马蛔虫卵染色制片复染法的一些改进

马蛔虫卵染色制片复染法的一些改进邓迎达,高榕（山东省济南生物工程研究院２５０００２）马蛔虫卵是观察动物细胞有丝分裂的最佳材料。一般方法只用铁明矾苏木精染色,但往往由于对比度不强和难以掌握染色深浅而不易获得理想效果。我室采用桔黄Ｇ－丁香油复染的方法,所...     

小鼠受精卵微注射Cdc25b mRNA可提高卵裂率并促进受精卵发育

为了观察Cdc25B蛋白及PKA/Cdc25B 信号途径在小鼠受精卵发育中的作用,将突变型和野生型Cdc25b转录成 mRNA,显微注射到小鼠受精卵中,放入含有或不含有dbcAMP的M16中,相差显微镜下观察受精卵卵裂情况;用蛋白激酶活性测定方法检测MPF的活性;利用Western 印迹检测Cdc2-Tyr15的磷酸化状态.结果显示,未加dbcAMP的Cdc25b- S321A mRNA注射组与Cdc25b-WT组相比,能够提前使受精卵发生G ₂/M期转变,导致卵裂,并明显提高卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,Cdc25b-S321A组先于Cdc25b-WT组提前激活MPF.此外, Cdc25b-S321A mRNA注射组可以有效恢复由PKA引起的受精卵G ₂期阻滞,显著增加卵裂率;MPF的活性测定和Cdc2-Tyr15磷酸化状态的检测结果也显示,在PKA持续激活的情况下,对比于Cdc25b-WT组,Cdc25b-S321A组提前激活MPF.因此,在小鼠受精卵发育过程中PKA主要通过磷酸化Cdc25B的321位丝氨酸,从而调控MPF的激活与失活来控制有丝分裂进程.     

论有丝分裂的动力学

对真核细胞有丝分裂的动力学提出一个新的模型,称为动粒马达-中央区马达模型.这个模型认为有丝分裂中动粒马达和中央区马达两类马达蛋白分子对染色体运动起重要作用.用这个模型对有丝分裂中染色体前中期会聚、中期振荡和子染色体后期分离等运动过程进行统一的描述.     

AURKB与MAPK参与调控小鼠受精卵早期发育

Aurora 激酶是肿瘤研究领域的热点, 近年来有研究表明该激酶家族在卵母细胞减数分裂中也起着重要的调节作用, 但对于其在哺乳动物早期胚胎发育中的研究鲜有报道. 本研究通过实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫荧光检测了Aurora 激酶 B(Aurora kinase B, AURKB)在小鼠受精卵中的表达和定位, 运用RNA 干扰技术观察了AURKB 功能缺失后对小鼠受精卵发育早期的影响, 并检测丝裂原激活蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinase, MAPK)通路抑制后小鼠受精卵卵裂及AURKB 表达、 活性变化. 结果表明, 在小鼠受精卵第一次卵裂进程中, G2/M 期为AURKB 的稳定表达时相, 其蛋白在G1/S 期少量分布于细胞浆, G2 期聚集于染色质周围, 进入有丝分裂后分布于全细胞. AURKB 的功能缺失可导致受精卵发生异常分裂. MAPK 通路的抑制亦可破坏受精卵的正常卵裂, 并下调AURKB的蛋白表达及活性. 结果提示, Aurora 激酶B 是小鼠受精卵早期发育所必需的, 并与MAPK 通路的激活相关.     

甜瓜有丝分裂染色体制片技术及核型分析

以萌发种子根为材料,研究预处理取样时间和预处理药剂对甜瓜染色体制片的影响.结果表明,上午8:00左右为最佳预处理取样时间,可以观察到近14%的中期分裂相;在4种药剂预处理活体根尖中,以添加对二氯苯(饱和)的放线菌酮(40 m g.L-1)水溶液的效果最佳.用此方法对厚皮和薄皮两种类型甜瓜进行核型分析,结果发现:两类甜瓜核型相似,都具有一对随体,核型均为2A型,核型公式均为2n=2x=24=14m+10st(2SAT).但两类甜瓜的染色体总长、平均长度以及随体在染色体上的分布都不相同.     

