ADAMTS-7,血管重塑中的新靶点(英文)

血管重塑是动脉粥样硬化和血管再狭窄发病中的一个重要的病理生理学过程。越来越多的证据表明,具有降解细胞外基质能力的酶在血管重塑中发挥着重要的作用。含I型血小板反应蛋白的解聚素和金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs,ADAMTS)家族是一类最近被克隆的金属蛋白酶家族,该家族成员同样具备降解细胞外基质的能力。ADAMTS家族由19个家族成员组成,参与了一系列的正常生理学功能,如发育、血管新生和凝血等。而ADAMTS家族成员的异常表达通常会引发各种疾病,如关节炎、肿瘤、凝血功能障碍性紫癜。本文从ADAMTS家族第七个成员——ADAMTS-7的结构、组织分布、调控、尤其是通过其底物软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)精细调控血管稳态几个方面综述了其在血管重塑中作用的最新研究进展。     

血管平滑肌细胞增殖调控机理的研究进展

高血压和动脉粥样硬化是以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖为主要病理特征的疾病,研究ＶＳＭＣ增殖调控机制对揭示这类疾病的发病机理具有重要意义。本文介绍ＶＳＭＣ表型转化的基因标志、组蛋白Ｈ_１激酶ｐ３４~（ｃｄｃ２）和生长因子对ＶＳＭＣ增殖的调节作用等方面的研究进展。     

Apelin-13促进血管平滑肌细胞增殖、迁移和血管新生内膜增生

研究apelin-13对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell, VSMC）增殖和迁移的影响及其作用机制.用免疫印迹分析检测apelin-13对VSMC增殖、迁移以及分化相关基因表达的影响,结果表明,apelin-13能以时间和浓度依赖的方式诱导VSMC增殖和迁移相关基因cyclin D1和MMP-2表达,促进细胞增殖和迁移;同时使VSMC分化标志基因SM22α和SM α-actin表达水平降低.而且,用鬼笔环肽对细胞骨架进行染色的结果显示,apelin-13可以促进VSMC从收缩表型向增殖表型转化.体内实验也表明,敲低apelin可抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成,提示apelin-13在体内具有促进血管新生内膜形成的作用.总之,本文结果表明,apelin 13通过调节VSMC增殖、迁移以及分化基因表达,进而促进其从分化型向增殖型转化,并向内膜下迁移和增殖.     

时钟基因Bmal1促进血管平滑肌细胞增殖

摘要 目的：观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响,进一步探讨生物节律对于血管发育的具体影响。方法：采用包装GV341-Bmal1载体的慢病毒转染的方法构建大鼠胸主动脉平滑肌细胞（A7R5）稳定转染Bmal1的细胞系,实时定量PCR和细胞爬片Bmal1的免疫荧光染色的方法判断所构建细胞系是否稳定过表达Bmal1,细胞爬片Ki67的免疫荧光染色的方法观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响。结果：实时定量PCR结果显示稳定转染Bmal1组细胞Bmal1的表达是对照组的11.2倍（P<0.01）;细胞爬片的免疫荧光染色结果显示稳定转染Bmal1组细胞BMAL1的表达明显升高（P<0.05）,且稳定转染Bmal1组Ki67阳性细胞比例明显升高（P<0.05）。结论：通过慢病毒转染的方法成功构建了血管平滑肌细胞稳定转染Bmal1的细胞系,细胞片Ki67的免疫荧光染色结果显示Bmal1的过表达促进了血管平滑肌细胞的增殖。     

510.6nm激光照射对兔血管平滑肌细胞增殖的影响

本文用５１０．６ｎｍ 波长激光以功率密度１、５、１０ ｍ Ｗ／ｃｍ ２ 和能量密度２、４、６Ｊ／ｃｍ ２ 照射体外培养的兔血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）,通过３Ｈ－ ＴｄＲ掺入率和细胞生长曲线测定细胞增殖率。结果显示,上述激光照射量均能抑制细胞增殖率,其中以１０ｍ Ｗ／ｃｍ ２ 组的作用最为显著     

