枣叶片离体培养再生植株

PlantletRegenerationfromLeavesCulturesofZizyphusiuiubaCHENZong－Li,YANZhi－Lian,QILong（Denyt17mllofmp,You’onl／nll＊,ndy,Yan’as716000）1植物名称枣（凯W…。Wwi）。2材料类别俗名“狗头枣”的无菌试管苗的叶片。3培养条件（l）叶片愈伤组织诱导及继代培养基：MS＋6－BA0．3mg／L（单位下同）＋2,4D20;（2）芽分化培养基：MS＋6－BAI．0＋IBA0．2＋D一泛酸钙1．0十活性发0．5％;（3）芽生长培养基：1／2MS＋6－BA0．2＋IAA0．04＋D一泛酸钙1．0;（4）芽增殖培养基：1／2MS＋6－BA0．4＋IAA0．0…     

草木樨状黄芪高频离体再生体系的建立

以草木樨状黄芪无菌苗茎切段为材料,在含１－２mg/L2,4-D和０－０．５mg/L６ＢＡ的MS培养基上培养获得大量愈伤组织,愈伤组织诱导率在９５％以上,愈伤组织在附加０．２mg/LＫＴ,１mg/L６ＢＡ,０或０．５mg/LＮＡＡ,５００mg/LＣＨ 和２００mg/L ＹＥ的ＭＳ培养基上诱导丛生芽,并进而发育成苗。苗的分化频率为１００％。分化苗或其茎的切段在不国源植物激素的１／２ＭＳ培养基上可出现根的分化,分化频率达９０％以上,再生植株经炼苗后移栽成活率达８０％以上。     

丽格海棠叶片离体培养与工厂化育苗体系的建立

利用丽格海棠叶片进行离体培养,建立工厂化育苗体系,B₅培养基适合于叶片诱导分化丛芽。丛芽在B₅+BA 0.5mg/L+IBA 0.05mg/L培养基中,增殖系数达6.06;B₅+IBA 0.5mg/L中,生根率达100%,平均根数4.5条。生根前无生长调节剂壮苗是获得健壮植株的有效方法。培养基中附加低浓度蔗糖对维持植株正常形态起关键作用。     

枣树离体叶片不定芽再生体系建立的研究

建立了木枣无菌试管苗快繁体系,以无菌苗叶片为外植体,对影响离体叶片不定芽直接再生的因素进行了研究.试验结果表明,TDZ比BA能更有效地诱导叶片不定芽的再生;褐化是抑制不定芽再生频率提高的关键因子,培养基中添加PVP、V c及改变生长素的种类和浓度均不能促进不定芽再生;添加A gNO3能够减轻褐化并可以大幅度提高再生频率,同时培养初期经过3周避光培养更有利于提高再生效率.因此,以附加2.0 m g/L TDZ和0.2 m g/L IBA的M S培养基,并添加5.0 m g/L A gNO3,可以高效诱导木枣离体叶片不定芽再生,再生频率最高达98.3%.不定芽在附加0.2 m g/L IBA和0.5 m g/L GA3的M S培养基上进行继代伸长培养,当不定芽长至3 cm时,转接至附加0.4 m g/L IBA的1/2 M S培养基上可以良好地诱导生根.     

