海洋真菌多不饱和脂肪酸的快速检测*

从海水中分离了一种产 EPA和 DHA的真菌 ,并建立了微生物油脂的快速提取、甲酯化及其多不饱和脂肪酸的含量的气相色谱测定方法。结果表明 :采用 CHCl₃ - KOH- CH₃ OH一步提取甲酯化适合于产多不饱和脂肪酸菌株的快速检测。对其油脂的提取 ,采用湿菌丝魏氏盐酸水解法较为合适 ;并用 KOH-CH₃ OH法对所得油脂进行了甲酯化。最后 ,运用毛细管气相色谱采用外标法测定了甲酯化样品中多不饱和脂肪酸的含量 ,其油脂中 EPA和 DH     

产二十二碳六烯酸等多不饱和脂肪酸真菌的筛选

从土壤中筛选出一株产二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）的丝状真菌,菌丝含油２１．２３％,ＤＨＡ占总脂肪酸２．５１％;同时含二十碳五烯酸（ＥＰＡ０,占总脂肪酸的０．４１％;不饱和脂肪占总脂肪酸的８０％。经鉴定为头孢霉属（Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｐ．）真菌。同时发现两株菌含ＥＰＡ,经鉴定为小克银汉霉（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｌｌａ ｓｐ．）和毛霉（Ｍｕｃｏｒ ｓｐ．）。在这几个属中发现ＤＨＡ和ＥＰＡ尚属首     

几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究*

从301株几丁质降解菌包括细菌、放线菌和真菌中,筛选出一株产几丁质酶活力较高的链霉菌A048(Streptomycessp．A048)。其产酶的适宜条件是,培养温度30℃,培养基pH7．0～7．5,碳源几丁质,氮源NH4NO3,体积溶氧系数kd值为1．56×10-6mol／(mL·min·atm),振荡培养120h,产酶可达15．1U／mL。     

产木聚糖酶厌氧真菌菌株筛选及产酶培养条件研究*

从12株分离自反刍动物瘤胃及粪样的厌氧真菌中筛选到一株木聚糖酶高产菌,编号为A4,初步鉴定为Neocallimastix属菌。以稻草秸、玉米秸、花生秸、滤纸片段为发酵底物,经39℃厌氧培养,A4菌产生的木聚糖酶活分别为14.31U/mL、11.39U/mL、6.99U/mL和13.38U/mL。对A4菌产生木聚糖酶的条件进行优化,结果发现,培养基中无细胞瘤胃液浓度对A4菌产生的木聚糖酶活无显著影响;但酵母膏浓度从1.0g/L降至0.5g/L后,A4菌产生的木聚糖酶活显著下降(P<0.05)。     

二十碳五烯酸等多不饱和脂肪酸高产菌的筛选

自从Dyerbers在1978年指出二十碳五烯酸（EPA）有益于人类健康以来,人们已发现二十碳五烯酸等N－3多不饱和脂肪酸具有预防和治疗动脉粥样硬化、血栓的形成和高血压,防癌抗癌,促进大脑发育,预防老年痴呆,保护视力等功能。目前其唯一商业来源为深海鱼油,但由于鱼油资源有限,且其中的N－3PU－FA由于被氢化和掺入人造黄油或起酥油而破坏,远远不能满足市场的需要（徐天宇,1995）。人们一直在探索EPA等多不饱和脂肪酸的新来源。研究表明,能产生有意义EPA的微生物主要有真菌和藻类（戴传超等,1995）。藻类的培养由于受外界的影响…     

产胞外黑色素菌株的筛选*

对不同来源获得的47株菌株在酪素培养基上生长、产色素情况进行了对比研究。从中选取了T4和Neurospora crassa AS3．1602,比较了二利用5种不同培养基产黑色素的能力。对T4菌株产生的黑色素做了初步研究,并初步鉴定T4菌株为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis）。     

一株产木聚糖酶链霉菌的鉴定及发酵产酶*

以木聚糖为唯一碳源,筛选出一株高产木聚糖酶生产菌株。该菌株经形态特征、 培养特征、生理生化和细胞壁组分分析等实验,鉴定为卷须链霉菌（Streptomyces cirratus).摇瓶发酵产酶实验表明：培养基最佳初始pH值为6．0;玉米芯水不溶木聚糖和蛋白胨分别是最佳的碳源和氮源;添加0．5％吐温80使得木聚糖酶活力提高到原来的2．5倍,发酵液最高酶活达到623u／mL。     

