转移人生长激素基因和注射人生长激素对促进银鲫生长的研究

本研究将人生长激素基因重组 DNA 导入银鲫受精卵,或用人生长激素对60日龄银鲫连续6周腹腔注射,均观察到了受体鱼的快速生长效应,转移人生长激素基因鱼在60日龄时的平均体重比对照鱼平均体重增加82%,相应体长平均值比对照鱼增加19.7%;在125日龄时,转基因组平均体重比对照组增加17.7%,相应体长平均值比对照增加3.5%。定期注射人生长激素,在6周的注射实验过程中,实验鱼的体重,体长都与对照组相近或略有减小。但是,在水泥池中饲养一个月后,注射10/μg/g 体重的实验组鱼平均体重比相应对照组鱼的平均体重增加32%;相应体长平均值增加11%。     

外源基因在鲤鱼受精卵细胞不同发育时期整合效率的研究

显微注射技术是构建转基因鱼的基本基因导入技术,在受精卵的不同发育时期注射外源基因,外源基因在受体鱼基因组的整合率是不同的,受精卵的成活率也不一致。本文报道了鲤鱼受精卵在其不同的发育时期,注射外源基因与其成活率,整合率的关系。     

鲤鱼和草鱼基因文库的构建及其生长激素基因和肌动蛋白基因的筛选

用显微注射方法,把由小鼠重金属鳌合蛋白(MT)基因启动子驱动的人生长激素(hGH)基因导人鲤鱼等的受精卵内,由此发育而成的一部分鱼的基因组内携带有MThGH基因,这些鱼称之为"转基因鱼"1.       

嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖对斑点叉尾免疫保护作用

嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)是近年来引起斑点叉尾高致死性、传染性疾病的主要病原之一。为了研究嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖对斑点叉尾的免疫保护作用,实验选用了400尾健康斑点叉尾,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组,每组用鱼100尾,每组下设两个重复,每个重复用鱼50尾,以腹腔注射的方式分别向Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组的斑点叉尾注射嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖、无花果多糖加脂多糖、全菌灭活苗和生理盐水,在试验第0、第28天时分别进行首次免疫和加强免疫,试验期间每隔7d,对试验鱼的血液白细胞杀菌活性、补体C3含量、IgM含量和血清凝集效价滴度进行测定;试验第49天时进行活菌攻毒。结果表明,首免后,接种脂多糖、无花果多糖加脂多糖的试验鱼血清凝集效价滴度明显升高,白细胞杀菌活性、补体C3含量、IgM含量也明显增加;加强免疫后,脂多糖、无花果多糖加脂多糖的试验鱼血清凝集效价滴度峰值分别为1∶256和1∶512,白细胞杀菌活性峰值分别为0.565和0.511,补体C3含量峰值分别0.194和0.180mg/mL,IgM含量峰值分别1.415和1.464mg/mL,免疫保护率分别为70.0%和65%。嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖和脂多糖+无花果多糖受免鱼的上述指标均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地高于生理盐水注射组,这两者的免疫保护效果优越于全细胞灭菌苗。     

版纳鱼螈泌尿系统解剖学及组织学观察

采用常规解剖学和组织学方法对版纳鱼螈Ichthyophis bannanica的泌尿系统进行研究.结果表明,版纳鱼螈泌尿系统包括中肾、输尿管、膀胱.版纳鱼螈的中肾由肾小体和肾小管组成,无皮质、髓质之分,肾小体主要分布在肾脏背外侧缘,肾小管由颈段、第1近曲小管、第2近曲小管、间段、第1远曲小管、第2远曲小管和集合管组成;输尿管位于两肾外侧缘,其上皮由前端的单层立方上皮过渡到后端的假复层上皮;膀胱为泄殖腔膀胱,内壁具有发达的绒毛,绒毛上皮为变移上皮.     