过表达CREG抑制ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖

目的：探讨E1A 激活基因阻遏子（Cellular repressor of E1A-stimulated genes，CREG）在氧化型低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoprotein，ox-LDL）引起的人血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell，VSMC）增殖中的作用及可能机制。方法：用60 滋g/mL ox-LDL处理人胸主动脉VSMC，在不同时间点（0 h，12 h，24 h，48 h）计数细胞并绘制生长曲线；在48 h时间点进行BrdU 染色检测增殖细胞的比率；采用Western Blot 检测各时间点CREG 表达。通过向VSMC 中转染携带CREG基因的质粒载体，筛选 获得过表达CREG 的VSMC（VSMCCREG）。进一步用ox-LDL 处理VSMCCREG，采用前述方法绘制生长曲线、进行48 h时间点 BrdU染色并检测CREG 和磷酸化Erk1/2 的表达。结果：与未经处理的对照组VSMC 相比，ox-LDL处理的VMSC 细胞总数及 BrdU阳性细胞比率显著增加；并且，CREG 表达随处理时间延长逐渐降低。此外，与ox-LDL 处理的VSMC 组相比，ox-LDL 处理 的VSMCCREG 组细胞总数及BrdU 阳性细胞比率均显著下降；并且CREG 表达增加、磷酸化Erk1/2 水平下降。结论：过表达 CREG 可能通过降低Erk1/2 磷酸化抑制ox-LDL诱导的人VSMC 增殖。     

L-苯丙氨酸与血管平滑肌细胞增殖

本文用氚标胸腺嘧啶核苷掺入ＤＮＡ合成法测定自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）与正常对照鼠的培养主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖,观察Ｌ－苯丙氨酸对细胞增殖、细胞生长及原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的影响。结果显示：（１）Ｌ－苯丙氨酸剂量依赖性地抑制血清、碱性成纤维细胞生长因子及凝血酶诱导的ＤＮＡ合成;（２）Ｌ－苯丙氨酸剂量依赖性地抑制细胞对血清的增殖反应;（３）Ｌ－苯丙氨酸抑制血清诱导的ｃ－ｆｏｓ     

瘦素对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖和移行的影响

目的本实验旨在研究瘦素(Leptin)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和移行的影响。方法采用原代细胞培养方法建立VSMC细胞模型;以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、免疫细胞化学染色等方法观察瘦素对VSMC增殖的影响;采用细胞移行实验观察瘦素对VSMC移行的影响;采用MAPK的抑制剂SB203580观察瘦素对VSMC增殖的抑制作用以探讨MAPK在瘦素促VSMC增殖中的信号转导机理。结果瘦素能显著促进VSMC增殖和移行,而MAPK的抑制剂SB203580可显著抑制瘦素对VSMC的增殖效应。结论瘦素具有明显的促VSMC增殖和移行的作用,其作用机制与激活MAPK信号途径有关。     

KLF5与c-Jun相互作用促进Ang II诱导的血管平滑肌细胞增殖

KLF5（Krüppel-like factor 5）是KLF家族转录因子中的成员,参与多种与增 殖相关基因的转录调节.通过体外培养大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMC）,以Ang Ⅱ为增殖诱导因素,研究KLF5介导VSMC增殖的机制. 研究发现,Ang Ⅱ可剂量依赖性诱导VSMC增殖,并伴有KLF5和c-Jun蛋白表达水平的 升高.为了证实KLF5参与Ang Ⅱ诱导的细胞增殖过程,用siRNA敲低内源性KLF5的表达后,发现细胞增殖活力受到明显的抑制;交互免疫沉淀和GST pull down分析结果显示,KLF5与c-Jun在体内和体外存在物理学上的相互作用,并且Ang Ⅱ可诱导二者之间的相互缔合.这些结果表明,KLF5通过与c-Jun相互作用进而介导Ang Ⅱ诱导的VSMC 增殖.     

