硫化氢在心血管系统中的生理意义及研究进展

硫化氢（H2S）是继一氧化氮（NO）和一氧化碳（CO）后新近发现的第三个气体信使分子。在心血管系统,硫化氢主要由胱硫醚-γ-裂解酶合成。它已经被证实具有与一氧化氮及一氧化碳相似的舒张血管和抑制血管平滑肌细胞增殖等生物学效应,另外还有促进血管新生的作用。     

血管平滑肌细胞与一氧化碳的关系

一氧化碳（CO）是一种鸟苷酸环化酶（GC）的激活剂。它可以通过酶解血红素氧合酶（HO）而在多种细胞产生。近来研究表明,平滑肌细胞（SMC）内也能产生CO。平滑肌细胞衍生的CO是血管环鸟嘌呤核苷3’,5’单磷酸（cGMP）的调节物,它可以作用于血小板和内皮细胞（EC）,进而负反馈作用于自身。金属卟啉包括锌卟啉9（ZnPP-9）可以抑制内源性CO的产生。     

一氧化氮在吲哚昔酚抑制血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的：观察吲哚昔酚（ldoxifene,ldo）对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响,并探讨平滑肌源性一氧化氮（NO）在其中的作用。方法：血管平滑肌细胞培养、NO释放的测定、细胞计数和MTT测定。结果：吲哚昔酚可剂量依赖性的促使血管平滑肌细胞NO的释放,10μmol／L吲哚昔酚明显抑制10％胎牛血清（FCS）和10^-7mol／L的ET-1诱导的细胞增殖,吲哚昔酚的抑制作用可被一氧化氮合酶抑制剂L-NAME（100μmol／L）和鸟苷酸环化酶（guanylate cyclase,GC）抑制剂美蓝（methylene blue,MB）（10μmol／L）明显减轻。结论：吲哚昔酚抑制血管平滑肌细胞增殖的作用与其NO释放密切相关,其中可能有NO-GC-cGMP通路的参与。     

粉防己碱对血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用血管紧张素Ⅱ建立了培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用H3-胸腺嘧啶核苷掺入法、流式细胞术、免疫细胞化学及Northernblot方法．观察了粉防已碱对血管平滑肌细胞增殖的作用及对原癌基因和抑癌基因的影响。结果发现：粉防己碱能逆转血管紧张素Ⅱ所致的H3-胸腺嘧啶核苷掺入量增多,阻止血管平滑肌细胞由静止期进入DNA合成期和有丝分裂期,能使c－fos、c—myc、c－sis原癌基因相关抗原及mRNA表达减弱,使P53抑癌基因相关抗原及mRNA表达增强。本文提示：粉防己碱有抑制血管平滑肌细胞增殖作用,同时能影响癌基因表达。     

硫化氢对血管平滑肌细胞的影响

在过去的二、三十年,硫化氢(H2S)被认为是继一氧化氮、一氧化碳后又一种重要的气体递质。在中枢神经系统,H2S主要作为一种神经递质,并且有着抗氧化作用,从而保护神经系统。在心血管系统,H2S通过舒张血管平滑肌、促进平滑肌细胞凋亡、抑制平滑肌细胞增殖等途径来参与高血压、动脉粥样硬化、冠心病、低氧性肺动脉高压等心血管疾病的调节,从而对机体起到一种保护作用。我们主要就H2S对血管平滑肌的调节机制进行概述,阐述其在心血管疾病调节中的重要作用。     

C型利钠利尿肽与心血管疾病

C型利钠利尿肽（CNP）是利钠利尿肽家族的第三个成员,CNP主要是由血管内皮分泌,与血管平滑肌细胞NRP－B受体结合激活颗粒型鸟苷酸环化酶,促进细胞内cGMP水平升高而起作用。除能舒张血管外还具有抑制平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质形成等心血管效应,并以自分泌和旁分泌的方式参与血管重逆,在心血管疾病的发生发展中具有重要的病生理意义,可能是内源性抗损伤因素之一。     

