长而逐渐降低.结果表明,空心莲子草有很强的水淹耐受能力,能够在江河河岸带生存,但在水淹持续时间较长的距水面较近的地段可能生长较差.     

LRRC4通过LRR结构域抑制脑胶质母细胞瘤U251细胞的生长和侵袭

LRRC4基因是候选的脑胶质瘤抑制基因,其细胞外区域含有一个保守的LRR和一个IgC2 结构域.本研究结合生物信息学分析,通过一步PCR法构建了不同结构域缺失的突变体（pc ΔLRR, pcΔIgC2或pcΔTm）.并将全长LRRC4（pcLRRC4）和各突变体转染至U251细胞,构建了稳定表达的U251细胞系.通过MTT,软琼脂集落形成及Transwell体外侵袭模型检测发现,全长LRRC4能够抑制U251细胞的生长和侵袭;LRR结构域缺失的突变体不再抑制U251细胞的生长和侵袭;而IgC2或Tm区缺失的突变体仍然可以抑制U251细胞的生长和侵袭.该结果表明,LRRC4抑制U251细胞的生长和侵袭依赖于它的LRR结构域,而不是IgC2或Tm结构域.     

PROL4提高肺癌细胞LTEP-a-2对化疗药物顺铂的敏感性

PROL4(proline-rich protein 4)是我们筛选发现的一个在肺癌细胞中表达缺失的基因．为了深入研究其在肺癌中的生物学功能,构建了PROL4表达质粒,转染肺腺癌LTEP-a-2细胞,获得了稳定表达PROL4的单克隆细胞株．与空载对照细胞相比,过表达PROL4的LTEP-a-2细胞其生长的血清依赖性明显提高,软琼脂集落形成能力降低,裸鼠皮下荷瘤生长受到明显抑制．进一步研究发现,过表达PROL4可明显提高多种肺癌细胞对顺铂的敏感性,而且这种敏感性的提高与PROL4协同顺铂促进细胞凋亡密切相关．该研究结果为临床上如何提高肺癌的化疗效果提供了重要的实验依据．     

抑癌基因DAPK在肿瘤的发生、转移、复发、预后中的作用

肿瘤对人类生命危害极大,关于肿瘤的形成、发展等方面的研究,已越来越受到人们的关注.现在已认识到,肿瘤的形成是一个多因素、多基因、多阶段的过程,是促细胞生长和抑制细胞生长两大类调节基因失衡的结果.对于这两大类调节基因失衡的原因及导致肿瘤的发生还不明确.另外,关于肿瘤的预防和治疗等方面研究还不清楚.DAPK基因从发现后,科学家们就认识到其与肿瘤的形成、发展有重要关系.本文就DAPK与肿瘤的关系作一概述.     

体外培养的人脐动脉平滑肌细胞可自发成骨细胞分化并钙化

研究脐动脉来源的平滑肌细胞在体外培养时是否会自发成骨细胞分化,以深入了解该细胞的生物学特点.采用MTT法研究了脐动脉平滑肌细胞的生长曲线:用形态学方法观察了脐动脉平滑肌细胞自发细胞结节的形成过程;用Hoechst 33258染色法及TUNEL染色法研究了细胞结节中的凋亡现象;采用免疫组化染色法研究了细胞结节中碱性磷酸酶的表达.采用茜素红S染色及透射电镜研究了脐动脉平滑肌细胞的自发钙化.研究发现,体外培养的脐动脉平滑肌细胞传代后约7天细胞即可汇合,汇合后的细胞表现为典型的"峰、谷"样生长状态,随着培养时间的延长.在"峰"形生长区域,细胞聚集生长,自发形成细胞结节,经4-5周培养,细胞结节不断增大并钙化,免疫组化发现结节中有大量碱性磷酸酶表达.同时,在结节形成过程中伴随有大量平滑肌细胞凋亡.我们的研究表明,体外培养的脐动脉来源的平滑肌细胞同主动脉来源的平滑肌细胞一样可以自发成骨细胞分化.而平滑肌细胞凋亡可能参与了该过程.     

