低温胁迫对黑果枸杞愈伤组织的影响

本研究对黑果枸杞愈伤组织进行不同温度的低温胁迫处理,记录其生理生化指标变化,分析黑果枸杞在细胞和组织水平对逆境胁迫的调控能力。研究表明:4℃处理48 h时细胞膜透性达到最大43.6%;0℃处理24 h时细胞活性下降最多,达到74%;H_2O_2在4℃低温胁迫72 h时达到最高67.3μmol/g;花色素苷在4℃处理48 h时达到最高0.43μmol/g;总黄酮在4℃处理下72 h时降到最低0.18μmol/g,而在0℃处理下24 h时就降到最低0.17μmol/g;CAT活性和APX活性在4℃和0℃低温胁迫24 h时都比对照降低近4倍;之后各项指标均逐步恢复。MDA、SOD、POD在4℃和0℃低温胁迫下含量变化不显著(p0.05);各项指标综合考虑,黑果枸杞在细胞和组织水平也具备对低温的抗逆性。     

固定化假单胞菌CTP-01细胞分解对硫磷的研究

用明胶-戊二醛(GGA)和聚丙烯酰胺(PAA)包埋的固定化Pseudomonas sp.CTP-01细胞具有降解对硫磷的特性。GGA固定化细胞水解对硫磷的活力比PAA固定化细胞高5.8倍。当保存在4℃时GGA和PAA固定化细胞分别可以保持活力31.3和70%。GGA和PAA包埋的细胞最适反应温度分别为50℃到70℃和60℃到70℃,然而整细胞在温度超过65℃时活力很快下降。GGA和PAA两种固定化细胞最适pH为8.0,当pH低于7.0时活力开始下降,pH4吋则完全失活。     

丝状固氮蓝藻柱胞鱼腥藻原生质球的培养再生

丝状固氮蓝藻柱胞鱼腥藻 (Anabaena cylindrica)在含 0 .1mol/ L KCl的 Allen液体培养基中培养7～ 9d,90 %以上细胞转化为原生质球或半原生质球 ,对低渗敏感或抗低渗。此种材料经 0 .1%溶菌酶 ,在 2 8℃下处理 3～ 4h,细胞低渗破裂率约 10 0 % ,成为质量较高的原生质球。用 0 .15mol/ L Ca Cl2 液体无机盐培养基培养 ,原生质球再生和分裂。不同原生质球再生不同步 ,最快培养 3 d分裂。再生分裂的主要方式为均等分裂 ,但有不规则分裂和出芽方式 ,再生率在 2 5%以上。     

温度对卷蛾分索赤眼蜂种群参数的影响

通过组建卷蛾分索赤眼蜂 Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja在米蛾 Corcyra cephalonica(Stainton)卵上实验种群生命表的方法 ,考察了梯度恒温 17、2 0、2 3、2 6、2 9、32℃和 35℃对该蜂发育、存活和繁殖的影响。在试验温度范围内 ,卷蛾分索赤眼蜂的世代发育历期随着温度的升高而缩短 ,发育历期由 17℃时的 2 0 .77d降至 35℃时的 7.2 5 d。卷蛾分索赤眼蜂的临界发育温度为 11.92和 38.95℃ ,适宜的生长发育温区则介于 2 0～ 2 9℃之间 ,最适发育温度为 2 3.0 7℃。在适宜温度 (2 0～ 2 9℃ )范围内 ,卷蛾分索赤眼蜂的幼期存活率维持在 90 %以上 ,雌成蜂具有较长的寿命 ,7.6 7～ 10 .87d;内禀增长率 (rm)及净生殖力 (R0 ) ,分别介于 0 .2 395～ 0 .4 890和 4 2 .32～ 6 4 .2 3之间。极端温度对卷蛾分索赤眼蜂的生长发育和生殖均有明显的抑制作用 ,在 35℃时 ,其幼期存活率为 12 .98% ,雌成蜂寿命不足 1d,且不能进行正常的生殖活动。温度对卷蛾分索赤眼蜂的子代性比有着显著的影响 ,在 17～ 35℃范围 ,子代雌雄性比随着温度的升高而不断下降 ,17,2 0 ,2 3,2 6 ,2 9℃和 32℃时的子代雌雄性比分别为 6 .73,3.4 8,2 .88,2 .4 5 ,2 .4 1和 1.75 ,温度与子代性比的作用关系可用公式 s=exp(3.5 1- 0 .10     