黑莓品种‘Arapaho’离体叶片不定芽诱导影响因素分析及再生体系建立

以黑莓(Rubus spp.)品种‘Arapaho’无菌苗叶片为外植体,通过正交和单因素实验分别研究了基本培养基类型、6-BA和1BA质量浓度以及暗培养时间、外植体的叶位和接种方式对不定芽诱导的影响,并研究了IBA质量浓度对不定芽生根的影响;在此基础上,初步建立了黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系.正交实验结果表明:基本培养基类型对叶片不定芽诱导率及平均不定芽数的影响最大,而IBA质量浓度对叶片不定芽诱导率及6-BA质量浓度对平均不定芽数的影响较小;适宜‘Arapaho’叶片不定芽诱导的最佳培养基为含有2.0mg·L-16-BA和1.0 mg·L-1IBA的MS培养基.单因素实验结果表明:暗培养时间、外植体的叶位及接种方式对不定芽诱导率有显著影响;最适宜的暗培养时间为21 d;植株中、上部叶片的再生能力较强,其中第3和第4位叶的不定芽诱导效果最佳;叶面朝上接种更有利于不定芽的诱导.在含0.2 mg·L-1 IBA的MS培养基中,不定芽生根率达100.0％,且根数多、长势良好.黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系为:以无菌苗的第3和第4位叶为外植体,经过适当修剪后叶面朝上接种于含有2.0 mg·L-16-BA和1.0 mg·L-1IBA的MS培养基上,暗培养21 d后置于光照条件下培养30 d;将不定芽转接到含有0.5 mg·L-16-BA和0.3mg·L-1 NAA的MS培养基上进行继代培养;当不定芽高约2 cm时转接到含有0.2 mg·L-1IBA的MS培养基上进行生根培养,最终获得完整植株.     

不同培养条件对南烛离体叶片不定芽再生的影响

以南烛( Vaccinium bracteatum Thunb.)组培苗离体叶片为实验材料,研究了不同培养条件对其不定芽再生状况的影响并筛选出最适培养条件。结果表明：基本培养基类型、生长调节剂种类及质量浓度、琼脂和蔗糖质量浓度、外植体类型、外植体接种方式和暗培养时间均对南烛离体叶片不定芽的出芽时间和再生率、外植体干枯率以及不定芽的生长状况有明显影响。南烛离体叶片不定芽再生的最佳培养条件为：以中脉横切2次的叶片为外植体,以近轴面面向培养基的方式接种;以1/2MS-1/2WPM为基本培养基,添加7.5 g·L-1琼脂、25.0 g·L-1蔗糖、0.5 mg·L-1 TDZ、5.0 mg·L-12ip或4.0 mg·L-1 ZT,暗培养21 d后转至光照度2000 lx、光照时间16 h·d-1的条件下培养。     

马铃薯叶片高效再生体系的建立

以4个马铃薯栽培品种为试材,进行了叶片离体再生研究,结果表明:东农303、鄂1号叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA2.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1;费乌瑞它为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1;夏波帝为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,愈伤组织的诱导率均可达100%.诱导不定芽分化的最佳培养基分别是:费乌瑞它、鄂1号为MS+6-BA2.5mg·L-1+GA35.0mg·L-1;东农303为MS+6-BA1.0mg·L-1+IAA0.1mg·L-1+GA32.5mg·L-1;夏波帝为MS+6-BA2.5mg·L-1+IAA0.5mg·L-1+GA32.5mg·L-1,其不定芽分化率分别达94.3%、100%、100%和90%.     

TDZ高效诱导蝴蝶兰叶片不定芽及植株再生

以蝴蝶兰（Phalaenopsis）无菌幼苗叶片为材料,研究添加TDZ（噻重氮苯基脲）条件下不同基因型、激素组合、叶片大小、暗培养时间对不定芽发生和再生植株的影响。结果表明：在相同培养条件下,不同基因型外植体芽诱导率差异显著,‘红天使’最高,达81.5%,‘汕农姑娘’等2个品种为0,‘满天红’等4个品种为9.2%～34.9%;添加TDZ芽诱导率显著高于6-BA;单独添加TDZ或6-BA芽诱导率显著高于NAA与TDZ或6-BA的组合。叶片越小不定芽诱导率越高;短时间暗处理有利于不定芽的发生。以1～2 cm长叶片为材料、15 d暗处理、在1/2 MS添加3 mg/L TDZ培养基中,‘红天使’的叶片外植体芽诱导率和平均不定芽数分别可达100.0%和18.2个。研究发现,在继代培养中TDZ对芽的伸长有抑制作用。     

