甘蓝型油菜子叶和下胚轴再生植株无性系建立

以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)豫油2号和6257的子叶和下胚轴为材料,在不同激素配比的MS培养基上诱导出了愈伤组织。将经过继代的部分愈伤转入分化培养基,分化结果表明:除基因型、外植体和分化培养基的激素配比对分化率有影响外,诱导愈伤培养基的激素配比对分化率也至关重要。豫油2号的子叶和下胚轴在最适诱导培养基(ZT 1+NAA0.5+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(ZT4+IAA 0.2 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为12.5%和75%;6257的子叶和下胚轴在其最适诱导培养基(KT 2+NAA1+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(6-BA 4+IAA 0.02 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为50%和37.5%。将其最适诱导培养基中的愈伤组织继代达8个月以上,建立了不同继代愈伤的再生植株无性系。     

茄子子叶和下胚轴的组织培养和植株再生

以4种茄子品种——六叶茄、七叶茄、九叶茄和长茄的子叶和下胚轴为外植体,探讨了不同生长调节物质对外植体分化的影响和不同品种、不同外植体以及外植体不同苗龄的分化能力差异。观察到外植体分化呈极性,并建立了4个品种茄子下胚轴的高效再生体系。     

罗布麻子叶和下胚轴再生植株的培养

本文报道了用罗布麻（Apocynum venetam)幼苗的子叶和下胚轴切段诱导出愈伤组织和再生植株。结果表明,愈伤组织的诱导在附加0.5mg/L6－BA和0.1-1mg/L NAA的MS培养基上为最好。在附加0.5mg/L NAA的MS培养基上培养愈伤组织能促进芽的分化,当NAA浓度增加到1mg/L时则能抑制芽的分化。随后在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株。     

甘蓝型油菜下胚轴原生质体培养的研究

从甘蓝型油菜下胚轴分离纯化原生质体。种子萌发时进行光照处理对原生质体产率影响不大,但可提高其活力。对液体浅层、固体平板和“琼脂岛”3种培养方法进行比较,结果“琼脂岛”法效果最好,不但细胞分裂速度快,而且克隆形成频率高。再生的愈伤组织转到分化培养基上后迅速分化出芽。诱导生根后进行移栽,生长状况良好。     

黄瓜子叶和下胚轴的离体培养

1　植物名称　黄瓜 (Ｃｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖｕｓ)品种“津绿 4号” ,由天津农业科学院黄瓜研究所育成。。2　材料类别　种子萌发的无菌苗子叶和下胚轴切段。3　培养条件　 (1 )种子萌发培养基 :1 /2ＭＳ0 ;(2 )诱导分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 1 0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＩＡＡ 0 2～ 0 4;(3 )生根培养基 :ＭＳ ＩＡＡ 0 5。上述培养基内琼脂浓度均为 0 8% ,蔗糖为 3 % ,ｐＨ5 8～ 6 0。培养温度 (2 5± 2 )℃ ,光照时间 1 0ｈ·ｄ- 1 ,光照度 2 0 0 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　无菌苗的培养　将黄瓜种子去壳后 ,以 75 %乙醇…     

甘蓝型油菜高效离体再生体系的建立

以甘蓝型油菜(Brassica napusL.)HC8为材料,从无菌苗苗龄、预培养基激素浓度、预培养天数、6-BA及NAA的浓度等方面对影响油菜组织培养的因素进行了分析研究,建立了甘蓝型油菜品系HC8的离体再生技术体系。结果表明,该油菜组织培养的最佳苗龄为5 d;最佳预培养时间为5 d,最佳2,4-D浓度为1.0 mg/L;子叶最佳诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/LNAA+3.5 mg/L AgNO3或MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+3.5 mg/L AgNO3,该条件下子叶愈伤组织诱导率最高可达100%,再生频率及分化频率分别可达88.0%和108.33%;下胚轴最佳诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+3.5 mg/L AgNO3,子叶愈伤组织诱导率最高可达95.24%,再生频率及分化频率分别可达81.82%和104.55%;最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L NAA,生根率最高为90.0%。     

发根土壤杆菌体外转化甘草子叶及下胚轴

利用发根土壤杆菌农杆碱型15834、A_4菌株和甘露碱型8196、K_(599)菌株体外转化甘草子叶及下胚轴。结果表明:除K_(599)菌株外,其余三种菌株都能诱导产生甘草发状根无性系。其中15834菌株的诱导率最高,下胚轴的诱导率高于子叶。组织学观察表明,在感染后4天左右,下胚轴维管束鞘外细胞、特别是形成层部分细胞大量启动形成分生细胞及分生细胞团,并进一步分裂形成根原基。6—8天后根原基具单向极性生长形成完整的发状根结构。发状根能在无外源激素的培养基上迅速生长。高压纸电泳检测到发状根中存在农杆碱及甘露碱,说明Ri质粒T-DNA编码的这两种冠瘿碱合成酶基因在甘草细胞中得到了表达。     