不同冻存条件对甘蔗原生质体活力和再生能力的影响

为了获得活力高和再生能力强的甘蔗原生质体,该文对甘蔗原生质体的冻存液浓度、冻存温度和冻存部位进行了研究。结果表明:(1)不同的冻存液、不同的冻存温度和不同的取材部位原生质体冻存后复苏对甘蔗原生质体的活力影响有显著差异性,三个冻存液组合比较,在组合2(70%培养基+20%血清+10%DMSO),冻存30 d后复苏活力最强,高达72%;冻存90 d内复苏,-196℃液氮和-80℃冰箱冻存,甘蔗原生质体的活力差异不显著,活力均在75%以上,但90 d冻存后复苏,-196℃液氮冻存后复苏比-80℃冰箱冻存冻存后复苏原生质活力强;不同取材部位比较,幼叶冻存30 d后复苏所得原生质体活力较高(达79. 2%),茎尖冻存30 d后复苏所得原生质体活力仅为42.7%。(2)不同的冻存液和不同的冻存温度,细胞第一次启动分裂和形成细胞团的时间差异不显著,一般培养5～6 d,细胞壁基本形成完整,培养6 d后,细胞启动分裂,培养15 d后形成细胞团。不同的材料部位相比较,茎尖酶解所得原生质体再生能力最强,较幼叶酶解原生质体,形成细胞壁的时间早3 d,第一次分裂时间早2 d。     

适合大量培养的红球藻藻种的筛选

研究了 4个雨生红球藻 (Haematococcuspluvialis)品系在 10℃、15℃、2 0℃、2 5℃和 2 8℃时的生长速率 (μ)、生物量、虾青素含量和产量 ,从中选出适合于大量培养的品系H .pluvialis2 6和H .pluvialisWZ。 2个品系的虾青素含量和产量分别达到 2 .4 1%— 3.16 % ,4 6 5 1— 5 4 35mg/L和 2 4 0 %— 2 5 9% ,39 84— 4 0 15mg/L。 2个品系的温度适应具有互补性 :H .pluvalisWZ适应于较低温度 (10℃— 2 0℃ ) ,H .pluvialis2 6适应于较高温度 (2 0℃— 2 8℃ ) ,在低温季节使用H .pluvialisWZ ,在高温季节使用H .pluvialis 2 6进行生产 ,可以延长生产期 ,提高产量     

高温对大白菜小孢子培养的影响

应用 FDA和 DAPI荧光显微术观察了高温处理对大白菜 Brassica campestris spp.pekinensis L our. Olsson 小孢子培养的影响 .在 2 5℃恒温培养条件下 ,小孢子的成活率迅速下降 ,至第 7天基本无幸存小孢子 ;小孢子膨胀后呈椭圆形 ,核第一次分裂多为不对称型 ;小孢子丧失胚胎发生能力 .相反 ,在培养开始时 ,先用 33℃高温处理 2 4 h,然后转入 2 5℃培养 ,小孢子成活率虽在第 1天急剧下降 ,但随后仍保持一定水平 ;膨胀的小孢子多呈圆球形 ,小孢子核第一次分裂出现对称型 ,频率可达 4 0 %左右 ;小孢子可进行几种方式的细胞分裂 ,以类似于胚胎细胞的对称分裂方式为主 占总分裂数的 5 5 % ;小孢子经多次分裂可形成紧密的多细胞团 ,最终形成胚状体 .若以高温诱导的小孢子分裂频率为评价指标 ,小孢子接受高温处理的敏感期位于开始培养的 1 2 h内 ,但以胚胎发生频率为指标 ,敏感期位于开始培养的2 4 h内     

