水稻原生质体培养及植株再生的研究

由粳稻77-170品系及籼稻品种IR-50的细胞悬浮培养物游离的原生质体,用琼脂糖包埋于RY-2培养基中,发生了持续分裂。前者植板率达2.5％以上,二者最后都再生出植株。对游离和培养方法做了如下改进:1)采用两步法,即先用果胶酶,再用果胶酶和纤维素酶的混合酶进行游离,可避免原生质体发生融合并获得高质量的原生质体;2)悬浮细胞培养基中加入ABA有利于原生质体的存活和分裂;3)琼脂糖包埋培养可大大提高植板率;4)用较高渗透压的培养基培养原生质体再生的细胞团及愈伤组织,可提高植株再生频率。由于这两个品种(系)的培养物都已继代一年半之久,再生植株均为白化苗。这是迄今第一个由籼稻原生质体再生植株的报道。     

籼稻原生质体培养和植株再生

用籼稻IR52、IR8和IR45的幼花序和幼胚愈伤组织在LS培养基建立了稳定的悬浮培养物。悬浮系的建立经历三个阶段:褐变期,长根期,成熟期。建立了适合籼稻原生质体生长的Y8培养基,其植板率显著高于KPR和PCM培养基。悬浮细胞系间差异明显,只有部份系可以提供有分裂能力的原生质体或具看护活性。以上三个品种的原生质体均分裂良好,但只有IR52和IR8分化出苗,其中IR52分化率1.25%,得再生植株50余株,移至田间生长结实正常。     

人参悬浮细胞系的建立及其生长特性的研究

从人参幼叶的培养中,筛选出了质地松疏、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系。将这种愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡培养．建立起分散程度好的人参悬浮细胞系。在此基础上,测定了人参细胞悬浮培养物的生长曲线。实验表明,水解酪蛋白（ＬＨ）对人参悬浮细胞的生长有利。滋养培养可以使人参悬浮细胞的愈伤组织形成率提高,并在低密度下达到较高的植板率。这为有效地筛选出适合于工业化生产的高产人参细胞株提供了方便。     

水稻原生质体培养再生植株程序化的初步研究

从12个品种水稻成熟种子诱发愈伤组织并继代培养,通过MS培养基中2,4-D浓度的变换,研究了2,4-D对水稻愈伤组织生长的影响。用AA培养基建立适合原生质体培养的胚性细胞悬浮系仅需3个月。由悬浮细胞系游离的原生质体在改良的KPR培养基中进行液体浅层培养,有10个品种获得高植板率的细胞团。变换使用不同的分化培养基,从7个品种得到再生植株。实验重复性达到80%,初步实现了水稻原生质体培养的程序化。     

籼型水稻原生质体再生植株

以在MSB培养基(MS无机盐,B 5有机成份附加2mg／L 2．4－D)中继代一年的87－l籼型花粉愈伤组织和由籼型水稻株系81－3在改良的RY一2培养基中继代半年的悬浮培养物游离原生质体,分别在RY 2和KPR培养基中进行液体浅层培养或琼脂糖包埋培养,并在琼脂糖包埋培养时饲喂以粳型广亲和材料02428的悬浮培养细胞或除去}王胞的调渗悬浮液。原生质体植板率达8．7％－12．5％。将3—4周后形成的肉眼可见的小愈伤组织转移到台o．5mg／L 2．4－D的N6固体培养基上增殖,待愈伤组织长到直径达2—3mm大小时,分别或串换使用三种不同激素水平的分化培养基,最终由籼型株系81－3的原生质体再生了植株,而87－1籼型花粉胚性愈伤组织原生质体只再生了愈伤组织。     

水稻原生质体培养再生植株程序化的初步研究

从１２个品种水稻成熟种子诱发愈伤组织并继代培养,通过ＭＳ培养基中２,４－Ｄ浓度的变换,研究了２,４－Ｄ对水稻愈伤组织生长的影响。用ＡＡ培养基建立适合原生质体培养的胚性细胞悬浮系仅需３个月。由悬浮细胞系游离的原和一质体在改良的ＫＰＲ培养基中进行液体浅层培养,有１０个品种获得高植板率的细胞团。变换使用不同的分化培养基,从７个品种得到再生植株。实验重复性达到８０％,初步实现了水稻原生质体培养的程序化。     

植物原生质体培养研究进展

自从Ｃｏｃｋｉｎｇ(196 0 )用酶法首次分离出有活性的原生质体 ,1971年Ｔａｋｅｂｅ等首次从烟草叶片分离原生质体 ,经培养获得再生植株 ,原生质体的研究和应用进入了一个新阶段。1　原生质体培养影响因子的研究1 1　培养基种类及成分不同植物原生质体培养的基本培养基不尽相同。培养基种类影响到原生质体的分裂频率、植板率以及小愈伤组织的出现等[1,2 ] 。潘增光[3 ] 等比较了 4种培养基 (ＭＳ、ＭＴ、改良ＭＴ、ＢＨ3)对苹果叶肉原生质体培养的影响 ,结果表明 ,只有在改良ＭＴ培养基中能观察到多细胞团形成 ,而在ＭＳ、ＭＴ、ＢＨ3作为…     

