BRCA1的生物学特性研究进展

本文综述了乳腺癌易感基因ＢＲＣＡ１生物学特性研究进展。在阐明ＢＲＣＡ１基因结构特点的基础上,着重了它作为一种新的肿瘤抑制基因在细胞生长发育,核转录调控及ＤＮＡ损伤修复中的作用。     

BRCA1基因结构及其在乳腺癌中的表达

利用ＭＰＣＲ技术从乳腺组织分离到抑癌基因ＢＲＣＡ１的ｃＤＮＡ片段,将此９１４ｂｐ的片段克隆进质粒ｐＵＣ１１８,并经全序列测定证实。序列分析表明,ＢＲＣＡＩｃＤＮＡ编码的肽链ＮＮ２－末端有一锌指结构,抑癌基因ＢＲＣＡＩ的产物可能是ＤＮＡ结合蛋白,ｃＤＮＡ序列存在两个变异位点：一个是第４０９位的Ｃ→Ａ（Ａｓｐ→Ｇｌｕ）：另一个是第８７９位的Ａ→Ｔ（ＭＩａ同义突变）。以该片段为探针,检测６例乳腺癌组织中ＢＲＣＡＩｍＩＭＡ表达,一例表达明显下降,一例没检测到表达的ｍＩＭＡ产物,说明一些乳腺癌组织的ＢＲＣＡ１基因转录水平降低     

乳腺癌易感基因研究进展

Ｂｒｃａ１和Ｂｒｃａ２是乳腺癌易感基因,在家族性乳腺癌患者中的突变是可以遗传的,在散发性乳腺癌患者中有杂合性丢失（ＬＯＨ）,而且表达水平下降。体外实验证明,Ｂｒｃａ１能抑制乳腺癌和卵巢癌细胞的增殖。Ｂｒｃａ１和Ｂｒｃａ２基因分别定位于１７ｑ１２－２１和１３ｑ１２－１３,编码序列分别为５７１１ｂｐ和１０９８７ｂｐ,其表达有一定的组织特异性。ＢＲＣＡ１和ＢＲＣＡ２蛋白分别由１８６３个氨基酸和３４１８个氨基酸组成,这两个蛋白都具有Ｇｒａｎｉｎ蛋白的某些特征。它们的功能目前还不是很清楚,但有证据表明这两个基因为生长发育所必须,并参与细胞增殖分化和ＤＮＡ损伤修复等生命活动。     

BRCA1与小鼠胚胎存亡有关

ＢＲＣＡ１与小鼠胚胎存亡有关肿瘤抑制基因ＢＲＣＡ１发现后,有３个研究组鉴定了ＢＲＣＡ１的２２处突变。这些突变的任何一种都会使人一生中有８５％患乳癌的危险。美国北卡罗莱纳大学ＣｈａｐｅｌＡｉｌｌ医学院的ＢｅｖｅｒｌｙＫｏｌｌｅｒ及其同事用遗传工程方法首...     

BRCA2研究的进展

ＢＲＣＡ２研究的进展现在华盛顿大学的Ｍａｒｙ－ｃｌａｉｒｅＫｉｎｇ于１９９０年报道了一个位于人１７号染色体的乳癌易感基因ＢＲＣＡ。１９９４年犹太大学医学院的ＭａｒｋＨ．Ｓｋｏｌｎｉｃｋ研究组分离到了这个基因,名为ＢＲＣＡ１。同时,Ｓｋｏｌｎｉｃｋ与英...     

直接作用于DNA修复的抗癌蛋白

1994年科学家首次认识到ＢＲＣＡ1基因突变可引起遗传性乳癌 ,后来别的科学家发现某些有该缺陷基因的妇女并无乳癌的家族史。现在科学家估计所有遗传性乳癌中约有 5 0 %是由ＢＲＣＡ1基因突变引起的 ,而几乎所有兼有卵巢癌与乳癌家族史的家族成员都携带ＢＲＣＡ1基因。ＢＲＣＡ1基因在正常时编码一个肿瘤抑制蛋白ＢＲＣＡ1。先前的遗传学研究提示该蛋白质抵抗癌症是靠其帮助修复损伤的ＤＮＡ。新近有遗传学证据证明 ,缺乏该蛋白质的小鼠暴露于放射线后便发生高比率ＤＮＡ突变。而且ＢＲＣＡ1基因在哺乳类基因组中的位置靠近其他的ＤＮＡ修复…     

