棉属二倍体野生棉与四倍体栽培棉种间杂交的胚珠培养

用棉属二倍体野生种与四倍体栽培种陆地棉杂交及四倍体栽培种海岛棉、陆地棉与二倍体栽培种亚洲棉杂交,以陆地棉自交作对照。将杂交和自交授粉后2天(部分材料为1天)的胚珠在液体培养基上进行飘浮静置暗培养。培养50—70天,7个杂交组合及2个自交品种的胚珠均获得一定频率的胚(包括成熟和不成熟胚)及成熟胚萌发的苗。其中陆地棉与澳洲野生棉、阿拉伯棉、亚洲棉、海岛棉与亚洲棉等4个杂交组合已得到杂种一代植珠。试验结果表明,同一组合的胚珠,在不同的培养基上获得胚的频率和胚萌发率有明显差异;不同组合的胚珠,在同一培养基上培养的结果也不一致。陆地棉X亚洲棉、海岛棉×亚洲棉两个组合授粉后1天的胚珠培养也获得一定频率的胚发育。     

哈蜜瓜幼胚体培养

植物名称:哈蜜瓜(Cucumis melo var Saccharinus Naudin) 材料类别:授粉后10天的幼胚——球形～心形胚期,带三分之一的种体培养。培养条件:诱导幼胚生长及产生愈伤组织的基本培养基为MS附加(单位为mg/1)①KT0.5,BA0.5,IAA1;②KT1,IAA?诱导愈伤组织再分化培养基为改良MS附加不同浓度的激素,其配方为:①改良MS(变有机物为B_5的成分及用量)附加 KT2,硫酸腺嘌呤3,赤霉素 5,②1/2 MS大量元素、微量元素、铁盐,附加BA10。诱导生根培养基为N_6大量、MS微量、铁盐(以上元素都减半),B_5的碘和钼、有机物,MS的肌醇,硝酸铵297,附     

玉米杂种优势与杂交后胚中ATP酶活性和RNA酶活性及蛋白质含量的关系

通过对若干个玉米杂交及其亲本自交授粉后1天、3天、7天、10天胚中ATP酶活性、RNA酶活性及蛋白质变化的比较来探讨杂种优势产生的生化机理。结果表明,30个组合的玉米授粉后一天,有90%组合杂交胚中ATP酶活性超过双亲或母本自交胚中ATP酶活性。授粉后3天杂交胚中ATP酶活性多数低于双亲自交胚中的ATP酶活性,看来这一表现与自交授粉后胚中合子细胞分裂较迟缓有关。以上四个时期授粉后,杂交胚中RNA酶活性介于双亲之间或低于双亲,这可能与杂交胚中核酸分解的速度较慢有关。杂交胚中蛋白质含量变化不同时期各组合间表现不同,杂交后胚胎发育初期胚中蛋白质的变化不一定是总的数量的增加,而是某些蛋白质或酶的变化。     

暴马丁香成熟胚愈伤组织和体胚诱导及其生理状态解析

以暴马丁香成熟胚为外植体进行愈伤组织和体胚发生诱导,通过调节诱导培养基中植物生长调节剂的种类和浓度,分析其对愈伤组织诱导和体胚诱导的影响,同时对培养过程中的外植体进行形态发生观察和生理状态分析。结果表明:①暴马丁香成熟胚外植体培养30 d可见直接体胚发生、60 d可见子叶型体胚;②BA在愈伤组织诱导过程中起到了主导作用,在0.5 mg·mL^-1BA和5~6 mg·mL^-1NAA组合下,愈伤组织诱导率可达100%;在0.5 mg·mL^-1BA和5 mg·mL^-1NAA组合体胚诱导率可达8%;③多酚含量在愈伤组织形成初期急剧上升且在培养过程中保持较高水平,子叶型胚期PAL和POD活性升高、MDA和SOD活性略下降。     

