植物自交不亲和分子机理研究的一些进展

综述了植物孢子体自交不亲和（ＳＳＩ）与配子体不亲和（ＧＳＩ）分子机理研究的一些进展。ＳＬＧ和ＳＲＫ基因编码的ＳＬＧ和ＳＲＫ蛋白在ＳＳＩ中起着关键作用,而Ｓ基因编码的Ｓ蛋白（ＲＮａｓｅ）在ＧＳＩ中起着重要作用。禾本科植物的ＧＳＩ是受双位点Ｓ和Ｚ基因控制的,文中也作了简要介绍。     

高等植物自交不亲和性的分子生物学

自交不亲和性是大多数高等植物防止近亲繁殖的一种遗传屏障。它涉及受精时雄配子（花粉）和雌蕊之间的相互作用。目前,已经分离获得了编码控制雌蕊自交不亲和性的Ｓ基因。在孢子体型自交不亲和的芸苔属中,雌蕊Ｓ基因编码Ｓ位点糖蛋白（ＳＬＧ）和Ｓ受体激酶（ＳＲＫ）。它们可能与磷酸化和去磷酸化参与了的某种信号传递有关,最后导致自交花粉生长的抑制。在配子分配体型自交不亲和的茄科中,雌蕊Ｓ位点糖蛋白为一种核糖核酸酶,称为Ｓ－核酸酶（Ｓ－ＲＮａｓｅ）。自交不亲和反应与Ｓ－核酸酶引起的花粉管ＲＮＡ降解有关,并且可能通过花粉管特异性地摄入Ｓ－核酸酶或者花粉管内存在的特异性的核酸酶抑制剂的作用,达到对自交花粉生长的抑制。另外,从配子体型自交不亲和的罂粟中,分离到了与芸台属和茄科不同的雌蕊Ｓ基因,其作用机理可能与Ｃａ＋＋参与的信号传递有关。     

植物的生殖讲座（五）：被子植物的自交不亲和性

自交不亲和性广泛存在于被子植物中,同形花与异型花均存在自交不亲和性。受精的障碍可发生在花粉萌发、花粉管进入柱头、花粉管在花柱中生长及进入胚囊中等不同阶段和部位。不亲和性由孢子体系统或配子体系统控制。用转基因技术研究发现甘蓝的ＳＬＧ启动子能控制配子体型和孢子体型的表达。配子体自交不亲和的Ｓ基因产物具有核酸酶的活性,能选择性地破坏不亲和花粉管的ＲＮＡ。本文简介了克服自交不亲和性的方法及自支不亲和性的利用。     

利用氨基酸分析快速测定甘蓝自交不亲和性

利用氨基酸分析方法,对甘蓝（ＢｒａｓｉｃａｏｌｅｒａｃｅａＬ．ｖａｒ．ｃａｐｉｔａｔａ）自交不亲和系与亲和系的柱头和花粉蛋白质进行了研究。结果表明,自交不亲和系与亲和系的柱头和花粉氨基酸组分有显著差别。柱头中苏氨酸和酪氨酸含量以及花粉中甘氨酸和丙氨酸含量可以作为评价自交不亲和性的指标。鉴定标准：自交不亲和系柱头中苏氨酸含量高于０．２２３％,酪氨酸含量高于０．３８５％;花粉中甘氨酸含量高于１．５９３％,丙氨酸含量高于１．４６４％。亲和系柱头中苏氨酸含量低于０．１８５％,酪氨酸含量低于０．１６４％;花粉中甘氨酸含量低于１４７０％,丙氨酸含量低于１００６％     

高等植物自交不亲和性的分子生物学

自交不亲和性是大多数高等植物防止近亲繁殖的一种遗传屏障。它涉及受精时雄配子（花粉）和雌蕊之间的相互作用。目前,已经分离获得了编码控制雌蕊自交不亲和性的Ｓ基因。在孢子体型自交不亲和的芸苔属中,雌蕊Ｓ基因编码Ｓ位点糖蛋白（ＳＬＧ）和Ｓ受体激酶（ＳＲＫ）。它们可能与磷酸化和去磷酸化参与了的某种信号传递有关,最后导致自交花粉生长的抑制。在配子分配体型自交不亲和的茄科中,雌蕊Ｓ位点糖蛋白为一种核糖核酸酶,称     