转录因子FBI-1的结构与功能

FBI-1是一个新近发现的和转录相关的胞内蛋白,属于POK蛋白家族成员。FBI-1通过直接结合DNA或者与其他蛋白形成复合物影响目的基因的转录水平,从而推动肿瘤的生长、促进细胞黏附拮抗凋亡、促进前体细胞分化。     

Pkh1/2-Pil1信号调节酵母细胞内吞

酵母细胞中Pkh1/2信号影响细胞内吞功能.Pil1因与Pkh1/2形成复合物并可被 其磷酸化引起关注.新近发现一个大分子复合物eisosome 是内吞的标志性位点， 而Pil1是其主要成分.前期研究发现，Pil1的磷酸化状态对eisosome结构完整至关 重要.本研究通过检测Pkh1/2突变菌的生长和萤光黄（LY） 染料在空泡聚集情况 ，发现由于Pkh1/2突变导致的生长抑制和液相内吞功能丧失,可部分由过表达的 Pil1补偿，得出结论是Pkh1/2-Pil1信号在一定程度上调节细胞内吞.     

骨折愈合中骨再生的生物学和生物力学

一、骨再生的生物学1.骨骼的生长和发育骨骼的生长和发育涉及很多细胞和组织的分化和增殖,虽然其过程复杂,却精确有序。在胚胎发育阶段,长骨先形成一个间充质细胞团块,然后软骨化形成软骨基质。随着发育的渐进,软骨细胞肥大,细胞外基质开始矿化,形成初级骨化中心。软骨细胞通过     

镉诱导的茶树苗膜脂过氧化和细胞程序性死亡

在含镉的营养液中,茶树幼苗生长受到抑制。随培养时间延长,膜脂过氧化产物丙二醛含量持续升高;超氧物岐化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性初期升高,而后分别在第4天和第2天开始下降。镉胁迫的第5-7天,一部分细胞陆续发生程序性死亡。其特征是：线粒体聚集于核周围,个数增加,嵴发达,而后衰亡。核仁消失,染色质凝结在核膜边缘,核萎缩,外层核膜局部扩张,形成胀泡。核以外溢、出芽和崩裂三种方式溃解。核是最后消亡的细胞器。程序性死亡的细胞局限于某些区域。镉胁迫下,幼苗膜脂过氧化可能是诱发PCD的主要原因。     

LPLUNC1基因对鼻咽癌细胞HNE1生长增殖的抑制作用研究

LPLUNC1在正常的鼻咽组织及人胚鼻咽组织中高表达,而在71%的鼻咽癌中表达下调或缺失,是与鼻咽癌的发生发展密切相关的新基因.通过研究LPLUNC1基因对鼻咽癌细胞系HNE1的影响,进一步确定其与鼻咽癌发生发展的关系.将LPLUNC1基因全长cDNA克隆入pcDNA3.1( )真核表达载体中,通过脂质体介导稳定转染入LPLUNC1低表达鼻咽癌细胞系HNE1中,通过RT-PCR及RNA印迹筛选LPLUNC1高表达的细胞株,并利用细胞生长曲线、MTT、BrdU掺入、流式细胞仪检测、软琼脂集落形成实验及裸鼠成瘤等实验,研究了LPLUNC1对鼻咽癌细胞系HNE1细胞生长、增殖的影响.结果发现,稳定转染LPLUNC1的HNE1细胞的生长速度明显减慢,在MTT与BrdU掺入实验发现LPLUNC1可明显地抑制鼻咽癌细胞的增殖,并且通过流式细胞仪检测也发现,LPLUNC1基因可明显延缓HNE1细胞的细胞周期进程,使G0/G1期细胞增多而S期细胞相对减少.进一步通过软琼脂集落形成及裸鼠成瘤实验发现,LPLUNC1稳定转染后的HNE1细胞集落形成率与集落的大小均小于空白载体细胞,同时能明显地抑制HNE1细胞的体外成瘤.结果表明,LPLUNC1基因能明显抑制鼻咽癌细胞HNE1的生长增殖,是鼻咽癌发生发展中的重要候选抑瘤基因之一.     