东方百合系内杂交授粉技术与胚抢救技术研究

研究了东方百合系内杂交授粉技术及胚抢救技术。结果表明:(1)在组合‘Justina’בShela’中,采用柱头直接授粉,花粉管在花柱中向下定向生长,在子房中向胚珠定向生长;采用切花柱授粉,花粉管在花柱切口及子房中发生不同程度无向性生长;残留花柱越长,进行胚珠定向的花粉管数量越多,获得的饱满种子越少,采用柱头直接授粉获得的饱满种子最多。(2)采用柱头直接授粉对东方百合系内56个组合进行杂交实验,仅1个组合未获得饱满胚珠、3个组合获得胚珠少于10个,其余52个组合获得大量饱满胚珠,初步表明此法可作为东方百合系内杂交通用授粉技术。不同胚抢救技术试验结果显示,授粉约70d后采用切胚珠接种比胚珠直接接种的杂种胚萌动快、萌发率高,而且前者的胚抢救效率也明显高于授粉40d后的"剥胚式接种"。研究认为,授粉约70d后采用"切胚珠接种"可作为东方百合系内杂交通用胚抢救技术。     

小叶杨与美杨种间杂交的胚胎发育和杂种胚珠的离体培养

1.观察了小叶杨(Populus simonii Carr.)和美杨(Populus pyramidalis Borkh.)人工杂交后从花粉粒萌发至胚分化完成的发育过程:1.大多数美杨花粉粒可以在小叶杨的柱头上萌发长出花粉管,花粉管在花柱中正常地生长并通过珠孔进入胚囊,于授粉后4—7天发生双受精作用,形成初生胚乳核和合子。胚乳的发育正常或不正常,后者表现为在游离核阶段的败育或胚乳细胞发育不良。胚在各个发育阶段尤其是球形胚和心形胚阶段,都可能败育,也可以正常发育成为分化完全的有效胚。2.将授粉后19天、22天、26天和29天含有不同发育阶段(心形期、鱼雷期、子叶伸长期)未成熟的杂种胚珠接种于人工培养基上,结果表明:1.M110培养基(1/2 MS+IAA 0.01毫克/升+BA 0.1毫克/升+蔗糖2%)是选用培养基中效果最好的;2.不同发育阶段杂种胚的胚珠可以离体培养成生长正常的小植株。     

离体授粉导致玉米颖果的发育

从田间生长的玉米植株的未授粉果穗(雌花序)上切取完整子房,并将其接种于培养皿内特定的琼脂-基本培养基上。向露在培养皿外面的花丝(花柱)末端进行授粉,导致46%的子房受精。随后谷粒(颖果)发育的程度是多样的。授粉后40天,一些谷粒仅有胚的发育,而另一些谷粒则有胚和不同程度的胚乳的发育:大约5%的子房发育成正常的谷粒;60%的具有一些胚乳的谷粒能在实验室发芽条件下萌发,70%的从仅具有胚的谷粒上切取的胚能在培养基上萌发。     

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。     

君子兰未成熟胚的试管培养

植物名称:垂笑君子兰(Clivia,nobilis Lindl)材料类别:本园栽培的6年生垂笑君子兰,盛花期人工授粉后15天的未成熟胚。培养条件:1.来成熟胚离体继代培养的基本培养基为MS,附加成份(毫克/升):①KT2,2.4—D0.5NAA0.25,ZT1;②NAA0.01,BA0.5;③NAA     

花生种间杂种的胚胎营救和植株再生

1　植物名称　花生种间杂种 (Ａｒａｃｈｉｓｈｙ ｐｏｇａｅａ×Ａ .ｃａｒｄｅｎａｓｉｉ)。2　材料类别　取杂交授粉后 30ｄ的幼果 ,自来水冲刷去泥土 ,洗净。以 70 %乙醇浸泡 1ｍｉｎ后在无菌条件下剥离出胚珠。胚珠再以70 %乙醇表面灭菌 1ｍｉｎ ,0 .1 %ＨｇＣｌ2 处理 5ｍｉｎ ,灭菌水洗涤 5次 ,然后进行胚珠和幼胚培养。成苗后切取带腋芽茎段作外植体。3　培养条件　 (1 )胚珠生长培养基 :ＭＳ ＫＴ0 .2ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) 5 %蔗糖 ;(2 )诱导幼胚萌发培养基 :ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 .0 ＢＡ 0 .5 ;(3)腋芽扩繁培养基 :ＭＳ ＢＡ 4…     

