COX-2和IL-1在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的探讨COX-2和IL-1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其在肿瘤的发生和发展中的作用。方法收集武汉大学人民医院和武汉大学中南医院病理科2000-2006年手术切除及活检的甲状腺乳头状癌标本共40例,另取癌周围组织5例作对照。采用免疫组织化学方法观察各组组织内COX-2和IL-1的表达。利用HPIAS-2000图像分析系统测定COX-2和IL-1在癌及癌旁组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果甲状腺乳头状癌组织中COX-2和IL-1呈高表达;癌旁组织中COX-2和IL-1呈低表达。图像分析结果显示两组间差异有显著性意义（P〈0.01）。结论IL-1可能通过诱导COX-2的表达,在促进肿瘤的发生和发展中起作用。     

Gankyrin在甲状腺乳头状癌的表达及临床意义

采用荧光定量PCR、Western blot及免疫组化方法对比研究gankyrin m RNA及蛋白在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)及正常甲状腺组织中的表达情况,分析gankyrin蛋白表达与PTC临床病理特征的关系,探讨gankyrin基因对PTC发生发展的影响。结果显示,PTC及HT样本中gankyrin m RNA及蛋白水平的表达量均高于正常对照组,有统计学显著意义(P0.01);PTC组及HT组间的表达无统计学差异(P0.05);临床特征分析表明,gankyrin蛋白表达在PTC中的表达与患者的性别、年龄、TNM分期等无关,而与是否合并HT有关。Gankyrin基因在PTC及HT中的高表达说明其在这两种关系密切的疾病中扮演着重要的角色,提示其与PTC的分子机制有关。     

SK4在甲状腺乳头状癌中的表达及其功能机制研究

采用Real-time PCR、Western blot及免疫组化检测中电导钙激活钾离子通道蛋白(intermediate-conductance calcium-activated potassium channel protein, SK4/Kca3.1/KCNN4)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)组织及细胞株中的表达情况,同时,对比研究SK4蛋白表达与PTC临床病理特征的关系。通过SK4特异性抑制剂(TRAM-34)下调SK4的表达后,采用CCK-8、平板克隆实验及Transwell实验分别检测SK4对PTC细胞株CGTHW-3增殖、集落形成及迁移能力的影响并分析其可能的分子机制。Real-time PCR、Western blot结果显示, SK4在PTC组织中的mRNA及蛋白表达量均明显高于癌旁组织(P0.01)。免疫组化结果显示, SK4的阳性率明显高于正常甲状腺组织(P0.01),而SK4蛋白表达阳性率与PTC患者性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移等临床病理特征之间并无显著统计学意义(P0.05)。TRAM-34可通过阻断SK4通道抑制CGTHW-3细胞的增殖、集落形成能力及迁移能力。以上结果提示, SK4通道在PTC组织及细胞中高表达,参与调控PTC细胞的增殖及迁移过程,可能与PTC发病的分子机制有关。SK4有可能成为PTC新的治疗靶点。     

IGFBP7在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的观察胰岛素样生长结合蛋白-7(IGFBP7)在甲状腺乳头状癌中的表达及意义。方法对87例甲状腺乳头癌(PTC)组织及癌旁组织(PeT)进行IGFBP7、Ki67、p53免疫组织化学分析,其中10例提取蛋白用半定量western blot方法进行IGFBP7表达水平分析。结果 (1)IGFBP7免疫组化显示,PTC癌组织IGFBP7阳性率达78.16%(68/87),明显高于癌旁组织的31.03%(27/87)(P0.05);(2)Western blot灰度值比较,癌组织IGFBP7表达水平显著高于癌旁组织(t=2.875,P0.05);(3)Ki67、p53与IGFBP7相关性分析显示,p53表达水平与IGFBP7表达水平呈显著正相关性(r=0.261,P0.05),而Ki67表达水平与IGFBP7表达水平无相关性(r=0.148,P=0.170);(4)高水平表达的IGFBP7与PTC淋巴结转移高度相关(r=0.238,P0.05)。结论 IGFBP7表达异常增高可能与甲状腺乳头状癌发生及发展有关,有望成为诊断PTC的一项新型的生物标记物。     

