缺氧复合失血性休克动物血浆对血管内皮细胞与白细胞粘…

本实验观察缺氧（模拟海拔４ ０００ｍ高原２４ｈ）复合失血性休克２４ｈ山羊血浆（ＳＰ）对培养的肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）与多形核白细胞（ＰＭＮ）粘附的影响,并对其机制进行了探讨。结果表明,ＰＡＥＣ在含２５％浓度ＳＰ的培养液中孵育１０ｍｉｎ－１２ｈ后,与ＰＭＮ粘附率明显增加（２７．４％－４６％,与对照组５％相比Ｐ〈０．０１）;温育１２ｈ末ＰＡＣＥ与ＰＭＮ的粘附力也比孵育３ｈ者明显增加（Ｐ〈０．０１）;     

白细胞与内皮细胞的粘附

白细胞与内皮细胞相互作用由粘附分子介导.整合素、免疫球蛋白及选择素家族的粘附分子在这两种细胞的粘附中起关键作用.粘附的起始阶段由选择素介导,随后由CD11/CD18复合物与ICAM-1形成更为紧密的结合.多种细胞因子及炎症反应可诱导粘附.抗粘附分子单抗、药物等可抑制粘附.     

内毒素血症大鼠肠系膜微循环中血管内皮细胞与白细胞的粘附性变化

本实验采用中文吖啶橙荧光标记技术,结合微循环观察用显微超高速摄录像装置,观察了内毒素对微血管内白细胞与微静脉血管内皮细胞的粘附性的影响。结果表明,内毒素对大鼠的血压、微血管口径和微动脉血流速度影响不大,微静脉血流速度在滴注内毒素后４５和６０ｍｉｎ下降了１６．６７％和１７．９５％（Ｐ＜０．０５）;但内毒素能迅速改变微静脉内的白细胞流态,明显增加附壁滚动的白细胞数和粘附白细胞密度指数,经测量同一微静脉内的白细胞和红细胞流速,求得白细胞与微静脉内皮细胞之间的破裂力在５ｍｉｎ和１５ｍｉｎ时下降了２５．９６％和４２．８８％（Ｐ＜０．０１）,下降趋势持续整个实验过程;说明内毒素能明显地增加白细胞与微静脉血管内皮细胞之间的粘附力。由此提示,研究白细胞与微静脉血管内皮细胞之间粘附力增强机制及寻找其抑制因素对改善微循环紊乱、抢救休克具有重要的临床意义。     

大鼠肝癌诱发过程中血浆对红细胞与血管内皮细胞粘附的影响

在大鼠肝癌诱发过程中,为了分析自体血浆对红细胞与内皮细胞粘附的影响,采用红细胞计数及透光度的改变来检测不同时相粘数的变化。结果显示自体血浆能明业增强红细胞与内皮细胞的粘附作用。     

血管壁剪切应力系统及用于内皮细胞与白细胞粘附的研究

本文建立了对血管壁上的内皮细胞施加剪切应力的系统。通过对系统中的血管内流场分析表明,该系统中的血管段的中间部分作为研究剪切应力对内皮细胞作用,以及研究内皮细胞与其它细胞粘附力的场所是比较理想的。采用该系统对在体内皮细胞研究发现：当对内皮细胞施加２８ｄｙｎ／ｃｍ２的剪切应力时,内皮细胞并未出现暴发性释放前列环素的现象,前列环素释放水平略有升高（０．４１±０．０５ｎｇ／ｃｍ２ｍｉｎ）以后呈线性下降并稳定在一定水平上（０．１７±０．０４ｎｇ／ｃｍ２ｍｉｎ）。在２８ｄｙｎ／ｃｍ２剪切应力下,受机械损伤的内皮细胞和动脉粥样硬化的内皮细胞仍能与较多白细胞粘附,而在正常内皮细胞和去掉内皮细胞的动脉壁几乎无白细胞粘附,说明在内皮细胞受损或动脉粥样硬化时,内皮细胞与白细胞的粘附增强     

体外流动剪切力作用下的白细胞-内皮细胞动态粘附

建立一个用于体外研究特定流动剪切力作用下白细胞和内皮细胞动态相互作用的方法。利用建立的平板流动小室系统可在体外产生特定的流动剪切力。将培养的人脐静脉内皮细胞装入平板流动小室后 ,以 0 .71dynes/cm2 的流动剪切力把含有吖啶橙染色的白细胞的灌流液导入流动小室 ,由此产生了白细胞和内皮细胞的动态粘附过程。整个粘附过程通过OlympusIX70倒置荧光显微系统观察 ,同时通过CCD摄象头录像。然后用图象采集卡将录像采集为数字图象并保存。利用针对实验设计的图象处理和分析方法 ,对采集的数字图象进行处理和测量 ,可以得到粘附白细胞的个数和滚动白细胞的速度。通过研究内毒素脂多糖 (LPS)对内皮细胞粘附功能的促进及地塞米松 (DXM )对该刺激的抑制作用来验证。对于用内毒素脂多糖 (LPS)处理的内皮细胞 ,固定粘附和慢速滚动的白细胞的个数比对照组分别显著增加了 2 3.7倍和 4 .1倍 ,同时白细胞在粘附作用过程中慢速滚动和快速滚动的速度比对照组明显降低了 2 5 .6 %和 2 6 .1%。而对于脂多糖和地塞米松 (DXM)处理过的内皮细胞 ,上述内毒素引起的影响被显著抑制了。该方法可以用于研究不同的化学和物理刺激对内皮细胞功能的影响机制 ,及用来评价各类抑制内皮细胞粘附功能的药物。     