不结球白菜自交不亲和S单元型的鉴定研究

依据甘蓝SRK基因保守序列设计SRK特异引物并进行验证,通过PCR-RFLP法分析16份不结球白菜自交系材料的SRK基因的多态性,根据其差异鉴定不结球白菜S单元型及自交不亲和性.结果表明:16个不结球白菜自交系SRK基因共产生6种不同的带型,其中有1个是强自交不亲和系,4个是弱自交不亲和系,且与田间测定的亲和指数相符,说明利用SRK基因的多态性鉴定不结球白菜纯合自交系的自交不亲和性和S单元型是可行的.同时对部分材料的SRK基因的核苷酸序列进行分析验证,表明相同类型SRK基因序列一致性较高,且SRK基因存在明显的单核苷酸多态性,为进一步自交不亲和性的研究奠定了基础.     

自交不亲和植物S—位点特异性糖蛋白

自交不亲和植物Ｓ┐位点特异性糖蛋白朱利泉王晓佳（西南农业大学,重庆６３０７１６）关键词植物自交不亲和性Ｓ－位点特异性糖蛋白多态性植物自交不亲和性是指植物正常的雌雄配子之间花期自交不结实或结实率很低的现象,它在遗传上受Ｓ－位点（Ｓ－ｌｏｃｕｓ）控制。Ｓ...     

大麻哈鱼生长激素基因Ⅱ的分子克隆和序列分析

以λ噬菌体ＥＭＢＬ－３为基因载体,构建大麻哈鱼（Ｏｎｃｏｒｈｙｎｃｈｕｓ　ｋｅｔａ）基因组文库,并从中分离出含全长的生长激素（ｃｓＧＨ）基因的克隆。本研究首次报道了对ｃｓＧＨ全长核苷酸序列分析的结果。发现ｃｓＧＨ基因由６个外显子和５个内含子组成,长度为３３６１碱基对（ｂｐ）。由该序列可推导出含２１０个氨基酸的多肽,其中存在２２个疏水氨基酸残基的信号肽。本研究所分析的ｃｓＧＨ的外显子和内含子,其排列方式与其他鲑类（Ｓａｌｍｏｎｉｄｓ）和罗非鱼（Ｔｉｌａｐｉａ）是相似的,而与鲤科鱼类（Ｃａｒｐｓ）不同,后者外显子和内含子的排列方式与哺乳类和鸟类相似。将所测定的 ｃｓＧＨ基因的编码区与已发表的 ｃｓＧＨⅡ和ｃｓＧＨ Ⅱ两种 ｃＤＮＡ序列进行比较,证明本研究所克隆的 ｃｓＧＨ基因应属于 ｃｓＧＨ Ⅱ,因它们的编码序列 １００％同源。     

芸苔属植物S受体蛋白激酶的研究

植物的发育过程中信号传导离不开接受信号的受体。受体是靶细胞接受信号或对其作出初步反应的一些特殊蛋白质。主要是细胞表面受体 ,是一类跨膜蛋白质 ,根据其结构和作用方式可分为三大类 :离子通道关联受体、Ｇ蛋白关联受体、酶联受体。酶联受体蛋白本身就是一种酶与酶相联系 ,通常是蛋白质激酶 ,可以使细胞内一些蛋白质磷酸化。在植物自交不亲和 (Ｓｅｌｆ-ｉｎｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ,ＳＩ)反应中 ,有一种重要参与物质 ,称为Ｓ受体蛋白激酶 (Ｓｒｅｃｅｐｔｏｒｋｉｎａｓｅ,ＳＲＫ)就属于酶联受体。自交不亲和现象在芸苔属 (Ｂｒａ…     

萝卜自交不亲和基因SLG6的CAPS标记的开发

萝卜是我国的主要蔬菜之一,其杂种优势十分明显,培育自交不亲和系是萝卜杂种优势育种的主要途径之一.本研究根据萝卜自交不亲和基因SLG6序列设计特异引物,以8个自交系为材料,其中自交不亲和系和自交亲和系各4个,扩增SLG6基因第232～711bp之间的单拷贝片段,8个材料均获得了一条480bp的特异片段.用限制性内切酶TaqⅠ对该片段进行酶切,自交不亲和系均产生约125bp和244bp的片段,其中,244bp的片段为自交不亲和系所特有,可作为SLG6基因的CAPS标记用于萝卜自交不亲和基因SLG6的检测;而自交亲和系则具有与自交不亲和系相同的125bp的片段和不同的多态性片段.     