内皮素—1对缺氧肺脉平滑肌细胞的增殖作用

内皮素（ＥＴ）是至今所发现的最强的内源性血管收缩肽,近年来发现ＥＴ－１能促进血管平滑肌细胞增殖。本研究表明ＥＴ－１对缺氧培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）有剂量依赖的增殖作用,缺氧可ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成且增加ＥＴ－１的丝裂原作用。ＥＴ－１的丝裂原作用主要由其Ａ型受体（ＥＴＲＡ）所介导,ＥＴＲＡ的特异拮抗剂ＢＱ１２３可显著抑制缺氧以及缺氧与ＥＴ－１协同所产生的增殖作用,而且发现ＥＴＲＡ在缺氧培养     

粉防己碱抑制血管平滑肌细胞增殖及对HSP70和p53表达的影响

目的：观察粉防己碱（Ｔｅｔ）对ＶＳＭＣ增殖的作用及对热应激蛋白７０ｋｄ（ＨＳＰ７０）及其ｍＲＮＡ和抑癌基因ｐ５３ｍＲＮＡ的影响。方法：用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。采用氚－胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］ＴｄＲ）掺入法流式细胞术,Ｗｅｓｔｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交方法。结果：Ｔｅｔ能逆转内皮素所致的［３Ｈ］ＴｄＲ掺入量增多（Ｐ＜０．０１）,阻止血管平滑肌细胞由静止期（Ｇ０／Ｇ１期）进入ＤＮＡ合成期（Ｓ期）和有丝分裂期（Ｇ２／Ｍ期）,并能逆转内皮素引起的ＨＳＰ７０及ｍＲＮＡ表达增强（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,ｐ５３抑癌基因ｍＲＮＡ表达减弱（Ｐ＜０．０５）。结论：Ｔｅｔ能抑制血管平滑肌细胞增殖,与ＨＳＰ７０及ｐ５３的调控有关     

新型金属蛋白酶ADAMTS-7促进体内和体外血管平滑肌细胞增殖

血管平滑肌细胞增殖和迁移对动脉粥样硬化和血管成型术后再狭窄的发生具有重要作用.本课题组之前的研究发现,含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMTS-7能够通过调节血管平滑肌细胞迁移直接促进新生内膜的形成.然而ADAMTS-7是否影响血管平滑肌细胞增殖尚不清楚.本研究发现,腔内给予腺病毒造成在体ADAMTS-7过表达能够明显促进大鼠血管损伤7天后新生内膜的形成.PCNA阳性细胞比例在过表达ADAMTS-7的血管内膜和中膜中明显增多.此外,利用血管外膜涂抹小干扰RNA的技术沉默ADAMTS-7体内表达.结果表明,与对照组相比,敲低ADAMTS-7能够明显抑制内膜增厚和内膜平滑肌细胞增殖,但是并不影响中膜细胞.3H掺入实验结果表明,过表达ADAMTS-7能够明显促进体外培养的原代血管平滑肌细胞增殖,基因沉默则抑制其增殖.综上所述,新型金属蛋白酶ADAMTS-7能够在体内和体外促进血管平滑肌细胞增殖.本研究结果提示,ADAMTS-7可能成为防治动脉粥样硬化和血管成型术后的再狭窄的新作用靶点.     

硫化氢在低氧性肺动脉高压发病中的作用

低氧性肺动脉高压(HPH)是临床众多心肺血管疾病发生、发展中重要的病理过程,也是决定这些疾病的进展及预后的重要因素之一.HPH又是复杂的病理生理过程,其发病机制迄今尚未完全阐明.近来发现,一直被称为有毒废气的硫化氢(H2S)可在机体内源性生成,外源性给予H2S可以缓解HPH和肺血管结构重建,其作用机制包括舒张血管、调节血管平滑肌细胞增殖/凋亡失衡、抑制肺动脉细胞外基质异常堆积等,进而揭示了H2S在HPH中的重要调节作用.     