乳腺癌易感基因研究进展

Ｂｒｃａｌ和Ｂｒｃａ２是乳腺癌易感基因,在家族性乳腺癌患者中的突变是可以遗传的,在散发性乳腺癌患者中有杂合性丢失（ＬＯＨ）,而且表达水平下降,体外实验证明,Ｂｒｃａｌ能抑制乳腺癌和卵巢癌细胞的的增殖。Ｂｒｃａｌ和Ｂｒｃａ２基因分别定位于１７ｑ１２－２１和１３ｑ１２－１３,编码序列５７１１ｂｐ和１０９８７ｂｐ,其表达有一定的组织特异性。ＢＲＣＡ１和ＢＲＣＡ２蛋白分别由１８６３个氨基酸和３４１８个氨基     

BRCA1在非遗传性癌症中的作用

ＢＲＣＡ１在非遗传性癌症中的作用ＢＲＣＡ１是新近发现的肿瘤抑制基因,乳房或卵巢细胞若缺少它所产生的蛋白质便会生长失控。去秋科学家宣告它与某些遗传性乳癌和卵巢癌有关。今年４月的《ＮａｔｕｒｅＧｅｎｅｔｉｃｓ》则报道：有两个研究组认为,至少有１０％非遗传...     

Epstein—Barr病毒BCRF1基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达

应用基因重组技术,把编码ＥＢ病毒早期蛋白的ＢＣＲＦ１基因重组于真核表达载体ｐＳＧ５中,并使该基因在乳地鼠肾（ＢＨＫ）传代细胞中获得良好表达,表达率为０．５％。血清学实验证实,鼻咽癌、类风湿性关节炎病人和正常人血清中均不同程度地含有ＩｇＧ／ＢＣＲＦ１抗体,抗体阳性率分别为９２％、８６％和７７％,几何平均滴度（ＧＭＴ）分别是１：１６．３５、１：１４．７２和１：１０．１５。两组病人和正常人血清中ＩｇＡ／ＢＣＲＦ１抗体阳性率和滴度之间有较大差别,它们的阳性率分别是７４％、７１％和１２％,ＧＭＴ分别是１：１２．３２,１：１０．５６和１：２．３５。还证实,鼻咽癌和类风湿性关节炎病人血清中ＩｇＡ／ＢＣＲＦ１和ＩｇＡ／ＥＡ（早期抗原）抗体阳性率和滴度间有很好的相关性,此为首次报导。重组表达质粒ｐＳＧ５－ＢＣＲＦ１的构建和表达为进一步研究ＢＣＲＦ１基因在病毒感染和肿瘤免疫中的作用创造了条件。本文就质粒的构建和３组血清中ＩｇＡ／ＢＣＲＦ１、ＩｇＡ／ＢＣＲＦ１、ＩｇＡ／ＥＡ和ＩｇＧ／ＢＣＲＦ１抗体间的关系和有关问题进行了讨论。     

乳腺癌组织中ER、PR和CEA相关性研究

应用免疫组化技术亲和组化法和ＡＢＣ法,检测了１０６例乳腺癌组织中ＥＲ、ＰＲ和ＣＥＡ水平。其阳性率依次为８３％、８１．１％和８８．７％。其中７９．２％的乳腺癌ＥＲ和ＰＲ表达一致。在９８例ＥＲ和／或ＰＲ阳性乳腺癌中有９２例（９３．９％）呈ＣＥＡ阳性,８例ＥＲ和ＰＲ阴性乳腺癌中６例（７５％）为ＣＥＡ阴性,８９％乳腺癌ＣＥＡ与ＥＲ和ＰＲ表达一致。在癌的分级表达中,随着癌的组织学分级增高ＣＥＡ阳性率增高,而ＥＲ和ＰＲ阳性率减低。结果表明,乳腺癌ＥＲ、ＰＲ和ＣｈＡ表达可反映肿瘤的不同生物学特征。同时检测三者对选择内分泌治疗及判断预后更有意义。     

肿瘤易感基因BRCA1

ＢＲＣＡ１为一新的肿瘤易感基因，定位在１７ｑ２１，其ｃＤＮＡ可转录７．８ｋｂｍＲＮＡ，编码含１８６３个氨基酸残基的长多态，在遣传性乳腺卵巢癌中有高频率的ＢＲＣＡ１基因杂合性丢失，同时有多形式多位点的基因突变，符合肿瘤抑制基因特点。     

去甲肾上腺素对棕色脂肪组织募集反应的调节作用

去甲肾上腺素（ＮＡ）可引起棕色脂肪组织（ＢＡＴ）的产热作用,也是ＢＡＴ募集反应主要的调节物质。ＢＡＴ中存在的肾上腺素受体（ＡＲ）至少包括α１,α２,β１和β２四型。ＢＡＴ的产热作用主要由β３－ＡＲ介导;其细胞增殖和细胞分化分别由β１－ＡＲ和β３－ＡＲ介导。与ＢＡＴ募集有关的几种转录因子的表达也受ＮＡ的调控,例如ｃ－ｆｏｓ和非成熟细胞Ｃ／ＥＢＰα基因的表达受β－和α１－ＡＲ的调节;Ｃ／ＥＢＰβ和成熟     

