加速苏木精染色液“成熟”的两种方法

海登汉氏(Heidenhain’s)苏木精染色法是一种经典的细胞核和染色体的染色法,广泛地用于动、植物制片和细胞学的压片中,而且对很多难于被其他染料着色的材料,用此法仍能取得比较良好的效果。但该法中的苏木精染色液配后不能马上使用,需放在空气中经一到二个月“成熟”后才能使用。“成熟”即苏木精氧化成苏木素(氧化苏木精)的过程:     

药用和染料植物——洋苏木

洋苏木(Haematoxylum campechianum)亦称彩木、墨水树、苏仿木,云实科常绿乔木。洋苏木是原产在中南美和印度群岛等地区的热带植物,它的褐色或紫褐色的心材提取的色素——苏木色精(Haematoxylin)是生物制片的重要染料。也用于羊毛、麻纺织品和制作蓝色墨水的染料。药用有收敛的功效。对霍乱后肠胃虚弱、痢疾腹泻、肺出血等都有疗效。     

介绍一种陈旧苏木精染液复苏的方法

苏木精是组织切片制作常用细胞核染料 ,以Harris苏木精染液最为常用。Harris苏木精染液在使用一段时间后 ,染色能力逐渐减弱 ,造成细胞核着色困难 ,染色时间延长 ,虽能着色 ,但依然着色浅淡 (图 1,2 )。为此 ,我们采用在陈旧Harris苏木精染液中加入苏木精酒精液 ,经煮沸冷却后加冰醋酸的方法 ,使Harris苏木精染液恢复染色能力 ,收到了较好的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1材料 (1) 5 %苏木精酒精液苏木精(E·Merck进口分装 ) 5 g溶于无水乙醇 10 0ml,放置 4～ 5周后使用。 (2 )陈旧Harris苏木精染液80 0ml。1 2方法在 80 0ml陈旧Ha…     

MALLORY磷钨酸苏木精染色及其应用

在显示心肌、骨骼肌的肌纤维主要结构及病变时 ,Mallory磷钨酸苏木精 (phoshangstic acidHematoxylin,PTAH)染色是常用的一种结缔组织染色法 ,此法不但能清晰地显示正常肌纤维的横纹 ,同时还能显示其它多种组织成分 ,特别在尸检工作中应用较普遍。1 .PTAH染色机制在 PTAH染液中只含苏木精一种染色剂 ,在磷钨酸参与下 ,经氧化成熟后能将不同组织及正常与异常部分染成蓝色和棕红色两种不同的颜色。Mallory在最初并未阐明 PTAH染色反应原理 ,但其方法仍符合现代组织化学的基本理论。PTA酸根基团中存在着许多空间 ,而这些空间和分子对…     

染色质、染色体、染色单体、同源染色体、姐妹染色单体

在真核细胞的细胞核中,有一种分布不均匀的物质,易被碱性染料(如苏木精)所染色,称之为染色质(chromatin)。当细胞进入分裂期(M期)时,染色质就逐渐螺旋化,并反复折叠成为具有一定形态特征的小体,称之为染色体(chromosome)。可见,染色质和染色体是遗传物质在细胞周期中不同时期的描述用语,其物质本原是同一的,但又有差别(在形态上),是两个不同的概念。即当我们描述细胞分裂的遗传物质情况时,称之为染色体,而说明间期的遗传物质情况时,称之为染色质。正常二倍体细胞的染色体经过S(synthesis)期后,     

六种伊红染液的配制及应用体会

伊红(Eosin)在显示细胞浆、嗜酸性颗粒、肌纤维和胶原纤维等结缔组织时,具有很强的亲和力,呈现出不同色调的红色,与胞核染料苏木精(He-matoxylin)在色泽上形成明显色差,使组织和细胞形态结构清晰地显示出来,形成红蓝相映鲜明绚丽的图像,成为经典的HE染色法。伊红染液的配制方法     

酚氧化酶及其酶原的生化特性与分子生物学研究进展

酚氧化酶(简称PO),又称为酪氨酸酶(tyrosinase,EC1.14.18.1),是一种含铜的酶.它能够分别催化单酚羟基和二羟基酚氧化成二酚(如多巴)和醌,醌在非酶促条件下形成最终的反应产物黑色素.PO在脊椎动物和无脊椎动物中都广泛存在,被认为是一种参与免疫的重要因子.本文就酚氧化酶及其酶原的生化特性和分子生物学特性研究的进展情况予以综述.     

