苣兰种子离体萌发与植株再生(简报)

苣兰种子在不加生长调节剂的改良KC培养基中培养30d离体萌发,40d肉眼可见细小原球茎：转入改良的KC NAA0．2mg／L培养基中,原球茎开始生长并分化成小苗;将小苗转入改良的KC NAA0．5mg／L 香蕉泥20g／L培养基中生根,并长成具有假鳞茎的健壮植株。     

西藏虎头兰的组织培养与快速繁殖

1植物名称 西藏虎头兰（Cymbidium tracyanum L．Castler．）。 2材料类别 种子。 3培养条件 西藏虎头兰种子萌发培养基：（1）1／2MS;（2）MS;（3）1／2MS＋100mL·L^-1洋芋;（4）MS＋100mL·L^-1洋芋;（5）1／2MS＋100mL·L^-1椰乳;（6）MS＋100mL·L^-1椰乳。原球茎继代增殖培养基：（7）MS＋NAA0．1mg·L^-1（单位下同）＋100mL·L^-1洋芋;     

西藏虎头兰花香成分分析

以盛花期的西藏虎头兰花为试材,采用手动固相微萃取(SPME)结合气相色谱一质谱联用(GC-MS)技术测定其一天内不同时间及不同花器官释放的花香成分及其相对含量。一天中三个时间点10∶00、14∶00和18∶00的西藏虎头兰花香分别鉴定出88种、87种和83种化合物,在花器官花瓣、唇瓣和合蕊柱中分别鉴定出72种、66种和62种化合物;包括醛类、醇类、酮类、酯类、萜烯类、烷烃类、醚类、呋喃类、酚类和芳香族十类化合物。全花花香成分主要是α-蒎烯,松萜和对甲酚;花瓣主要花香成分α-蒎烯,松萜和β-蒎烯;唇瓣主要花香成分对甲酚、α-蒎烯,松萜;合蕊柱主要花香成分对甲酚、己醛、1-己醇。结果表明,西藏虎头兰一天内不同时间段花香成分种类逐渐减少;花器官花香成分从合蕊柱向花瓣种类逐渐增加,说明其主要香气释放部位为花瓣;在不同时间段及花器官中,萜烯类物质、醇类物质和酯类物质无论种类数量还是相对含量都占有很大比重,说明萜烯类物质、醇类物质和酯类物质是西藏虎头兰花香的主要组成成分。     

古巴兰的茎段原球茎诱导与植株再生的研究

试验以古巴兰幼嫩芽体为外植体,通过原球茎诱导途径,建立快速高效的古巴兰再生体系。结果表明：最适宜的诱导茎段和叶片原球茎的培养基分别为MS＋5．0mg／L6-BA＋1．5mg／LNAA和MS＋2．0mg／L6-BA＋1．5mg／LNAA;诱导出的原球茎在MS＋1．5mg／L6～BA＋0．5mg／LNAA培养基上继代最好;在MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA的培养基上能分化出不定芽苗;再生的植株在MS＋6．0mg／L6-BA＋1．0mg／LNAA的培养基上能实现增殖和复壮;最适宜的生根培养基为1／2MS＋0．1mg／LNAA。     

西藏绵头雪莲的组织培养及植株再生

1植物名称绵头雪莲（Saussurealaniceps）。2材料类别种子子叶。3培养条件培养基：（1）N6＋BA2mg·L－1（单位下同）＋NAA0．02;（2）N6＋BA1.5＋NAA0．2 水解乳蛋白500;（3）N6＋NAA0.5＋IAA0．5＋KCI60。培养温度：25~28℃,光照度2400lx,光照12－14h·d－1。4生长与分化情况4．1愈伤组织诱导及芽的分化经表面消毒后的种子接种子培养基（1）上,7－10d后种子前发长出了叶,10－15d后,子叶边线突起。膨大,产生紫绿色的愈伤组织。20－25d后,愈伤组织上突起产生绿色芽点,经10－20d,不定芽伸长至0．5－1．5cm。1块愈伤组织…     