血管紧张素Ⅱ对人肺血管平滑肌细胞增殖及黏着斑激酶表达的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）与黏着斑激酶（FAK）对人肺血管平滑肌细胞增生的影响。方法：采用免疫印迹方法测定了不同组别中FAK的表达,并采用MTT比色法,^3H—TdR掺入测定细胞增殖情况。结果：AngⅡ能促进细胞增殖。对细胞的影响呈现剂量依赖关系。结论：AngⅡ促进人肺动脉平滑肌细胞增殖,并促进FAK的表达,在肺血管结构的重构方面可能有着重要的病理生理学意义。     

己糖激酶介导小豆蔻明改善血管平滑肌细胞糖代谢的作用

目的：探讨小豆蔻明对胰岛素抵抗状态（IR）血管平滑肌细胞（VSMCs）糖代谢的影响及其作用机制。方法：采用高糖（2.5×l0-2 mol·L-1）高胰岛素（100 U·L-1）培养VSMCs,72 h后加入小豆蔻明培养48 h,观察培养液中葡萄糖消耗量、细胞内己糖激酶活性以及细胞增殖。结果：高糖高胰岛素培养72h后,血管平滑肌细胞糖消耗量降低（P〈0.01）;小豆蔻明能显著性增加IR细胞的平均糖消耗量（P〈0.01）,增强己糖激酶活性（P〈0.01）;同时明显抑制高糖高胰岛素引起的VSMCs增殖（P〈0.01）。结论：小豆蔻明能增强己糖激酶活性,改善IR状态下细胞糖代谢;同时抑制高糖高胰岛素刺激引起的VSMCs异常增殖。     

绞股蓝总苷对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞表型的影响

研究绞股蓝总苷对高脂诱导的大鼠血管平滑肌细胞表型的影响及可能的分子机制。采用高脂饲料喂饲建立高脂大鼠模型,观察绞股蓝总苷对血脂各成分的影响,血管平滑肌细胞超微结构及血管表型标志物表达的影响。结果显示,绞股蓝总苷能降低大鼠血脂水平并抑制血管平滑肌细胞超微结构发生去分化表型改变;增加高脂大鼠动脉分化标志蛋白SM-actin的表达,降低细胞增殖蛋白PCNA的表达。说明绞股蓝总苷能有效抑制高脂诱导的大鼠平滑肌细胞去分化,机制可能与抑制MCPIP1的表达有关。     

17-AAG 对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖影响的实验研究

目的：研究17- 丙烯胺-17 去甲氧格尔德霉素（17-Allylamino-17-emethoxy-geldanamycin, 17-AAG）对球囊损伤后大鼠颈动脉 血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：选取雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30 只,随机数字法分为球囊损伤（Balloon injury,BI）组10 只、球囊损伤+17-AAG 低剂量治疗（Balloon injury+Low dose AGG,BIL）组10 只、球囊损伤+17-AAG 高剂量治疗（Balloon injury+High dose AGG,BIH）组10只。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,病理学评估血管内膜增生情况。各组于球囊损伤28 天后取 材,将损伤区域的血管段取材固定,苏木精- 伊红染色（HE）观察血管并测量内膜面积（Intimal Area, IA）、中膜面积（Membrane Area,MA）,计算内膜/中膜面积比（IA/MA）,以评估内膜增生情况;同时,利用免疫荧光染色（Immunofluorescence staining, IFS）观 察增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen, PCNA）表达的情况,以评价血管平滑肌细胞的增殖情况。结果：大鼠颈动脉球 囊损伤模型成功建立。HE 染色后计算血管I/M比值,结果表明BIL组与BI组血管I/M 比值无统计学差异（P>0.05）,BIH 与BI组 血管I/M比值有统计学差异（P<0.05）。IFS结果表明,BIL组血管壁PCNA 表达较BI组略有降低,但无统计学意义（P>0.05）。BIH 组血管壁PCNA表达较BI组明显减低,有显著统计学差异（P<0.05）。结论：一定浓度的17-AAG可明显的抑制球囊损伤后颈动脉 血管平滑肌细胞增殖;17-AAG可以成为球囊损伤后大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制剂。     

溶血磷脂酸的信号转导途径

溶血磷脂酸（ＬＰＡ）是一种细胞间磷脂信使,它可通过Ｇ蛋白偶联受体引起多种生物学效应,如促进血小板聚集,诱导平滑肌收缩,刺激细胞增殖,抑制细胞分化等。最近研究发现Ｇ蛋白介导的ＬＰＡ信号转导途径至少有四种：（１）刺激磷胆酶Ｃ和磷脂酶Ｄ;（２）抑制腺苷酸环化酶;（３）激活Ｒａｓ及其下游的Ｒａｆ／ＭＡＰＫ途径;（４）Ｒｈｏ信号;粘着斑蛋白的酪氨酸磷酸化和肌动蛋白细胞骨架的重组。这些信号转导途径对细胞的增殖     