乳腺特异性表达172~（HIS）突变型p53转基因鼠的建立

ｐ５３基因突变几乎存在于所有人类肿瘤中,尤其与严重危害妇女健康的恶性肿瘤──乳腺癌关系密切。研究表明：野生型ｐ５３基因是抑癌基因,而突变型ｐ５３基因则是癌基因──呈显性负调控突变型。本研究首次构建了这种类型的１７２ＨＩＳ突变型ｐ５３基因的转基因鼠,用以研究ｐ５３基因突变与乳腺癌发生的关系。用重组ＰＣＲ法把小鼠ｐ５３基因的第１７２个密码子ＣＧＣ突变成ＣＡＣ（由编码精氨酸突变为编码组氨酸）,得到１７２ＨＩＳ突变型ｐ５３基固。将其插入到大鼠乳清酸性蛋白（ＷＡＰ）启动子与ＳＶ４０ｐｏｌｙ（Ａ）信号序列之间。获得置于载体ｐＢＬ１１９（Ｆｉｇ．１）上的表达结构ＷＡＰ－１７２ＨＩＳｍｔｐ５３－ＳＶ４０。经过ＢｓｓＨＩＩ酶切,纯化该表达结构部分。通过显微注射,将其分别导入ＦＶＢ和Ｃ５７ＢＬ品系小鼠受精卵中,获得３２只Ｆ０代鼠。经ＰＣＲ鉴定,其中９只为转基因阳性鼠（Ｆｉｇ．２）。对其进行的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析（Ｆｉｇ．３）证实了ＰＣＲ的鉴定,并得出了每只鼠中整合的转基因拷贝数（Ｔａｂｌｅ１）。当这９只鼠哺乳第二天时,取乳腺制备ＲＮＡ,进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析,其中５只的乳腺中有转基因表达,其中３只呈较高水平表达（Ｆｉｇ．     

抑制Pm8抗性表达的遗传学研究及Pm8抗性抑制基因的染色体定位

对不同１ＢＬ·１ＲＳ易位系品种中Ｐｍ８抗性表达的差异进行了遗传学及生化研究。结果表明,小麦抗白粉病基因Ｐｍ８位于１ＲＳ染色体上,但在一些１ＢＬ·１ＲＳ易位系品种中,Ｐｍ８的抗性表达受一对位于小麦染色体组中的显性抑制基因所控制。生化研究结果显示,在种子蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱上的低分子量区域,有一条醇溶蛋白带（称为ＳＢ带）与Ｐｍ８的抗性表达紧密相关。所有ＩＢＬ·ＩＲＳ感白粉病基因型都含有ＳＢ带。利用ＳＢ蛋白带做生化标记,可以准确预测１ＢＬ·１ＲＳ易位系品种对白粉病的抗感性。通过时１ＢＬ·１ＲＳ易位系品种格蓝森８１单体１Ａ种质的综合分析,进一步将Ｐｍ８抗性抑制基因定位于其相应的部分同源染色体１Ａｓ上。这一结果可能预示着小麦部分同源染色体之间的某些内在联系。     

黄瓜AGAMOUS同源基因的分离和表达(英文)

黄瓜花发育的早期均有雌蕊和雄蕊原基的分化,但在发育过程中,由于雌蕊或雄蕊的发育受到阻滞,导致雄花和雌花的形成。近年来在拟南芥和金鱼草等植物中遗传学的研究表明,花器官的特征是由同源异形基因决定的。在拟南芥中,由于ＡＧ在决定雄蕊和雌蕊特征方面起重要作用,本研究利用 ＲＴ－ＰＣＲ技术,从黄瓜的雌、雄蕊中分离出 ＡＧ的同源基因,并对其在花发育过程中的表达和可能作用进行了分析。首先,根据ＡＧ同源基因的保守区域设计５’简并引物５’－ＧＡ（Ａ／Ｇ）ＡＴ（Ｔ／Ｃ／Ａ）ＡＡ（Ｔ／Ｃ／Ａ）ＡＡ（Ｇ／Ａ）（Ａ／Ｃ）Ｇ（Ｇ／Ｔ／Ｃ）ＡＴＣＧＡ（Ｃ／Ａ）ＡＡＣ－３’,然后进行３’,ＲＡ ＣＥ ＰＣＲ,扩增出约１ｋｂ大小的片段,序列分析表明该片段含有非常保守的ＭＡＤＳ ｂｏｘ。进而,利用５’ ＲＡＣＥ ＰＣＲ得到全长度的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ的核苷酸序列与ＣＵＭ１（黄瓜 ＭＡＤＳ ｂｏｘ ｇｅｎｅ１）同源性高达９７％。 ＣＵＭ１在接牵牛中过量表达可引起花萼变为心皮状和花瓣变为雄蕊,说明ＣＵＭ１为ＡＧ的同源基因。基于该基因与ＣＵＭ１序列上的高度同源,我们认为其为黄瓜的ＡＧ同源基因。该基因命名为ＣＭＢ１,基因银行登记号为ＡＦ２８６６４９。Ｓｏｕｔｈｅｒ     