青鱼Mylopharygodon piceus出血病的初步研究

青鱼出血病是危害青色最严重的疾病之一,尤以二龄为甚。通过人工注射免疫后,可使青鱼的成活率由原来20％左右提高至60—90％,个别的可达98.98％。通过病鱼肾脏组织超薄切片电镜观察,首次发现病毒颗粒(直径为50—56毫微米)的存在,经0.15微米孔径的滤膜过滤的病原悬液可反复在鱼体内传3—4代,使健康鱼发病。因此,认为青鱼出血病是病毒引起的疾病。     

荧光异彩观赏鱼

历史回眸1985年,我国科学家朱作言先生通过显微注射方法,将人的生长激素基因和小鼠重金属螯合蛋白启动子相结合,注入鲫鱼受精卵,成功构建了世界上首例转基因鱼,掀起了世界各国对转基因鱼的研究热潮。此后,转基因鱼研究有了长足     

动物遗传工程

931461用生长滋紊甚因徽注射北方狗鱼的分子学分析及其生长估侧[英〕/Gross,M.L.…1 Aquaeulture一1992,103(3~4)一253~273[译自ANI,1992,4(10),5204〕 把小牛或Chin。。k蛀鱼生长激素cDNA注射到北方狗鱼新生受精卵里。筛选鱼鳍片组织表明,1398条推断的转基因鱼中有88条出现转基因的甚因组整合。通过血清的放射免疫检侧到1218条推断的转兹因鱼中有36条表达了受劳斯肉瘤病毒长末端重复序列转录调控的小牛生长激素转基因。用薄切片免疫组织化学检测亦发现在注射鱼鱼鳍的中胚层组织里含小牛生长激素。注射的40条鱼的6种组级进行Southern杂…     

渤海湾头鲻、鲮鲻的寄生动物——Ⅱ.蓬莱地区

蓬莱地区头鲻、(鱼夋)鲻的寄生动物区系由9种组成:单殖类吸虫1种、复殖类吸虫1种、绦虫胚囊蚴1种、线虫1种、棘头虫2种、寄生桡足类3种。(鱼夋)棘头虫 Acanthocephalus lizus 及卷尾带巾线虫Cucullanus spirocaudus 均为新种。首次发现了侧尾鱼虱 Caligus laticaudus Shiino 的第3期附着幼体。文中对上述2新种及侧尾鱼虱第3附着幼体的形态特征进行了描述。     

第26届国际生物学奥林匹克竞赛试题 实验3·动物生物学

正总分:99分考试时间:90 min共8题在本考试中,你将解剖鳕鱼(Gadus morhua),对你解剖和识别鱼的结构和器官的能力进行考察。另外,鱼不同结构的功能也会被考查。考试由4部分组成。第1部分:外部结构的识别(15分);第2部分:内部结构的识别(37分);第3部分:心脏分析(22分);第4部分:大脑分析     

转大麻哈鱼生长激素基因鲫鱼研究

通过显微注射方法得到了一批转大麻哈鱼生长激素基因的实验鲫鱼。斑点杂交和ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ杂交证实部分实验鱼的基因组中已整合了外源生长激素基因,并有一尾鱼有比较明显的生长速度快的特征。     

蓝太阳鱼第一次性周期性腺发育的组织学

蓝太阳鱼(Lepomis cyanellus)是广东省于1997年从北美引进的小型淡水鱼类,本文采用组织切片技术对蓝太阳鱼的性腺发育进行了研究。蓝太阳鱼的性腺发育程序可以分为5个时期。在1月龄,卵巢和精巢处于第Ⅰ期;2~3月龄时,卵巢和精巢发育到第Ⅱ期;4月龄时发育到第Ⅲ期;5~6月龄时发育到第Ⅳ期;7~8月龄时达到性成熟第Ⅴ期。过冬时,卵巢退化到第Ⅱ~Ⅲ期,而精巢仍停留在第Ⅴ期。成熟卵巢的成熟系数为2.80%~8.10%,成熟精巢的成熟系数为1.45%~3.45%。精巢和卵巢发育都为不完全同步型,且精巢发育比卵巢稍快。蓝太阳鱼的繁殖期在广州地区为3~11月,为多次产卵类型。本文从生殖和生长的关系上对蓝太阳鱼生长缓慢的原因进行了初步探讨,并将蓝太阳鱼作为一种鱼类实验动物的可行性进行了分析。     

