通过组织培养筛选小麦抗赤霉病突变体的研究

选用中抗赤霉病的春小麦品种和品系的花药进行离体培养,以小麦赤霉病29号菌株产生的致病培养滤液为选择剂,结合物理诱变处理,进行抗病鉴定,用赤霉病菌分生孢子直接接种在愈伤组织和再生植株筛选抗病突变体。在83块愈伤中有53块抗病。在11株的再生植株中有9株均比未经培养滤液处理的对照提高了抗病性,从中选出4株抗病性接近或超过“苏麦3号”品种。     

用组织培养法筛选水稻抗白叶枯病突变体——Ⅰ.水稻愈伤组织抗白叶枯病病原菌的选择及其再生植株的抗病性鉴定

选用感病品种南粳34去壳籽粒的愈伤组织,按种白叶枯病病原菌菌株Ks 8-4,共同培养,以期筛选抗菌愈伤组织。在365块接菌愈伤组织中,有63块局部生长,从中得到抗菌新愈伤组织63块,并分化出再生植株。鉴定再生植株当代R_1 45株,有44株抗病,1株感病。部分株系得到了R_2、R_3代植株,多代鉴定表明,其抗病性是稳定的和可遗传的。     

利用辣椒疫霉培养滤液体外筛选胡椒抗瘟病无性系研究

在胡椒（Piper nigrum Linn．)茎尖丛生增殖技术的基础上,以印尼大叶种“Lampong Type”无菌实生苗作外植体源,利用辣椒疫霉(Phytophthora capsici)培养滤液对胡椒茎尖及其增殖形成的丛生芽进行体外选择。辣椒疫霉培养滤液的不同灭菌方法对辣椒疫霉培养滤液的毒性影响显著,过滤灭菌方式可以保持辣椒疫霉培养滤液的毒性,而高温高压灭菌方式则不能。随着辣椒疫霉培养滤液浓度的增加,茎尖和丛生芽的存活率和增殖率都在下降。在存活的茎尖或丛生芽培养中,一部分可正常增殖,其余的形成愈伤组织,或者保持生长停滞的休眠状态。在选择性培养基上继代培养2次后进行生根和移栽,利用离体叶片针刺接种法对温室条件下生长的移栽植株进行抗瘟病测定。以3次抗病检测均无明显症状的植株作为抗病株。随着辣椒疫霉培养滤液浓度的增加,得到的再生植株数量降低,但其中抗病株的比例提高。利用过滤灭菌方式加入选择性培养基的处理中,25％、50％和75％的辣椒疫霉培养滤液分别获得1株、4株和3株抗病株,分别占各处理再生植株总数的1．54％、20．00％和42．86％,共获得8株,占该组处理再生植株总数的8．70％。     

辣椒疫毒致病毒素

辣椒疫霉（PhytophthoracapsiciLeonian）在培养液中振荡培养时可分泌毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成水渍状褐腐斑,类似病原菌侵染后形成的症状。Plich’s和V8C培养液适于P.capsici的生长和产毒;生长适宜温度和pH范围分别为20～30℃与pH6～7,在25～30℃、pH5～8的条件下培养滤液毒性最强;培养15天产毒达到最高值。滤液先后经85％硫酸铰沉淀、DE52、CM32和SephadexG－75柱层析将毒素纯化。经鉴定该纯毒素为39．8kD酸性糖蛋白,并对80℃以上高温或蛋白酶敏感,而β-D-葡萄糖苷酶处理不影响其毒性,蛋白亚基为毒素的活性中心。毒素处理寄主叶片引致病理性坏死,这一作用与辣椒品种抗病性有关。     