黑麦花粉母细胞的减数分裂--植物学彩色显微摄影系列之五

减数分裂是在植物个体生长过程中,体细胞进行有丝分裂增殖的基础上,当生殖器官出现的时候．在幼小花蕾中发生特殊的细胞分裂。由于这种细胞分裂是在性成熟时发生的,故又称成熟分裂。它包括两次连续的分裂,即减数第一次分裂(Ⅰ)和减数第二次分裂(Ⅱ),分裂的结果形成4个子细胞,每个子细胞的     

中华小长臂虾对温度的耐受性及温度对其呼吸代谢的影响

为了研究中华小长臂虾(Palaemonetes sinensis)对温度的耐受性及温度对其呼吸代谢的影响,利用逐渐升降温的方式获得了中华小长臂虾的温度耐受范围,在此基础上以静水密闭式方法研究了温度对中华小长臂虾耗氧率(OCR)、排氨率(AER)和窒息点(AP)的影响。结果表明:中华小长臂虾具有较强的温度耐受能力,耐受范围为0~37℃。低温组在5℃时活力开始减弱,下降到0℃时中华小长臂虾失去运动能力,0℃保持6 h后恢复室温则全部死亡;高温组在31℃时活力开始下降,34℃时出现异常反应,37℃开始死亡并在39℃全部死亡;温度对中华小长臂虾的OCR、AER和AP均具有极显著影响(P0.01);在温度为10~30℃范围内,随着温度的升高,中华小长臂虾的OCR和AER逐渐升高,回归分析表明,OCR与温度(T)的回归方程为OCR=-0.077+0.018T(R2=0.955);AER与T的回归方程为AER=-0.008+0.002T(R2=0.915)。AP则是随着温度的升高,出现了先升高后下降的变化趋势,在本实验的温度条件下,窒息点的范围为0.19~0.31 mg·L-1;中华小长臂虾氧氮比(O/N)在各个温度处理组的变化范围为7.61~13.24,说明中华小长臂虾在实验温度条件下主要以蛋白质为供能物质,脂肪供能所占的比率较小。     

温度胁迫对白桦悬浮细胞中三萜积累及防御酶活性的影响

以白桦悬浮培养细胞为试材,悬浮培养第7d进行高温(50℃热处理1h)和低温(4℃冷胁迫3h)胁迫处理,此后不同时间(0h～7d)收获白桦细胞,研究细胞干重、三萜积累及防御酶活性的变化。研究结果表明,高温和低温胁迫后均表现在24h～3d收获细胞显著促进了白桦总三萜的合成,且以高温处理效果最佳,48h收获细胞时分别比对照(25℃)和冷胁迫处理提高36.4%和12.87%;而在冷胁迫处理后4d～7d表现显著刺激了总三萜的合成,其中在第7d总三萜的含量比对照增加了22.1%,且两温度胁迫处理后15h～4d显著促进了齐墩果酸三萜的积累,24h收获时,热处理和冷胁迫均比对照提高38.1%和39.65%。两温度胁迫后不同程度促进了超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸裂解酶(PAL)、过氧化物酶(POD)活性提高及丙二醛的积累,但各酶活性出现高峰及变化规律存在差异,明确各酶相互协调、补充是保证细胞适应温度胁迫,减轻自由基伤害,并促进次生产物合成的原因。     

测定红豆杉悬浮细胞中多酚氧化酶活性的反应条件初探

多酚氧化酶 (ＰＰＯ)是导致红豆杉培养细胞褐变的主要因素 ,迄今这一问题尚未得到根本解决。本文初步探讨了不同ｐＨ值和温度 ,以及聚乙烯吡咯烷酮等 4种化合物对红豆杉悬浮培养细胞中ＰＰＯ活性的影响。红豆杉 (Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)细胞来自华中理工大学生物工程系。称取 1ｇ细胞加入ｐＨ 6 .8的0 .0 5ｍｏｌ·Ｌ-1磷酸缓冲液中 ,在 4℃下研磨后 ,于 2℃低温离心 (1 5 0 0 0×ｇ) 2 0ｍｉｎ ,取 0 .1ｍｌ上清液 (粗酶液 ) ,以 0 .0 2ｍｏｌ·Ｌ-1邻苯二酚为底物 ,测定多酚氧化酶活性。酶活性以每ｍｉｎ光密度变化 0 .0 0 1为 1个…     