注射促黄体素释放激素类似物和地欧酮诱导大鳍Hu和长吻Wei排卵的研究

对于性成熟的大鳍鲭Mystus macropterus(Bleeker)野生鱼,单独注射多巴胺的抑制剂地欧酮(DOM)不能影响血清促性腺激素(GTH)水平,也不能诱导排卵;单独注射类似物LHRH-A,虽能使血清GTH水平显著升高,但仅产生较低的排卵率;而当DOM与LHRH-A结合注射却显著增强LHRH-A促进血清GTH水平升高的作用,并诱导出较高的排卵率。对性成熟的长吻鲈Leiocassis longirostris Gunther野生鱼,使用LHRH-A＋DOM作2次注射诱导排卵的效果也与注射 LHRH-A加脑垂体这一传统诱导排卵方法相似。Linpe方法(LHRH-A＋DOM,作1次或2次注射)避免了采集、保存脑垂体不便给生产带来的麻烦,在鲩科鱼类的人工繁殖中,具有较高的推广价值。     

青海湖裸鲤性腺发育的组织学研究

采用石蜡组织切片法,对青海湖裸鲤的性腺发育进行组织学研究,系统地描述了各期卵巢和精巢的形态结构、特征及变化。结果表明:(1)青海湖裸鲤性腺的发育可分为六个时期,卵母细胞从第3时相发育到第4时相基本同步。第Ⅳ期末卵巢,第4时相卵母细胞的卵径大小比较整齐,卵径平均值为2.3mm,第4时相卵母细胞占切面上卵数的85%以上,占切片面积的96%以上,第2、3时相卵母细胞已很少;(2)产后卵巢的组织结构逐步由第Ⅵ期回复到第Ⅱ期,再由第Ⅱ期到第Ⅲ期向第Ⅳ期过渡;(3)性成熟个体有68.12%的雌鱼和83.9%的雄鱼以第Ⅳ期性腺越冬,另有21.01%的雌鱼和10.7%的雄鱼以第Ⅲ期性腺越冬,还有10.87%的雌鱼和5.4%的雄鱼以第Ⅱ期性腺越冬。根据青海湖裸鲤各季节性腺发育情况,作者认为青海湖裸鲤已达到性成熟的个体并不是每年都参与繁殖活动,存在生殖间断性。这反映了青海湖裸鲤的繁殖习性对高原寒冷多变气候的适应性。还对卵黄核和核仁在卵黄形成中的作用以及青海湖裸鲤的产卵类型和生殖间断性进行了讨论。     

第10届国际生物奥林匹克竞赛(1999)实验试题(三)

(续 2 0 0 0年第 3 5卷第 4期第 4 3页 )　第 4实验室 :行为学试题 ( 5)～ ( 9)你现在可以开始实验了。实验应按以下要求来完成 :将雌鱼放入水槽 ,将一条小尾鳍雄鱼放入一侧的烧杯 ,将一条大尾鳍雄鱼放入另一侧的烧杯 ,中央的烧杯空着。　　观察鱼的活动 ,在第 2、3、4和 5m in时记录雌鱼是在哪条雄鱼的区域中 ,还是在位于中间的空烧杯 (的区域 )。还要注意哪一条雄鱼的红色和橙色更深。　　将在实验中已用过的鱼放入另外的容器中 ,然后用没有用过的鱼重复实验。当你重复实验时 ,将大尾鳍雄鱼放入右侧烧杯 ,再重复时将其放入左侧烧杯。因为…     

转基因鱼

引言 利用显微注射技术已经在一定范围内产生了一些转基因动物种,而这项技术在鱼类上的应用也正在取得某种程度的成功。研究用于鱼类的最佳显微注射技术及探讨一种用于大批量培养的改良方法终将导致在商业生产规模上出现转基因鱼品种,这种鱼能将所需要的特性如快速生长,疾病抗性等转递给后代。     

使用RAPD分析辨别印度半岛的五种结鱼

用RAPD分析研究了结鱼种组(黄鳍结鱼Tor putitora,结鱼Tor tor,库德里结鱼Tor khudree,Tor mosalmahanadicus和墨脱四■魮Neolissochilus hexagonolepis)5个物种的遗传关系。在所测试的69个随机引物中,11个引物能够在所有5个物种中扩增出稳定的条带。RAPD带型显示,综合使用这些RAPD标记能够区分这5个物种,但Tor mosal mahanadicus和黄鳍结鱼享有相似的带型。UPGMA分析揭示出3个独特的分支,第一支由黄鳍结鱼、Tor mosal mahanadicus和结鱼组成,第二支是库德里结鱼,第三支是墨脱四■魮。Tor mosal mahanadicus的分类地位在不同学者间存在分歧,被认为是库德里结鱼或结鱼的亚种,但我们的结果表明,相对而言,Mahanadi河中的Tor mosal mahanadicus与黄鳍结鱼的进化关系更近,因此有必要对其系统分类地位进行重新评估。     