离体筛选小麦抗赤霉病和根腐病突变体 I．小麦兼抗赤霉病和根腐病愈伤组织的筛选及其抗病性的鉴定

本文选用冬小麦和春小麦品种及其杂种后代的幼穗进行离体培养， 以赤霉病菌及根腐病菌的培养 滤液为选择剂，按不同的筛选方法筛选兼抗赤霉病和根腐病的突变体，用赤霉病菌和根腐病菌分生抱子 直接接种在经筛选的愈伤组织上，进行抗病性鉴定。试验结果表明：不同筛选方法对筛选兼坑赤霉病和 根腐病的愈伤组织的效果有明显差异，二步筛选法比混合筛选法效果好。供鉴定的120块愈伤组织中， 有村块愈伤组织具有兼抗赤霉病菌和根腐菌侵染的能力。     

辣椒疫霉致病毒素

辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)在培养液中振荡培养时可分泌毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成水渍状褐腐斑,类似病原菌侵染后形成的症状。Hich’s和V₈培养液适于P capsici的生长和产毒;生长适宜温度和pH范围分别为20～30℃与pH6～7,在25～30℃、pH5～8的条件下培养滤液毒性最强;培养15天产毒达到最高值。滤液先后经85％硫酸铵沉淀、DE52、CM32和SephadexG-75柱层析将毒索纯化。经鉴定该纯毒索为39．8kD酸性糖蛋白。并对80℃以上高温或蛋白酶敏感,而β-D-葡萄糖苷酶处理不影响其毒性,蛋白亚基为毒紊的活性中心。毒素处理寄主叶片引致病理性坏死,这一作用与辣椒品种抗病性有关。     

内生真菌感染对宿主羊草抗病性的影响

以感染内生真菌的天然禾草羊草为实验材料,通过体外纯培养条件下的内生真菌、感染内生真菌的离体叶片和在体叶片对3种病原菌的抑菌实验,以探讨内生真菌对宿主植物羊草在抗病性方面的贡献。结果表明:体外纯培养条件下,分离自羊草的内生真菌Epichlobromicola对新月弯孢(Curvularia lunata)、根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)和枝孢霉(Cladosporium sp.)这3种病原菌都具有抑制作用,抑菌率分别达56.22%,46.93%和45.15%,且内生真菌培养滤液可以有效抑制这3种病原菌的孢子萌发,平均萌发率分别为30.4%,15.7%和16.4%;宿主植物叶片在离体条件下,内生真菌感染可以有效降低羊草叶片受C.lunata和C.sp.侵染后的病斑数或病斑长度,但对B.sorokiniana不起作用,甚至提高了叶片的病斑数及病斑长度,而离体叶片提取液对不同病原菌均有不同程度的抑制作用;在体条件下,内生真菌均可以通过降低叶片病斑数来增强羊草植株对这3种病原菌的抗性。由此看来,内生真菌E.bromicola对宿主植物羊草在抗病原菌侵染方面有一定的增益作用。     

植物抗病的信号转导途径

植物在遭受不同病原菌入侵时会表现出不同的反应,若病原菌具有逃避寄主的识别并破坏寄主防御系统的能力则表现感病;若植物能及时识别病原菌并激活自身的防御体系,将表现出抗病性,而特异性的抗病性常常伴有过敏反应的产生。那么植物对病原菌的最初识别,识别后的信号转导以及抗病性过程究竟是怎样的呢？本文将对这一问题进行概述。     

辣椒炭疽病菌毒素

辣椒炭疽病菌(辣椒刺盘孢Colletotrichum capsici)在25—28℃的Czapek-Dox培养液中振荡培养时分泌出毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成坏死斑,类似于病原菌侵染形成的症状。辣椒叶煎汁培养液和Czapek-Dox培养液适于C.capsici的生长和产毒,生长适宜温度和范围分别为25℃和pH6—7,在25—28℃,pH6—7的条件下培养滤液毒性最强;光线和通气条件可促进C.capsici的生长和产毒;培养14天的培养滤液毒性最强。培养滤液经丙酮沉淀及离子交换树脂柱和Sephadex G-50柱层析将毒素纯化。实验结果表明该毒素为多聚糖类物质。生物检测结果表明:培养滤液和C.capsici毒素溶液能抑制辣椒、绿豆、豌豆、豇豆种子胚根生长;并能使辣椒幼苗发生萎蔫,这一作用与辣椒品种抗性有关。     