叶绿体中电色效应慢上升相的起源,质子释放过程及细胞色素b_6、f的氧化还原反应

P515吸收变化中的慢上升相(P515s),可用Tris,NH_4Cl或尼日利亚菌素,加在低盐浓度的叶绿体中形成。在叶绿体和叶片样品中,不管有无P515s,都有明显的细胞色素b_6和f的氧化还原变化。在有解联剂存在下,中性红染料可测到膜内质醌醇氧化释放质子的过程,释放速度与P515s形成的速度接近。高盐浓度中暗适应的叶绿体,释放H~+的速度比P515s形成的速度快,其中质醌醇释放H~+的速度只有1～2 ms。在接近生理条件下(无外加供受体、抑制剂),P515s的起源与细胞色素b_6、f的氧化还原反应造成的电子跨膜流动无直接联系,而质醌醇释放H~+的过程及随后的侧向扩散,可能是P515s形成的直接起因。     

蒌蒿多酚氧化酶的活性及其影响因素的研究

蒌蒿Artemisia selengensis Turcz.菊科蒿属,别名芦蒿、藜蒿,狭叶艾水蒿等为风味野菜,在南京有"早春第一时鲜"的美誉.蒌蒿在保藏过程中,在多酚氧化酶和O2的参与下将酚类化合物氧化成醌,醌再聚合成有色物质,使其切口氧化褐变,本实验主要对多酚氧化酶活性进行研究,以便为蒌蒿的保鲜提供参考.     

可口革囊星虫的精子发生及精子结构

为了探究可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)精子发生过程及结构上的特殊性,用显微及亚显微技术研究了可口革囊星虫的精子发生和精子结构。可口革囊星虫的精巢位于收吻肌基部,为一曲折的带状组织。成熟精巢内可观察到精原细胞、精母细胞以及精细胞等各阶段的生精细胞。在精子形成早期,很多精细胞脱离精巢,以精细胞团的形式掉落到体腔中。精细胞团内的精细胞同步发育为精子后,脱离精子团进入肾管。成熟精子由头部和尾部组成。头部由钟形顶体与鼓形细胞核构成。顶体后段下包于精核的前端。顶体分内、中、外三层,外层有横隔;顶体下腔内有颗粒状物质不均匀分布,中央有一束丝状纤维组成的顶体棒。核物质电子密度高,核内含空泡。无核前窝,具浅的核后窝。尾部分中段和末段,中段由6个(偶见5个或7个)线粒体围绕近、远端中心粒构成;末段细长鞭状,由轴丝及包绕轴丝的质膜组成,轴丝为典型的"9 2"结构。分析认为:可口革囊星虫精子发生过程以及超微结构上存在特殊的结构与机制:①精细胞团保证了精子形成的同步性;②顶体后段下包于精核的前端使精子头部小而灵巧,利于快速运动;③顶体的横隔使精子顶体的牢固性增强,确保受精时顶体反应的正常进行;④中段较多的线粒体使精子具有更强的环境适应性,有利于有效的受精。     

“减数分裂”教学的重要性及建议

(一)减数分裂与细胞学、遗传学的关系现行《生物》课本中“减数分裂与生殖细胞的成熟”一节教材是全书中重要的一节,减数分裂是一种特殊的有丝分裂。在减数分裂过程中细胞经过连续两次分裂,而染色体只复制一次,结果使性细胞中染色体数目减半。性细胞再经受精作用形成合子,合子中染色体数目又恢复到亲代体细胞中染色体数目,从而使亲子代细胞中的遗传物质保持相对稳定。减数分裂的前期I,细胞中的染色体发生了一系列特殊的变化——同源染色体联会、交叉互换和分离。每一对同源染色体中的两条染色体彼此分离,以后随机地分配到二个子细胞中去;异源染色体     

用基因重组的大肠杆菌合成靛兰

美国加州的 Ensrei 等和德克萨斯大学的 Wakett 等发表的论文宣称(美国“科学”杂志10月14日),大肠杆菌中的萘氧化基因能生物合成人们最早知道的染料之一靛兰。他们将恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)PPG7中取出的质粒 NAH_7的片段进行克隆,并在大肠杆菌 HB101中表达。这一重组大肠杆菌在培养基中增殖,结果生成了靛兰。该染料可在色氨酸或吲哚存在下增产。能氧化芳烃为顺(?)二羟硫醇的某些细菌也     

介绍一种核和染色体的优良染色剂

苏木精,洋红,地衣红是细胞核和染色体的经典染色剂,至今仍广泛应用。但这些染料都各自存在一些缺点,如苏木精虽可适用于各种动植物材料的染色,但染色程序略繁而操作的技术要求高。后两种染色剂则往往对一些材料染色较佳,而对另一些材料则染色困难或不清晰,有较大的局限性。尤其是洋红和地衣红,商品质量很不稳定,甚至同一厂家不同批号的产品,质量也有显著差别。而对我国广大的科技工作者来说,前三种染料均依赖进口,不仅国家每年需花费大量外汇,而且一般中学或基层单位很难获得这些染料。近年,一位加籍华人学者对以往的石碳酸品红染色剂加以改良,用于细胞杂交中核的染色,效果很好。我们近两年来,选用该染色剂于大量植物染色体的研究工作中,获得了极为优良的效果,它具有以下的主要优点:     

