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相似文献
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1.
五氧化二钒(V2O5)是一种常见的工业毒物和环境污染物。为了进一步验证钒的致畸性,并为揭示其发育毒性的作用机理提供依据。本在大鼠致畸试验的基础上,应用细胞微团培养方法他钒对大鼠胚胎芽细胞在体内外增殖和分化的影响。体外实验:从妊娠d13的孕鼠中分离出胚胎,取前肢芽,制成细胞悬液(21×10^7cell/mL),取10μL置于培养板上成一微团,于高湿、37℃的CO2孵箱中预培养2h,然后缓慢加入不同剂量的V2O5溶液(勿冲散微团,对照加培养基),培养5d。体内实验:取鼠妊娠d12时,经i.p,以不同剂量的V2O5处理,16h后处死、取胚胎肢芽细胞培养。然后,固定细胞,分别采用苏木精染色和阿利新兰染色,前经甲醇脱色后以酶标光密度值反映细胞增殖情况;后由镜检每一微团中天蓝色的分化落数判断对细胞分化的抑制作用。体外试验结果显示,钒剂量在5.0μmol/L,以上时细胞集落数明显下降,光密度则在7.5μmol/L以上时明显下降,均呈明显的剂量-反应关系(Table1),说明钒对肢芽细胞增殖和分化都有抑制作用,但细胞增殖和分化的两条抑制曲线明显不同(Fig.1),其中IC50分别为13.14和4.77μmol/L。按Flint及Reanaault提出的判定标准,钒为肢芽细胞的特异性分化抑制物,与大鼠致畸试验的结果一致。体内染毒对胚胎肢芽细胞增殖的影响与体外染毒无明显差别,但对抑制细胞分化则差别显,2mg/kg V2O5组的集落数已减少近50%。已在抑制胚肥形成过程中的细胞增殖和分化可导致发育异常。钒在对肢芽产殖无明显影响时即可影响细胞的分化,表明:至少在较低剂量时,抑制胚胎细胞分化可能是钒致畸机理的最初形式;提高剂量后,其发育毒性除表现在影响细胞分化外,还可能表现在抑制细胞增殖。  相似文献   

2.
目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)摄入后对孕鼠糖代谢的影响以及生物学机制分析。方法:孕鼠妊娠10 d后,将实验动物随机分为3组,每组12只,妊娠对照组(Ctrl)腹腔注射生理盐水,同型半胱氨酸高剂量组(HCYH)和同型半胱氨酸低剂量组(HCYL)腹腔注射HCY溶液,注射浓度分别为200 mg/kg·d和100 mg/kg·d,持续20 d(即为HCY20 d)后,利用血糖含量检测试剂盒和胰岛素试剂盒分别检测孕鼠空腹血糖水平、胰岛素水平;葡萄糖检测试剂盒对孕鼠葡萄糖耐量和胰岛素抵抗进行检测;蛋白免疫印迹法检测孕鼠目的蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT蛋白(P-AKT)的表达。结果:与Ctrl组比较,在孕鼠注射HCY后,空腹血糖水平升高、血清中胰岛素浓度下降、HOMA-β指数下降、HOMA-IR指数升高(P<0.05);摄入葡萄糖后,孕鼠血糖随时间的变化而下降,葡萄糖曲线下面积升高(P<0.05);摄入胰岛素后,孕鼠血糖随时间的变化而升高,胰岛素曲线下面积升高(P<0.05);PPARγ、P-AKT、GLUT4蛋白表达水平下降,HCYH组降低水平更为显著(P<0.05)。结论:孕鼠HCY摄入后,生物体糖代谢紊乱,AKT磷酸化表达水平抑制,HCY可能通过降低PPARγ的表达减少AKT磷酸化,导致胰岛素受体的活化,进而激活了PI3K/AKT通路,减少了脂肪组织中的GLUT4表达,增加了对于葡萄糖的摄取能力。  相似文献   

3.
目的:探讨妊娠期大鼠经炎症免疫刺激后对胚胎基因表达谱的影响.方法:选取6只孕鼠,分别腹腔注射LPS及Zymosan后,取胚胎抽提总RNA,经纯化反转录等过程合成生物素标记的cRNA,经片断化后与Rat Genome 230 2.0 Array芯片杂交,读取芯片结果并进行分析.结果:LPS组有183个基因上调、270个基因表达下调,Zymosan组有144个基因表达上调、417个基因表达下调.有50个基因在上述两组中均表达上调,其中已知功能的有9个;有173个基因在上述两组中表达均下调,已知功能的有85个.结论:应用全基因组芯片筛选了孕鼠经炎症刺激后胚胎差异表达的基因,为进一步研究孕鼠经炎症刺激后仔鼠血压升高的机制提供了新的思路.  相似文献   

