免疫组织化学切片质量的探讨

在大中型医院,免疫组织化学检测在临床病理诊断中已成为重要的辅助手段,对疾病的确诊、治疗方案的确定及预后评估等非常重要。免疫组织化学切片质量的好坏直接影响结果的判断。虽然免疫组化方法简单,但影响因素较多,常导致结果不稳定。以往有许多献从组织的固定、抗原修复及显     

免疫组织化学标记新技术的临床病理应用

随着免疫组织化学在肿瘤病理诊断中的应用 ,肿瘤标记物不断推陈出新 ,不仅丰富了肿瘤标记物的内容 ,而且有力地推动了诊断免疫组织化学的深入发展 ;与此同时 ,免疫组织化学标记方法学也取得了可喜的成果 ,由于各种新方法的问世 ,不仅简化了操作步骤 ,缩短了标记时间 ,使工作效率得到显著提高 ,方法的敏感性特异性也得以明显增强 ;自动免疫组织化学染色机的应用 ,它集诸多优点为一体 ,标志着免疫组织化学标记技术已基本实现了规范化操作。现将结合我们体会作如下介绍 :一、微波在免疫组织化学中的应用微波以高频电磁波热效应和化学效果 ,加速…     

细胞块的制备方法

随着免疫组织化学技术的发展和针对各种特异性抗原抗体的出现，免疫组织化学方法为肿瘤的病理诊断提供了客观依据，大大提高了诊断的准确率，免疫组织化学用于细胞学诊断也日益受到人们的重视，它能为细胞学诊断和鉴别诊断提供一个新的手段，从而进一步提高细胞学诊断水平。但是用于细胞学染色的细胞涂片，常因收集的细胞太少而致癌细胞检查假阴性；有时由于细胞分布不均匀，有重迭而使免疫组织化学显色时，阳性物质在细胞内的定位不清楚，背景不清晰。为了克服这些缺点，我们把针吸物制成细胞块，这样就可以多次切片，弥补了常规细胞涂片制…     

腹水离心石蜡切片联合免疫组化检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌的诊断价值

目的:探讨腹水离心石蜡切片及免疫组织化学在卵巢癌诊断中的价值.方法:对30例腹水标本离心收集细胞沉渣,经自动脱水机脱水后石蜡包埋,切片进行免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67表达.结果:腹水离心石蜡切片细胞形态清晰,着色鲜艳,免疫组织化学阳性定位准确.结论:腹水离心石蜡切片联合免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌具有临床诊断价值.     

淋巴结组织切片HE染色的体会

目前,组织化学、免疫组织化学、电镜和ＰＣＲ等先进技术虽已用于淋巴系统疾病,尤其是淋巴系统肿瘤的诊断、鉴别诊断和研究,但是,石蜡切片ＨＥ染色仍然是临床病理诊断最常用的有效方法。由于淋巴组织结构复杂,组织处理不当时,常常难以获得理想的切片质量,给准确诊断带来许多困难,有时甚至造成误诊。影响淋巴结石蜡切片质量的因素较多,但我们认为关键应注意以下几个环节。１　淋巴结活检石蜡切片的应用淋巴结石蜡切片主要用于活检和穿刺组织的制片,为了获得准确的病理诊断、疗效判断和某些研究工作,需要高质量的ＨＥ染色切片。诊断…     

不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响

用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中Ｐ53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨Ｐ53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对Ｐ53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测Ｐ53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示Ｐ53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体Ｐ53 ＤＯ - 7和ＬＳＡＢ试剂盒为ＤＡＫ…     

去黑色素法在免疫组织化学中的应用

在有色素的黑色素瘤免疫组织化学鉴别诊断和研究中 ,常遇到的问题是经免疫组织化学 DAB显色后的切片 ,其棕黄色结果是抗原表达还是黑色素的沉集很难区别 ,有必要除去黑色素 ,否则将导致错误的结论。选择什么样的去黑色素方法 ,去色素后对免疫组织化学有无影响以及是否需要进行抗原修复等问题有待摸索 ,为此 ,我们特对 15例有色素和 13例无色素性黑色素瘤进行了实验比较 ,现报道如下 :材料和方法1　材料 :选取我科病理诊断为黑色素瘤的病例 2 8例 ,其中有色素的 15例 ,无色素的 13例 ,常规 10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋切片 ,切片厚 4um,共 …     

免疫组织化学技术制片的规范和质量控制

随着免疫组织化学技术的不断发展,该技术在组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应用越来越广泛.     

