抗人淋巴细胞免疫球蛋的临床应用进展

抗人淋巴细胞免疫球蛋白制品已经临床研究,证实有效,其中包括在肾,心脏,肝等器官移植的免疫排斥预防和治疗,骨髓移植的移植物抗宿主反应的预防,以及再生障碍性贫血的治疗等。     

鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白热原检测中的应用

报道了鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白内毒素检查中的应用。在用鲎试剂检测细菌内毒素时 ,按中国药典的要求对鲎试剂灵敏度进行标定 ,并作干扰实验 (增强或抑制实验 ) ,然后用鲎试法与家兔法同时测定 15批抗淋巴细胞免疫球蛋白。结果发现三批鲎试剂的灵敏度标示值均正确 ,五批抗淋巴细胞免疫球蛋白半成品在最大有效稀释度 (MVD)时对试验无干扰 ,这两种方法测定结果的符合率达到 91.7%。从而表明鲎试法很有可能代替家兔法     

乙型肝炎人免疫球蛋白的稳定性研究

目的 考察乙型肝炎人免疫球蛋白的稳定性.方法 对乙型肝炎人免疫球蛋白成品进行(25±2)℃条件下为期6个月的加速稳定性试验和(6±2)℃条件下为期4年的长期稳定性试验,对考察的制品按2010版《中国药典》三部进行全面检测,检测其抗-HBs效价、蛋白质含量、纯度、pH值、分子质量大小分布(单体+二聚体)、麦芽糖含量、甘氨酸、无菌检查、异常毒性检查、热稳定性试验、热原检查、外观检查、鉴别试验等质量指标,用t检验分析各质量指标检测数据的变化趋势.结果 乙型肝炎人免疫球蛋白制品在进行加速试验后,单体+二聚体、抗-HBs效价值都有下降趋势.在进行长期试验后,除单体+二聚体有所下降趋势之外,其他各项质量指标的变化均无统计学意义.结论 乙型肝炎人免疫球蛋白的稳定性良好,在进行6个月的加速破坏性试验和4年的长期稳定性试验后,其质量仍能符合2010版《中国药典》三部的规定要求.     

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果 3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1 000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。     

低温乙醇法纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白的研究

用健康人T淋巴细胞免疫猪,检测指标合格后采集猪血浆,经热吸收去除相应的杂抗体后,用改进的低温乙醇法分离纯化得到抗人T细胞猪免疫球蛋白。试生产5批,其主要质量指标均符合《中国药典》的要求,表明改良的低温乙醇法可用于纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白。     

人破伤风免疫球蛋白及其应用

临床上对破伤风的预防与治疗通常使用破伤风抗毒素(TAT)和人破伤风免疫球蛋白(TIG),前者由于来源于动物血清,常常发生过敏反应和血清病,而后者的过敏反应率很低,预防效果好。本文就TAT和TIG的应用效果比较、TIG的剂量、生产开发、市场前景等作了全面的综述。     

人免疫球蛋白制造工艺改进的研究

目的：提高人免疫球蛋白的纯度、热稳定性,缩短生产周期。方法：在原生产工艺的基础上将CohnⅡ的溶解液进行一步提纯,即进行一步乙醇冷沉淀,去除脂蛋白等杂蛋白。结果：改进后的生产工艺,人免疫球蛋白的纯度由原来的90％左右提高到98％左右,热稳定都有很大提高,57℃ 4h后略现乳光略加重,无凝胶化、无絮状物产生,制品成品检定合格即可发出,无须放置,缩短了生产周期。改进后的生产工艺效果显著,工艺可行。     

静注人免疫球蛋白的研究与应用

采用先进的生物工程技术或分离技术制备的以健康人血浆为原料的静注人免疫球蛋白,是治疗原发性免疫缺乏症、继发性免疫缺陷病、自身免疫性疾病(如川崎病、特发性血小板减少性紫癜)的有效药物,有着其它药品不可替代的作用。近年来,随着临床适应症的不断增加和新技术的应用,静注人免疫球蛋白的需求量在血浆蛋白制品中一直保持高增长的势头,这种倾向仍在继续。本文就静注人免疫球蛋白的研究与应用进展作一简要综述。     

人免疫球蛋白稳定性的两种试验方法结果比较

通过检测人免疫球蛋白制品中抗-HBs含量的变化情况,采用留样观察法和加速试验法对不同温度条件下的人免疫球蛋白有效期进行预测。结果表明,与常规留样观察法相比,加速实验法推测出的药物有效期出现一定的偏差,所以应用于人免疫球蛋白稳定性观察仅能提供参考性数据。人免疫球蛋白的有效期确定应以常规留样观察法测得的结果为最可靠的依据。     