雪花莲外源凝集素基因转化番茄

将含有雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的质粒ｐＲＳＳＧＮＡ１通过冻融法转化到根癌土壤杆菌９Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）菌株ＬＢＡ４４０４中。采用叶盘法转化番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）栽培品种“Ｃ８”、“Ａ３９”和“Ａ５３”,获得了含ＧＮＡ基因的４３株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、ＮＰＴⅡ基     

pGEX-L系列表达载体的构建

对ｐＧＥＸ系列表达载体的多克隆位点（ＭＣＳ）进行了改造,改造前ＭＣＳ上仅有ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩ和ＥｃｏＲＩ三个酶切位点。改造后的ＭＣＳ上含有８个酶切位点,它们分别是ＢａｍＨＩ、ＳａｃＩ、ＡｖａＩ、ＸｈｏＩ、ＢｇｌⅡ、ｐｓｔⅠ、ＫｐｎＩ和ＥｃｏＲＩ,改造后构建形成的ｐＧＥＸ－Ｌ系列载体对目的基因的插入有更强的适应性。     

竹节花黄斑驳病毒启动了在棉花维管组织中是一个强启动子

用竹节花黄斑驳病毒（Ｃｏｍｍｅｌｉｎａ Ｙｅｌｌｏｗ Ｍｏｔｔｌｅ Ｖｉｒｕｓ,ＣｏＹＭＶ）启动子－ｇｕｓ嵌合基因和ＣａＭＶ３５Ｓ－ｇｕｓ嵌合基因通过根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＬＢＡ４４０４介导分别转入棉花（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｌ．ｃｖ．Ｊｉｎｇｍｉａｎ７,Ｊ７Ｇ）,诱导再生了棉花转基因植株。Ｇ     

牛生长激素基因在马铃薯中的表达

将牛生长激素基因ｃＤＮＡ 与Ｐａｔａｔｉｎ ＣｌａｓｓＩ启动子及ＮＯＳ３终止子连接,构建了表达载体ｐＰＢＧＴ． 用直接法将表达载体转入农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ） ＬＢＡ４４０４（ｐＲＡＬ４４０４）菌株, 用此菌株转化马铃薯（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ ）得到再生植株． 经ＮＰＴⅡ活性检测,总ＤＮＡ ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ证明目的基因已整合到马铃薯基因组中．ＲＮＡ 点杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明牛生长激素基因已在转基因马铃薯块茎中转录和表达     

马铃薯HMGR基因的克隆,序列分析及其表达特征

采用ＲＴ－ＰＣＲ技术,从马铃薯（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ Ｌ．）幼叶中克隆了一个约１．０ｋｂ的ｃＤＮＡ片段,序列分析结果表明,该ｃＤＮＡ与忆报道的马铃薯ＨＭＧＲ基因家族的三种类型基因具有较高核酸序列同源性,与ＨＭＧＲⅠ基因同源性为７７．０％,ＨＭＧＲⅡ基因为９３．２％,ＨＭＧＲⅢ基因为７７．１％。其中３’端非翻译区序列与ＨＭＧＲⅠ、ＨＭＧＲⅡ、ＨＭＧＲⅢ三种基因同源性分别为５０．２％,８     

ACC合酶基因（ACSG）可能是黄瓜雌性系的分子标记

利用本实验室根据已知序列分离得到的ＡＣＣ合酶基因（ＡＣＳＧ）为探针对不同黄瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．）品种（系）的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,初步分析了该基因与黄瓜性别表型之间的相关性。发现在所检测的１０个不同品系中,ＡＣＳＧ与雌性系表型之间存在明显的相关关系,而且这种相关关系在不同的实验中具有良好的重复怀。ＡＣＳＧ基因可能是鉴定黄瓜雌性系的一个分子标记。     