网状纤维染色与免疫组织化学方法在显示肿瘤细胞及间质成分中的应用

免疫组织化学技术在判断肿瘤细胞来源、分类及鉴别诊断中应用十分广泛。网状纤维作为细胞外间质成分,存在于人体各组织器官中,通过网状纤维染色观察网状纤维在肿瘤组织中的形态变化是肿瘤鉴别诊断中又一重要参与依据。应用免疫组织化学方法和网状纤维染色,对一些不同类...     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

EBER原位杂交结合CK免疫组织化学双染在诊断鼻咽癌中的应用价值

目的探讨全自动免疫组织化学仪行EB病毒早期RNA(Epstein-Barr virus early RNA,EBER)与细胞角蛋白(cytokeratin,CK)双染在鼻咽癌诊断中的应用价值。方法收集我院2018年1月至2019年12月鼻咽活检组织60例,根据诊断结果进行分组,A组为鼻咽非角化型未分化性癌30例,B组为上皮性病变30例。在VENTANA全自动免疫组织化学仪平台上分别对这两组病变进行CK免疫组织化学染色、EBER原位杂交、EBER原位杂交结合CK免疫组织化学(EBERCK)双染标记,其中双染再分为是否复染苏木素,比较染色情况。结果免疫组织化学CK单染A、B组均可见阳性细胞;原位杂交EBER单染A组鼻咽癌细胞阳性,B组表达呈阴性;EBER-CK双染A组鼻咽癌细胞呈双阳性,B组病变细胞呈CK阳性、EBER呈阴性,未见双阳性表达;EBER-CK双染复染苏木素后的表达与未复染苏木素的表达相同,但对比差,不易观察。结论全自动免疫组织化学仪行EBER-CK双染有助于鼻咽癌组织学诊断,不复染苏木素效果更佳,值得推广。     

热点名词释疑:组织化学和细胞死亡的几个概念

1．免疫组织化学和免疫细胞化学：这两个词均起源于美国人Coons等1941年创立的免疫荧光技术[1],是利用抗原抗体反应原理在组织和细胞原位检测特定抗原定位和分布的组织化学技术,结合图象分析也可对所检测的物质做半定量分析。经典意义上两者的区别在于,免疫组织化学是指在光镜水平的检测,而免疫细胞化学是指在电镜水平的检测也即免疫电镜技术。在一些欧美的杂志中,现在仍可见到这种区别性的用法。但目前许多人对两者已混用．在大部分场合已没有什么差别。免疫组织化学和免疫细胞化学技术已广泛应用于生物医学研究及临床诊断。2．原位…     

高效实用的组织芯片免疫组织化学对照体系的建立

目的开发一种高效实用的组织芯片对照体系应用于免疫组织化学质量控制。方法根据临床病理诊断的需求,以组织获取的难易程度、提高工作效率及实用性强为原则,运用组织芯片技术,设计多种对照组织芯片的微阵列,并用多种抗体测试验证。结果建立了5种组织芯片对照系统,可为约190种抗体的免疫组织化学染色提供相应的阳性和阴性组织对照片,其中1号芯片覆盖的抗体达80余种。结论科学合理设计和反复验证的组织芯片对照体系,组织耗费少、实用性强和效益高,可广泛推广应用于日常大规模的免疫组织化学质量控制工作中。     