一株奇异变形杆菌对铜绿假单胞菌多细胞行为的抑制作用

目的：抗生素耐药性成为了全球性的健康问题。研究发现病原菌的多细胞行为在抗生素的耐药性中起着至关重要的作用（尤其是生物膜）,因而通过抑制多细胞行为而控制耐药性成为当务之急。本文以奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）为研究对象,考察它的发酵滤液对一种机会致病菌——铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）多细胞行为的作用,以期得到一株多细胞行为抑制菌：在不影响Paerugiliosa生长的前提下,抑制生物膜形成、EPS产生以及定向丛集运动,解除保护,减缓扩散,为降低Paemgi—nosa耐药性,增强抗生素作用效果提供可能。方法：采用结晶紫生物膜测定法、蒽酮一硫酸法、平板检测法,探究Pmirabilis发酵滤液对Paemginosa生物膜、胞外多聚物、定向丛集运动和生长的影响。结果：Pmirabilis发酵滤液能显著抑制Paeruginosa生物膜量,在体积百分比浓度为1％时,抑制率可达60．9％。该菌的发酵滤液还能阻碍Paeruginosa的定向丛集运动,减弱它的吸附和扩散运动;同时,也减少了Pacrugillosa胞外多聚物的产量,在滤液体积百分比浓度为1％时,抑制率达到45．9％。更重要的是,固体平板实验证明该发酵滤液对P．aemginosa的生长没有影响。结论：Pmirabilis在不影响病原菌生长的前提下,对病原菌的多细胞行为有一定的控制作用。其发酵滤液中存在着抑制微生物膜、定向丛集运动等的成分,在治疗细菌感染性疾病和降低抗生素耐药性方面有潜在应用价值。     

福建漳州水仙花的染色体数目及命名研究

福建漳州的水仙花分为单瓣水仙及重瓣水仙两类,李时珍早就指出它们乃一物二种^[1]。李懋学等(1980)观察了福建漳州、浙江舟山、江苏崇明岛等地的水仙花的染色体数目,均为2n=30,因此认为这三个地区的水仙花都是中国水仙Narcissus tazetta L.var.chinensis Roem.,并从染色体组型分析,阐明它们全是同源三倍体^[8]。我们分别观察了漳州的单瓣水仙及重瓣水仙染色体数目,与他们观察的结果有所不同。说明漳州水仙花的染色体数目及其分类问题,有进一步研究之必要。     

Dormancy in Laportea bulbils: experiments with buds cultured in vitro

Dormancy in bulbils of Laportea bulbifera was investigated usingbuds cultured in vitro. Buds excised from immature bulbils couldsprout in light, but scarcely in the dark. Regardless of lightconditions, buds isolated from mature bulbils failed to sproutwhile those from chilled mature bulbils could. GA and BA stimulatedthe sprouting of buds excised from dormant mature bulbils. Incontrast, ABA and morphactin inhibited the sprouting of budsexcised from nondormant chilled mature bulbils. These resultssuggest that, in dormant Laportea bulbils, the buds themselvesare in a dormant state which may be controlled by a balanceof activity between growth-inhibiting and -promoting substances. (Received October 29, 1976; )     

A method for large-scale multiplication of Curculigo orchioides through bulbil formation from leaf explant in shake flask culture

An efficient method has been developed for large-scale multiplication of Curculigo orchioides (Hypoxidaceae), an endangered medicinal plant, through direct bulbil formation from leaf explants in shake flask cultures. Leaf-segments (7 x 10 mm) were cultured in B5 liquid medium containing KNO3 (200 mgNL-1), (NH4)2SO4 (50 mgNL-1), benzyl adenosine (2.2 microM), adenine (0.11 mM), indole butyric acid (1.0 microM) and polyvinyl pyrrolidone (250 mgL-1). About 95% of explants produced maximum number of bulbils (546/flask at 6 weeks growth) in the medium. Shake flask cultures yielded 2737 bulbils/L medium whereas static cultures yielded 624 bulbils/L medium. Germination of bulbils was maximum (90.62%) on agar-gelled B5 medium containing benzyl adenosine (2.2 microM) and gibberellic acid (3.5 microM). Plantlets developed in vitro were successfully transferred to soil with a high rate of survivability (90%) and were comparable to natural population in growth and vigour.     