FOXQ1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

采用Real-time PCR、Western blot及免疫组化法检测甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织与正常甲状腺组织中叉头框Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)m RNA及蛋白质水平,对比分析其与PTC临床病理特征间的关系,探讨FOXQ1在PTC发生发展中的作用。研究结果显示,PTC中FOXQ1 mRNA及蛋白质水平均高于正常甲状腺组织,其水平差异具有统计学意义(P0.01);FOXQ1 mRNA及蛋白质水平与PTC患者淋巴结转移及TNM分期密切相关(P0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小及是否合并桥本氏甲状腺炎间差异无显著统计学意义(P0.05)。FOXQ1在PTC中高表达及其和淋巴结转移、TNM分期的正相关提示该蛋白在PTC中可能具有促癌作用。     

DcR3在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

应用RT-PCR、Westem blot、免疫组化分别检测甲状腺乳头状癌组织与癌旁正常甲状腺组织标本中DcR3mRNA及蛋白的表达情况,探讨DcR3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及,临床意义。RT-PCR检测显示,甲状腺乳头状癌中DcR3 mRNA的表达明显高于正常甲状腺组织（P〈0．05）：Western blot提示,DcR3蛋白在甲状腺乳头状癌中表达比正常甲状腺组织高（P〈0．05）;免疫组化显示,DcR3蛋白在甲状腺乳头状癌中高表达（P〈0．05）。DcR3mRNA及蛋白质在甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织间的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。DcR3基因及蛋白在甲状腺乳头状癌中高表达,提示DcR3可能促进了甲状腺乳头状癌的发生发展。     

CDK4和CDK6在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinases 4,CDK4)和细胞周期素依赖性蛋白激酶6(cyclin-dependent kinases 6,CDK6)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达及其临床意义。方法免疫组织化学检测73例PTC及其癌旁正常组织中CDK4和CDK6的表达,分析两者与PTC患者临床病理特征的关系。结果 CDK4和CDK6在PTC的阳性表达率分别为58.9%和52.1%,显著高于癌旁正常组织的6.8%和11.0%。CDK4和CDK6在Ⅲ+Ⅵ期PTC中的阳性表达率均显著高于Ⅰ+Ⅱ期,在有淋巴结转移的阳性表达率均显著高于无淋巴结转移,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、包膜侵犯无关。双变量相关性分析显示CDK4和CDK6具有密切正相关关系。结论 CDK4和CDK6在PTC中高表达,且与临床分期和淋巴结转移存在相关性,可能在肿瘤的恶性转化方面有重要作用。     

瘦素及其受体在宫颈癌中的表达和意义

目的探讨瘦素(leptin)及其受体(OB-R)在宫颈癌中的表达与临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学技术检测10例慢性宫颈炎、12例宫颈上皮内瘤样病变、50例宫颈癌中leptin和OB-R的表达,利用CD34标记宫颈癌血管内皮细胞并计算微血管密度(MVD)。结果leptin和OB-R仅在10例慢性宫颈炎、12例上皮内瘤样病变的鳞状上皮层中呈弱阳性表达;50例宫颈癌中Leptin染色( )39例,OB-R染色( )33例;宫颈癌中leptin表达、MVD与肿瘤分化程度、浸润深度和是否远处转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄和肿瘤组织学分型无关(P>0.05);OB-R表达与浸润深度和是否远处转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤分化程度和组织学分型无关(P>0.05);leptin或OB-R染色( )MVD明显高于染色(-)者。结论Leptin是宫颈癌重要的血管生长因子,瘦素及其受体和MVD与肿瘤的恶性程度密切相关。     

抑癌基因PTEN 在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义*

目的:通过免疫组织化学方法检测PTEN基因在正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织、甲状腺乳头状癌癌组织中的表达水平并进行比较,探讨其对甲状腺乳头状癌诊断和治疗的意义。方法:采用SP免疫组化方法,用已知阳性组织做阳性对照,以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗做阴性对照,分别作HE染色和免疫组织化学染色。结果:PTEN蛋白在三组组织中的表达差异具有显著性(P<0.001);正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织中的阳性率分别为100%和82.5%,均显著高于甲状腺癌组织中的45%(P<0.05),即PTEN在甲状腺癌中表达显著降低;PTEN在甲状腺乳头状癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性表达率分别为15%和60%,差异有显著性(x2=10.91,P=0.001);PTEN在甲状腺乳头状癌在包膜侵犯组和无侵犯组的阳性表达率分别为25.93%和60.61%,差异有显著性(x2=7.22,P=0.007);PTEN在甲状腺癌淋巴结转移组和包膜侵犯组的阳性表达强度显著低于无淋巴结转移和包膜侵犯组(P<0.01),有统计学意义。结论:PTEN基因表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起重要作用。     