静注人免疫球蛋白中IgG含量检测方法的探讨

为了更好地进行生产质量控制,快速、准确的测定静注人免疫球蛋白中的IgG含量。实验中对2001~2008年的静注人免疫球蛋白中的IgG含量检测结果进行了抽样统计分析。分析结果表明:样品40倍稀释后测得的吸光值与标准曲线第三点的吸光值无显著性差异;样品40倍稀释后测得的IgG含量与样品进行20、30、40倍三个稀释度测得的IgG含量的平均值无显著性差异。从而证明,样品40倍稀释后测得的IgG含量可以代表该批样品的IgG含量,无需进行20、30倍的稀释。检测方法会更省时、省力、省材料。     

白癜风患儿抗核抗体、免疫球蛋白及补体检测的临床分析

目的:探讨白癜风患儿中抗核抗体(ANA)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)以及补体(C3、C4)的表达及临床意义。方法:收集2014年10月至2016年5月我院收治的30例白癜风患儿为病例组,并于同期随机选取30例健康体检儿童为对照组,患儿的血清ANA、12种自身抗体谱分别采用间接免疫荧光法及免疫印迹法进行检测,IgG、IgA、IgM,C3、C4水平采用免疫透射比浊法进行检测。结果:病例组中ANA阳性率为13.33%(4/30),与对照组的3.33%(1/30)比较,差异无统计学意义(P0.05)。12种自身抗体谱中,分别有1例(3.33%)患儿dsDNA、SmDNA、SS-A/Ro60KD、SS-B/La、CENP-B阳性,与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。病例组患儿血清IgG、IgA、C4水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ANA阳性患儿血清IgG、IgA、IgM水平高于ANA阴性患儿,而补体C3、C4水平低于ANA阴性患儿,差异有统计学意义(P0.05)。结论:白癜风患儿ANA阳性表达与健康儿童无明显区别,体液免疫功能有明显异常,临床有重要的参考价值。     

转人源免疫球蛋白猪胚胎的研究进展

转基因猪能够为人类提供可移植的异种器官,从而缓解临床医学应用上供体移植器官短缺的压力.本文综述了异种器官移植后发生免疫排斥的研究进展,讨论了应用原核显微注射法和精子栽体法生产转人源免疫球蛋白基因(DAF、MCP、CD59)巴马香猪胚胎的方法,力争为解决异种移植的技术"瓶颈"提供技术支撑,为后续的异种器官移植做初步的研究.     

低温乙醇法和硫酸铵盐析法制备抗人T细胞猪免疫球蛋白的非临床安全性评价

目的 采用低温乙醇法制备抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin, P-ATG),并对其进行多项非临床研究,同时与原硫酸铵盐析工艺制品(市售制品)进行非临床对比研究,评价2种制品在毒理特性方面的一致性。方法 给予新西兰兔的血管重复刺激性试验,评价2种制品对注射部位的局部反应;新西兰兔红细胞的体外溶血试验,评价2种制品的溶血性;单次给药静脉注射SD大鼠进行毒性试验,评价2种制品的急性毒性;4周重复给药静脉注射SD大鼠进行毒性并伴随局部刺激性、免疫原性和毒代动力学试验,评价2种制品的长期毒性。结果 2种工艺制品连续5 d静脉注射新西兰兔,未见局部刺激性;2种工艺制品体外对新西兰兔红细胞无溶血作用,不引起新西兰兔红细胞凝聚;供试品组(低温乙醇法)在累计剂量1 560 mg/kg和市售对照组(硫酸铵盐析法)在累计剂量1 640 mg/kg的情况下,单次静脉注射SD大鼠产生的急性毒性反应相同,未显示出明显毒性,P-ATG(低温乙醇法)最大耐受量(maximum tolerance dose, MTD)>1 560 ...     

非免疫球蛋白配体药物应用进展

同抗体药物相比,非免疫球蛋白配体药物(Non-immunoglobulin scaffolds,非免蛋白配体药物)具有分子量小,不需要翻译后修饰,通常缺乏二硫键,并可进行直接的多聚化修饰等优点。最近几年,研发的非免蛋白配体药物种类就达到了二十余种,如Adhirons,Alphabodies,Centyrins,Pronectins,Repebodies,Affimers,和Obodies等,其中的139个非免疫球蛋白配体,可以特异靶向结合102种蛋白。这些非免疫球蛋白配体多用于癌症和炎症性疾病的治疗和诊断,其中有10多种非免疫球蛋白配体已经进入临床试验研究。最近,非免蛋白配体也被用于伴侣蛋白作结构解析研究,翻译后修饰的细胞内监控,或作为显微镜,流式细胞仪,Western印迹法等检测方法中抗体的替代品。     