高压力对体外培养动脉中膜平滑肌细胞增殖及增殖相关蛋白和生长因子的影响

为了探讨力学因素在血管重建中的作用和机制,观察在单纯高压力条件下血管平滑肌细胞增殖及其相关蛋白和生长因子的变化。应用血管体外应力培养系统,在施加单纯压力的条件下培养猪颈总动脉。按压力大小,将培养的血管分为高压力(21．3kPa)组和正常压力(13．3kPa)组。两组血管均分别培养1、4和7d。免疫组织化学检测血管中膜平滑肌细胞的α-肌动蛋白,增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子A、转化生长因子13l及P53蛋白的变化。结果显示：在高压力的作用下,随着培养时间的延长,α-肌动蛋白呈减少的趋势;增殖细胞核抗原,转化生长因子131、P53持续增多;血小板源性生长因子A先增加而后有所减少。说明高压力可明显促进血管平滑肌细胞表型的转变,发生增殖现象。提示高压力可能通过调节血小板源性生长因子A、转化生长因子131及P53蛋白的表达来调控血管平滑肌细胞的增殖。     

一氧化氮在吲哚昔酚抑制血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的：观察吲哚昔酚（ldoxifene,ldo）对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响,并探讨平滑肌源性一氧化氮（NO）在其中的作用。方法：血管平滑肌细胞培养、NO释放的测定、细胞计数和MTT测定。结果：吲哚昔酚可剂量依赖性的促使血管平滑肌细胞NO的释放,10μmol／L吲哚昔酚明显抑制10％胎牛血清（FCS）和10^-7mol／L的ET-1诱导的细胞增殖,吲哚昔酚的抑制作用可被一氧化氮合酶抑制剂L-NAME（100μmol／L）和鸟苷酸环化酶（guanylate cyclase,GC）抑制剂美蓝（methylene blue,MB）（10μmol／L）明显减轻。结论：吲哚昔酚抑制血管平滑肌细胞增殖的作用与其NO释放密切相关,其中可能有NO-GC-cGMP通路的参与。     

动脉粥样硬化中平滑肌细胞增殖的调控

内膜平滑肌细胞局限性增生是动脉粥样硬化早期最主要的病变。增生的平滑肌细胞通过特异性低密度脂蛋白(LDL)受体和非特异性胞饮作用的途径大量地摄入LDL,合成并分泌各种结缔组织基质成分,最终形成动脉粥样硬化病灶。正常动脉壁的平滑肌为收缩型,此时细胞生长代谢活力较低,胞内粗面内质网、游离核糖体和线粒体成分较少,对外界各种有丝分裂原不能起有效反应。只有经过向合成型表     

缝隙连接在同型半胱氨酸介导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的:探讨缝隙连接(GJ)是否参与同型半胱氨酸(Hcy)介导的自发性高血压(SHR)大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及可能的分子机制。方法:原代培养SHR VSMCs,细胞分四组:①对照组,②Hcy组,③缝隙连接阻断剂(18α-GA)组和④Hcy+18α-GA组。MTT法及流式细胞仪检测细胞的增殖活性,免疫荧光技术观察细胞中Cx43、Cx40蛋白表达及定位,Western blot法检测细胞中Cx43、Cx40蛋白表达,染料示踪分子传递法(划痕标记染料传输法)检测细胞的缝隙连接功能。结果:①与对照组相比,Hcy组MTT法测得A值及细胞周期测得S值增高(P0.05),18α-GA组降低(P0.05);与Hcy组比,TGFβ-1+18α-GA组A值及S值均降低(P0.05)。②免疫荧光技术检测细胞中Cx43、Cx40蛋白表达呈阳性,两者共定位于胞浆。③与对照组相比,Hcy组Cx43、Cx40蛋白表达增强(P0.05),18α-GA组Cx43、Cx40表达均减弱(P0.05);与Hcy组比,Hcy+18α-GA组Cx43、Cx40表达均减弱(P0.05)。④与对照组相比,Hcy组缝隙连接功能明显增强(P0.05),18α-GA组缝隙连接功能明显减弱(P0.05),与Hcy组比,Hcy+18α-GA组缝隙连接功能显著降低(P0.05)。结论:Hcy通过上调SHR VSMCs Cx43和Cx40的蛋白表达,引起缝隙连接通讯功能的增强,促进了SHR VSMCs增殖。     