地黄组织培养及植株再生的研究

以地黄根茎所获无菌苗为材料,对其愈伤组织诱导、分化和再生植株的获取进行了初步研究。结果表明：取叶片、茎段、叶柄进行愈伤组织诱导,筛选出最适培养基为MS附加2,4-D0．5mg／L、BA1．0mg／L,愈伤组织诱导率可达100％。将叶片接种在分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加BA 3mg／L、NAA 0．1mg／L,分化率为77．5％。试管苗在改良的MS(大量与微量元素、铁盐和有机物质各1／2)附加NAA 0．05mg／L的培养基上,经过15～20d培养,生根率可达100％。     

花花柴的组织培养与植株再生

1植物名称花花柴[Karelinia caspica（Pall．）Less．]。 2材料类别花花柴种子萌发形成的幼嫩叶片。     

粤紫萁离体再生技术研究

粤紫萁(Osmunda mildei)为新近形成的自然杂交种,其分布区狭窄、种群个体数量少、有性繁殖能力极低.该文以孢子为外植体,以MS、3/4MS、1/2MS和1/4MS为基本培养基,探讨不同生长调节剂对粤紫萁孢子萌发、原叶体增殖和孢子体形成的影响.结果表明:粤紫萁孢子中极少的可育孢子在植物生长调节剂的作用下,能够萌...     

苦豆子的组织培养及植株再生的研究

用4种诱导培养基P1(MS+2,4-D0.5mg/L)、P2(MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L)、P3(MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L)、P4(MS+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L),3种分化培养基(MS+6-BA1mg/L;MS+6-BA0.5mg/L;MS+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L)和4种生根培养基(MS;MS+IBA1mg/L;MS+IBA1mg/L+IAA0.5mg/L;1/2MS+IAA0.2mg/L)对苦豆子愈伤组织进行诱导和植株再生,研究影响苦豆子组织培养的因素,结果表明愈伤组织的诱导频率主要依靠激素的种类和浓度,培养基中加入0.2～2mg/L的2,4-D有利于苦豆子愈伤组织生长,但使褐化发生时间提前;培养基中加入活性炭对苦豆子愈伤组织褐化有明显的抑制作用;加入IAA对苦豆子根的分化是必需的。     

药用植物穿心莲离体培养技术及其应用研究进展

穿心莲为我国重要的南药之一,用于清热解毒、凉血消肿,其主要活性成分穿心莲内酯具有抗癌、抗HIV病毒、抗炎、保肝等功效。然而,穿心莲内酯人工合成难度较大,主要从人工栽培的植物原料中提取,栽培植物原料的质量因受土壤、气候、水肥管理等各种因素的影响而参差不齐,穿心莲生长周期长且占用土地资源。植物离体培养技术在种苗快繁及活性成分积累等方面都具有显著优势,是实现穿心莲活性成分快速、高效生产的重要途径之一。穿心莲组织离体再生技术体系日益完善,从外植体到完整植株的组织离体再生技术日渐成熟,已在种苗繁育、倍性育种等方面有了一定的应用。同时,在穿心莲愈伤组织培养、细胞悬浮培养、不定根培养、毛状根培养过程中,通过优化培养条件和使用适宜的诱导子可大幅增加培养物中穿心莲内酯等活性成分的积累。该文分别从穿心莲组织、细胞、不定根及毛状根培养等方面,全面系统地综述了近年来国内外关于穿心莲离体培养技术以及其生产穿心莲内酯的研究进展,以期促进穿心莲离体培养技术的发展与应用,为离体生产穿心莲内酯的研究提供参考。此外,还提出了未来在穿心莲离体培养技术及通过该技术生产穿心莲内酯的研究中需重点关注的3个方面:(1)熟化完善穿心莲组织离体再生技术体系,建立全面系统的评价体系;(2)优化培养条件和高效诱导子联用,进一步提高穿心莲内酯等重要活性成分产量;(3)开展通过细胞悬浮培养技术生产穿心莲内酯的生物反应器培养研究。     

