HSV体外感染对IgG产生的抑制作用和TNF及r-IFN对它的影响

本文观察了体外HSV-I感染对人淋巴细胞增殖、分化,产生免疫球蛋白的影响。HSV-I能感染PWM刺激的人扁桃体淋巴细胞,并抑制其增殖和免疫球蛋白(IgG)的产生,感染实验组的IgG产量较对照组明显降低(P<0.005)。HSV-I感染后,上清中可检出一定量的病毒,其滴度为10~(3·2)—10~(5·7)TCID50/ml;直接免疫荧光法检出病毒抗原阳性细胞为3％—8.5％。在感染实验系统中加入重组的IFN_a(r-IFN_a)、IFN_γ(r-IFN_γ)和纯化的肿瘤坏死因子(TNF),观察到r-IFN。和TNF均有一定程度抗病毒作用,部分解除HSV-I对IgG产生的抑制作用。和对照组相比,差异显著(P<0.01)。r-IFN_γ对HSV-I的感染和IgG产生几乎无作用(P>0.05),但r-IFN_γ对TNF有协同作用:抑制病毒增殖和解除HSV-I对IgG产生的抑制,比单独用TNF组更为显著(P<0.01)。     

γ-去氢骆驼蓬碱的分离和结构

从新疆产植物骆驼蓬(Peganum harmala L.)的种子中分得一个新的γ-咔啉(γ-carbo-line)类生物碱,根据其光谱和化学数据推定其结构为Ⅵ,命名γ-去氢骆驼蓬碱(γ-哈尔碱,γ-harmine)。     

蛋白酶水解免疫球蛋白G

三十年前就已开始用蛋白酶消化免疫的马血浆,以获得精制高效的破伤风和白喉抗毒素。这一方法目前仍是制备各种精制抗毒素的良好手段。近二十年来由于蛋白质分离技术的进展,对进一步了解免疫球蛋白的结构、功能和遗传性提供了有利的条件。 Porter(1959)首先用木瓜酶水解家兔抗体免疫球蛋白GIgG得到两种碎片,一为Fab(F代表碎片,ab代表能与抗原相结合的抗体部分),另一为Fc(c表示可结晶之意)碎片。最近的研究说明家兔和人的IgG几乎可被所有的蛋白水解酶所分解,所试过的蛋白水酶如木瓜酶、胃酶、胰酶、胰凝乳朊酶及组织朊酶等对IgG     

虹鳟Fc受体FcγR的α和γ亚基基因的克隆及表达分析

Fc受体(FcR)是一种表达在免疫细胞表面的受体分子, 由多亚基构成, 通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc段结合引起包括炎症因子释放和吞噬作用等体液和细胞免疫反应。研究采用RACE技术首次克隆得到了虹鳟FcγR的α亚基基因(FcγRα)和γ亚基基因(FcRγ)的cDNA序列, 采用生物信息学软件对FcγRα和FcRγ的序列进行了特征分析, 实时荧光定量PCR检测了其在不同组织和细胞亚群中以及在Poly (I鲶C)和LPS刺激后头肾中的表达。结果显示:FcγRα的cDNA全长1677 bp, 开放阅读框为954 bp, 编码317个氨基酸; FcγRα由信号肽和2个Ig样结构域构成, 但没有跨膜区和胞内区。FcRγ亚基存在2种形式, 分别命名为FcRγ1和FcRγ2(包含FcRγ2a和FcRγ2b两个剪接异构体), 它们均由信号肽、跨膜区和胞内的免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)构成。氨基酸序列相似性分析表明虹鳟FcγRα与斑点叉尾鮰FcRI相同率最高(30%), 虹鳟FcRγ1和FcRγ2a/2b与哺乳动物FcRγ相同率最高可达40%。组织表达显示FcγRα、FcRγ1和FcRγ2a/2b在头肾、脾脏和血液中表达较高; 细胞亚群表达显示FcγRα、FcRγ1和FcRγ2a/2b在髓样细胞群中表达最高; LPS和Poly (I鲶C)刺激后,FcγRα、FcRγ1和FcRγ2a/2b在头肾中的表达显著上调, 这表明FcγR在机体抗细菌和抗病毒免疫中可能发挥重要作用。     

牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立

实验旨在建立牛重组IFN-γ(BovIFN-γ)的ELISA检测技术,为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞,从培养细胞中提取总RNA,经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA,进一步克隆至pET28a,转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出预期大小(18kD左右)组氨酸标记蛋白,经鉴定为BovIFN-γ;以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1,腹水效价在1∶210×100~1∶211×100之间。Western-blot分析显示,4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明,4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应,而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明,此方法检测敏感性达到2ng/mL,特异性良好,为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。     

清胰利胆颗粒联合床旁CRRT疗法对SAP患者炎性因子、免疫功能及外周血Foxp3、RORγt mRNA表达的影响

目的:探讨清胰利胆颗粒联合床旁连续性肾脏替代治疗(CRRT)对重症急性胰腺炎(SAP)患者炎性因子、免疫功能及外周血叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)、维甲酸相关孤独受体γt(RORγt)m RNA表达的影响。方法:选取2017年3月~2019年12月期间我院收治的SAP患者80例,根据随机数字表法分为对照组(n=40)和研究组(n=40),对照组患者予以床旁CRRT疗法治疗,研究组在对照组的基础上联合清胰利胆颗粒治疗,比较两组疗效、炎性因子、免疫功能、外周血Foxp3、RORγt mRNA相对表达量及不良反应。结果:研究组治疗后临床总有效率为87.50%(35/40),高于对照组患者的70.00%(28/40)(P<0.05)。研究组治疗后免疫球蛋白G(Ig G)、免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白M(Ig M)、Foxp3 m RNA相对表达量较治疗前升高,且高于对照组(P<0.05)。两组治疗后白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、RORγt m RNA相对表达量较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。两组在治疗过程中均未出现严重不良反应。结论:清胰利胆颗粒联合床旁CRRT疗法治疗SAP,疗效显著,可有效改善患者炎性因子、免疫功能,其主要作用机制可能与外周血Foxp3、RORγt m RNA相对表达量有关。     

树莓果粉对I型糖尿病大鼠血糖、免疫反应及氧化应激的影响

本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的大鼠模型来研究树莓果粉在Ⅰ型糖尿病中降血糖、免疫调节及抗氧化的活性。结果发现树莓果粉能增加糖尿病大鼠的体重,降低其血糖,并对糖尿病大鼠受损的胰岛有一定的修复作用。同时,树莓果粉能明显降低糖尿病大鼠血清中CD4、CD8分子、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及免疫球蛋白Ig G、Ig A和Ig E的含量。此外,树莓果粉能显著增强糖尿病大鼠胰腺和血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,增加还原型谷胱甘肽(GSH)含量,并明显降低丙二醛(MDA)的含量。说明树莓果粉能通过减缓自身免疫反应程度和缓解氧化应激来改善胰岛β细胞的损伤,从而达到治疗Ⅰ型糖尿病的作用。     

树莓果粉对I型糖尿病大鼠血糖、免疫反应及氧化应激的影响北大核心CSCD

本研究采用链脲霉素(STZ)诱导的大鼠模型来研究树莓果粉在Ⅰ型糖尿病中降血糖、免疫调节及抗氧化的活性。结果发现树莓果粉能增加糖尿病大鼠的体重,降低其血糖,并对糖尿病大鼠受损的胰岛有一定的修复作用。同时,树莓果粉能明显降低糖尿病大鼠血清中CD4、CD8分子、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及免疫球蛋白Ig G、Ig A和Ig E的含量。此外,树莓果粉能显著增强糖尿病大鼠胰腺和血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,增加还原型谷胱甘肽(GSH)含量,并明显降低丙二醛(MDA)的含量。说明树莓果粉能通过减缓自身免疫反应程度和缓解氧化应激来改善胰岛β细胞的损伤,从而达到治疗Ⅰ型糖尿病的作用。     

儿童难治性肺炎支原体肺炎的临床特点及血清IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ的变化分析

目的:分析儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)的临床特点及血清白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)检测对RMPP的预测价值。方法:回顾性分析我院2014年6月～2018年1月收治的453例肺炎支原体肺炎(MMP)患儿临床资料,包含81例RMMP及372例普通MPP(GMPP),分析和比较2组患儿的临床特征、临床表现、胸部影像学、肺外并发症、实验室检查结果,采用多因素Logistic回归分析RMPP发生的危险因素,并以受试者工作绘制特征(ROC)曲线分析各因素检测对RMPP的预测价值。结果:RMPP组年龄、热程、发热、寒战、呼吸音减弱、肺部浊音应该是肺部罗音、胸腔积液、大叶性肺炎、心脏损害、氧疗率、住院时间、白细胞计数、中性粒细胞百分比、前白蛋白、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(Ig G)、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ水平均显著高于GMPP组(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示血清IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ水平为RMPP发生的独立危险因素(P0.05)。血清IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ及四者联合检测的曲线下面积分别为0.681、0.699、0.693、0.767、0.857,联合检测曲线下面积明显高于IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ单独检测。结论:RMPPP患儿的年龄相对较高,且临床表现、胸部影像学、肺外并发症较GMPP患儿严重,更需吸氧治疗,延长住院时间。RMPP患儿血清IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ水平明显上升,且四者联合检测对预测RMMP的发生临床价值较高。     