Ezrin蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其与生存期关系的研究

目的探讨膜细胞骨架链接蛋白Ezrin在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与生存期关系的研究。方法收集武汉大学人民医院和武汉大学中南医院病理2000-2006年手术切除及活检的甲状腺乳头状癌标本40例和甲状腺腺瘤标本20例。采用免疫组织化学方法检测各组组织内Ezrin蛋白的表达。利用HPIAS-2000图像分析系统测定Ezrin蛋白在甲状腺乳头状癌及甲状腺腺瘤中表达的平均光密度和平均阳性面积率,并结合临床资料进行总生存期分析。结果 1.甲状腺乳头状癌组织中Ezrin蛋白呈高表达;甲状腺腺瘤中Ezrin蛋白呈低表达;图像分析结果显示两组间差异有显著性意义(P<0.05)。2.Ezrin蛋白表达强阳性组总生存期均短于表达弱阳性组(P<0.05),差异有统计学意义。结论 Ezrin蛋白与甲状腺乳头状癌的发生、发展及临床预后有密切关系。     

NF-κB在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

探讨NF-κB在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。采用RT-PCR、蛋白质印迹（Western blot）和免疫组织化学法检测140例甲状腺乳头状癌及其癌旁正常甲状腺组织中NF-κB表达水平,分析其表达水平变化与临床病理特征的关系。结果表明,78.6%（110/140）甲状腺乳头状癌组织NF-κB mRNA表达量明显高于癌旁正常甲状腺组织,80.7%（113/140）甲状腺乳头状癌组织NF-κB蛋白表达量明显高于癌旁正常甲状腺组织,差异具有统计学意义（P<0.01）。免疫组化显示NF-κB的阳性表达主要定位于胞浆,在甲状腺乳头状癌组织的阳性率为81.4%,显著高于癌旁正常甲状腺组织（P<0.01）,NF-κB 表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移及临床病理分期有关,但与性别、年龄无关。NF-κB在甲状腺乳头癌组织中高表达,且NF-κB的异常表达与甲状腺乳头状癌的发生、发展及转移密切相关。     

CBX7蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨CBX7蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。方法收集江夏区人民医院病理科2009-2013年手术切除及活检的甲状腺乳头状癌标本40例和癌旁组织标本20例。采用免疫组织化学方法检测各组组织中CBX7蛋白的表达。并对各组免疫组织化学反应的平均光密度和平均阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验,检验水准α为0.05。结果 CBX7蛋白在癌旁组织中呈高表达,甲状腺乳头状癌中呈低表达,统计分析显示,CBX7蛋白在癌旁组织中的表达显著高于甲状腺乳头状癌(P0.05)。结论 CBX7蛋白在甲状腺乳头状癌中呈低表达,可能与甲状腺乳头状癌的发生和发展密切相关。     

HINT2在甲状腺乳头状癌中的表达和功能研究

HINT2与多种肿瘤发生发展密切相关,在甲状腺癌中的功能还不清楚.该文使用组织芯片检测甲状腺乳头状癌组织中HINT2的表达,发现12例癌组织中HINT2蛋白表达水平显著高于正常组织(86％,P＜0.05).该文构建高表达和低表达HINT2的甲状腺乳头状癌细胞系K1稳定克隆后,使用CCK8和克隆形成实验检测HINT2对细...     

