HIV－1共受体基因定位

ＨＩＶ－１共受体基因定位美国国立癌症研究所米歇尔·迪安及其同事已将ＨＩＶ－１共受体（Ｆｕｓｉｎ和ＣＫＲ－５）的基因定位。Ｆｕｓｉｎ基因定位在染色体２ｑ２１止,靠近ＩＬ－８Ｒ（ＩＬ－８ＲＡ和ＩＬ８ＲＢ）基因;ＣＫＲ５基因定位在染色体３Ｐ２１上,非常接近...     

小干扰RNA干扰缺氧诱导因子-1alpha增强口腔鳞癌细胞株化疗敏感性

目的：探讨针对缺氧诱导因子－１α（ＨＩＦ－１α）的小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）对口腔鳞癌细胞（ＯＳＣＣ）化疗敏感性的影响。方法：用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测ＯＳＣＣ和针对ＨＩＦ－１α基因的ｓｉＲＮＡ导入ＯＳＣＣ后的ＨＩＦ－１α蛋白表达水平;用ＭＴＴ法检测细胞对化疗敏感性的影响;用流式细胞术检测化疗诱导细胞凋亡的凋亡率。结果：ＨＩＦ－１α在ＯＳＣＣ中高表达,ＨＩＦ－１α－ｓｉＲＮＡ转染后ＨＩＦ－１α表达水平明显下降,细胞对化疗敏感性明显提高,化疗诱导肿瘤细胞凋亡率明显增加。结论：针对ＨＩＦ－１α基因的ｓｉＲＮＡ能明显降低ＨＩＦ－１α的表达,增强化疗对ＯＳＣＣ的凋亡诱导作用,有效提高ＯＳＣＣ对化疗的敏感性。     

人免疫缺陷病毒1型Rev单链抗体细胞内免疫抗病毒基因治疗研究

应用抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗体细胞内免疫方法,研究在人Ｔ细胞和周围血淋巴单核细胞内抗病毒复制的效果,探讨细胞内免疫抗ＨＩＶ－１基因治疗的可行性。克隆抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗抗体（ｓＦｖ）基因,以逆转录病毒为基因载体,将名装后的含靶基因的逆转录病毒转导至人ＣＤ４阳性Ｔ－细胞株ＣＥＭ和ＳｕｐＴ１,以及ＨＩＶ－１阴性自愿者的周围血淋巴单核细胞（ＰＢＭＣ）,再分别用不同剂量（ＭＯＩ）的ＨＩＶ－１病毒株ＰＮ     

从一名国内感染的艾滋病人分离人免疫缺陷病毒（HIV）

从一名国内感染的艾滋病人采血,分离其外周血单核细胞（ＰＭＣｓ）。首先与正常的ＰＭＣｓ共培养,４周后检测其ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ）达到峰值。用此时的细胞及其上清分别感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ、ＣＥＭ、ＭＴ４细胞,可很快地在这三株细胞中检测到ＨＩＶ生长,ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中生长情况最好,同时用病人血清直接感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ和ＭＴ４细胞,４周后检测其细胞上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）为阳性,但ＯＤ值很低（约为ＰＭＣ共培养组的一半）。用病人的少量全血与正常ＰＭＣｓ共培养,得到的结果与分离病人ＰＭＣｓ法相近。应用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）、免疫酶法（ＩＥＡ）、蛋白印迹法及ＨＩＶ－１ＰＯｌ基因和Ｅｎｖ基因特异引物的聚合酶链反应（ＰＣＲ）等证实为ＨＩＶ－１病毒。分离的ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中连续传代,细胞被感染后２－３天即出现以大量融合细胞为主的细胞病变,感染后７－１０天细胞几乎全部死亡。病毒在连续传代过程中的生长特征及致细胞病变特征不变。此病毒命名为ＣＡ－２毒株。     

HIV—1 SF2株env基因（120）在大肠杆菌中的表达

运用基因重组技术,将ＨＩＶ－１ ＳＦ２株编码外膜蛋白ｇｐ１２０的ｅｎｖ基因片段与原核载体ｐＢＶ２２０进行重组,构建成质粒ｐＢＶＳＦ２ｅｎｖ,并在大肠杆菌（Ｅ．ＣｏｉｌＤＨ１０ｂ）中获得表达,经Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ反应证实,该重组蛋白与来自ＨＩＶ－１感染者的血清（含多克隆抗体）发生特异性反应。     

