亚麻原生质体培养及植株再生

试验分别采用四个纤维用亚麻(Linumusitatissimum)品种7309,948,Belinka和Viking的无菌苗的茎尖为材料游离原生质体。以萌发10天的无菌苗茎尖游离获得的原生质体得率和活性最高,分别达到1．8×106／gFW和85．5％。以V-KM为培养基,采用琼脂岛法培养的原生质体,可在培养3天后发生第一次分裂,10天后统计细胞分裂频率为36％,20天后统计植板率达到5．2％。品种7309和Belinka再生的愈伤组织接种在均附加o．6mg/L6-BA和0．1mg／LNAA的B5-1和MS3固体培养基上,都有芽苗分化,并分别获得再生植株。品种Viking和948分别仅分化获得了不定根或叶状体。     

花椰菜幼苗下胚轴诱导再生植株

植物名称:花椰菜(Brassica oleracea varbotrytis)80天结球栽培品种。材料类别:无菌苗下胚轴。无菌苗培养:种子经70％酒精浸泡30秒钟后,转移到0.1％昇汞溶液灭菌20分钟,再用无菌水冲洗三次,接种于MS培养基上。培养温度为25—28℃;光强为散射光,约100 lux;每天照光12小时。培养8—10天时幼苗高约3—4厘米,子叶绿色,于无菌条件下先切除胚根、子叶和茎生长点。再把下胚轴切成约1厘米左右长的切段作为外植体进行诱导培养。     

苗龄与红光对向日葵原生质体分离和培养的影响

用1.0—1.5%(W/V)纤维素酶(Onozuka R-10)和0.3—0.5%(W/V)果胶酶[Pectinasc (Serva)]配合分离到大量有活力的向日葵下胚轴原生质体,经液体浅层培养或琼脂糖小块培养7—10天后,均能持续分裂到细胞团或体细胞胚,至14—21天形成大量肉眼可见的小愈伤组织(直径0.5—2.0mm)。比较试验表明:(1)影响向日葵下胚轴原生质体分裂生长的首要因素是起始材料无菌苗的生理状态。用红光照射无菌苗,能明显地促使下胚轴原生质体在较低密度(1×10~4/ml)培养时,也能持续分裂,再生小愈伤组织;(2)在MS培养基上添加5mmol/L谷氨酰胺或以7.5mmol/L谷氨酰胺代替原培养基中的无机氮,能促使原生质体高频率(44.4%左右)分裂,再生愈伤组织。     

碱蓬茎段培养再生植株的研究

将碱蓬(Suaeda Forsk)种子经消毒后分别接种在4种不同pH值的培养基上,两天后观察发现以pH 7培养基上的种子出苗最快,出苗率最高。6d时观察,在pH9的培养基上也有较高的出苗率。用上述无菌苗茎段为外植体,分别接种在4种不同生长素的培养基上均能产生愈伤组织,除含有2,4-D的培养基外,其它3组愈伤组织的诱导频率均达到100％。把愈伤组织移到添加BAP与IAA的分化培养基上,三个星期后由愈伤组织分化出不定芽,分化频率为12.5％。当不定芽长至1.5cm~2cm时转入生根培养基,两个星期后长出白色的根,获得完整植株。     

“春丰1号”厚皮甜瓜的组织培养和快速繁殖

1植物名称日本引进的厚皮甜瓜（Cu－cumismelovar.reliculatus)品种“春丰1号”。2材料类别种子。3培养条件种子先用75％的乙醇浸30s,再用0．1％的HgCl2浸泡10min,最后用无菌水冲洗4遍后,接种在不添加激素的MS固体琼脂培养基上,7－10d后萌发长成实生苗。将实生苗基部第3和第4节位单节切段,分别接种到不同配方培养基中,生长20d,再将试管苗单节切段,接种在相同的培养基上,25d后统计试管苗数,同时观察试管苗的形态学变化。生根培养是将单节切段接种到生根培养基上,25d后统计生根率和根条数,所有处理的样本量均为10株试管苗,3次…     

花叶万年青的组织培养

植物名称:花叶万年青(Dieffenbachia picta)材料类别:带腋芽的茎段培养条件:基本培养基为MS。芽诱导培养基附加BA1mg/L,NAA0.1mg/L;增殖培养基去除NAA,仅附加BA10mg/L,培养温度25～30％,光照强度2000lx,每日光照10小时。生长和分化:剪取茎段,剥去叶片,经消毒后用无菌水冲洗8～9次,在无菌条件下,切成约1cm长的茎段,每段带一腋芽,或者切成带芽的片状三角形。接种在芽诱导培养基上,接种7天后,可见芽肿胀隆起。其后,芽逐渐萌动,但生长缓慢。约10周     