23例皮脂腺癌的临床病理观察及文献复习

目的研究和分析皮脂腺癌的临床病理特征及诊断要点。方法搜集我院从2013年1月至2017年12月诊断的23例皮脂腺癌,研究其发病部位、年龄、性别等临床特征,运用组织学和免疫组织化学染色对其组织学形态、免疫组织化学表型特征进行分析,并进行随访和复习相关文献。结果 23例皮脂腺癌有17例(73.9%)发生于眼周,中位年龄66.5岁,男女患病比例约相等。23例皮脂腺癌镜下分化程度不一,但均可见巢状或条索状分布的典型病变区域,其内中央区皮脂腺样细胞外包绕基底样细胞,具有不同程度的异型性,免疫组织化学EMA、AR等可辅助诊断,但缺乏特异性指标。随访至今其中6例患者出现了局部复发或淋巴结转移。结论皮脂腺癌是一种少见的具有一定侵袭性的恶性肿瘤,早期诊断对降低复发率和转移率有一定帮助,需要病理医生深入了解其临床病理特征,避免漏诊和误诊。     

乳腺颗粒细胞瘤临床病理观察并文献复习

目的探讨乳腺颗粒细胞瘤(granular cell tumor of the breast,GCTB)的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断、治疗与预后。方法应用光学显微镜及免疫组织化学方法分析1例GCTB病例的临床病理特点及免疫表型,并复习相关文献。结果患者女性,31岁,无明显诱因出现左乳无痛性肿块10天。术中快速冰冻切片镜下见瘤细胞体积大,成巢状或条索状排列,其间有纤维脂肪组织分隔,似浸润性生长,与乳腺癌极为相似,但胞质内可见丰富的嗜酸性颗粒,罕见核分裂象和核异型性,快速冰冻切片诊断为左乳良性病变。冰冻后石蜡切片镜下见瘤细胞间边界不清,呈实性巢片状排列,瘤细胞呈圆形、椭圆形或多边形,胞核小,圆形或卵圆形,核仁明显,胞质粗颗粒状、嗜酸性,未见明显核分裂象及核异型性。免疫组织化学显示肿瘤细胞S-100阳性,CD68阳性,广谱细胞角蛋白(Pan Cytokeratin,PCK)阴性,Ki-67增殖指数约3%。结合组织学特征及免疫组织化学诊断为乳腺颗粒细胞瘤。结论乳腺颗粒细胞瘤是一种罕见的软组织肿瘤,虽然极少数具有恶性倾向,但是从临床特征、影像学检查上都极易误诊为乳腺癌,加大了诊断难度。依据临床病理组织学特点及免疫组织化学可准确诊断。     

免疫组织化学中的抗原修复技术

概述了免疫组织化学中固定对组织抗原性的影响,综述了抗原修复的方法及其原理。组织块的大小、固定液的种类、浓度及固定时间的长度都影响组织的抗原性。免疫组织化学实践中常用酶消化法、酸水解法、微波金属盐法、高压锅加热法等修复组织的抗原性。     

肺小细胞癌细胞异质性电镜和免疫组织化学观察

采用电镜及免疫组织化学方法对３２例肺小细胞癌细胞异质性及组织学起源等问题进行了研究。结果提示：肺小细胞癌主要由神经内分泌分化型细胞组成,其中间杂少数鳞状细胞分化型,腺分化型及未分化型细胞,显示多向性分化和细胞异质性。未分化型细胞可能是起源细胞。免疫组织化学染色表明嗜铬蛋白Ａ具有较强特异性,为首选免疫标记,与神经特异性烯醇化酶、角蛋白、癌胚抗原联合使用,可提高诊断的准确性     

免疫组织化学双标技术中应注意的几个问题

免疫组织化学技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法,它具有高度特异性和敏感性。因此：免疫组织化学技术作为一种研究手段在科研和教学工作中得到了较为广泛的应用,而随着各项研究工作的需要,免疫组织化学的双标技术也随之产生且应用越来越广泛。根据我们的实践,免疫组织化学双标技术中应注意的事项如下：（1）固定的时间不宜过长,以免抗原的过度丢失。     

微波Envision免疫组织化学标记的特异性和敏感性研究

本文应用新建立的快速微波－Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法免疫组织化学技术,分别对福尔马林固定和石蜡包埋切片的良恶性肿瘤进行免疫组织化学标记,观察该法的敏感性和特异性。所有２３种抗原均获得强阳性、低背景。整个程序在１８分钟内完成。结果表明：该法是一种特异性强、敏感性高、背景染色轻、快速和简便的新方法,可用于常规病理诊断。