苯扎贝特对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨苯扎贝特对体外培养的牛血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖的影响,以及可能的信号转导通路.方法采用改良的贴块法培养小牛胸主动脉VSMC,α-actin单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定培养细胞.以MTT法反映VSMC增殖情况;用Westem Blot方法检测与细胞增殖有关的丝裂原激动蛋白激酶(MAPK)信号传导通路.结果苯扎贝特呈剂量依赖性抑制VSMC增殖,其抑制增殖的作用主要是通过MAPK传导途径.结论苯扎贝特通过抑制VSMC增殖可能参与延缓动脉粥样硬化及经皮冠状动脉腔内成行术(percutaneous transluminal coronaryangioplasty,PTCA)术后再狭窄的发生、发展.     

三种钠尿肽抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖效应的比较

本文比较了心房钠尿肽（ＡＮＰ）、Ｃ－型钠尿肽（ＣＮＰ）、血管钠肽（ＶＮＰ）抑制肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）增殖的效应。用蛋白激酶Ｃ激动剂佛波酯（ＰＭＡ）刺激体外培养大鼠ＰＡＳＭＣｓ的增殖,以总蛋白含量和ＭＴＴ比色ＯＤ值为指标,观察三种钠尿肽对ＰＭＡ刺激大鼠ＰＡＳＭＣｓ增殖的影响。结果表明,ＰＭＡ（１０＾－９－１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）显著升高（Ｐ＜０．０５）ＰＡＳＭＣｓ的总蛋白含量和ＭＴＴＯＤ值,     

血管平滑肌细胞在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化的发生发展是一个复杂的过程,涉及到多种细胞及细胞因子的相互作用.平滑肌细胞作为血管壁的重要成分,调节着血管的收缩舒张功能,同时也分泌多种细胞因子及细胞间质;它的生物学行为对动脉粥样硬化的发生、发展及最终的结局产生着重要的影响.本文就平滑肌细胞的生物学行为的变化及其在动脉粥样硬化的不同发展阶段的作用进行综述.     

成熟脂肪细胞和血管外周脂肪组织刺激血管平滑肌细胞增殖：老化和肥胖的作用

脂肪细胞和血管外周脂肪组织对血管功能有重要的调节作用。Barandier C等弯2005的Am J Physiol Hean Circ Physiol杂志上报道脂肪细胞和血管外周脂肪组织对人平滑肌细胞（smooth muscle cell,SMC）的增殖有刺激作用,而这种刺激作用是通过其分泌的蛋白生长因子实现的。     

新型大豆异黄酮磺酸酯抑制血管平滑肌细胞增殖活性研究

为了寻找对血管平滑肌细胞异常增殖有较强抑制作用的化合物,本文用MMT法考察新型大豆苷元磺酸酯体外抑制血管平滑肌细胞增殖活性.结果表明:该大豆苷元磺酸酯对血管平滑肌细胞增殖在10-7 mol/L时有抑制作用(P＜0.05),该浓度下的抑制率为56.06％,与先导化合物大豆苷元相比活性提高约1000倍.构效关系研究表明,大豆苷元经苯磺酸酯修饰,改变分子的空间结构、分子的可极化率从26.51增加到54.12,改变了药物的电荷分布,更有利于药物通过细胞膜到达靶标和与靶标更精确作用而导致药物药理作用大大增强.药理实验与构效关系研究初步表明,该大豆苷元磺酸酯有进一步研究价值.     

一氧化氮抑制内皮素促血管平滑肌细胞增殖作用的信号转导途径

培养的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）分别以内皮素（ＥＴ－１）、一氧化氮（ＮＯ）前体Ｌ－Ａｒｇ和ＮＯ供体ＳＩＮ－１刺激,或用ＥＴ－１＋Ｌ－Ａｒｇ、ＥＴ－１＋ＳＩＮ－１联合刺激,测ＶＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的改变,以研究ＮＯ抑制ＥＴ－１促ＶＳＭＣ增殖作用的信号转导途径。结果表明：（１）ＥＴ－１ １０＾－８ｍｏｌ／Ｌ单独刺激,＾３Ｈ－