石蒜与萱草远缘杂交育种研究

目的：为培育石蒜属植物新品种（系）提供参考依据。方法：以石蒜属（Lycoris）、朱顶红属（Hippeastrum）、萱草属（Hemerocallis）植物为试材，采用花粉离体培养、田间杂交、胚拯救等方法，研究了石蒜属植物在远缘杂交过程中的生殖隔离。结果：1、在花粉活力测定中，所得最适宜朱顶红花粉萌发的培养基组成为：70 g/L蔗糖+5 mg/L硼酸+0.01 g/L氯化钙+50 g/LPEG-4000；萱草组花粉的最适培养基组成为：100 g/L蔗糖+0.3 mg/L硼酸+0.4 mg/L氯化钙。2、以石蒜属植物作母本，设计8个杂交组合试验，结果表明子房膨大率随杂交组合的不同而呈现差异性，其中与四倍体萱草杂交组合所得平均子房膨大率为59.81%，高于二倍体萱草组（33.12%）。3、胚拯救初期，各组合获得胚珠0～44个，其中鹿葱×萱草‘金娃娃’组合最多，中国石蒜×萱草‘金娃娃’组合最少。胚珠膨大率随杂交组合的不同出现差异，7个杂交组合的胚珠均发生膨大，膨大率在1.79%～96.15%之间。其中鹿葱×’Custard Candy’组合胚珠膨大率较高（96.15%），稻草石蒜×’Cust...     

无核香味葡萄胚挽救育种研究

为创制无核香味葡萄新种质,该研究以7个无核葡萄品种为母本,4个玫瑰香味品种为父本,配置了9个杂交组合。田间杂交后,通过胚挽救技术离体培养杂种胚珠,使胚珠中幼胚继续发育,继而在幼胚萌发成苗后利用无核标记对F1代株系进行无核性状的早期检测,同时对杂种幼苗进行温室炼苗,最终移栽大田。结果表明:(1)利用胚挽救技术获得365个胚挽救株系,移栽大田并成活182株杂种苗。(2)对其中72个株系利用无核基因探针GSLP1-569与无核分子标记SCF27-2000进行无核性状检测,分别检测出8个和38个杂种后代携带无核特异性条带,初步确定为无核株系。(3)杂交组合中以‘红宝石无核’、‘火焰无核’、‘昆香无核’为母本的组合成苗率相对较高,较适宜做母本;香味品种中‘玫瑰香’更适合做为父本选育香味无核种质。(4)以‘火焰无核’和‘昆香无核’为母本的杂交组合分别在授粉后的43d和51d采样,胚发育率(6.96%~8.54%和16.92%~18.13%)和成苗率(6.45%和8.75%~10%)较高;‘红宝石无核’ב玫瑰香’、‘莫莉莎无核’ב玫瑰香’和‘波尔莱特’ב玫瑰香’3个组合分别在授粉后59~60d、54d、52d采样,胚挽救育种效果较好;杂交组合‘克瑞森无核’ב巨玫瑰’和‘奇妙无核’ב昆香无核’胚败育时期分别为授粉后39d和48d。(5)幼胚发育至子叶型胚时最易成苗,延长胚珠离体暗培养时间显著增加了畸形胚比率。研究认为,葡萄胚挽救育种过程中,胚珠离体培养时间在8~10周为宜。     

普通小麦与粗山羊草正,反交的育性研究

普通小麦与粗山羊草杂交需借助幼胚培养方可获得杂种,取授粉１２～１６天的幼胚进行拯拯救,成苗率较高,效果较好。而不同杂交方式对共杂种成胚率、成苗率及思胚拯救率影响很大。以普通小麦为母本,粗山羊草为父杂交时,１５个杂交组合平均杂种成胚率,成苗率及幼胚拯率分别为５．３５％和５８．７３％,而在１２个反交组合中,其平均成胚率,成苗率及幼胚拯救率分别为９８．８８％、１７．１０％和２４．４４％。由此可见,普通小     

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究.结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50～60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长.低浓度(0.01mg·L^-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳.     