具胶原蛋白酶活性铜绿假单胞菌的筛选*

从成都皮革厂等堆积废弃毛皮、皮革的场所采集土样,通过以明胶为主要基质培养基进行富集和初筛,获得95株有明胶酶活性菌株。挑选其中28株明胶酶活性较高的菌株进行牛皮消化试验,有12株菌能在48h内完全消化小牛皮。以Ⅲ型酸溶性胶原为底物,测定了12株菌发酵培养液中胶原蛋白酶活性,确认这12株菌都具有胶原蛋白酶活性,酶活力基本相同,约10-16U／mL。经形态观察、生理生化特征分析及BIOLOG微生物鉴定仪鉴定,这12株菌分为两类,分别是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeraginosa)和火神发光杆菌(Photobacterium logei)(结果另发表)。对铜绿假单胞菌产生胶原蛋白酶粗酶性质进行了研究,其酶活最适温度为32℃,最适pH为7．5,可以被金属蛋白酶抑制剂EDTA和EGTA部分抑制,不能被PMSF抑制。对铜绿假单胞菌产胶原蛋白酶发酵条件的研究表明,不仅培养基中氮源、碳源和金属离子影响产酶量,而且发酵工艺对胶原蛋白酶的产生也有较大影响。     

淀粉基高吸水树脂降解菌的筛选及初步鉴定*

以淀粉接枝丙烯酸高吸水树脂为唯一碳源,从土壤中筛选出4个菌株,纯化后进行菌种鉴定。经过表面观察和理化实验,初步鉴定出它们分别为两类放线菌(放线菌科,Actinomycetaceaes和固氮菌科,Azotobacteraceae)、酵母菌(隐球酵母科,红酵母属,Rhodotonda)和霉菌(毛霉科,根霉属,Rhizopus sp．),为深入研究高吸水树脂的降解性能提供参考。     

生物脱硫的研究新进展*

化石燃料的脱硫形势日益严峻。生物技术为脱有机硫提供了一条经济有效的可行之路。阐述了近几年生物脱硫在许多方面的重大进展 ,主要包括 :新菌种的分离 ,生物脱硫机制的研究 ,应用直接进化技术提高酶的催化效率 ,新型反应器的设计及有价值的化学副产品的生产等。     

海洋真菌多不饱和脂肪酸的快速检测

从海水中分离了一种产EPA和DHA的真菌,并建立了微生物油脂的快速提取、甲酯化及其多不饱和脂肪酸的含量的气相色谱测定方法。结果表明：采用CHCl3-KOH-CH3OH一步提取甲酯化适合于产多不饱和脂肪酸菌株的快速检测。对其油脂的提取,采用湿菌丝魏氏盐酸水解法较为合适;并用KOH－CH3OH法对所得油脂进行了甲酯化。最后,运用毛细管气相色谱采用外标法测定了甲酯化样品中多不饱和脂肪酸的含量,其油脂中EPA和DHA的含量分别为7.32％和7.58％。     

二十碳五烯酸的菌种选育及发酵条件

利用含亚麻子油的斜面培养基连续传代和逐渐降低培养温度,诱导筛选的方法,从大量丝状真菌中选育到一株产二十碳五烯酸（all－cis－5、8、11、14、17－eicosopnthenoicacid）较高的被孢霉菌（Motierellasp．）SM481。研究得到最适培养基及最适培养条件。在最适培养及产二十碳五烯酸条件下,细胞干重和二十碳五烯酸产量分别为28．8g／L和0.127g／L。     

真菌发酵生产鱼油特征脂肪酸

DHA和EPA是鱼油的特征脂肪酸,具有调整血脂、改善大脑功能和维持正常视力等重要作用.一直以来,其来源主要是海产鱼油.近年研究发现许多微生物的脂质中也含有DHA和EPA,特别是一些低等真菌含量甚为丰富,利用其发酵生产DHA和EPA替代鱼油资源具有广阔的前景.阐述了能产生EPA,DHA的真菌及其合成途径和发酵影响因素.     

Docosapentaenoic acid (22:5n-3): A review of its biological effects

This article summarizes the current knowledge available on metabolism and the biological effects of n-3 docosapentaenoic acid (DPA). n-3 DPA has not been extensively studied because of the limited availability of the pure compound. n-3 DPA is an elongated metabolite of EPA and is an intermediary product between EPA and DHA. The literature on n-3 DPA is limited, however the available data suggests it has beneficial health effects. In vitro n-3 DPA is retro-converted back to EPA, however it does not appear to be readily metabolised to DHA. In vivo studies have shown limited conversion of n-3 DPA to DHA, mainly in liver, but in addition retro-conversion to EPA is evident in a number of tissues. n-3 DPA can be metabolised by lipoxygenase, in platelets, to form ll-hydroxy-7,9,13,16,19- and 14-hydroxy-7,10,12,16,19-DPA. It has also been reported that n-3 DPA is effective (more so than EPA and DHA) in inhibition of aggregation in platelets obtained from rabbit blood. In addition, there is evidence that n-3 DPA possesses 10-fold greater endothelial cell migration ability than EPA, which is important in wound-healing processes. An in vivo study has reported that n-3 DPA reduces the fatty acid synthase and malic enzyme activity levels in n-3 DPA-supplemented mice and these effects were stronger than the EPA-supplemented mice. Another recent in vivo study has reported that n-3 DPA may have a role in attenuating age-related decrease in spatial learning and long-term potentiation. However, more research remains to be done to further investigate the biological effects of this n-3 VLCPUFA.     