道产子马的冷冻受精卵移植成功

5月12日和21日,位于北海道日高的北海道大学的实验农场里,借英国纯种马系的杂种马之腹连生了2头道产子(北海道产的马),道产子的冷冻受精卵移植初次取得成功。看来冷冻受精卵有可能保存道产子的基因资源。在北海道,目前虽然约有1000头的道产子,但在产业上并无价值,可以预料头数将逐渐减少。     

有丝分裂过程中染色体的交换

在有丝分裂过程中,染色体进行有规律的运动,最终产生两个与亲代细胞遗传组成一致的子细胞。过去一直认为只有在减数分裂过程中才有遗传物质的交换及重新组合,而在有丝分裂中没有这种现象的发生。随着科学技术的发展,现在的研究结果表明：在有丝分裂过程中也存在着遗传...     

细胞有丝分裂教学难点的突破

在细胞有丝分裂的教学中 ,笔者常发现学生对染色体、姐妹染色单体 (以下简称单体 )、DNA在有丝分裂各时期的数量关系及变化情况难以掌握。在教学中我采取分析知识 ,寻找内在联系 ;利用图表 ,归纳总结规律 ;巧设问题 ,及时应用训练的办法来突破难点 ,收到较好的效果。1　分析染色体、单体、DNA的关系染色体的行为变化 ,与单体、DNA的关系是十分密切的。因此 ,必须把三者的关系从数量方面弄清楚 ,才能有助于理解染色体的行为变化。但若仅从教材有关课文中简单说明三者的关系 ,学生是难理解和接受的。因此 ,教师必须深入剖析三者的关系。在…     

泥鳅受精卵的电脉冲基因转移

鱼类具有怀卵量大、受精卵易得,容易进行体外操作、人工孵化及培育等优点,使得它成为转基因动物研究的极好材料。1985年朱作言等首次发表了转基因鱼研究的初步结果,随后又建立了较为完整的转基因鱼模型,并获得了可遗传的转基因鱼及其子一代。这一研究现已扩展到了十多个国家和地区的几十个实验室。已有的研究成果表明,鱼类基因转移与传统育种技术相结合,将有可能带来育种史上的革命,并建立定向、快速的鱼类育种新技术。已发表的转基因鱼研究,都是采用显微注射的方法直接将外源基因导入鱼类受精卵     

白头翁的核型分析和有丝分裂的细胞学观察

对白头翁进行了核型分析发现,按Levan等(1964) 标准,核型公式为2n=16=10m+2sm+4st,为2A 核型按照(Stebbin)方法分为。白头翁染色体数目、核型和有丝分裂各时期的特征均为首次报道。     

CDC25B蛋白亚细胞定位调控小鼠1-细胞期受精卵发育

为探讨小鼠细胞分裂周期25B（CDC25B）蛋白149位丝氨酸磷酸化状态对小鼠1 细胞期受精卵中CDC25B的亚细胞定位和发育的影响,应用定制的CDC25B-pS149位的 磷酸化和非磷酸化抗体检测小鼠1-细胞期受精卵各细胞时期的磷酸化和非磷酸化状 态;应用免疫荧光观察各期受精卵中CDC25B蛋白的定位情况;将质粒pEGFP-CDC25B -WT、pEGFP-CDC25B-S149A和pEGFP-CDC25B-S149D融合质粒及空载体质粒显微注射入 G1期受精卵中,观察不同显微注射组小鼠1-细胞期受精卵中外源性CDC25B蛋白亚细 胞定位．结果显示,CDC25B-S149位丝氨酸在G1和S期被磷酸化,在G2和M期去磷酸化 ．1-细胞期受精卵从G2向M期的转换过程中,发生了CDC25B向细胞核区的移位,到2- 细胞初期,部分CDC25B蛋白又从细胞核回到细胞浆．实验结果提示,小鼠1-细胞期受精卵G2/M期转换过程中,CDC25B 的S149位点磷酸化修饰可能是对CDC25B细胞内定 位及其活性的精确调节方式．     