BIV—1—gp120在重组杆状病毒系统中的表达

将中国株ＨＩＶ－１Ｂ亚型ｇｐ１２０全基因序列克隆到杆状病毒转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＩ中多角体启动子下游,构建成重组转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＩ－ｇｐ１２０,利用细菌／杆状病毒（Ｂａｃ ｔｏ Ｂａｃ）表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞Ｓｆ９中高效表达了ＨＩＶ－１的外膜糖蛋白ｇｐ１２０,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果一致,证明表达了２种糖基化程度不同的ｇｐ１２０。     

海南哥纳香化学成分研究（Ⅱ）

从海南哥纳香（Ｇｏｎｉｏｔｈａｌａｍ ｕｓｈｏｗ ｉｉＭｅｒｒ． ｅｔＣｈｕｎ）的种子分离到结晶Ｖ、ＶＩ和ＶＩＩ。根据它们的ＩＲ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、ＭＳ分析及衍生物光谱分析,它们均属番荔枝内酯的新类型——裂双四氢呋喃型番荔枝内酯。晶Ｖ和晶ＶＩ分别命名为海南哥纳香丁素（ｈｏｗ ｉｉｃｉｎ Ｄ）和戊素（ｈｏｗ ｉｉｃｉｎ Ｅ）。晶ＶＩＩ系两个平面结构相同的化合物海南哥纳香己素和庚素（ｈｏｗ ｉｉｃｉｎｓ Ｆ,Ｇ）的混晶     

天然及氧化修饰脂蛋白对人动脉平滑肌细胞原癌基因表达的影响

动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）的增殖在动脉粥样硬化（ＡＳ）的形成过程中极其重要。我们在建立人主动脉ＳＭＣ体外培养方法的基础上,观察了ＬＤＬ,ＶＬＤＬ及ＨＤＬ和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,Ｈ－ｒａｓ原癌基因及Ｒｂ抗癌基因转录表达的影响。结果表明：（１）ＨＤＬ对ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,ｒａｓ基因表达无影响;（２）ＬＤＬ和ＶＬＤＬ有使这些基因表达增加的趋势;（３）ｏｘ－ＬＤＬ,ｏｘ－ＶＬＤＬ和ｏｘ－ＨＤＬ具有使ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ,和ｒａｓ基因表达显著增强的作用（Ｐ＜０．０１）,且其作用较相应的天然脂蛋白大（Ｐ＜０．０１）;（４）天然和氧化修饰型脂蛋白对Ｒｂ基因表达均无影响。据上述结果推测：ＬＤＬ,ＶＬＤＬ,ｏｘ－ＬＤＬ,ｏｘ－ＶＬＤＬ和ｏｘ－ＨＤＬ的致ＡＳ作用可能与刺激ＳＭＣｓｉｓ,ｊｕｎ和ｒａｓ原癌基因表达增加有关。     

广东两株人免疫缺陷病毒的分离和鉴定

从我省两名经性途径感染艾滋病的病人中采血,分离外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）,将其与正常人ＰＢＭＣｓ共培养分离人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）,３周后检测上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）超过阈值。将共培养第四周细胞和上清分别感染Ｈ９细胞（Ｔ细胞淋巴瘤传代细胞）,一周后检测ＨＩＶ－１ ｐ２４怕,证明有病毒生长。用ＨＩＶ－１ ＥＮＶ基因引物的套式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）证实,两株新分离的病毒     

几种细胞因子对HSV—1感染单核巨噬细胞的影响

以ＨＳＶ－１接种人单核细胞系Ｕ９３７和小鼠腹腔巨噬细胞，并在接种前后分别以不同的细胞因子处理，经病毒滴定，免疫荧光试验检测病毒抗原及多聚酶链反应技术检测病毒基因研究了细胞因子对ＨＳＶ－１感染单核巨噬细胞的影响。结果证实，ＴＮＰ－α５０ｕ／ｍＬ，Ｍ－ＣＳＦ２００ｕ／ｍＬ，ＩＦＮ－γ１０００ｕ／ｍＬ，ＩＦＮ－α１０００ｕ／ｍＬ均能增强单核巨噬细胞对ＨＳＶ－１的抗性，加速细胞对ＨＳＶ－１ＤＮＡ的清除，抑     

氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响

动脉平滑肌细胞（ｓｍ ｏｏｔｈ ｍ ｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）是动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）斑块中的主要细胞,它的增殖在ＡＳ形成过程中极其重要．利用体外培养的人主动脉ＳＭＣ,观察了天然高密度脂蛋白（ｎａｔｉｖｅ ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｎ－ＨＤＬ）及氧化修饰ＨＤＬ（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ＨＤＬ,ＯＸ－ＨＤＬ）对培养人主动脉ＳＭＣ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１（细胞周期蛋白Ｄ１）基因转录表达的影响．结果表明：（１）Ｎ－ＨＤＬ对ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达无影响（Ｐ＞ ０．０５）;（２）ＯＸ－ＨＤＬ使ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达显著增强（Ｐ＜０．０１）,其表达量随时间（２、１２、２４ ｈ）延长而增加．上述结果表明,ＯＸ－ＨＤＬ的致ＡＳ作用可能与其刺激ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达增加有关．     

化学趋化因子受体在HIV感染中的作用及其在AIDS治疗中的应用价值

化学趋化因子受体作为协同受体,为人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）进入细胞所必需。其中ＣＸＣＲ４被亲Ｔ细胞的病毒株利用,而ＣＣＲ５被亲巨噬细胞的病毒株利用,它们是大多数病毒株利用的协同受体。协同受体和ＣＤ４一起形成复合受体,ｇｐ１２０与之结合后发生构象改变,使ｇｐ４１暴露出来,引起膜的融合。ＨＩＶ协同受体发现为治疗艾滋病开辟了新的途径。利用趋化因子拮抗剂、单克隆抗体和天然配体封闭趋化因子受体可阻止ＨＩＶ     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究

从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性,分别记为：ＣＦＰｇ,ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系,考察了在ＳＤＳ和不同抑制剂存在下各种活性的变化．结果表明,ＳＤＳ可以增强ＣＦＰｇ活性且使得ｅ－ＰＡ变得对一些抑制剂更敏感;ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ,ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ,ｐｅｐｓｔａｔｉｎ,ａｐｒｏ－ｔｉｎｉｎ,ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌｆｌｕｏｒｉｄｅ（ＰＭＳＦ）和ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ（ＤＴＴ）对ｕＣＦ没有影响;ｐｅｐ－ｓｔａｔｉｎ能增强ＣＦＰｇ和ｕＣＦＰｇ活性,Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）能增强ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ活性．这些现象说明不能简单将ｅ－ＰＡ归结为丝氨酸蛋白酶或巯基蛋白酶．此外又以纤溶酶原为底物,分析了ｅ－ＰＡ在体外降解天然蛋白质的肽键特异性,结果表明：ｅ－ＰＡ可以切割碱性氨基酸,小的中性氨基酸及Ｍｅｔ的羧基端,同时ｅ－ＰＡ确能将纤溶酶原切割为纤溶酶;这一结论为ｅ－ＰＡ有可能成为新型溶栓药物提供了生化基础．     

鸡减蛋综合征病毒（EDSV—76）基因组E1区结构特点分析

ＥＤＳＶ－７６病毒中国株ＡＡ－２经常规方法提取其病毒ＤＮＡ后,建立了限制性内切酶ＰｓｔＩ水解片段的全基因文库。对其中ＰｓｔＩ－Ｇ片段和ＰｓｔＩ－Ａ片段的正反链进行序列测定,获得ＥＤＳＶ Ｅ１区（０－８．８ｍ．ｕ）的核苷酸序列。经分析,ＥＤＳＶ Ｅ１区具有与其他腺病毒Ｅ１区类似的结构。以大于６０个氨基酸残基为标准,ＥＤＳＶ Ｅ１区共有７个开放读码框架（ＯＲＦ）,其中Ｒ１、Ｒ２、ＥｌｂｓＴ和Ｅ１ｂ１Ｔ     

高活性重组hG-CSF的制备

我们构建了新的硫氧还蛋白（Ｔｈｉｏｒｅｄｏｘｉｎ）融合表达载体ｐＥＴＴｒｘＬ和ｐＥＴＴｒｘ－ＨｉｓＬ,它们可使功能蛋白在大肠杆菌胞质中以可溶性形式高效表达。利用此表达系统成功地获得的ｈＧ－ＣＳＦ－硫氧还蛋白融合蛋白的高效可溶性表达,表达水平达总细胞可溶蛋白的４１％以上。所表达的ｈＧ－ＣＳＦ－硫氧还蛋白融合蛋白可通过Ｃｕ２＋－ＩＤＡＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ固相金属螯合层析柱,方便地从细胞破碎可溶上清中直接纯化。所获得的融合蛋白具有ｈＧ－ＣＳＦ特异的生物活性,其比活性达到０．５－１．３３×１０７ｕ／ｍｇ融合蛋白。这样表达的ｈＧ－ＣＳＦ融合蛋白能被ＩｇＡ蛋白酶特异地切割,将ｈＧ－ＣＳＦ从融合蛋白上切下获得与天然蛋白一级结构完全一致的重组ｈＧ－ＣＳＦ 。     