FcγRs功能研究及其对疫苗设计策略的启示

Fcγ受体(FcγRs)与免疫球蛋白Ig G Fc的特异作用介导了广谱的免疫学功能,并对天然免疫和适应性免疫产生影响。近些年的研究表明,免疫反应中Fc与FcγRs的相互作用是动态调节过程,由Ig G的亚型、Ig G Fc的糖链结构以及免疫细胞FcγRs的选择性表达决定。Ig G和免疫细胞共同决定了Fc和FcγRs结合的细胞特异性。现全面阐述FcγRs家族分子的生物学功能以及Fc与FcγRs的相互作用对疫苗设计策略所产生的深远影响。     

抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用（英文）

免疫球蛋白是机体固有免疫系统的组成部分,是机体防御的第一道防线。本研究对抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体进行了特征分析并将其应用到不同免疫试验中用以检测鹅免疫球蛋白。用此单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱用以分离血清中的鹅免疫球蛋白;偶联辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)后的单克隆抗体用作第二抗体来检测鹅特异性抗体。此外,该单克隆抗体可以识别和定位外周血淋巴细胞中的SIg+淋巴细胞。研究表明,该单克隆抗体可在多种条件下检测或分离鹅免疫球蛋白并作为研究鹅体液免疫的有力工具。     

抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用

免疫球蛋白是机体固有免疫系统的组成部分,是机体防御的第一道防线。本研究对抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体进行了特征分析并将其应用到不同免疫试验中用以检测鹅免疫球蛋白。用此单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱用以分离血清中的鹅免疫球蛋白;偶联辣根过氧化物酶 (Horseradish peroxidase,HRP) 后的单克隆抗体用作第二抗体来检测鹅特异性抗体。此外,该单克隆抗体可以识别和定位外周血淋巴细胞中的SIg+淋巴细胞。研究表明,该单克隆抗体可在多种条件下检测或分离鹅免疫球蛋白并作为研究鹅体液免疫的有力工具。     

血红蛋白F乌鲁木齐[~Gγ~I22(B4)Asp→Gly]——在维吾尔族中发现的一种新的胎儿血红蛋白变异体

在乌鲁木齐市进行的一次脐带血普查中,检出一例慢速血红蛋白变异体,携带者为一维吾尔族新生儿。结构分析表明,γ链第22位的天冬氨酸被甘氨酸所替代;变异体的γ75位是异亮氨酸,γ136位是甘氨酸。这种变异[~Gγ~I22(B4)Asp→Gly]迄今在国内外文献中均未见报道,是一种新发现的胎儿血红蛋白变异体,命名为血红蛋白F乌鲁木齐(HbF Urumqi)。热不稳定试验阴性。     

HbF-新晋[~Gy~I119(GH2)Gly→Arg]一种新的不稳定胎儿血红蛋白变异体

 1988年我室又发现一种新的慢泳异常胎儿血红蛋白(HbF)。先证者为一健康汉族女婴。醋纤膜电泳(pH8.6)示变异体区带位于HbF与Hb A_2之间,反相高效液相色谱(HPLC)示正常GγI峰前方出现一异常峰。异常Hb含量为Hb总量的16.8％。理化性质测定该变异体为一轻度不稳定Hb。结构分析证明该变异体为GγI链第119位(GH2)的甘氨酸(Gly)被精氨酸(Arg)取代。γ链GH2位于α_1γ_1接触面,此处的氨基酸置换可导致Hb的不稳定。此变异体被命名为HbF-新晋[~(GγI)119(GH2)Gly→Arg]。     