中国人群的等位基因地理分布图

发表了我国首批绘制的人类基因地理分布图,包括１２个等位基因,即ＡＢＯ系统的Ｉ＾Ｂ,Ｉ＾Ｏ,ＭＮＳ系统的ｍ,Ｒｈ－Ｄ,ＨＬＡ系统的Ａ１与Ａ１１,人体免疫球蛋白的Ｇｍ＾１;２１与Ｇｍ＾１,３;５,ＡＫ＾１,Ｇ６ＰＤ缺陷型,以及ＰＴＣ味盲基因。这些基因地理不仅显示了等位基因的地理分布状况,也可用于研究某些等位基因的起源与扩散,基因流动以及某些环境因子通过选择对某些等位基因频率的影响。     

抗旱基因HDCS1的植物表达载体构建

在克隆了二棱大麦第３组ＬＥＡｃＤＮＡ,抗旱基因ＨＤＣＳ１的基因上,将其连接于ｐＢ１１２１的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子和ＮＯＳ终止子之间,,构建了ＨＤＣＳ１的植物表达载体ｐＢＨＣ,并进行了ＰＣＲ和酶切鉴定,为进行植物抗旱基因工程研究创造了条件。     

抑制肺癌及乳癌的基因

许多基因编码抑制细胞生长的蛋白质 ,这些基因中的某些基因抑制肿瘤生长 .以前发现ＢＲＣＡ1基因抑制乳癌生长 ,现发现基因ＲＡＳＳＦ1Ａ也是这种基因 .在 2 0 0 1年 5月 2日的ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅ上报道的一项研究确认 ,许多肺癌与乳癌缺乏有功能的ＲＡＳＳＦ1Ａ .研究者发现 ,将恢复ＲＡＳＳＦ1Ａ功能的人癌细胞移植到小鼠体内 ,可防止小鼠发生肿瘤 .研究者用外科手术从肺癌和乳癌病人身上取得癌细胞来创建可在实验室生长的细胞系 .从小细胞肺癌病人取得的 32个细胞系中的ＲＡＳＳＦ1…     

乳腺癌ConA、LCA、PSA免疫组化研究

运用ＡＢＣ法研究５０例乳腺癌三种凝集素受体（Ｌｅｃｔｉｎ－Ｒ）的表达,并以乳腺纤维瘤和乳腺小叶增生症各１０例作为对照。结果表明：该三种凝集素受体在乳腺良、恶性病变中的表达率无显著性差异。ＣＯｎＡ－Ｒ在乳腺癌以胞浆型定位为主,在纤维腺瘤则以胞膜型多见（Ｐ＜０．０５）。ＬＣＡ－Ｒ和ＰＳＡ－Ｒ在乳腺三种病变中均以胞浆型为主。ＣｏｎＡ－Ｒ与乳腺癌分化程度具良好的相关性;ＬＣＡ－Ｒ与乳腺癌瘤体大小有关。该三种凝集素受体与ＥＲ、ＰＲ及ＣＥＡ的表达未显示密切的关联。     

CAAT结合蛋白CBF在转录中的作用

ＣＡＡＴ结构是一种在真核生物启动子中普遍存在的顺式作用元件。ＣＢＦ,又称为ＮＦ -Ｙ、ＣＰ１,是一个ＣＡＡＴ特异性转录因子。在转录过程中 ,ＣＢＦ与ＣＡＡＴ特异性结合 ,共同调控启动子的转录 ,本文综述了ＣＢＦ的结构及其在转录中的作用。１ＣＡＡＴ结构ＣＡＡＴ结构存在于由ＲＮＡ聚合酶Ⅱ所转录的大多数真核生物基因的近端启动子中〔１〕,它与其他的启动子元件相互协调 ,一起控制启动子的转录活性。在高等的真核细胞启动子中 ,ＣＡＡＴ一般位于 -８０区〔２〕。对不同物种的某些基因进行比较 ,发现ＣＡＡＴ结构在启动子上的位置以…