有丝分裂是怎样发现的

目前大家公认有丝分裂是德国生物学家弗莱明(W．Flemming)发现的。在观察了蝾螈细胞分裂现象的基础上,弗莱明于1882年提出了“有丝分裂”(mitosis)这一术语。但从更详细的资料来看,有丝分裂的发现不是一蹴而就的,人类对有丝分裂的认识是一系列科学发现的综合结果。有丝分裂的发现建立在显微镜发明的基础上,在20世纪以前,人们用只能够放大到几百倍的光学显微镜,发现有丝分裂是很困难的。人们是在不断的对比和想象中来认识有丝分裂过程的。     

林蛙受精卵的表面收缩波和卵裂起动收缩

林蛙受精卵表面的大豆凝集素结合位点没有侧向运动,联在结合位点上的标记物在卵表面位置的改变应该可以反映卵表面运动。本文利用近景摄影测量术和侧向摄影法观测卵表面标记点位置的变化,得到下面的结果：１．卵裂前３０－４０ｍｉｎ,整个卵表面都向预定分裂沟中心移动,表示卵表面在收缩。卵裂前１５ｍｉｎ左右,沟中心附近的卵表面开始松弛,随之是离沟较远处的卵表面松弛,显示卵表面有一个从预定分裂沟中心向四周传播的收缩波     

沙打旺有丝分裂染色体形态变化的观察

沙打旺根尖分生组织细胞有丝分裂晚前期至中期染色体的形态变化的观察尚未见报道。作者在观察沙打旺有丝分裂过程中,晚前期看到14+4的染色体图像,即14条长的染色体和4个长度相近的短“染色体”,而且从晚前期至中期的过渡中,4条短“染色体”有两两彼此不断靠近,最后显现为二条完整染色体的变化过程。     

显示细胞有丝分裂的一种理想方法

本文介绍一种显示植物细胞有丝分裂各个时期的方法,该方法效果明显,易于掌握,是一种较理想的实验教学方法。     

植物细胞有丝分裂实验的几点改进

“细胞有丝分裂”是生物学实验课必修内容之一 ,通过实验可使学生对有丝分裂的过程和染色体的概念有一个感性认识。但从以往的实验情况看 ,该实验成功率较低 ( 5 0 %— 6 0 % ) ,其失败原因 ,除学生操作不准确外 ,主要是因为 :①选材不当 ;②各期分裂细胞稀少 ;③胞质、胞核、染色体之间的颜色不分明 ;④细胞分散差。针对上述存在的问题 ,借鉴资料 ,经大量的实验探索 ,对该实验做了几点改进 ,收到明显效果 ,现介绍如下 :1　选大蒜做实验材料因大蒜体积小 ,蒜瓣多 ,且一瓣蒜的生根量相当于一个葱头的生根量 ,既节约了经费 ,又减轻了工作量 ,…     

怎样获得有丝分裂相最多的洋葱根尖

怎样获得有丝分裂相最多的洋葱根尖田汝岭,赵云云（首都师范大学生物系）洋葱根尖是观察植物有丝分裂的传统材料。有丝分裂指数的高低,直接影响着观察效果。不同生长长度的根是否有不同的有丝分裂指数,至今我们还没有看到专门的研究报告。同一长度的根,在一天中,其有...     

有丝分裂方向的影响因素

有丝分裂方向不仅关系到细胞增殖过程中子细胞的排列方式,而且对细胞分化、组织器官形态结构具有决定性作用。从细胞内环境和所处的微环境2个方面,讨论有丝分裂方向的影响因素。