内源性CO对内皮素促大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及MAPK活性的影响

血红素加氧酶（ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ,ＨＯ）是血红素分解代谢过程中的限速酶,它能使细胞内的血红素降解成胆绿素和一氧化碳（ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅ,ＣＯ）,近来资料表明内源性一氧化碳对生理和病理状态下的血管张力有重要的调节作用,目前尚不不禁内源性ＨＯ／ＣＯ刘否参与平滑肌细胞增殖过程的调节,本实验在体内培养的大鼠主动脉平滑肌细胞模型上,用血色素加氧酶抑制剂卟啉锌－９（ｚｉｎｃ ｐｒｏｔｏｐｏ     

胰岛素影响自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及肌动蛋白分布的丝裂原激酶的机制探讨

血管平滑肌细胞增殖的同时伴有细胞内肌动蛋白的改变,这种改变受PKC-MAPK信号转导途径调控,但目前机制尚不清楚。为探讨胰岛素对PKC-MAPK信号转导途径参与调控血管平滑肌细胞增殖及细胞内肌动蛋白分布的影响,本研究用PKC抑制剂预处理SHR在鼠体外培养的血管平滑肌细胞,观察预处理的血管平滑肌细胞经胰岛素刺激后细胞内DNA的合成、MAPK的活性、表达及细胞内肌动蛋白的分布。发现,胰岛素刺激后可使血管平滑肌细胞增殖,同时伴有[^3H]TdR掺入增加、MAPK活性及表达与对照组比较明显升高。这些作用可被PKC抑制剂阻断。胰岛素在刺激血管平滑肌细胞增殖的同时也使细胞内肌动蛋白重新分布,这一效应也可被PKC抑制剂阻断。 上述结果提示,胰岛素使血管平滑肌细胞增殖的效应可能与MAPK信号转导途径有关。     

小鼠血管损伤后巨噬细胞与平滑肌细胞的相互作用

目的研究血管损伤后病变形成过程中的巨噬细胞与平滑肌细胞的相互作用。方法C57BL/6（6～8周龄）小鼠24只,右侧股动脉植入透明塑料微导管,制作小鼠血管损伤模型,术后给予特异性抗体AFS98及APB5,分别阻断巨噬细胞和平滑肌细胞增殖的信息传导通路。给药2周后采集股动脉组织,用免疫组织化学的方法对血管病变进行分析。结果小鼠股动脉血管损伤2周后,病变部位聚集了大量的巨噬细胞、平滑肌细胞。给予阻断巨噬细胞增殖的信息传导通路的特异性抗体AFS98后,病变部位的巨噬细胞数量显著减少,平滑肌细胞数量反而增多。相反,给予抑制平滑肌细胞增殖的抗体APB5后,病变局部平滑肌细胞数量减少,而巨噬细胞数量急剧增加。结论小鼠股动脉血管损伤后,构成病变的细胞主要为巨噬细胞与平滑肌细胞。这两种细胞在分化成终末成熟细胞的过程中,存在着相互拮抗的作用。     

缺氧时培养的肺动脉平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ自分泌的变化及其机制

缺氧是否通过影响血管平滑肌细胞的自分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不清楚。本实验动态了缺氧对培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）的血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）分泌的影响。结果发现：２．５％Ｏ２缺氧导致ＰＡＳＭＣｓ的ＡＴⅡ分泌降低,０％Ｏ２缺氧进一步抑制ＡＴⅡ分泌。常氧条件下,ＮＯ供体ＳＩＮ－１显著的抑制ＡＴⅡ分泌,而ＮＯ合酶凶制剂硝基精氨酸（ＬＮＡ）则能消除缺氧对ＡＴⅡ分泌的抑制作用。０     

510.6nm激光照射对兔血管平滑肌细胞增殖的影响

本文用５１０．６ｎｍ 波长激光以功率密度１、５、１０ ｍ Ｗ／ｃｍ ２ 和能量密度２、４、６Ｊ／ｃｍ ２ 照射体外培养的兔血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）,通过３Ｈ－ ＴｄＲ掺入率和细胞生长曲线测定细胞增殖率。结果显示,上述激光照射量均能抑制细胞增殖率,其中以１０ｍ Ｗ／ｃｍ ２ 组的作用最为显著