番茄幼胚的离体培养

植物名称:番茄(Lycopersicon esculentum),品种为“强力米寿”和“北京早红”。材料类别:授粉后14天的果实,消毒后取出种子,剥取幼胚。培养条件:基本培养基为Neat等设计的HLH培养基,每升分别附加(mg/l,下同)IAA0.02 BA0.1,IAA0.02 BA0.5,IAA0.05 BA0.1,IAA0.05 BA0.5,IAA0.5,BA0.1,BA0.05,     

中国部分野生百合自交和组内及组间杂交亲和性研究

以百合属(Lilium)4个组13种野生百合为试验材料,配置80个杂交组合,分析中国野生百合自交、组内及组间杂交的亲和性.采用延迟授粉和切割柱头两种授粉方式和胚拯救技术,以克服受精前、后的障碍,提高育种效率.结果显示:百合自交亲和性存在一定差异,大花卷丹(L.leichtlinii)和兰州百合(L.davidi‘ unicdor cotton')自交不亲和;卷瓣组组内杂交在所配置的杂交组合中,仅有3个组合[垂花百合(L.c ernuum)×细叶百合(L.pumilum)、兰州百合×垂花百合以及兰州百合×大花卷丹]通过延迟授粉获得杂交胚,并通过组培获得杂交苗;卷瓣组与钟花组组间杂交亲和性较好.研究表明,对于大多数的杂交组合,延迟授粉比切割柱头对克服受精前障碍有效;而对于绝大多数的自交和杂交组合,组培能有效克服受精后障碍,并获得子一代苗.     

丁香（Syringa L.）种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究。结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50-60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氮酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长。低浓度（0.01mg·L^-1）BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳。     

梅胚培养与新梢再生

植物名称:梅(Prunus mume),品种大叶青。材料类别:盛花后68天的在适宜条件下不能发芽的未成熟胚。培养条件:带完整种皮的胚置于10％次氯酸钠溶液中杀菌5分钟,无菌水冲洗干净后取胚接种。     

苏云金杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞及转基因植株再生的研究

以葡萄的胚性愈伤组织作为农杆菌介导,Ti质粒转化材料,利用共培养法将苏云金杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞,通过胚状体发生途径再生转基因植株。实验发现:80μmol/L的乙酰丁香酮诱导处理农杆菌和葡萄愈伤组织后可将转化效率提高50倍。OD值为0.8的农杆菌菌液稀释8—10信后与在G培养基预培养10天的胚性愈伤组织共培养2—3夭,Ti质粒对葡萄愈伤组织细胞的转化效率可达50%左右。筛选得到的转基因植株在含Km 30 mg/L的选择培养基上继代存活6个月,生长正常;提取叶片染色体DNA做Southern blot,杂交结果为阳性。将转基因植株各部分切段置于含Km 50 mg/L的选择培养基上,能够脱分化产生抗性愈伤组织并能增殖。     

姜花属种间杂交胚拯救研究

为提高姜花属种间杂交胚挽救中幼胚萌发率,以白姜花×金姜花的胚珠为试材,研究不同胚珠发育时期、不同培养基及低温处理果实对幼胚萌发率的影响.结果表明,白姜花×金姜花胚挽救的适宜培养基是MS+0.1 mg/L BA十0.1 mg/L NAA;接种时期以60 d的幼胚培养效果最佳;低温处理果实3～6 d能有效提高幼胚的萌发率.