抗菌肽体外对结核杆菌的作用初探

将结核杆菌接种于含抗菌肽的苏通氏培养基中 ,在接种后不同时间内取样接种于罗氏培养基上 ,观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况 ,初步探讨了抗菌肽 (CecropinB)对结核杆菌标准株H3 7RV的作用。结果显示 ,接种 10天后在罗氏培养基上结核杆菌对抗菌肽敏感。说明在体外培养中 ,抗菌肽有一定的抗结核杆菌的作用     

兔眼越桔幼苗胚轴、子叶诱导再生植株

植物名称:兔眼越桔(Vaccinium ashei)材料类别:无菌苗胚轴、子叶。无菌苗培养:种子用70％酒精浸泡1分钟后,转移到10％的漂白精片过滤液中灭菌15分钟,再用无菌水冲洗三次,接种于0.5％琼脂上,培养温度为25～28℃,光强为2,000lx,每日光照16小时。培养3～4周后幼苗高约2～3cm,子叶绿色。于无菌条件下取子叶、胚轴(5～7mm)作为外植体进行诱导培养。     

利用雌激素构建小鼠淋病奈瑟菌感染模型

目的探讨用雌激素构建淋病奈瑟菌感染小鼠模型的方法。方法淋病奈瑟菌WHO-A接种经皮下注射苯甲酸雌二醇和真皮下埋植尼尔雌醇片（雌三醇）预处理的雌性ICR小鼠,小鼠阴道拭子接种T-M选择培养基培养分离淋病奈瑟菌,取小鼠阴道分泌物涂片染色观察淋病奈瑟菌感染情况,比较两种雌激素对小鼠淋病奈瑟菌感染的差异。结果与对照组相比,苯甲酸雌二醇小鼠体内淋病奈瑟菌有短时间的定植,而尼尔雌醇组与对照组无差异。结论雌激素（尤其是雌二醇）有利于淋病奈瑟菌在小鼠阴道内的定植。     

一种全细胞百日咳菌苗效力试验替代方法的建立

<正>全细胞百日咳菌苗的效力通过小鼠保护试验(AMPT)来判定。此法是用不同稀释度的百日咳国际参考苗(ZSPV)和待检菌苗免疫小鼠,14天后脑腔攻击Bordetella百日咳菌18323(100-1000LD50)。 从1951年到1959年,由医学研究委员会进行的现场研究表明,能使小鼠抵抗脑腔攻击的百日咳菌苗也可保护儿童。尽管在AMPT的结果和接种的个体产生的保护力之间有高度的相关性,此试验仍有许多操作上的困难:(i)需要大量可对百日咳菌苗的免疫产生应答的小鼠。这些动物须在适宜的环境中喂养一个月,费用很高;(ii)脑腔注射需要毒株;(iii)实验室间和实验室内的结果有很大的     

黑节草的组织培养

植物名称:黑节草(Dendrobum candicum) 材料类别:种子在培养基上形成无菌苗后,将无菌苗的幼茎切成0.2—0.5cm的茎段作培养材料。培养条件:培养种子无菌苗是用RM的大量元素为基本培养基,每升附加BA0.2mg,NAA2mg,蔗糖3％,琼脂适量。培养室温度为20—25℃,光强 10001ux,每天光照8小时。生长与分化情况:黑节草的蒴果按常规作表面灭菌后,将蒴果内的种子播种在培养基上,待形成种子无菌苗后,再将无菌苗的幼茎茎段接种在分化     

美国卫生研究院食品药品管理署生物制品局细菌部主任罗宾斯教授在京学术讲座综述(续一)

<正>百日咳菌苗 百日咳菌苗是第二次世界大战后发展起来的一种用福马林杀菌的全菌体菌苗。在美国使用实践中,用小鼠作保护力试验,用凝集反应测定免疫小孩中的凝集抗体;但是菌苗如何产生保护?百日咳又是如何致病?免疫成分是什么?如何说明人得到免疫?人体免疫情况是血清抗体还是分泌抗体?是否是细胞免疫?我们都不太清楚、百日咳菌相的变化有3～4种,第一相菌也是在变动的,在培养基上有时变为3或4相。现在谈几个     

培养基除菌过滤在百日咳菌苗生产中的应用

经一系列试验证实百日咳菌大罐培养浓度的下降与培养基中不耐热营养因子不足有关,将培养基的高压灭菌方式改为除菌过滤,保留热不稳定营养因子,可以提高百日咳菌大罐培养浓度;优化酸沉淀条件后,提高了菌苗回收率,从而节省了大量培养基,缩短了生产时间,获得了良好的经济效益。     

碱蓬茎段培养再生植株的研究

将碱蓬（ＳｕａｅｄａＦｏｒｓｋ）种子经消毒后分别接种在４种不同ｐＨ值的培养基上,两天后观察发现以ｐＨ７培养基上的种子出苗最快,出苗率最高。６ｄ时观察,在ｐＨ９的培养基上也有较高的出苗率。用上述无菌苗茎段为外植体,分别接种在４种不同生长素的培养基上均能产生愈伤组织,除含有２,４Ｄ的培养基外,其它３组愈伤组织的诱导频率均达到１００％。把愈伤组织移到添加ＢＡＰ与ＩＡＡ的分化培养基上,三个星期后由愈伤组织分化出不定芽,分化频率为１２５％。当不定芽长至１５ｃｍ～２ｃｍ时转入生根培养基,两个星期后长出白色的根,获得完整植株。     

