Protective effects of calcitonin on IL-1 stimulated chondrocytes by regulating MMPs/TIMP-1 ratio via suppression of p50-NF-κB pathway

The aim of this study was to investigate the effects and underlying mechanisms of calcitonin (CT) on interleukin 1 beta (IL-1β) stimulated human chondrocytes. IL-1β (5 ng/mL) was added into chondrocytes to establish osteoarthritis (OA) model in vitro. Different concentrations of CT (0.1, 0.5, 1, 5, 10 and 50 nM) were used for treating IL-1β stimulated chondrocytes. Cell viability of chondrocytes was measured by cell counting kit-8 (CCK8) method. Western blotting was performed to evaluate the expression of matrix metalloproteinases (MMP-13), tissue inhibitor of metalloproteinases 1 (TIMP-1), p50 and p38. CT inhibited MMP-13 expression and promoted TIMP-1 expression in the IL-1β stimulated human chondrocytes. The CT-mediated alteration of MMP-13/TIMP-1 ratio was partially attributed to the inactivation of the p50- nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) pathway by suppressing p50 in IL-1β stimulated chondrocytes. CT might play a protective role in IL-1β stimulated OA model via p50-NF-κB pathway.

Abbreviations: CT: calcitonin; IL-1β: interleukin-1β; MMP-13: matrix metalloproteinases-13; TIMP-1: tissue inhibitors of metalloproteinases-1.     

绝经后骨质疏松症TNF-α通过激活NF-κB促进RANKL诱导的破骨细胞形成

本研究检测了绝经后骨质疏松症妇女的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和雌激素水平,并探讨了TNF-α对破骨前体细胞RAW264.7中破骨细胞标志物核因子κB受体激活因子(nuclear factor kappa-B, RANK)、组织蛋白酶K (Cathepsin K, CTSK)和凝血酶受体激活肽(thrombin receptor activating peptide, TRAP)以及核因子-κB (NF-κB)亚基(p65)和NF-κB抑制蛋白(IκBα)的影响。研究结果表明,绝经后骨质疏松症患者的TNF-α水平显著升高,而雌二醇水平显著降低。核因子κB受体激活因子配体(receptor activator for NF-κBligand, RANKL)处理1周后,破骨前体细胞RAW264.7中破骨细胞标志物RANK、CTSK和TRAP的mRNA和蛋白高度表达。与RANKL对照组相比,TNF-α处理可上调RANK、CTSK和TRAP m RNA的表达。但是,仅TNF-α不能诱导培养的RAW264.7细胞分化为破骨细胞成。TNF-α以剂量依赖性方式诱导NF-κB亚基p65和IκBα磷酸化,而NF-κB抑制剂处理则有效降低了RANK和TRAP的表达。本研究结论表明,绝经后骨质疏松症中TNF-α通过激活NF-κB来促进RANKL诱导的破骨细胞形成。     

槲皮素调节AMPK/SIRT1/NF-κB通路对乙型肝炎大鼠肝组织损伤的影响

摘要 目的：探究槲皮素调节AMPK/SIRT1/NF-κB通路对乙型肝炎（HB）大鼠肝组织损伤的影响。方法：采用随机数字表法将65只Wistar大鼠分为Ctrl组、HB组、槲皮素低剂量组（槲皮素L组,50 mg/kg）、槲皮素高剂量组（槲皮素H组,200 mg/kg）及槲皮素H+AMPK抑制剂组（200 mg/kg槲皮素+10 mg/kg Compound C）,每组各13只,采用尾静脉注射携带1.3拷贝HBV基因组的重组8型腺相关病毒（rAAV8-1.3HBV）法建立HB大鼠模型（Ctrl组除外）;酶联免疫吸附实验（Elisa）检测血清中HB表面抗原（HBsAg）、HB e抗原（HBeAg）、肝功能指标[谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）]水平及肝组织中炎性因子[白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）]水平;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测血清中HBV-DNA水平;苏木素-伊红（HE）染色、曼森氏（Masson）染色观察肝组织病理改变;免疫印迹法（WB）检测肝组织中AMPK/SIRT1/NF-κB通路蛋白表达水平。结果：与Ctrl组比较,HB组血清中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA、ALT、AST、TBIL水平均升高（P<0.05）;肝组织可见肝静脉扩张、充血,肝细胞排列紊乱、水肿、坏死,同时发生明显纤维化;肝组织中AMPK磷酸化、SIRT1蛋白水平均降低,IL-1β、TNF-α水平及核NF-κB蛋白水平均升高;经槲皮素L、槲皮素H干预后上述情况均得到改善,且槲皮素H干预改善更明显（P<0.05）;而增加AMPK抑制剂干预后,槲皮素H干预的改善作用被削弱（P<0.05）。结论：槲皮素能够减轻HB大鼠肝组织损伤,保护其肝功能,其机制可能与调节AMPK/SIRT1/NF-κB通路有关。     