谷子胚性愈伤组织粘液提取物对原生质体培养的影响

将谷子胚性愈伤组织粘液提取物添加到谷子原生质体培养基中,其对原生质体培养的影响表明该提取物有助于原生质体形成细胞壁;并且该类有粘液分泌的念伤组织的原生质体游离所需的酶液浓度低、处理时间短。由原生质体形成完整细胞的数量在一定范围内与谷子原生质体培养的植板率相对应;通过增加形成完整细胞的数量可较大幅度地提高原生质体培养的植板率。     

沙打旺悬浮培养细胞原生质体的体细胞胚胎发生再生植株(英文)

以继代培养5—24代的沙打旺(Astra-galus adsurgens Pall.)胚性悬浮系为材料,从生长4d的细胞培养物中可游离出大量有活力的原生质体。细胞预质壁分离或低温预处理对原生质体得率和活力没有影响,但可提高原生质体培养的植板率。预处理的原生质体培养在NH_4NO_3浓度降至2.5mmol/L,并附加0.5mg/L NAA、1.0mg/L 2,4-D、0.7mg/L BA和0.4mol/L葡萄糖的KM8P培养基中,经持续分裂形成细胞克隆,植板率高达16%—20%。细胞克隆在附加1.0mg/L 2,4-D和0.5mg/L BA的MS培养基中增殖后,转至含0.1mg/L NAA和1.0mg/L BA的MS分化培养基中可形成体细胞胚,平均体细胞胚发生频率约为40%,每个克隆产生20—40个体细胞胚。在无激素的1/2MS培养基中,体细胞胚发育成形态正常和染色体数稳定的小植株。     

人参培养细胞单细胞克隆的条件培养

来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进人参培养细胞的单细胞在较低细胞植板密度培养时的克隆形成。每毫升含3×10³个细胞时,条件培养的植板率是普通平板培养的4倍。细胞悬浮培养12－16天时所制备的条件培养基活性最大,在一定浓度范围内随条件培养基浓度增加。细胞克隆植板率随之增加。条件培养基具有一定的生理作用专一性。看护培养和条件培养的比较,表明前者在细胞密度较低时能更有效地促进细胞克隆的形成和生长。条件培养基在4℃条件下贮存两周仍保持活性稳定,并且能耐受高温处理。当受到强酸或强碱处理其活性失去．但在弱酸或弱碱条件下稳定。     

浙江产植物一新变种

<正> 无腺野海棠(野牡丹科) Bredia amoena Diels var.eglandulata B.Y.Ding,var.nov.(Melastomaceae) A var.amoena recedit inflorescentis,pedicellis et calycibus hirsutis brunneo-ferrugineis 3-6 mm longis dense tectis;calyce majore 6-7 mm longo,saepe3-lobis. Zhejiang:Taishun Xian(泰顺县),Wuyanling(乌岩岭),22 Oct,1972,H.S.Guo(郭汉身)Te401(Typus,ZJMU;模式标本存浙江医科大学植物标本室);TaishunXian,Huangquiao(黄桥)L.H.Lou et al.(楼炉焕等)460(ZJFC)。     

A SUPEROXIDE DISMUTASE PURIFIED FROM THE ROOTS FROM Stemona tuberosa

Proteins from the fresh roots of Stemona tuberosa (Stemonaceae) were extracted into 20 mM phosphate buffer, pH 7.2/0.1 M NaCl, precipitated with 90% saturation ammonium sulfate, and enriched by diethylaminoethanol (DEAE) cellulose. The protein eluted as a single main peak from the unbound fractions (ST-1), and appeared as a single band with superoxide dismutase (SOD) activity after native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) resolution and zymogram development. ST-1 was classified as SOD due to its strong inhibition by HCN and H₂O₂. The amino acid sequence of three tryptic peptides of ST-1 matched with the SOD isozymes from Ananas comosus and Solanum lycopersicum. The SOD consisted of at least two heterologous protein subunits with molecular mass of 17.6 and 31.5 kD, respectively, and had an optimal SOD activity at pH 5 and over a temperature range of 0–50°C. MgCl₂, MnCl₂, and HgCl₂ were strongly inhibitory at all concentrations tested. The SOD activity was completely negated in the presence of 0.5 mM SDS or 5 mM HgCl₂. The relationship between riboflavin and nitroblue tetrazolium (NBT) on SOD activity was linear, giving K _m and V _max values of the purified SOD of 62.414 ± 0.015 M and 101.010 ± 0.022 µmol/min/mg protein for NBT and 27.389 ± 0.032 M and 38.167 ± 0.021 µmol/min/mg protein for riboflavin, respectively.     

茶叶中的原花色素类物质

本文对近年来茶叶中原花色素类物质的研究进展进行了综述,分别介绍了茶叶中原花色素类物质的种类和结构;茶叶中原花色素类物质的提取、分离和鉴定;原花色素类物质的生物合成途径;原花色素类物质和茶类的关系及原花色素类物质和饮茶保健。