生姜离体叶片愈伤组织悬浮细胞系建立与植株再生

以‘莱芜大姜’为试材,研究了生姜离体叶片愈伤组织的诱导以及细胞悬浮系建立与植株再生。结果表明,以生姜试管苗叶片为外植体,接种到MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的培养基上,可有效诱导出生长迅速、质地疏松的愈伤组织。将获得的愈伤组织接种到MS+0.15 mg/L 2,4-D+6.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖的液体培养基上,25℃黑暗条件下震荡培养25-30 d,可建立分散性好、生长迅速的悬浮细胞系,细胞悬浮系培养的适宜参数为:初始接种量为1.0-1.5 g,继代培养的适宜间隔期为15 d,继代培养液体培养基更新比例为3/4。将悬浮细胞接种到固体培养基MS+0.2 mg/L NAA+10.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖上可获得再生植株。     

TDZ对苹果叶片离体再生不定芽的效应

以苹果叶片再生不定芽效率为评价指标,ＴＤＺ的细胞分裂素活性比ＢＡ高一个数量级。在０．４－６．０ｍｇ．Ｌ＾－１范围内ＴＤＺ浓度对新乔纳金苹果叶片再生芽效率没有显著影响。ＴＤＺ和ＢＡ交替使用可提高苹果吉片再生不定芽效率。     

影响油菜子叶外植体不定芽高频率再生的因素

采用７个甘蓝型和２个白菜型油菜品种研究了影响子叶外植体芽再生的一些因素和不同基因型的子叶外植体的离子体培养反应和芽再生能力。结果表明,苗龄４ｄ的幼苗叶子含２,４－Ｄ０．５－１．２ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基培养２或６ｄ后再转到分化培养基上培养,芽再生率３４％－４６％。     

野葛叶片和茎段高频再生体系的建立

探讨几种因子对野葛叶片和茎段高频再生体系建立的影响。采用植物组织培养、正交实验和单因子实验的方法。野葛叶片和茎段的最佳消毒方式为70%酒精处理30 s后再用0.1%HgCl₂处理15 min;野葛叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 2 mg·L^-1,野葛茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 2 mg·L^-1;暗培养更有利于野葛愈伤组织的诱导;野葛叶片和茎段愈伤组织诱导的最佳蔗糖浓度均为30 g·L^-1;野葛叶片愈伤组织的最佳出芽培养基为MS+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 3.0 mg·L^-1,而野葛茎段愈伤组织的最佳出芽培养基为MS+ NAA 0.5 mg·L^-1+KT 2 mg·L^-1;光照培养更有利于野葛叶片和茎段愈伤组织芽的再分化;野葛叶片愈伤组织再生芽生根的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+PP₃₃₃ 0.5 mg·L^-1,而野葛茎段愈伤组织再生芽生根的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L^-1+PP₃₃₃ 3.0 mg·L^-1;野葛叶片和茎段愈伤组织再生芽生根的最佳蔗糖浓度均为30 g·L^-1;叶片再生苗移栽的最佳PP₃₃₃浓度为1.0 mg·L^-1,茎段再生苗移栽的最佳PP₃₃₃浓度为3.0 mg·L^-1;叶片和茎段再生苗的最佳移栽基质均为蛭石:珍珠岩（2:1）。     

坪山柚上胚轴离体再生体系的建立

以坪山柚(Citrus grandis Osbeck'Pingshanyou')无菌苗的上胚轴为外植体,研究了其离体培养和植株再生技术.结果表明:坪山柚上胚轴的形态学上部出芽能力最强,诱导不定芽的最佳培养基为:MS+6-BA 1.0 mgL-1+TDZ 0.05 mg L-1+NAA0.2 mg L-1+GA31.0 mg L-1+蔗糖40 g L-1,培养4周后不定芽诱导率为100%,平均不定芽数为8.35;最适生根培养基为1/2MS+NAA1.5 mg L-1,生根率为88.7%,平均生根6.4条;生根试管苗移栽30 d后成活率达90%.     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化.结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4％.分化后得到的不定芽在含NAA0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基上生根率达90％,移栽存活率为95％.     