ABCG2蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的 探讨ABCG2蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集武汉大学人民医院2000-2006年手术切除及活检的甲状腺乳头状癌标本40例和甲状腺腺瘤标本20例.采用免疫组织化学方法检测甲状腺乳头状癌和甲状腺腺瘤组组织内ABCG2蛋白的表达.利用HPIAS-2000图像分析系统测定ABCG2蛋白在甲状腺乳头状癌及甲状腺腺瘤中表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果 甲状腺乳头状癌组织中ABCG2蛋白呈高表达;甲状腺腺瘤中ABCG2蛋白呈低表达;图像分析结果显示两组间差异有显著性意义(P＜0.05).结论 ABCG2在甲状腺乳头状癌组织中的高表达可能参与了甲状腺乳头状癌的发生、发展,而且其在癌组织中的高表达可能参与了甲状腺乳头状癌化疗过程中多药耐药形成.     

小鼠乳腺中瘦素及其受体的表达与作用

瘦素(Leptin)是影响乳腺发育和泌乳的自分泌和旁分泌因子. 为探讨瘦素在乳腺发育、泌乳和退化过程中的调控及作用机理, 本研究应用激光共聚焦显微技术对小鼠乳腺发育、泌乳以及退化过程中瘦素及其长型受体(OB-Rb)蛋白水平的表达定位进行检测, 并采用乳腺组织体外培养和Western blot方法研究了妊娠期、泌乳期和退化期瘦素对乳腺的作用以及乳腺发育各个时期瘦素的信号转导通路. 结果显示, 小鼠乳腺整个发育过程中瘦素和OB-Rb的表达呈显著正相关, 在青春期最高, 妊娠期下降, 泌乳期维持在低水平, 幼仔离乳后乳腺退化, 瘦素和OB-Rb的表达显著上调, 并在乳腺退化13天恢复到青春期水平; 瘦素及其受体的表达部位的变化显示瘦素专一性地诱导OB-Rb的表达, 表明瘦素通过与OB-Rb共同作用调控乳腺发育和泌乳的生理机能; 妊娠期, 瘦素与OB-Rb结合, 通过激活JAK-MAPK信号通路促进乳腺导管上皮细胞的增殖和分化; 泌乳期, 瘦素激活JAK-STAT5信号通路诱导乳腺中b-酪蛋白基因表达; 退化期, 瘦素激活JAK-STAT3信号通路启动乳腺细胞凋亡并参与乳腺组织重建过程.     

草鱼瘦素受体基因片段序列的克隆及其组织表达分析

根据斑马鱼、大西洋鲑和人等物种巴知的瘦素受体基因核苷酸保守区序列设计一对简并引物,通过RT-PCR法从草鱼肝胰脏中首次克隆获得草鱼瘦素受体基因的片段序列.该片段序列长713 bp,编码237个氨基酸,氨基酸序列分析表明草鱼瘦素受体基因片段氨基酸序列与其他物种的相似性在35％ -86％之间.通过邻接法(Neighbor Joining,NJ)构建系统进化树显示,鱼类的瘦素受体独立聚成一支,草鱼与金鱼、斑马鱼聚成一支,再与日本青鳉、黑点青鳉、红鳍东方鲀和大西洋鲑聚成一支.通过实时荧光定量PCR分析草鱼瘦素受体基因的组织差异表达,结果表明,草鱼瘦素受体基因在肝胰脏、肌肉、脑、心脏、脾和肠系膜脂肪组织中均有表达,其中在脾脏组织中表达量最多,显著高于其他组织(P＜0.05),其次是心脏、脑、肌肉和肠系膜脂肪组织,在肝胰脏组织中表达量最低,且显著低于其他组织(P＜0.05).     

Twist及Akt2在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨Twist、Akt2在甲状腺乳头状癌中的表达和相互关系。方法应用免疫组化方法,对60例甲状腺乳头状癌、10例结节性甲状腺肿进行Twist、Akt2表达的研究。结果甲状腺乳头状癌Twist及Akt2阳性表达率分别为81.67%(49/60)及60.00%(36/60),结节性甲状腺肿Twist及Akt2阳性表达率分别为0.00%(0/10)及10.00%(1/10),前者与后者相比差异有统计学意义(P<0.05);Twist及Akt2在甲状腺乳头状癌中的表达水平与病人的年龄及原发肿瘤分期无关,但与有无淋巴结转移相关(P<0.05),且Akt2的表达在T3,4期肿瘤及T1,2期肿瘤相比也具有显著性(P<0.05);Twist及Akt2的表达呈正相关(r=0.492,P=0.000)。结论在大多数甲状腺乳头状癌的上皮细胞中都存在Twist及Akt2的过表达,其淋巴结转移的发生与Twist及Akt2过表达或功能的不正常可能有密切的关系;Twist与Akt2的表达呈正相关。     