温度对下丘脑神经元膜上延迟整流性K~ 通道活动密度的影响

目的 :探讨温度对下丘脑神经元延迟整流性K 单离子通道 (Ik)活动密度的影响。方法 :采用膜片钳细胞贴附式技术观察和记录 32℃、37℃和 39℃时下丘脑神经元Ik 的活动。结果 :温度升高 ,记录到封接膜片上Ik 活动的机率增大 ,由 32℃时的 34.6 %升至 39℃时的 5 1.0 % ,而且出现多通道活动 ;Ik 通道活动密度明显增高 (P <0 .0 5 ) ,32℃、37℃和 39℃时膜上的通道活动密度分别为 0 .71、1.2 2和 1.5 2channels/ μm2 。结论 :温度升高 ,下丘脑神经元上Ik 通道更多地处于活动状态 ,这可能有利于下丘脑神经元对体温活动的调节     

低温对橘小实蝇羽化的影响

【背景】橘小实蝇是重要的检疫性害虫,发生危害严重。有关低温对橘小实蝇成虫羽化的影响尚未见报道。【方法】通过设置不同温度(8、4、0和-4℃)及处理时间(12、18和24 h),研究了橘小实蝇羽化率和羽化时间的变化。【结果】随着温度的降低,橘小实蝇羽化率和羽化时间显著降低和延长。羽化率可从正常温度(28℃)下的100.0%降低至6.7%(0℃);羽化时间可从正常温度(28℃)下的9.0 d延长至12.5 d(0℃)。当温度为-4℃时,橘小实蝇不能正常羽化。【结论与意义】橘小实蝇的耐寒性较差。本研究可为该虫适生区划定提供理论依据。     

温度对不同年龄大鼠海马器官型脑片长期培养中细胞活性和tau蛋白表达的影响

探讨在海马器官型脑片的长期培养过程中,温度对不同年龄大鼠的海马脑片细胞活性和tau蛋白表达的影响,并以此为依据建立一种研究tau相关疾病的模型.选用出生后1周、2周、4周和8周的Wistar大鼠制备海马器官型脑片,培养温度分别为34℃和37℃,培养时间为21d,在培养过程中,检测培养基中的乳酸脱氢酶的含量以判断脑片的活性,采用免疫印迹技术检测细胞骨架蛋白tau的含量的变化.结果如下:(1)温度对海马脑片的细胞活性影响:34℃较37℃能在较长的时间内保持细胞活性,而在同一培养温度时,不同年龄鼠的脑片的细胞活性变化趋势一致;(2)温度对海马脑片的tau蛋白表达的影响:成年鼠(4周和8周)的海马脑片tau蛋白在34℃时能维持较长时间的稳定表达,而在37℃时tau的表达量随培养时间的延长而显著下降,且随鼠龄的增加,这种影响越明显.温度对1周和2周龄乳鼠的海马脑片tau蛋白的表达无影响.结论为:34℃培养条件下,4周和8周龄大鼠制备的海马器官型脑片能更长时间维持脑片的活性和tau蛋白的稳定表达,从而可望成为研究与tau蛋白相关疾病(如老年性痴呆)的理想模型.     