甘蓝型油菜游离单细胞培养及植株再生

本文首次报道了甘蓝型油菜(Brassica napes）二倍体游离单细胞的培养并再生出了植株。从甘蓝型油菜下胚轴愈伤组织分离的游离单细胞在含有2mg/L 2,4-D和3mg/L BA的Nitsch培养基中作浅层液体静置培养时,可形成大量愈伤组织。在附加3mg/L BA人和2-6mg/L GA₃的MS培养基上,从这些愈伤组织中可高频率地诱导产生再生植株。从3个供试品种（Canadian twin, Altex和81008) 的游离细胞培养中,都获得了再生植株。其中Canadian twin的再生频率高达67%, Altex和81008的再生频率分别为41%和11.7%。     

影响油菜下胚轴外植体芽高频率再生的因素

以芥菜型油菜DB3 的下胚轴为外植体 ,分析了苗龄、激素、AgNO3 对油菜外植体的高频率再生的影响。结果发现 ,3～ 5d的苗用于诱导愈伤组织较佳 ,6 BA 1 .5mg/L +NAA 0 .1mg/L的组合对下胚轴芽的分化较好 ,AgNO3 可提高下胚轴芽的分化率     

甘蓝型油菜叶柄原生质体培养再生植株

Two cultivars of Brassica napus,Altex and Canadian twins,were used as materials.Protoplasts isolated from petioles of plants grown in vitro were cultured in Nitsch mediumsupplemented with 0.5mg/L BA,0.5mg/L NAA,1mg/L 2,4-D,100mg/L serine,800mg/Lglutamine,4% sucrose and 0.4mol/L mannitol.After 2 days of culture,the first division wasobserved.The division frequency estimated after 10 days of culture was 30—60%.One weekafter transferring onto MS medium containing 6mg/L GA_3 and 3mg/L BA,protoplast-derivedcalli regenerated into shoots.The regeneration frequency of the two cultivars was 24% and31% respectively.It was found that the protoplasts isolated from petioles could float on thesurface of the 3% sucrose contained solution which was very favourable both to purificationand culture of the protoplasts.     

皖油离体培养再生植株体系的建立

甘蓝型油菜(Brassica napus L.)皖油14具柄子叶为外植体,进行安徽省地方性油菜品系离体培养再生植株体系的研究.通过不同浓度的激素组合实验,结果表明:在愈伤组织诱导中,以MS-C7(MS 2 mg/L6-BA 0.2mg/L NAA 0.25 mg/2,4-D 7.5 mg/L AgNO3)培养基的出愈率最高,且可产生大量绿色芽点;以MS-B3(MS 1.0 mg/L6-BA 0.1 mg/L NAA 7.5 mg/L AgNO3)培养基的芽苗分化率最高,可分化出丛生的不定芽;生根培养基MS 0.1 mg/L NAA 7.5 mg/L AgNO3的生根率达100%.7.5 mg/L的AgNO3可以明显减少愈伤组织的褐化,良好的空气流通可以减少玻璃苗的形成.初步建立了皖油14品系的高频再生植株体系.     

大白菜下胚轴离体不定芽高效再生体系的研究

以大白菜的下胚轴为外植体,比较了不同浓度TDZ和6-BA两种细胞分裂素与不同浓度NAA相配合的培养基上不定芽再生的差异,并利用筛选出的高效再生培养基研究外植体苗龄、切段来源、接种方式以及品种对不定芽再生的影响。结果表明:与6-BA相比,TDZ对诱导下胚轴不定芽再生更有效,在M S+TDZ 0.3 m g.L-1+NAA0.5 m g.L-1+A gNO35 m g.L-1的培养基上,下胚轴不定芽再生频率高达87.8%,平均每下胚轴再生不定芽数也达到15.1个;3~5 d苗龄之间的下胚轴不定芽再生能力无显著差异,再生频率均达到80%以上,此后随着苗龄的增加,不定芽分化频率快速下降,苗龄为7 d时再生频率只有51.1%;下胚轴不同切段不定芽再生能力由强到弱表现为:上部切段>中部切段>下部切段;以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的;不同品种大白菜下胚轴的不定芽再生能力有一定差异。     

植物生长调节剂对油菜下胚轴生长及脱分化的影响（简报）

BAP和ZT可以防止油菜下胚轴的徒长.欲从萌发油菜种子得到无菌苗时可以加入0.5mg@L-1的BAP,如要用下胚轴诱导愈伤组织则宜采用1mg@L-1以上的BAP.发芽培养基中植物生长调节剂组成对下胚轴切段的脱分化能力无明显影响,但用含NAA的发芽培养基得到下胚轴切段的愈伤组织产生的根毛较多.愈伤组织诱导培养基中植物生长调节剂对下胚轴切段脱分化,以0.5mg@L-1BAP+1mg@L-1NAA+0.25mg@L-12,4-D诱导愈伤组织的作用最好,诱导率达100%,愈伤组织块大,且无根毛产生.     