微小RNA-205 在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的:观察微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-205在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达并探讨其临床意义。方法:收集自2014年1月至2014年12月在我院甲状腺外科住院治疗的甲状腺乳头状癌患者的术后新鲜病理组织45例,其中男14例,女31例,年龄24-69岁,平均45.5岁。结节性甲状腺肿28例,癌旁正常甲状腺组织5例。提取各组织中的miRNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)方法检测miR-205的表达情况。结果:甲状腺乳头状癌miR-205的表达量较非肿瘤组织(结节性甲状腺肿、癌旁组织)明显下调[(1.06±1.76)vs(3.19±4.88),P=0.038]。伴淋巴结转移的PTC组织中miR-205表达量明显低于无淋巴结转移的PTC组织[(1.21±1.80)vs(9.59±1.60),P=0.003]。miR-205的相对表达与PTC患者性别、年龄及浸润与否均无显著相关性,而肿瘤直径呈显著相关性。结论:miR-205在PTC中的表达异常下调,可能与PTC的发生、侵袭和转移有关。     

黑龙江林蛙瘦素受体基因克隆及其在感染中的表达分析

黑龙江林蛙(Rana amurensis)在东北地区森林生态系统保护中发挥重要作用,同时又具有很高经济价值。瘦素受体(leptin receptor, LEPR)属于I类细胞因子受体超家族成员,是调节能量代谢、调控免疫应答的关键因子。为研究LEPR基因在嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)感染中的作用,利用RT-PCR方法克隆黑龙江林蛙LEPR完整编码区,并对序列进行生物信息学分析;构建Ah感染的黑龙江林蛙炎症模型,通过qRT-PCR、免疫组织化学染色和Western印迹等方法,对LEPR在生理状态下及感染状态下不同组织的表达进行动态检测。结果显示,LEPR基因读码框含3 408bp,共编码1 135个氨基酸,其在黑龙江林蛙多个组织中均有表达,心血管表达量最低。在Ah感染下心、肝、脾、肾、皮肤、肌肉和胃LEPR mRNA均在72 h达到表达量峰值(P<0.05),肺组织在8 h达到峰值(P<0.05)。免疫组织化学和Western印迹显示,肝、脾、皮肤和胃之间LEPR表达量差异不显著(P>0.05);脾和皮肤在不同感染时间表达量从高到低为：7...     

促红细胞生成素和受体在前列腺癌组织中共同过表达的研究

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)和受体(EPOR)在前列腺癌(PCa)组织中的表达,并进一步阐述EPO和EPOR在前列腺癌发生发展中所起的作用。方法:应用免疫组化SP法检测30例前列腺癌根治术组织标本中癌与增生(BPH)组织的EPO和EPOR表达及30例正常前列腺组织(NP)中的EPO和EPOR表达。前列腺癌分级采用Gleason评分。半定量EPO和EPOR评分分析免疫组化结果。同时根据细胞染色强度区分为过表达和正常表达。统计学分析采用配对样本比较Wilcoxon的秩和检验及线形回归分析。结果:大部分前列腺癌均可见EPO和EPOR同时过表达,但是前列腺增生组织只有EPO过表达;正常前列腺组织没有EPO和EPOR过表达。前列腺癌和良性前列腺增生的EPO免疫组化评分中位数为2.38和0.93(P<0.01);前列腺癌和良性前列腺增生的EPOR免疫组化评分中位数为2.50和0.68(P<0.01)。前列腺增生和前列腺癌的EPO和EPOR表达密切相关,但是前列腺癌的Gleason评分和EPO以及EPOR评分没有相关性(P值均>0.05)。结论:EPO和EPOR同时过表达促进前列腺癌发生发展,但是相对于EPO的过表达,EPOR过表达是前列腺癌发生更为重要的早期事件;前列腺癌组织中EPO和EPOR表达差异,提示除了缺氧外,可能还有其它机制参与EPOR的过表达。