电磁水对血白细胞、红细胞、血小板及血管内皮细胞影响的研究

血管中白细胞等的粘附、聚集问题能够影响微循环的血流速度,是损伤血管内皮细胞乃至形成血栓的主要因素之一.在内毒素注射大白鼠的随机、对照实验中,发现电磁水能够减轻内毒素所致的炎症刺激,并能够降低白、红细胞和血小板的粘附、聚集,能降低白细胞的渗出,能提高红细胞的电泳率,能抑制血流速度的减慢和能够减轻血管内皮细胞的损伤.t检验,差异显著（P〈0.01）以及差异明显（P〈0.05）.揭示电磁水能够提高血细胞和血管内皮细胞的表面负电荷密度,并可以减轻外因（如,内毒素）对体内细胞和血管的损伤.说明电磁水能够改善微循环,维系正常血流和防止血栓形成.     

几种不同刺激对血管内白细胞粘附的影响

目的：研究几种刺激引起白细胞与内皮细胞粘附的变化。方法：本实验采用脉冲电刺激、缺血再灌、内毒素和白介素-8等物理或药物的作用,观察大鼠肠系膜细静脉内白细胞粘附及白细胞和血管内皮粘附之间的差别。结果：缺血再灌、内毒素、内毒素、脉冲电刺激和白介纱-8（IL-8）作用后肠系膜细静脉白细胞粘附数量比正常组明显增多,IL-8用药后30min细静脉内白细胞粘附数量最多、缺血再灌、内毒素、脉冲电刺激后白细胞粘附数量大致相同。结论：缺血再灌、内毒素、脉冲电刺激能诱导白细胞的粘附作用。造成内皮损伤,IL-8诱导白细胞的粘附作用最强。     

突然扩张流槽中血管内皮细胞表面粘附蛋白表达的研究

动脉粥样硬化的非随机分布与当地的血流动力环境有关,为了研究复杂的流体动力学条件对血和皮细胞生理功能的影响,构建了平行板式平直流槽和突然扩张流槽,通过数值模拟分析了流型的特征,并探讨流型改变对人脐静脉血管内皮细胞表面粘附蛋白表达的影响,发现突然扩张流槽中流动的空间变化使得总体细胞表面粘附蛋白ICAM－1的表达显著高于平直流槽中的均匀定常剪切作用,表明局部流动空间变化的性质可以影响血管内皮细胞的功能。     

5—羟色胺对肺动脉平滑肌细胞在缺氧条件下增殖的作用

本研究应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,核酸分子杂交、免疫组织化学染色技术,探讨无氧（０％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和／或低氧（２．５￣３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉平滑肌细胞增殖和５－羟色胺转载体基因表达的影响。结果表明：无氧２４ｈ可刺激ＰＡＳＭ的ＤＮＡ合成,＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入增加（Ｐ〈０．０５）,加入５－羟色胺能非常显著地促进无氧ＰＡＳＭ增殖（Ｐ〈０．００１）,而对常     

缺氧对体外培养的肺动脉平滑肌细胞形态及增殖的影响

本实验应用形态学、免疫组化染色,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、流式细胞等技术探讨缺氧（〈１％Ｏ２和２．５％Ｏ２）对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）形态及增殖的影响。结果表明：缺氧２４ｈ使ＰＡＳＭ表型从收缩型向合成型转换,胞浆内ＳＭ－ａ ａｃｔｉｎ减少,线粒体和粗面内质网增多,缺氧４８ｈ以后线粒体肿胀,空泡化,内质网扩张,胞浆内出现髓鞘样结构。流式细胞分析显示缺氧ＰＡＳＭ Ｇ２／Ｍ期细胞比例明显增多（Ｐ〈０．００     

低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响

应用蛋白ｄｏｔｂｌｏｔ技术检测了低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和常氧内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ）内ＰＤＧＦ相对含量,并利用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术观察了ＨＥＣＣＭ和ＮＥＣＣＭ及加入特异ＰＤＧＦ抗体对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ中的ＰＤＧＦ含量明显高于ＮＥＣＣＭ;ＨＥＣＣＭ能明显增强ＰＡＳＭＣ内ＤＮＡ合成,促进ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期;当预先加入ＰＤＧＦ－Ｂ链抗体时,则会明显地抑制ＨＥＣＣＭ对ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成,阻止ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期。结果提示,低氧时ＰＡＳＭＣ增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放ＰＤＧＦ增加有关     