PKC对小鼠受精卵发育的调控作用

为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 -细胞期卵的发育     

6_m2细胞转化与肌醇磷脂代谢相关性研究

肌醇磷脂代谢与V-mos癌基因转化细胞的相关性,迄今为止未见报导。本文用6m2细胞(Moloney鼠类肉瘤病毒(含V-mos)温度敏感突变株(MoMuSVts110)转化的NRK细胞)为模型,探讨了肌醇磷脂代谢与细胞转化的相关性。在33℃ (转化型温度)时,细胞内PIP(磷脂酰肌醇-4-磷酸)含量明显高于39℃(正常型温度),显示出转化型6m2细胞中存在一个提高的PI激酶活性。同时可见DG(二酰甘油)和IP_3(肌醇三磷酸)含量和蛋白激酶C(PKC)活性均明显高于正常型细胞。当细胞由39℃转至33℃10min,PIP、DG、IP_3含量和PKC活性均明显增加,并伴随有PKC活性由胞质向质膜上的转移。实验结果表明肌醇磷脂代谢参与了6m2细胞转化过程。文中对其作用机理进行了讨论。     

通过加速贮存试验估算u-PA产品在不同温度时的贮存寿命

通过在 6 0℃、70℃、80℃的加速贮存试验 (MIS)观察了 u- PA冻干产品的热稳定性 ,并对其活性的热降解速度和不同温度时贮存寿命进行了估算。在 3 7℃ ,2 5℃ ,4℃ ,0℃贮存时 ,活性单位损失 5 0 %所需的时间为 1 73 d、2 .78a,70 .8a,1 1 8a:活性单位损失 1 0 %需的时间分别为 2 0 d、1 0 0 d、7.6 4 a、1 1 a。     

产朊假丝酵母细胞和细胞壁对铜离子吸附条件研究

观察温度和pH 值对产朊假丝酵母细胞与分离纯化的细胞壁对铜离子吸附的影响,探讨细胞壁在酵母吸附重金属离子过程中的作用pH 升高,细胞和细胞壁对铜离子的吸附能力都提高,吸附最适pH 为6-0 。温度升高可提高细胞和细胞壁的吸附能力,最适温度为50 ℃。细胞壁是铜离子吸附的主要部位,细胞壁嵌合蛋白(33 ×103蛋白) 起重要作用。     

温度对海带幼孢子体生长和光合作用的影响

根据欧盟项目的总体研究计划 ,在室内和围隔实验中研究了海带幼孢子体在不同温度条件下的生长情况和光合作用曲线 ,得出幼孢子体在 15°C下生长情况最好 ,而且其长度和重量的日增加量均和温度有线性相关关系。 Pm 值在 15℃时为 5 79mol O2 / (g DW· h) ,围隔实验中为 6 4 2 (mol O2 / (g DW· h)。由于围隔实验海区的光照强于室内 ,使得围隔中海带的光合作用曲线其光饱和点高于室内实验海带的光饱和点。海带光饱和参数 (Ik)与温度有线性相关关系 (R2 =0 .736 7,p<0 .0 5 )。5℃时 ,Ik 值平均为 96μE/ (m2 · s) ,10℃时为 71μE/ (m2 · s) ,15℃时为 31μE/ (m2 · s)。呼吸速率 R值在 5℃时最低 ,为 5 4μmol O2 / (g DW·h) ,10℃、15℃和围隔中均高于 5℃时的呼吸速率 ,并且在 10℃达到最高。本次实验研究得出的生长和光合作用参数将有助于合理确定桑沟湾中海带的养殖容量。     

不同理化因子对雪莲培养细胞中黄酮类形成的影响

研究了不同理化因子对水母雪莲(Saussurea medusa Maxim)愈伤组织生长及黄酮类化合物生物合成的影响。结果表明,有利于细胞生长及黄酮形成的合适温度为25℃。白光对愈伤组织生长无促进作用,但有利于黄酮的形成。培养基中添加1mg／L NAA和O．2mg／L的KT组合对细胞的生长较有促进作用。5％蔗糖和1％葡萄糖的组合有利于细胞的生长和黄酮的形成。用⁶⁰C0-γ射线辐照愈伤组织,在剂量为4000Gy的条件下,获得一个合成黄酮能力高于原愈伤组织70％的细胞系。用高效液相和紫外分光光度法,测定离体培养光照条件下干细胞总黄酮的含量为3．2％,是暗培养的4．4倍。培养温度25℃时干细胞黄酮的含量为2．02％,分别为20℃,35℃时的5倍和3．2倍。