结球甘蓝下胚轴原生质体培养再生植株体系的优化研究

以结球甘蓝‘新夏50’的无菌苗下胚轴为材料,对影响原生质体分离、纯化与培养的主要因素进行研究,建立适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系,为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定基础。结果表明:2.5%纤维素酶R-10+0.05%果胶酶Y-23+9CPW+5mmol/L MES的混合酶液,从4d苗龄的下胚轴上分离出高产率的原生质体。在改良B5+0.5mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA的液体培养基上,原生质体分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱导和生根培养,获得了再生植株。倍性检测结果表明,不同原生质体所获得的24株再生植株中,19株为正常二倍体,4株为嵌合体,1株为四倍体。     

甘蓝下胚轴原生质体再生植株

经纯化后,甘蓝下胚轴原生质体的产量为1．5×10⁶g^-1(Fw),采用液体浅层培养的方法进行培养。2～3d后,发生第一次分裂,第10天,统计分裂频率为6l％,5周内形成大量的细胞团和小愈伤组织,统计植板率为1．1％,把小愈伤组织转到与原生质体培养基相同激素的MS固体培养基上增殖。当愈伤组织长到3～5mm大小时,接到分化培养基上,芽分化率为46.7％．分化出来的芽长到3～4cm长时,从基部切下,插入生根培养基,两星期左右即可长成完整植株。     

白桦下胚轴再生系统的建立

本文对白桦下胚轴的再生系统作了研究。讨论了不同的基本培养基、激素组成、培养条件及外植体的生理年龄在不同阶段产生的效应。通过诱导、分化和生根阶段, 得到了再生植株, 提出了最适的基本培养基、激素组成、培养条件及下胚轴外植体的生理年龄, 为白桦的遗传转化奠定了基础。     

桃下胚轴高频离体再生体系的建立及优化

以6个桃品种的下胚轴为外植体,研究不同基因型、不同基本培养基及植物生长调节物质组合等对桃下胚轴离体再生不定芽的影响.结果显示:不同基因型桃下胚轴再生率差异显著;QL为'97-8-4'和'甜桃王'的最适基本培养基,MS为'金童5号'的最适基本培养基;植物生长调节物质用2.0 mg/L BA+0.04 mg/L NAA或单独使用2.0 mg/L BA的再生效果好.'97-8-4'在QL+2.0 mg/L BA+0.04 mg/L NAA+100 mg/L肌醇的培养基中再生率最高,为94.44%;'甜桃王' 在QL+2.0 mg/L BA+0.04 mg/L NAA+100 mg/L肌醇+500 mg/L CH的培养基中再生率最高,为80.42%;'金童5号'在QL+2.0 mg/L BA+0.04 mg/L NAA+200 mg/L肌醇的培养基中再生率最高,为78.00%.     

甘蓝型油菜(Brassica napus L.)胚胎发育过程中子叶叶肉细胞的超微结构观察

用透射电镜观察了开花后20天、30天和50天的甘蓝型油菜子叶叶肉细胞的超微结构。鱼雷形胚时子叶细胞中富含核糖体和内质网并开始形成脂体。蛋白质的积累迟于油脂,开花后30天时液泡中出现蛋白质体。胚成熟时细胞中大量脂体相互挤压成多边形并围绕在蛋白质体周围,少有细胞器。整个观察过程中质体始终缺乏精细的片层结构,胚成熟时细胞中质体数显著减少。对质体在胚胎发育过程中的功能及其与低亚麻酸育种的关系进行了讨论。     

枫香下胚轴的离体培养和植株再生

1　植物名称　枫香 (Ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｆｏｒｍｏｓａｎａ)。2　材料类别　无菌种子萌发后的幼苗下胚轴。3　培养条件　 ( 1 )无菌种子萌发培养基 :ＭＳ ;( 2 )不定芽诱导培养基 :1 /2ＭＳ 6 ＢＡ0 .5、1 .0、2 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 0 .1 ;( 3)不定芽增殖培养基 :1 /2ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 ＮＡＡ 0 .1 ＧＡ 30 .5 ;( 4 )生根培养基 :ＷＰＭ ＩＢＡ 2 .0。所有培养基蔗糖均为 3% ,琼脂 0 .65 % ,ｐＨ 5 .8,1 2 1℃高温、高压灭菌 1 6ｍｉｎ。培养温度 2 4～ 2 6℃ ,光照 1 6ｈ·ｄ- 1 ,光照度 2 0 0 0ｌｘ左右。4　…     

马铃薯实生苗子叶及下胚轴原生质体培养研究

用马铃薯普通栽培种（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ Ｌ．）３ 个品系的实生苗刚展开的子叶及下胚轴游离和培养原生质体。实验结果表明,子叶及下胚轴原生质体的分裂频率显著地高于经多次继代繁殖的试管苗顶部幼嫩叶片和茎尖的原生质体;在强连续光照下培养的实生苗,其原生质体的产量和质量都显著地高于弱光下培养的;在完全黑暗下培养的黄化实生苗不能游离出完整的原生质体;酶解前对子叶及下胚轴切段在酶液中进行真空渗透处理能显著地提高原生质体的产量,但此种处理对试管苗叶片无明显效果;下胚轴原生质体的产量显著地高于子叶,但在原生质体的质量方面,这两种组织间无明显的差异