枯草杆菌Ki—2—132株中degUS基因的遗传效应

利用基因同源重组和基因割裂的方法,研究了枯草杆菌ｋｉ－２－１３２中ｄｅｇＵＳ基因的作用。发现此基因对菌株的蛋白酶产生、感受态的形成、细胞运动、葡萄糖对产酶的抑制等系列表型都有影响,是一个多效基因。通过对此基因的割裂分析,发现单纯ｄｅｇＵＳ阅读框对菌生长时的细胞形态及表达载体上ａｐｒＥ的表达有明显的影响,而对其他表型的影响不明显     

细胞生长速率对青霉素酰化酶基因表达的影响

本文报道在细胞生长的不同时期,加苯乙酸诱导pac基因表达,发现在细胞生长早期(0—24h),苯乙酸诱导pac基因表达的效应非常明显,诱导效率很高;随着时间的推延,苯乙酸诱导pac基因表达的作用逐渐减弱,在细胞生长中期(24～48h),诱导效率明显减弱;在细胞生长后期即静止期(48－72h),苯乙酸几乎诱导不出pac基因的表达。RNA—DNA点杂交检测各期细胞内青霉素酰化酶mRNA的量,也发现在生长早期诱导的细胞转录产生的Fac—mRNA量很高,在生长中、后期诱导的细胞转录产生的pac—mRNA量明显减少,mRNA水平和蛋白质水平变化趋势一致。上述结果表明,苯乙酸诱导青霉素酰化酶基因表达依赖于细胞生长速率,处于生长周期不同时期的细胞,诱导产生青霉索酰化酶的能力不同,细胞生长速率对Pac基因表达的影响发生在转录水平,pac基因表达与细胞生长相偶联,提示存在一个或多个与细胞生长相偶联的因子调节着pac基因的表达。     

转化生长因子—β（TGF—β）的结构

1978年,Delarco和Todar首先发现病毒转化的细胞能分泌一种具有使正常大鼠肾成纤维细胞表型发生转化能力的因子,它在表皮生长因子(EGF)存在的情况下使贴壁生长的细胞特性发生改变,获得在软琼脂培养基上生长形成克隆的能力,并失去生长密度依赖的抑制作用。因此,这种细胞因子被命名为转化生长因子-β(TGF-β)。在过去的10年中,发现TGF-β实际上是一种具有多种生物学功能的细胞因     

细胞分裂研究中的新发现

细胞的发现,在生物学的发展中引起过巨大的作用。直到不久以前,生物学家们还认为植物细胞的繁殖过程是跟有机体(其细胞在被研究中的)的在历史上形成的个体发育的特点无关的。在摩尔根遗传学影响之下,细胞学家们在有丝分裂的研究上化过好多精力,这一点曾经是认为十分肯定的:在植物有机体生长的时候,在细胞分裂过程中,细胞核中的染色质网形成为染色体。染色体纵向分裂,它们的两半分散到细胞的两极,两半之间产生一层细胞板,随着,每团染色体形成细胞核,而一个细胞变成了两个——细胞分裂了。     

水稻花药培养中小孢子形成植株的组织分化和器官建成的初步观察

以 N_6为基本培养基培养水稻花药,用压片法及石蜡制片法,对小孢子形成植株的过程进行组织分化和器官建成的观察。结果表明,从小孢子到花粉植株形成分两个阶段:愈伤组织的形成和不定根、不定芽的分化。小孢子(花粉)第一次有丝分裂形成两个均等细胞,而后这两个细胞再经过多次分裂,形成愈伤组织。由愈伤组织中发生的不定根是内生源的。芽是外生源的,即愈伤组织表面的一部分细胞,经过反分化形成分生组织,而后这种分生组织再进一步分化成芽。不定根和不定芽在开始时是独立发生的,它们之间没有维管组织联系。从外部形态上看,当花粉形成植株时,都是先出芽而后出现根。但从解剖上看,可能也有不定根发生早于不定芽的现象。     

人的原代上皮角质形成细胞和永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的增殖能力的比较

目的：筛选适合充当组织工程皮肤的种子细胞,比较原代培养的人原代上皮角质形成细胞和永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的增值能力。方法：将两种细胞（小儿包皮环切术后的组织培养表皮角质形成细胞,永生化的上皮角质形成细胞HaCaT）,分别接种于96孔板,通过MTT检测细胞1,3,5,7,9,11天的生长情况;当两种细胞融合至60%时分别取1×106个细胞,通过流式细胞检测细胞的周期。结果：永生化的上皮角质形成细胞HaCaT每隔一天即可传代一次,原代上皮角质形成细胞每3天传代一次;细胞周期：永生化上皮角质形成细胞HaCaT的G1期和S期的比例高于原代上皮角质形成细胞。生长曲线：MTT检测两种细胞1,3,5,7,9,11的生长情况,永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的生长速度明显高于原代上皮角质形成细胞。结论：永生化上皮角质形成细胞HaCaT的增殖能力要高于原代培养的上皮角质形成细胞。