绵枣儿叶片植株再生体系的建立

1 植物名称 绵枣儿[Scilla scilloides（Lindl.） Druce]。     

泰山酸枣离体叶片再生体系的建立

以泰山酸枣叶片为外植体,以WPM为基本培养基,研究了植物生长调节剂种类、浓度及培养方法等因素对离体叶片不定芽再生的影响,结果表明:不定芽启动的最佳培养基激素组合为1.0 mg·L-1 TDZ+0.5 mg·L-1 IAA;不定芽诱导伸长最佳培养基的激素组合为0.1 mg·L-1 IAA+0.5 mg·L-1 GA3.暗培养是不定芽再生的必需条件,在最适宜的不定芽再生培养基上,叶片连续光培养,不定芽不能再生;叶片先进行暗培养3周后转入光下培养,叶片不定芽再生效果最好,再生率最高可达100%.     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件。以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的激素组合对不定芽分化最有利。在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化。结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15 d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4%。分化后得到的不定芽在含NAA 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的 1/2MS培养基上生根率达90%,移栽存活率为95%。     

香石竹的叶片培养及植株再生

１植物名称香石竹（Ｄｉａｎｔｈｕｓｃａｒｙｏｐｈｙ－ｌｌｕｓ）,别名康乃馨。２材料类别无菌苗叶片。３培养条件以ＭＳ为基本培养基。分化培养基附加：（１）６－ＢＡ１．０ｍｐ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．３;（２）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．１;（３）６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．０５。增殖培养基附加６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．１。分化和增殖培养基均加蔗糖３％、琼脂０．７％,ｐＨ５．８。生根培养基为１／２ＭＳ附加ＮＡＡ０．１,蔗糖２％,琼脂０．６％,ｐＨ５．８。培养温度为（２５±１）℃,光照１２ｈ·ｄ－１,…     

果树离体叶片培养再生研究进展

从基本培养基的选择、外植体的选择、培养条件、激素和其它添加物的影响等方面综述了有关的研究成果,并提出了存在问题及今后的研究方向。     

‘孔府酥脆’枣试管苗离体叶片不定梢诱导和再生

Using in vitro leaves of Zizyphus jujuba ‘Kongfusucui’ plantlet as explants,effects of culture method,phytohormone proportion and culture time on induction rate of adventitious shoot from leaves and effects of sucrose concentrations in rooting media on rooting of adventitious shoot were studied.The results show that induction rate of adventitious shoot by two-step culture method(firstly cultured on medium Ⅰ for four weeks then cultured on medium Ⅱ for three weeks) is significantly higher than that by one-step culture method(cultured continuously on medium Ⅰ for seven weeks).Phytohormone proportion in medium Ⅰ has an obviously influence on induction rate of adventitious shoot,which gradually increases with increasing of TDZ concentration in medium Ⅰ.And adding 1.0 mg·L-1 TDZ in medium Ⅰ leads to induction rate with above 80%.With culture time prolonging(cultured for 1,2,3 or 4 weeks on medium Ⅰ,respectively),induction rate increases gradually.Sucrose concentration has a significant effect on rooting of adventitious shoot,sucrose with higher concentration(30 g·L-1) is beneficial to rooting.According to induction rate and growth status of adventitious shoot,it is determined that optimal culture method of adventitious shoot induction from Z.jujuba ’Kongfusucui’ leaves is two-step culture method,that is,leaves firstly cultured on WPM medium containing 1.0 mg·L-1 TDZ and 0.5 mg·L-1 IAA for four weeks,and then cultured on WPM medium containing 0.5 mg·L-1 IAA and 1.0 mg·L-1 GA3 till adventitious shoot produced.