用于杂交瘤繁殖的血清补充物

胎牛血清(FBS)已成为用于动物细胞(包括杂交瘤)培养的精选的血清。较廉价的其它血清诸如成牛血清和马血清,它们所含的高浓度免疫球蛋白可能干扰某些筛选测定或单克隆抗体的纯化。为了提供胎牛血清的低廉替代物,研制了一种缺少免疫球蛋白 G 的成牛血清(MBS)。MBS 的免疫球蛋白量非常低(每毫升低于150微克),对血细胞凝集作用、酶标测定和免疫荧光筛选没有干扰。现已用它来进行杂交瘤的常规培养,并产生了与胎牛血清可比拟的结果。然而,结果表明:MBS 不适宜杂交瘤的克隆和融合,但有利于需要大量培养基的克隆繁     

抗牙龈卟啉单胞菌血凝素2单克隆抗体的制备

目的制备抗牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)血凝素2(hemagglutinin-2,HA-2)的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)。方法用重组HA-2(recombinant HA-2,rHA-2)免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞.用ELISA方法测效价。结果获得1株能够高效识别rHA-2的mAb,命名为4F11。此单克隆抗体的免疫球蛋白亚类为IgG1,效价达1?106。结论成功制备了重组牙龈卟啉单胞菌血凝素2的单克隆抗体mAb.将进一步用于牙龈卟啉单胞菌的诊断,并为牙周疾病的治疗研究奠定基础。     

免疫球蛋白

免疫球蛋白(immunoglobulins),是对含有抗体的三种球蛋白(γ-,β_(2A)-及β_(2M)-球蛋白)的概括语。自1937年Tiselius 提出在电泳上移动最慢的γ-球蛋白就是抗体蛋白以来,人们一直把γ-球蛋白与抗体等同起来看待。近年来由于超速离心法、层析法、凝胶扩散法、免疫电泳法等新技术的使用,发现与免疫有关的蛋白质的理化学性质及免疫学特性颇不均一(Heterogeneity)。例如,在超速离心上有7S与19S之别,在免疫电泳上亦不仅限于电泳图的末端部位,而是通过β-球蛋白一直扩展到α_2-球蛋白区域(图1)。所以正确地     

基因工程中常用术语的命名规则

1　基因的命名基因符号最初用英文的第 1个字母的大写表示。例如 ,T代表苏氨酸 ,T+代表苏氨酸合成酶野生型基因 ,T-代表苏氨酸合成酶缺陷型基因。但随着基因数目的增多及众多突变类型的出现 ,这一套符号已经不够用了。1 90 6年 ,M.Demerec等提出了一套新的基因命名规则 :1 )每个基因座位用 3个小写斜体字母表示 ,这 3个字母来自说明基因特性单词的前 3个字母 ;2 )表型相同基因不同的突变型 ,用 3个字母后面加了 1个大写字母表示 ;3 )同一基因的不同突变位点用基因符号后面所加的阿拉伯符号表示 ,如果突变位点所属的基因还不确定 ,那么大写…     

贵州苗族新生儿HbF中G_λ/A_λ比值测定与~Aγ~T基因频率分析

用含Triton X-100的酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法测定了贵州省108例苗族新生儿脐带血胎儿血红蛋白(HbF)中。~Gγ/~Aγ值。显示107例(占99.07％)新生儿的~Gγ值在55—78％之间,均值与标准差为70.42±3.45;高~Gγ值者1例(占0.925％);低~Gγ值者未发现。用Large-pore Vydac C4柱反相高效液相层析法对108例样本进行了~Aγ~T基因频率(f~4γ~T)分析,f~4γ~T为0.0648。     

人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价的测定

采用经典微量细胞病变法,应用近两年分离自中国手足口病(HFMD)高发区的3株肠道病毒71型(EV71)病毒株,对中国不同血液制品厂家生产的35批人免疫球蛋白制品进行抗-EV71中和效价检测。结果显示,3株不同EV71病毒株间的抗-EV71中和效价差异均在4倍以内,差异无显著的统计学意义(F=2.323,P0.05)。根据这3株毒株检测结果判定,35批人免疫球蛋白的抗-EV71均为阳性,肌肉注射用免疫球蛋白(简称肌丙)的抗-EV71-GMTs(525.9)显著高于静脉注射用免疫球蛋白(简称静丙)的GMTs(252.3,F=66.518,P0.01)。30批静丙的抗-EV71-GMTs中和效价分布在128.0~384.0之间。应开展原料血浆中抗-EV71中和效价的筛选,研制高效价的EV71特异性免疫球蛋白制品,用于HFMD的治疗和预防。