基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路探讨忍冬苷对脓毒症肝损伤大鼠的影响

摘要 目的：基于高迁移率族蛋白B1（HMGB1）/Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路探讨忍冬苷对脓毒症肝损伤大鼠的影响。方法：60只雄性SD大鼠随机分为模型组、对照组、阳性对照组（地塞米松10 mg/kg）、忍冬苷低剂量（7.5 mg/kg）、忍冬苷中剂量（15 mg/kg）、忍冬苷高剂量（30 mg/kg）组,每组10只。采用盲肠结扎穿刺法建立大鼠脓毒症模型。实验结束后麻醉大鼠取血制备血清,检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）含量;分离肝组织称重,计算肝脏指数,一部分用于HE染色观察肝组织病理变化,一部分用于制备组织匀浆检测组织中肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）活性及HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达。结果：与对照组比较,模型组大鼠血清中MDA、TNF-α、IL-6含量、肝脏指数以及肝组织中AST、ALT活性、HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达显著增加（P＜0.05）,SOD活性与IL-10含量显著下降（P＜0.05）;且肝组织出现明显病灶,肝细胞水肿变性,大量炎性细胞浸润。与模型组比较,阳性对照组与忍冬苷各剂量组大鼠血清中MDA、TNF-α、IL-6含量、肝脏指数以及肝组织中AST、ALT活性、HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达显著降低（P＜0.05）,SOD活性与IL-10含量显著升高（P＜0.05）;忍冬苷低、中剂量组仍可见病灶和水肿,但病变减轻;地塞米松组与忍冬苷高剂量组肝细胞结构趋于正常,未发现病灶。与阳性对照组比较,忍冬苷低、中剂量组大鼠血清中MDA、TNF-α、IL-6含量、肝脏指数以及肝组织中AST、ALT活性、HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达显著升高（P＜0.05）,SOD活性与IL-10含量显著降低（P＜0.05）;忍冬苷高剂量组上述指标无显著差异（P＞0.05）。结论：忍冬苷通过下调HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的表达,抑制氧化应激,减轻炎症反应,改善肝功能,发挥对脓毒症肝损伤的保护作用。     

不同时间窗高压氧治疗对急性脑梗死患者血清ZO-1、Caveolin-1和TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的：探讨不同时间窗高压氧治疗对急性脑梗死（ACI）患者血清紧密连接蛋白（ZO-1）、小窝蛋白-1(Caveolin-1)和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法：选择2020年4月～2023年4月期间在空军军医大学第一附属医院就诊的158例ACI患者作为研究对象,通过随机数字表法分为A组（接受常规治疗,于发病12 h～7 d内接受高压氧治疗）和B组（接受常规治疗,于发病12 h内行高压氧治疗）,各79例。对比两组各项量表评分、脑血流灌注、血清ZO-1、Caveolin-1水平和TLR4/NF-κB信号通路相关指标的变化情况。结果：治疗后,B组美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）低于A组,日常生活活动能力量表（ADL）评分高于A组（P<0.05）。治疗后,B组脑血管储备能力（CVR）、双侧脑动脉峰流速、双侧脑动脉峰平均流速高于A组（P<0.05）。治疗后,B组血清Caveolin-1低于A组,血清ZO-1高于A组（P<0.05）。治疗后,B组TLR4、NF-κB低于A组（P<0.05）。结论：于发病12 h内给予ACI...     

基于PI3K/AKT/NF-κB信号通路调控细胞凋亡探讨扶正解毒化瘀方抗人呼吸道合胞病毒的作用机制

观察扶正解毒化瘀方对人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)感染相关细胞凋亡的影响,探究其抗病毒作用机制。体外实验确定扶正解毒化瘀方对人喉癌上皮细胞(Hep-2)的细胞毒作用,选取最大无毒浓度(TC₀)进行干预实验;以HRSV A亚型感染Hep-2细胞,设细胞对照组、病毒对照组、利巴韦林药物对照组及扶正解毒化瘀方组,显微镜下观察细胞病变,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测炎性因子调节的正常T细胞表达和分泌(RANTES)水平,Western Blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/苏氨酸激酶(AKT)/核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关蛋白的mRNA相对水平。与细胞对照组相比,病毒对照组细胞病变明显,细胞上清RANTES水平升高,细胞PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白AKT、糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、NF-κBp65表达增加,凋亡相关蛋白Fas、Bax、TRAIL的mRNA水平升高,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。而...     

阿达木单抗治疗重度银屑病的临床疗效及对外周血Th1/Th2平衡和单核细胞p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

摘要 目的：观察阿达木单抗治疗重度银屑病的临床疗效及对外周血Th1/Th2平衡和单核细胞p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响。方法：选择解放军总医院第五医学中心2019年3月-2022年3月期间收治的118例重度银屑病患者,根据随机数字表法分为对照组（常规治疗,59例）和研究组（对照组的基础上结合阿达木单抗治疗,59例）。观察两组疗效、症状评分变化、外周血Th1/Th2平衡和单核细胞p38MAPK/NF-κB信号通路的变化,记录两组不良反应发生情况。结果：研究组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后的Th1、白细胞介素-2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）低于对照组,白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、Th2高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后的p38MAPK、NF-κB蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）。研究组治疗后的银屑病皮损面积及严重程度指数（PASI）评分低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间比较,差异不显著（P>0.05）。结论：阿达木单抗治疗重度银屑病的疗效较好,可能与调节外周血Th1/Th2平衡和单核细胞p38MAPK/NF-κB信号通路有关,且不增加不良反应发生率,具有较好的安全性。