L-苹果酸产生菌筛选及高产突变株诱变选育

通过广泛收集和分离,获得根霉属(Rhizopus)、曲霉属(Aspergillus)及裂褶菌属(Schizophyllum)等属菌株897株。产酸指示平板上的变色圈测定结果表明,它们中间628株为产酸菌。通过纸层析对产酸菌发酵液酸谱的分析,获得129株L-苹果酸产生菌,经进一步测定发酵液中L-苹果酸的含量,筛选出以葡萄糖为原料,摇瓶发酵140小时,L-苹果酸产率48．37g／L,对糖转化率48．37×10^-2 的菌株LMO2。经初步鉴定,这一菌株为曲霉(Asper-gillus sp.)以LM02作为出发株,采用亚硝基胍、自然污染细菌、甲基磺酸乙酯及紫外线进行诱变处理,选育出葡萄糖为原料,L-苹果酸产率较高的突变抹N1-14、N1-14、NE1412、NU1416及NU1419。其中N1-14 的L-苹果酸产量最高,比出发株提高46．2×10^-2。N1-14 的菌丝生长速度快,产孢能力强,摇瓶发酵葡萄糖140小时,平均L-苹果酸产率为72．53g／L,对糖转化率53．74×10^-2。全发酵液经薄层层析测定,不含黄曲霉毒素。发酵产物分离提纯后,得到白色粉末状结晶,经纸层析、质谱及红外光谱测定,证明为L-苹果酸。     

八种因素对头孢霉菌丝脂肪酸不饱和指数的影响

为了探讨环境胁迫和真菌脂肪酸不饱和度的关系 ,用合成培养基探讨 8种单一因子对头孢霉(Cephalosporiumsp .)菌丝体脂肪酸不饱和指数的影响。结果表明 ,低起始 pH值 (4 .0～ 5 .0 ) ,低培养温度 (10～ 15℃ ) ,有利于获得高不饱和指数 ;随着三角瓶装液量的增加 ,脂肪酸不饱和指数逐步降低 ;接种量对脂肪酸不饱和指数影响不大 ;葡萄糖或蔗糖作为碳源 ,NH4 Cl或 (NH4 ) 2 SO4 作为氮源 ,低碳源浓度 (10～ 2 0g/L)有利于获得高不饱和指数 ;随着培养时间增加 ,脂肪酸不饱和指数逐步增加 ,至 10d时脂肪酸不饱和指数可达最高 ,为 170 .38     

Concentration of docosahexaenoic and eicosapentaenoic acids by enzymatic alcoholysis with different acyl-acceptors

The aim of this work was to produce docosahexaenoic (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA) enriched acylglycerols by alcoholysis of tuna and sardine oils, respectively, using isobutanol and 1-butanol as acyl-acceptors. The alcoholysis reactions were catalyzed by lipases Lipozyme® TL IM from Thermomyces lanuginosus and lipase QLG® from Alcaligenes sp., because these lipases have shown selectivity towards DHA and EPA, respectively. Studies were made to determine the influence of reaction time, alcohol/oil molar ratio, lipase amount and temperature. In the optimized conditions for the alcoholysis of tuna and sardine oils catalyzed by Lipozyme TL IM and lipase QLG, respectively, the DHA and EPA contents were trebled (from 22 to 69% for DHA, and from 19 to 61% for EPA). The stability of both lipases was also determined. Although Lipozyme TL IM is much more stable in isobutanol than in ethanol, with the former the conversion attained after four reaction cycles was about 40% of the initial conversion. In similar conditions, the conversion obtained with lipase QLG was about 88% of the initial conversion. In addition, the separation of DHA enriched acylglycerols and isobutyl esters from an alcoholysis reaction was studied by liquid–liquid fractionation using the ethanol–water–hexane biphasic system. The DHA enriched acylglycerols obtained were 97.6% pure (64.4% DHA).     

转化石胆酸为熊去氧胆酸的菌种筛选和产物鉴定

筛选到一株泡木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)90-9菌株,它能转化石胆酸(Lithocholic acid)为熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid).该菌转化0.1%(W/V)石胆酸96h,熊去氧胆酸重量收率为38.1%.经各项理化性质,包括熔点、比旋值、红外光谱、核磁共振谱、质谱和元素分析等项鉴定,证明产物为熊去氧胆酸.     

培养条件对头孢霉菌丝体脂肪酸组分的影响

研究了头孢霉(Cephalosporium sp.)菌丝体最大生产力和多不饱和脂肪酸形成积累的条件。菌丝体最适培养条件为：麦芽糖60g/L\,KNO33g/L、起始pH为60、500mL三角瓶装100mL培养基、接种25%、25℃培养10d则菌丝体达到最大干重。多不饱和脂肪酸形成积累的最适条件为：葡萄糖10～20g/L、(NH4)2SO4或NH4Cl 3g/L、培养基起始pH为40、500mL三角瓶装100mL培养基、接种10%～20%、10℃下照光培养。〖JP2〗因此,在整个生产流程中可采用不同条件分段掌握的技术原则。同时提出在多不饱和脂肪酸的形成和积累途径中油酸(18∶1)向亚油酸(18∶2)的转化是关键,为进一步探索最适培养条件和关键酶的调节提供依据。