慢性低O_2高CO_2大鼠肺肥大细胞对肺小动脉的作用

目的 :探讨慢性低O2 高CO2 大鼠肺肥大细胞 (MC)对肺小动脉的作用。方法 :采用慢性低O2 高CO2 肺动脉高压模型 ,观察大鼠肺MC和肺小动脉形态改变及测定肺动脉压。结果 :观察到大鼠肺动脉压力升高和肺MC脱颗粒及空泡变。结论 :肺MC可能也是肺动脉高压形成的因素之一。     

急性低氧和间断低氧习服对大鼠主动脉收缩和舒张功能的影响

目的：观察急性低和间断低氧习服对大鼠主动脉收缩和舒张功能的影响。方法：用去甲肾上腺素（ＮＥ）诱发大鼠离体动脉环的收缩,反映收缩功能的变化,主动脉环以０．６２μｍｏｌ／Ｌ ＮＥ预收缩后用乙酰胆碱（Ａｃｈ）舒张对抗,反映舒张功能的变化。结果：与常氧对照组相比,急性低氧和间断低氧习照大鼠主动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ１０＾－９,１０＾０８,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）介导的收缩反应显著增强（Ｐ〈０．０５～０．０１     

急性低氧与间断低氧适应对家兔局部血流分布的影响

本实验目的在于探讨急性低氧和间断低氧适应对局部血流分布的影响。我们将26只家兔分为急性低氧,低氧适应和常氧对照三组。在麻醉状态下用放射性标记的蟾蜍红细胞分别测定左心室、双侧肾、双侧肾上腺的血流量;并分区测定了大脑皮质、海马、丘脑下部、脑干的局部脑血流。吸入10％低氧混合气1小时后,急性低氧组脑局部、左心室、肾上腺的血流显著高于对照。经2周间断低氧适应后,低氧适应组脑局部(脑干除外)、左心室、肾上腺的血流下降。两组动物低氧时的肾血流变化不明显。结果提示,2周间断低氧适应能改变局部血流分布,血流的再分布有利于改善机体的抗低氧能力。     

低氧时肺动脉内皮细胞单层通透性变化

目的和方法：研究肺动态内皮细胞（ＰＡＥＣ）在低氧性肺水肿（ＨＰＥ）发生中的作用机制。采用ＯＰＡＥＣ体外培养的方法，观察了ＰＡＥＣ生长状态和特征性蛋白因子ⅧＲ：Ａｇ的变化，并利用ＰＡＥＣ融合单层通透性模型研究了低氧对ＰＡＣＥ融合单层的通透性的影响。结果：ＰＡＥＣ生长数量无明显变化，但细胞的生长质量，ⅧＲ：Ａｇ阳性细胞数明显下降，ＰＡＣＥ通透性明显增加，ＣａＭ阻断剂ＴＦＰ只能部分抑制０这种通透性增加。     

缺氧与高渗溶液对家兔颈动脉体化学感受器活动的影响

目的和方法：实验在游离灌流的颈动脉体窦神经标本上,观察氧分压降低和渗透压升高对化学感受性单位放电的影响。共记录７２个有自发放电的化学感受性单位对二者的反应。结果：仅对ＰＯ２降低有反应的化学感受性单位有２２例（占３０．６％）,对两种自然刺激均有反应的化学感受性单位有３５例（占４８．６％）,仅高渗引起化学感受性单位放电增加的有１５例（占２０．８％）。结论：在颈动脉体中不但存在着对缺氧敏感的化学感受性单位,还存在着对渗透压敏感的化学感受性单位,它们对氧分压、渗透压的改变有不同的敏感性。     

急性低氧对血浆皮质醇浓度及海马去甲肾上腺素含量的影响

本工作观察不同氧浓度,不同低氧时间猫血浆皮质醇浓度和海马内去甲肾上腺素含量的改变,以分析海马在低氧应激过程中的作用,结果显示,吸入１０．４％及７．９％Ｏ２后,猫血浆皮质醇浓度逐渐升高,分别于４５ｍｉｎ及３０ｍｉｎ达峰值;而低氧３０ｍｉｎ后,海马组织中的ＮＥ含量明显降低,两者与低氧程度无明显关系。     

急性低氧时狗心泵代偿-失代偿转变的力学特征

为了分析急性低氧时心泵代偿-失代偿转变过程的力学特征,在22条麻醉开胸狗上,于吸入气氧分压递降条件下,作了心泵舒缩功能测定。结果表明,虽然严重低氧时心泵外功功率尚可保持在增大状态,但其压力作功成分减小,容积作功成分增大。动脉导纳的增加是容积作功增大的主要原因。这时,主动脉内有效血液推动力进一步增大,而泵缩力量却开始减弱。肌力效应在泵失代偿发生前,对舒缩功能的增强起着重要作用。在泵代偿-失代偿转变阶段,斯塔林效应的作用显著。“舒-缩谐调”的变化,早在泵失代偿前就已出现,并渐明显,值得注意。