福尔马林灭活柱状黄杆菌对草鱼免疫相关基因表达的影响

在本研究中,将福尔马林灭活的柱状黄杆菌菌苗（FKG4）经腹腔注射免疫草鱼,以注射灭菌PBS作对照,分别在免疫后1、7、15和28d,提取受免鱼和对照鱼肝脏、脾脏和头肾3种组织中的总RNA并反转录成cDNA,利用Real-time PCR方法对不同组织中C-反应蛋白（CRP）、主要组织相容性复合体I（MHC Ⅰ）、肿瘤坏死因子（TNFα）、白介素1（IL-1β）、白介素8（IL-8）、Ⅰ型干扰素（IFN Ⅰ）等6种免疫相关基因的表达进行定量分析。结果发现CRP在受免鱼肝脏中的表达于免疫后1、7d显著性高于对照鱼,而在脾脏与头肾中的表达未出现显著性差异;MHC Ⅰ在受免鱼3种组织中的表达于免疫后1、7、15d都显著性高于对照鱼;TNFα在3种组织中的表达水平都较低,但都于免疫后1、7天显著性高于对照鱼;IL-1β在3种组织中的表达于免疫后1d都显著性高于对照鱼,但只有在头肾中的表达在免疫后7d时仍保持显著性差异;IL-8在3种组织中的表达都只是于免疫后1d显著性高于对照鱼;TNFα、IL-1β及IL-8等三种炎症因子的基因表达在免疫后15d都恢复到对照鱼的水平;而IFN Ⅰ在3种组织中的表达与对照组之间未出现显著性差异。结果表明,FKG4注射免疫可以显著提高草鱼3种组织中与抗菌免疫相关的基因表达,从而增强鱼体抵抗细菌性病原的免疫力。     

注射促黄体素释放激素类似物和地欧酮诱导大鳍■和长吻■排卵的研究

对于性成熟的大鳍Ｍｙｓｔｕｓｍａｃｒｏｐｔｅｒｕｓ（Ｂｌｅｅｋｅｒ）野生鱼,单独注射多巴胺的抑制剂地欧酮（ＤＯＭ）不能影响血清促性腺激素（ＧＴＨ）水平,也不能诱导排卵;单独注射类似物ＬＨＲＨ－Ａ,虽能使血清ＧＴＨ水平显著升高,但仅产生较低的排卵率;而当ＤＯＭ与ＬＨＲＨ－Ａ结合注射却显著增强ＬＨＲＨ－Ａ促进血清ＧＴＨ水平升高的作用,并诱导出较高的排卵率。对性成熟的长吻ＬｅｉｏｃａｓｉｓｌｏｎｇｉｒｏｓｔｒｉｓＧｕｎｔｈｅｒ野生鱼,使用ＬＨＲＨ－Ａ＋ＤＯＭ作２次注射诱导排卵的效果也与注射ＬＨＲＨ－Ａ加脑垂体这一传统诱导排卵方法相似。Ｌｉｎｐｅ方法（ＬＨＲＨ－Ａ＋ＤＯＭ,作１次或２次注射）避免了采集、保存脑垂体不便给生产带来的麻烦,在科鱼类的人工繁殖中,具有较高的推广价值。     

人生长激素和转移的人生长激素基因对去垂体鱼的生长代偿效应

通过显微注射技术,将小鼠重金属螯合蛋白(MT-1)基因启动顺序与人生长激素基因顺序的重组体pMThGH注入鲤鱼(Cyprinus carpio)的受精卵内,由此发育的转基因鱼及其后代F1和F2均显示出快速生长效应。去垂体后,转基因鲤鱼F2持续生长,而非转基因鲤鱼和鲫鱼(Carassius auratus)的生长停止。给去垂体的鲫鱼腹腔注射生物合成的人生长激素(hGH),可恢复其生长。实验结果表明,转基因鱼体内表达和体外生物合成的hGH均能代偿鲤鱼和鲫鱼的内源生长激素并刺激去垂体鱼的生长。