人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104抗癌细胞活性的检测

检测人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104对癌细胞的杀伤活性以及此杀伤活性对白细胞介素-2的依赖性,动态观察其体外增殖能力.用台盼兰拒染法计算细胞扩增倍数;用MTT法检测细胞毒杀伤活性,实时观察细胞的杀伤过程.结果表明, 在200 IU/ml IL-2刺激下,TALL-104细胞增殖能力较强;在效靶比5∶ 1,作用时间为24 h,TALL-104细胞表现出对癌细胞MCF-7和A-431较高的杀伤率分别为50.4%和69.5%;当作用时间在72 h以内,效靶比不高于10∶ 1时,杀伤率随作用时间和效靶比的增加而明显升高(P<0.05);最大杀伤率分别为79.8%(MCF-7细胞)和90.4%(A431细胞).因此,TALL-104细胞体外增殖能力较强,其细胞毒活性不严格依赖于IL-2的存在.     

层析法从血浆分离静注人免疫球蛋白及其初步检定

目的：实验尝试采用多步柱层析的工艺取代乙醇低温沉淀的方法,能高效的从血浆中获得IVIG产品。方法：通过亲和层析、离子交换一套工艺纯化出IVIG产品,进而按照枟中华人民共和国药典枠对静注人免疫球蛋白（pH4）及其关键指标进行了检测。在此基础上还采用免疫浊度法等方法,对其纯度和非目的蛋白构成与国际产品进行比较。结果：工艺获得IVIG产品的关键性指标检测均达到枟中华人民共和国药典枠的要求,其质量不低于现有国际同类产品。结论：本工艺能以较高回收率获得高质量的IVIG产品。     

人—小鼠淋巴细胞杂交瘤中抗体分泌和人染色体丢失的关系

本文应用G带,G11和C带染色体制片的方法分析16个人一小鼠杂交瘤抗体分泌和人染色体丢失的关系。结果表明抗体阳性的9株杂交瘤保留人的染色体较多,7/9在13条以上,阴性的7株中4/7在5条以下。Ig基因相关的三对人染色体中,14号(重链基因相关)最稳定,22号(入链基因相关)其次,2号(K链基因相关)最易丢失。9株以SHM-D33为融合亲本瘤系的杂交瘤,没有1株保留第2号染色体,而用RF瘤系建立的4株杂交瘤中有3株拥有2号染色体,提示2号的丢失可能也与瘤系相关。     

静注人免疫球蛋白联合万古霉素治疗小儿败血症的疗效及外周血NLR、PCT变化观察

摘要 目的：观察静注人免疫球蛋白联合万古霉素治疗小儿败血症的疗效及外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）、降钙素原(PCT)变化。方法：选取2011年1月~2020年1月我院收治的败血症患儿80例为研究对象,按数字随机表法分为对照组和观察组各40例,对照组给予万古霉素治疗,观察组在对照组基础上给予静注人免疫球蛋白治疗,比较两组临床疗效、症状改善时间和住院时间、NLR、PCT、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞计数（WBC）、免疫功能及不良反应发生率。结果：观察组治疗有效率高于对照组（87.50%vs65.00%）（P<0.05）。观察组神经系统症状改善时间、体温改善时间、拒奶改善时间和住院时间为（6.22±1.05）d、（3.88±0.25）d、（5.10±0.86）d、（8.71±2.05）d,均短于对照组的（8.76±1.53）d、（6.22±0.64）d、（7.53±1.46）d和（11.24±3.36）d,比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组外周血NLR、PCT、hs-CRP、WBC水平为（1.35±0.20）、（0.80±0.34）mg/mL、（3.56±0.62）g/L、（9.12±1.80）×10⁹/L,均显著低于对照组的（1.83±0.32）、（2.19±0.73）mg/mL、（9.78±2.64）g/L和（12.26±2.59）×10⁹/L,比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组CD4⁺、CD3⁺、CD4/CD8为（42.77±11.36）％、（41.27±11.26）％、（1.70±0.33）,均显著高于对照组的（35.80±9.32）％、（35.66±9.40）％和（1.29±0.25）,比较差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率比较无差异（10.00%vs7.50%）（P>0.05）。结论：静注人免疫球蛋白联合万古霉素治疗小儿败血症的疗效显著,可降低炎症因子,提高免疫功能,且安全性较高。     

一种辅助SNT测定人特异性免疫球蛋白抗体效价的ELISA方法的建立

利用已建立的抗破伤风类毒素和抗狂犬病病毒的抗体半定量检测ELISA试剂,建立检测人特异性免疫球蛋白半成品和成品效价的可靠方法,依靠统计分析技术,推算出抗体ELISA效价,发现其与小鼠血清中和试验(SNT)检测的抗体效价的相关性和一致性极好,可用于ELISA对SNT的稀释范围的确定,提高其准确性,还可部分替代SNT对生产过程进行监控,缩短生产时间。