广藿香叶盘法高效再生体系主要影响因素的研究

广藿香是重要的芳香药用植物,利用基因工程技术对广藿香进行品种改良,需要建立一个高效的广藿香植株再生体系。该研究以广藿香无菌苗叶片为材料,将叶盘外植体分别置于不同条件下培养,观察、统计其再生植株的数量及生长状况。通过研究15~50 d的苗龄、第2~4节上的叶及培养基中2,4-D、NAA、BA和KT的浓度和配比等因素对广藿香叶盘再生植株的影响,在此基础上优化培养条件,建立广藿香高效再生体系。结果表明:广藿香无菌苗的苗龄、叶片在茎上的着生位置以及培养基中的植物生长调节物质浓度和配比都对广藿香的植株再生有显著影响;优化培养条件为以培养30 d的广藿香无菌苗顶芽下第2对展开叶片切割的叶盘为外植体,在含0.1 mg·L-1NAA和0.5 mg·L-1BA的MS培养基中培养28 d,叶盘的不定芽发生频率达到100%,单个叶盘的平均再生芽数为96.5个,经生根培养及温室炼苗,再生植株的移栽成活率达到96%。广藿香叶盘植株再生体系的建立为其基因转化研究及优良品种的快速繁育奠定了基础。     

In vitro culture of Trichogramma pretiosum on an artificial medium

The composition of an artificial medium and environmental conditions are described for the in vitro rearing of the egg parasite Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae). The medium was composed of defined amounts of protein, carbohydrates, lipid, salts, and vitamins, but also contained up to 40% insect hemolymph. The hemolymph was necessary to induce pupation. T. pretiosum eggs were obtained by dissection of Heliothis virescens (F.) (Lepidoptera: Noctuidae) eggs. In vitro reared T. pretiosum were similar in size to H. virescens reared T. pretiosum, and females were fecund.

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Résumé Les oeufs de Trichogramma pretiosum ont été obtenus par dissection d'oeufs d'Heliothis virescens. T. pretiosum Riley (Hymenoptère, Trichogrammatidae) a été élevé avec succès sur un substrat synthétique. Outre des quantités définies de protéines, glucides, lipides, éléments minéraux et vitamines, la ration contenait aussi jusqu'à 40% d'hémolymphe de Manduca sexta. L'hémolymphe était nécessaire pour induire la nymphose. En plus de la nourriture, les conditions d'environnement sont apparues extrêmement importantes pour élever T. pretiosum dans des conditions satisfaisantes. Le contrôle de l'humidité relative, en particulier, était le facteur le plus important. Les adultes produits au cours de cette étude étaient d'apparence normale; ils se sont accouplés sans problèmes, les femelles étaient fécondes et leur taille ne différait pas de celle d'individus élevés sur H. virescens.

     

光皮桦组织培养离体再生研究

采用正交试验等设计,系统开展了光皮桦组织培养高效再生体系研究。结果表明:光皮桦茎段外植体最佳诱导培养基及激素组合为MS+0.50mg.L-1 6-BA+0.10mg.L-1 TDZ+30mg.L-1蔗糖+5.50g.L-1琼脂,丛生芽最佳生根培养基为1/2MS+1mg.L-1 IBA+20g.L-1蔗糖+5.50g.L-1琼脂;丛生芽在最佳生根培养基上培养15d后获健壮生根苗,移栽成活率达90%。该实验结果为光皮桦的优良品种快繁以及遗传转化体系建立奠定了良好的基础。     