紫云英细胞转化条件的研究

研究了紫云英（ＡｓｔｒａｇａｌｕｓｓｉｎｉｃｕｓＬ．）细胞遗传转化的条件。根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ）经含乙酰丁香酮的低ｐＨ／ＰＯ３－４ 诱导培养后,用来感染紫云英下胚轴原生质体,随后的细胞ＧＵＳ瞬间表达活性显著提高,间接证明了上述预培养诱导活化了细菌ｖｉｒ基因,促进了Ｔ－ＤＮＡ 向植物细胞转移。在ＰＥＧ介导的ＤＮＡ 转移中,较高的ｐＨ 和Ｃａ２＋ 浓度能够提高细胞ＧＵＳ活性。质粒ＤＮＡ 浓度及启动子类型对外源基因在植物细胞内表达也有一定影响。采用外植体－农杆菌共培养法,获得ＧＵＳ和ＮＰＴ Ⅱ基因稳定表达的紫云英转化植株     

云南蕨类植物区系新记录（Ⅰ）

云南蕨类植物区系新记录（Ⅰ）陆树刚,张光飞（云南大学生态学与地植物学研究所,昆明６５００９１）ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＴＯＴＨＥＰＴＥＲＩＤＯＦＬＯＲＡＯＦＹＵＮＮＡＮ（Ⅰ）￥ＬＵＳｈｕ－Ｇａｎｇ;ＺＨＡＮＧＧｕａｎｇ－Ｆｅｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｃ...     

烟草Ⅰ类几丁质酶和β－1，3－葡聚糖酶cDNA在大肠杆菌中的表达

对经过修饰的烟草Ⅰ类几丁质酶（Ⅰｃｈｉｔｉｎａｓｅ,ⅠＣｈｉ）和β１,３葡聚糖酶（Ⅰｇｌｕｃａｎａｓｅ,ⅠＧｌｕ）ｃＤＮＡ分别构建了原核表达载体,并转化大肠杆菌ＢＬ２１。经ＩＰＴＧ诱导表达,ＳＤＳＰＡＧＥ法证明表达产物ⅠＣｈｉ和ⅠＧｌｕ的分子量分别约为３０ｋＤａ和３１ｋＤａ,在菌内以包涵体形式存在。经包涵体的收集、洗涤、裂解和复性,两种表达产物在体外均表现出较强的抑病原真菌活性,且ⅠＣｈｉ的抑菌活力大于ⅠＧｌｕ,二者具有很强的体外抑菌协同性     

青藏高原近缘野生大麦5S rRNA基因染色体原位杂交定位

采用原位杂交技术,以５Ｓ ｒＲＮＡ基因为探针,对产于青藏高原的４份近缘野生大麦和栽培大麦,即：二棱野生大麦Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．ｓｓｐ．ｓｐｏｎｔａｎｅｕｍ（Ｋｏｃｈ）Ｈｓｕｅ,六棱野生大麦Ｈ．ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．ｓｓｐ．ａｇｒｉｏｃｒｉｔｈｏｎ（Ａｂｅｒｇ） Ｈｓｕｅ,六棱瓶形野生大麦Ｈ．ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．ｓｓｐ．ａｇｒｉｏｃｒｉｔｈｏｎ ｖａｒ．ｌａｇｕｎｃｕｌｉｆｏｒｍ（Ｂａｋｈｔ） Ｈｓｕｅ,栽培大麦Ｈ．ｖｕｌｇａｒｅ．Ｌ．进行了研究,将杂交结果进行观察与统计,并建立起５Ｓ ｒＲＮＡ基因定位的模式图。结果表明５Ｓ ｒＲＮＡ基因在染色体上的位点呈现动态变化,由二棱野生大麦、六棱瓶形野生大麦到六棱野生大麦、栽培大麦、位点数目有递增的趋势,而且位置也发生了某些改变。探讨了５Ｓ ｒＲＮＡ基因进化