梨茎尖离体培养

本试验用茎尖培养方法获得植株,并对影响茎尖培养的有关因素进行了初步探讨。早春取一年生“锦丰”和“早酥”的顶梢,长约15cm,分别浸泡在0、50、100、200 ppmGA_3 100ml 溶液中。放置在26°±2℃的恒温室内。经常加蒸馏水,保持溶液的体积。浸泡7天后,换蒸馏水再浸泡11天,然后用75%酒精消毒半分钟,10%漂白粉液消毒10分钟,再用无菌水冲洗三遍。在解剖镜下剥离茎尖,取0.5mm 左右的茎尖,分别接种到     

接种固定化粪菌和培养基种类对体外结肠菌群发酵的影响

目的研究三种模拟结肠发酵培养基和粪菌固定化对体外结肠发酵体系菌群构成的影响,为建立高度模拟结肠体外结肠发酵提供参考。方法采集健康女性成人粪便,粪便制备悬液或用结冷胶-黄原胶固定化粪菌接种于模拟结肠发酵反应器,分别用三种培养基按0.07 m L/h稀释率进行连续发酵10 d,用末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)与高通量测序技术分析菌群多样性,并分析发酵液短链脂肪酸含量。结果 T-RFLP分析显示,培养基类型主要影响粪菌固定体系菌群α多样性达到稳定的时间和多样性。β多样性分析显示,第10天时培养基Ⅲ悬液培养和培养基I固定化培养系统的菌群构成与粪便菌群最相近。而培养基Ⅲ在第10天达到较高而稳定的丁酸浓度。结论由于比粪菌固定培养更易操作,培养基Ⅲ悬液培养适于模拟人结肠发酵。     

卡介苗标准化(续一)

<正> 4.菌苗接种后特定时间内在人和动物必须具备使结素反应阳转的能力:结素试验是测定结核杆菌感染最简便而又非常可靠的试验。但它是否是抗痨的一种确实指标,目前尚无定论;在更好的方法发现之前,可以被认为它是接种成功和增加抵抗力的标志。由于人和动物反应不同,每批菌苗应作人和动物的测定。 动物试验:实验表明豚鼠皮内注射少至11个可培养单位(活菌)即发生结素阳性反应。注射大约4000个活菌就能使结素产生最大阳性反应。虽将剂量增大几百倍,也不能引起对结素的更高反应。然而,人则不然。多数实验室的测定方法是以皮内剂量注射豚鼠,动物于4-6周后,应对10-50单位结素出现阳性反应(10mm以上)。 Rosenthal叙述了更敏感的试验方法,用对新生儿和婴儿大约1/36的剂量用单刺器接种豚鼠。试验用体重400～500 gm白色或浅色皮肤的豚鼠,大腿外侧脱毛滴标准菌苗     

百合叶片愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:百合(Lilium concolor)。材料类别:实生苗叶片切段。将百合种子(来源于日本TAKII种子公司)用水浸泡1d,经70％乙醇处理30s,0.1％升汞溶液灭菌15min,用无菌水淋洗5次后接种于MS培养基上。培养温度25±2℃,光周期12h光照/12h黑暗,光照度1500～2000lx。培养1月后种子萌发,40d后无菌苗高8～10cm,线形叶片宽度2～3mm,叶片淡绿色,于无菌条件下将叶片     

口服痢疾活菌苗深层培养试生产小结

在英明领袖华主席抓纲治国的战略决策指引下,坚持预防为主的卫生工作方针,为防治菌痢这一常见病、多发病,我所正积极研制口服痢疾活菌苗。 我们用痢疾F_2a 、、F_3a(依链株)菌种,简单培养基,先于10立升深层培养罐内38℃恒温进行小量培养试验,试验中,按口服痢疾活菌苗质量指标要求,对培养基的选择,培养温度,PH变化,与生长浓度、活菌率之间的关系,初步掌握试生产工艺的全过程后,改用100立升罐培养、制苗。现将试生产7批次的结果,小结如下:     

深层液体培养法生产沼泽红假单胞菌

根据沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudomonaspalustris)在好氧黑暗条件下也可生长的特性 ,采用液体深层培养方法 ,在通气式发酵罐中进行大规模生产。对培养基中的碳源、氮源、生长因子和微量元素进行了优化 ,用正交试验确定了主要培养基成分的添加量和接种量。在 10 0 0mL三角瓶和 2 5L全自动通气式发酵罐上进行了放大试验 ,在适宜工艺条件下培养 2 4h ,菌体浓度可达 6 0亿 /mL。