日本血吸虫酚及酚酶的组织化学定位

本文对不同发育阶段的日本血吸虫体内的酚类物质及酚酶的分布进行了研究,并介绍了一种显示日本血吸虫酚酶的组织化学方法。研究的结果表明:仅成熟雌虫的卵黄细胞颗粒球及子宫中虫卵卵壳含有酚类物质及酚酶,雌虫的其它组织细胞,雄虫的所有组织 细胞以及未成熟的雌性或雄性童虫均无酚类物质及酚酶。雌性血吸虫体内的酚类物质及酚酶的生理意义是作为制造卵壳的前身物质;推想在卵壳形成过程中,酚类物质被酚酶氧化成醌,再与邻近的蛋白质结合形成醌鞣蛋白,成为硬化的卵壳物质。本文还对吸虫纲中酚酶组织化学的问题进行了比较和讨论。     

酚氧化酶及其酶原的研究进展(Ⅱ)——免疫学特性、细胞定位及其功能

酚氧化酶（Phenoloxidase,PO）又称为酪氨酸酶（tyrosinase,EC1．14．18．1）,是一种含铜的酶,能够催化单酚羟化成二酚（如多巴）,并把二酚氧化成醌;醌在非酶促条件下形成最终的反应产物黑色素。PO在脊椎动物和无脊椎动物中都广泛存在,而且被认为是一种参与免疫的重要因子。本文就酚氧化酶及其酶原的免疫学特性、细胞定位及其功能研究进展进行综述。     

丹参醌化合物结构特征与抗氧化活性

对双氢丹参醌I和丹参醌Ⅱ在油脂中的抗氧化作用及构效关系进行了量子化学研究。结果表明 ,抗氧化剂与油脂中碳中心自由基 (R· )复合成稳定自由基 (AH -R· ) ,可能是丹参醌抑制或阻止油脂氧化酸败的主要途径 ,双氢丹参醌I也可借助释放活泼H(本身转化成稳定自由基A· )有效清除R·。丹参醌分子本身的化学活性和对应的AH -R·与A·的稳定性对此类抗氧化作用有重要影响。AH -R·和A·中自旋集居分布 ,对比较抗氧化剂的相对活性可能是一个有价值的电子结构参数。     

凝胶上测定酪氨酸酶活性的几种方法

酪氨酸酶广泛存在于动植物及人体中,是生物体合成黑色索的关键酶。如果人体缺乏酪氨酸酶,或酪氨酸酶的活性不能表达,则会导致白化病。因此,酪氨酸酶活性的检测对于研究白化病发病的分子机制具有重要意义。 酪氨酸酶具有氧化酶的功能,能将L-多巴氧化成多巴醌,多巴醌进一步变成黑色素。根据这个特性,将     

一色齿毛菌漆酶的酶学特性及染料脱色研究

染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解。本文从白腐菌一色齿毛菌LS0547中纯化出胞外漆酶并用于染料脱色实验。SDS-PAGE结果显示纯化的漆酶分子量大小为63.7kDa。漆酶氧化底物ABTS的最适pH为2.2,最适温度为50℃。叠氮钠可强烈抑制漆酶活性,半胱氨酸和二硫苏糖醇可部分抑制漆酶活性。漆酶氧化ABTS,丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的米氏常数分别为0.217,0.306和0.199mmol/L。粗酶和纯化的漆酶用于不同化学结构的染料的脱色研究,结果表明一色齿毛菌纯化漆酶可快速对RB亮蓝进行脱色,偶氮胭脂红和结晶紫的脱色效果低于RB亮蓝,测试的三种染料均可在没有介体存在的条件下被漆酶脱色,显示出一色齿毛菌漆酶在染料废水处理中的应用前景。     

醌蛋白研究进展

醌蛋白又称醌酶,是一类以吡咯喹啉醌(PQQ)或其结构类似物(TTQ、TPQ或LTQ)为辅助因子的氧化还原酶。以PQQ为辅酶的醌蛋白是其中最重要的一类醌蛋白。按其在氧化还原反应过程中包含辅酶的种类和数量可以分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型等3种型别。Ⅰ型醌蛋白是一类简单的醌蛋白,只含有1分子的PQQ作为辅酶;而Ⅱ型和Ⅲ型醌蛋白含有PQQ和血红素c作为辅酶。Ⅱ型醌蛋白包含1分子PQQ和1分子血红素c,广泛存在于假单胞菌属、丛毛单胞菌属细菌的胞外周质中,参与催化反应过程。Ⅲ型醌蛋白仅存在于醋酸菌属细菌的细胞膜上,由3个亚基组成,即含有1个PQQ/血红素的催化亚单位、1个含有3个血红素c的亚单位和1个不含辅酶的功能未知的亚单位。综述了几种主要醌蛋白的结构、催化机制、电子传递,以及它们的应用情况。     

一步法纯化乌骨鸡皮肤酪氨酸酶

酪氨酸酶(EC.1.14.18.1)是黑素细胞内形成黑色素一个关键的酶。它做为一个含铜酶广泛地存在于自然界中。酪氨酸酶既能催化L-酪氨酸的羟化形成L-多巴(羟化酶的活性)又能催化L-多巴的氧化形成多巴醌(氧化酶的活性)。多巴醌进一步自动氧化形成黑色素。