独墅湖颤蚓翻新底泥量的估算

独墅湖颤蚓翻新底泥量的估算曹勇（苏州城建环保学院,２１５００８）ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＥｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＳｅｄｉｍｅｎｔＲｅｎｅｗａｌｂｙＴｕｂｉｆｉｃｉｄｓｉｎＤｕｓｈｕＬａｋｅ￥ＣａｏＹｏｎｇ（ＳｕｚｈｏｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＵｒｂａｎＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ,２１５００８）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（１）：５６－５８。Ｔｕｂｉｆｉｃｉｄｓａｒｅｓａｍｐｌｅｄｍａｉｎｌｙａｔａｎｉｎｔｅｒｖａｌｏｆｔｗｏｍｏｎｔｈｓｉｎ１９８４．ＳｉｘｓｐｅｃｉｅｓａｒｅｆｏｕｎｄｉｎｔｈｅｓｅｄｉｍｅｎｔｏｆＤｕｓｈｕｌａｋｅ,ａｎｄＬｉｍｎｏｄｒｉｌｕｓｈｏｆｆｍｅｉｓｔｒｉａｎｄＢｒａｎｃｈｕｒａｓｏｗｅｒｂｙｉａｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｓｐｅｃｉｅｓ．Ｔｈｅｄｅｆｅｃａｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｔｈｅｓｅｔｗｏｓｐｅｃｉｅｓａｒｅｍｅａｓｕｒｅｄａｎｄｔｈｅａｍｏｕｎｔｓｏｆｓｅｄｉｍｅｎｔｒｅｎｅｗａｌａｒｅｅｓｔｉｍａｔｅｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｔｕｂｉｆｉｃｉｄｓ,ｌａｋｅｓｅｄｉｍｅｎｔ,Ｄｕｓｈｕｌａｋｅ．水栖寡毛类     

从一名国内感染的艾滋病人分离人免疫缺陷病毒

从一名国内感染的艾滋病人采血,分离其外周血单核细胞。首先与正常的ＰＭＣｓ共培养,４周后检测其ＨＩＶ－１ｐ２４抗原达到峰值。用此时的细胞及其上清分别感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ,ＣＥＭ,ＭＴ４细胞,可很快地在这三株细胞中检测到ＨＩＶ生长。ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中生长情况最好。同时用病人血清直接感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ和ＭＴ４细胞,４周后检测其细胞上清ＨＩＶ－１Ｐ２４抗原为阳性,但ＯＤ值很低。用     

虎斑颈槽蛇胸腺APUD细胞的免疫组织化学观察

虎斑颈槽蛇胸腺ＡＰＵＤ细胞的免疫组织化学观察ＴＨＥＩＭＭＵＮＯＨＩＳＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＴＨＹＭＩＣＡＰＵＤＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＳＮＡＫＥＲＨＡＢＤＯＰＨＩＳＴＩＧＲＩＮＡＫｅｙｗｏｒｄｓＲｈａｄｂｄｏｐｈｉｓｔｉｇｒ...     

白介素10的临床应用研究

１９８９年,Ｆｉｏｒｅｎｔｉｏ等发现Ｔｈ２细胞分泌一种能抑制Ｔｈ１细胞功能的未知因子,称为细胞因子合成抑制因子（ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｙｎｔｈｅ－ｓｉｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＣＳＩＦ）。Ｍｏｏｒｅ等发现ＣＳＩＦ与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）中ＢＣＲＦ－...     

缺氧诱导因子1和红细胞生成素3‘—增强子调节内皮细胞？…

目的和方法：将红细胞生成素（ＥＰＯ）３＇－增强子野生片断及点突变片断借脂质体主人脐静脉内皮细胞株ＥＣＶ－３０４,用半定量ＲＴ－ＰＣＲ测定正常秘缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）诱导剂氧化钴（ＣｏＣｌ２）作用下培养６ｈ的细胞环氧合酶２（ＣＯＸ－２）和血栓素合酶（ＴＸＳ）的ｍＲＮＡ。结果：ＨＩＦ－１诱导剂ＣｏＣｌ２可放ＣＯＸ－２和ＴＸＳ基因转明显增强２,向细胞导入野生ＥＰＯ３＇增强子片断可阻断ＣｏＣｌ２诱