送春与多花兰种间杂交后代的ISSR分析

该文使用简单重复序列间( ISSR)分子标记,对送春与多花兰种间杂交后代进行了研究。结果表明：从80个ISSR引物中筛选出14个扩增效果稳定的ISSR引物,对两亲本和59个F1代个体进行了ISSR扩增,得到107个扩增位点,扩增的片段大小位于90~2100 bp之间,平均每个引物扩增7.64条条带,得到11种类型的带。 ISSR标记在送春×多花兰的F1代中表现出一定的多态性,分离频率为44.86％,分离位点有83.33％符合孟德尔1︰1或3︰1的分离规律,产生偏孟德尔分离的位点占12.50％,余下的4.17％属于特殊分离带型。可能导致后代变异的位点为偏孟德尔分离的6条带、缺失的8条带或新生成的2条带。聚类图中父本和母本与F1代个体间的遗传距离较远,59个杂交后代先聚集成一组,再同母本相聚为一组,最后才同父本聚在一起,59个杂种均偏母本型。送春与多花兰的杂交后代在植株形态、染色体、遗传物质方面都具备双亲特点,61个个体间的ISSR分子量标记结果和植株形态学特征都说明,59个F1代杂种包含送春和多花兰的遗传特性是真杂种;F1代杂种既有双亲的互补特征带,又有双亲的重组片断即产生新的特异带,这说明送春与多花兰的杂交后代具有遗传变异的特点。该研究结果可以有效地对杂交后代进行定向选择,为兰花的杂交育种提供了分子依据。     

华重楼离体胚培养及植株再生初探

为探明华重楼离体胚培养及植株再生的基本体系,该文以华重楼离体幼胚为试验材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同光照、不同浓度梯度组合的植物生长调节剂对华重楼离体幼胚萌发、成苗的影响。结果表明:培养到60 d时,暗培养条件下华重楼离体幼胚的生长率和萌发率分别比光培养条件下高45.25%、19.17%,故暗培养比光培养更有利于华重楼离体幼胚生长发育。当GA₃浓度相同时,离体幼胚萌发所需时间随IAA浓度增加而延长。不同浓度的GA₃都可促进离体幼胚萌发,促进作用由强到弱依次为5 mg·L^-1GA₃>1 mg·L^-1GA₃> 10 mg·L^-1GA₃。在黑暗条件下,优选得到最适华重楼离体幼胚生长发育配方为1/2 MS+30g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂+0.5 g·L^-1活性炭+5 mg·L^-1GA₃     

甜椒花药培养及再生植株技术体系的研究

为建立甜椒(Capsicum annuum var.grossum)花药培养及再生植株技术体系,对影响花药胚状体诱导和分化的因素进行了研究。结果表明,培养基组成对胚状体诱导率的影响以NAA基本培养基椰乳KT,最佳胚状体诱导培养基为NTH+0.1 mg L–1 NAA+10%椰乳+1 mg L–1 KT+50μmol L–1 Ag NO3+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂+2 g L–1活性炭。花药经过24 h低温预处理和8 d高温预培养后,胚状体诱导率可达23.38%。植物生长调节剂对胚状体出芽率的影响为6-BANAAIAA,最佳胚状体分化培养基为NTH+1 mg L–1 6-BA+0.3 mg L–1 NAA+0.1 mg L–1 IAA+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂。胚芽转入1/2MS+0.5 mg L–1 IBA+30 g L–1蔗糖+5 g L–1琼脂培养基后,生根率可达92.5%。     

In vitro organogenesis and plant regeneration from unpollinated ovary cultures of Azadirachta indica

A novel method of organogenesis in neem (Azadirachta indica A. Juss.) from unfertilized ovaries is described. The Murashige and Skoog’s (MS) medium with 9 % sucrose, 1 μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 5 μM 6-benzylaminopurine (BAP) was the best for callus induction from unfertilized ovaries. However, further proliferation of callus occurred better on MS medium supplemented with 0.5 μM 2,4-D either alone or in combination with 4.5 μM kinetin. Maximum shoot regeneration (78 %) was observed when calli, induced from ovaries of 4 mm size flower buds and proliferating on MS + 0.5 μM 2,4-D, were subcultured to MS medium containing 5 μM BAP. Histological analysis revealed that 4 mm sized flower bud corresponds to a 2-nucleate stage of embryo sac. The shoots were then multiplied by forced axillary branching on MS medium supplemented with 1.0 μM BAP and 250 mg dm⁻³ casein hydrolysate. The shoots could be rooted on 1/4 strength MS medium supplemented with 0.5 μM indole-3-butyric acid (IBA) at a frequency of 79 %. Cytological analysis by root tip squash preparations revealed that all the plantlets were diploids. These plants were subsequently hardened and established in soil with transplantation rate of 81.8 %.