2-吗啉乙磺酸(MES)对拟南芥幼苗生长的影响

本实验研究0.05% MES对野生型拟南芥生长的影响。结果表明,含有MES的培养基pH变化较小,其培养10 d的拟南芥幼苗干重、鲜重、叶绿素含量和含水量均高于对照组,而叶片PAL和POD活性却低于对照组,说明MES通过影响培养基的pH变化促进拟南芥生长。     

黄独脱毒苗快繁及产业化技术探讨

以黄独脱毒苗为试材,采用植物组织培养方法研究不同因素对脱毒苗快繁技术的影响。结果表明,在黄独脱毒苗快繁中,白砂糖可替代蔗糖,果酱瓶可替代三角瓶,液体培养优于固体培养,但自来水不能代替蒸馏水。黄独脱毒苗在移栽的过程中,气孔关闭率在第5天时达到最高,以后气孔逐渐恢复关闭功能。脱毒苗与非脱毒苗的块茎在直径和鲜重上均有显著差异,表明黄独经脱毒后可提高产量。     

不同培养条件对光叶楮试管苗玻璃化的影响

以MS为基本培养基,研究生长调节剂、蔗糖、琼脂、光照强度和温度等因素对光叶楮试管苗玻璃化的影响。结果表明,最佳的生长调节剂配比是1.0 mg/L 6-BA、0.3 mg/L NAA,蔗糖浓度3.5%,琼脂浓度0.35%,光照强度2 000 lx,培养温度25℃。该优化培养条件能有效防止玻璃化苗的发生,获得较高的增殖系数和较健壮的苗木,且能降低生产成本。     

梅花鹿Fibulin 5 编码区cDNA的克隆及功能研究

为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析。同时利用RNA干扰技术（RNA interference, RNAi）下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区（Potentiated pedicle periosteum, PPP）细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响。结果显示：(1) 梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1347 bp,编码448个氨基酸;(2) 生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWA_Matrilin、cEGF和EGF_CA等重要的功能结构域;(3) 构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72%的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程。     

花榈木组培苗茎段低温胁迫培养及耐冷性诱导

以花榈木组培苗茎段为试材,在低温胁迫条件下进行耐冷性愈伤组织诱导培养。结果表明,5℃是花榈木茎段低温胁迫培养及耐冷性诱导的最适温度。经过5℃低温胁迫培养获得的耐冷性愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L上的分化率达70.0%,且再生植株的低温伤害率明显低于对照。     

速生固氮树木屑栽培香菇试验初报

利用银合欢、南洋楹和大叶相思三种速生固氨树的木屑袋栽香菇,结果表明,银合欢木屑能促进香菇菌丝生长,鲜菇产量比对照提高108.6 g/袋,生物效率提高31.0%;大叶相思木屑的鲜菇产量比对照提高51.6 g/袋,生物效率提高13.1%。对各配方的香菇不同时期的5'-磷二酯酶活性检测表明,子实体形成期酶活性比转色期弱,即其活力在于实体形成期受抑制,且受抑制程度与产量呈正相关。     

野葛高频植株再生体系相关因子的优化

对野葛高频植株再生体系相关因子进行优化,结果表明,野葛带芽茎段再生体系的最佳消毒方式为70%酒精处理30s后用0.1% HgCl₂处理15min;最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 5.0mg/L;最佳培养条件为:蔗糖浓度30g/L,pH 6.0,液体培养,培养温度25℃,光照培养。