4.
胚胎鼠胃粘膜上皮细胞的原代培养   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用胰酶冷消化法对胚胎鼠胃粘膜上皮细胞进行了培养,细胞培养于含20%的胎牛血清的DMEM/F12的培养液中,种植24h后开始生长,3d长成片状,相差显微镜下观察90%的细胞具有上皮细胞特征。免疫细胞化学显示:(a)90%的细胞上皮角蛋白染色阳性;(b)90%的上皮细胞PAS染色阳性;(c)20%的上皮细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)染色阳性。透射电镜可见微绒毛、连接复合物(紧密连接,桥粒)、丰富的糖原、线粒体。放射自显影结果表明:上皮细胞具有合成DNA的能力,而且在培养2d时增殖能力最强。本实验为研究胃粘膜的功能提供了较好的方法。  相似文献   

5.
目的:探讨妊娠期补锌对染汞孕鼠胚胎发育毒性的保护作用.方法:建立孕鼠动物模型,应用不同剂量的氯化甲基汞(0.01、0.05、2.00mg/kg·d)及5.00mg/kg·d硫酸锌于妊娠6~9天连续灌胃.蒸馏水灌胃为对照组,观察孕鼠及胚胎的汞毒性及硫酸锌的影响.应用ICP-MS法测定各组胎鼠脑组织汞含量;Western blot法检测各组胎鼠脑bcl-2蛋白表达情况;TUNEL法检测各组胎鼠脑细胞凋亡情况.结果:各组均未发现死胎、吸收胎及畸形胎;0.01、0.05mg/kg·d氯化甲基汞对孕鼠及胎鼠生长发育没有明显的抑制作用;2.00mg/kg·d氯化甲基汞可以明显抑制孕鼠体重增长及胎鼠身长、体重及尾长的增长(P<0.05),但对孕鼠产仔数、胎窝总重及胎盘总重没有明显的影响,0.05mg/kg·d、2.00mg/kg·d 氯化甲基汞组胎鼠脑组织汞含量较对照组明显升高(P<0.05),bcl一2蛋白表达明显下降(P<0.05),脑细胞凋亡较对照组明显升高(P<0.05);应用硫酸锌预处理后,氯化甲基汞对孕鼠及胚胎的毒性作用明显降低(P<0.05),胎鼠脑组织汞含量较染汞组明显降低(P<0.05),bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),胎鼠脑细胞凋亡明显降低(P<0.05).结论:孕期补锌可以降低氯化甲基汞对孕鼠胚胎的毒性作用,其机制与锌通过升高bel-2蛋白的表达而抑制细胞凋亡有关.  相似文献   

6.
从早期胚胎多能干细胞生成的嵌合鼠   总被引:7,自引:2,他引:7  
宋震涛  李秋棠 《遗传学报》1993,20(6):499-503
本文利用囊胚注射法将小鼠胚胎多能干细胞-CCE细胞注射到发育3天半的昆明和C37BL/6J小鼠受体囊胚腔内,经假孕鼠借腹怀胎,获3只CCE细胞毛色嵌合鼠。实验共注射胚胎654个,经培养其恢复成活率73.8%,胚胎移植后,假母受孕率及产仔率分别为32.9%和53%。在所获3只嵌合鼠中,2只为CCE-昆明毛色嵌合鼠,1只为CCE-C37BL/6J毛色嵌合鼠,这是国内首次利用胚胎多能干细胞获得嵌合鼠。为  相似文献   

7.
在纽约举办的讨论关于人类胚胎研究标准的论坛上 ,一些生物学家认为人类胚胎干细胞应该注入鼠的胚胎中以检测它们的临床应用前景。AliBrivanlou (RockefellUniversityinNewYork)等认为 ,在检验人类胚胎干细胞的多能性时需要这种嵌合式的胚胎。而胚胎干细胞将来的临床应用正是利用了这种多能性 ,即这一种类型的细胞可以向不同方向发育而发挥不同的功能。伦理学反对将人类细胞注入人类胚胎的实验。所以研究者认为应该将人类的胚胎干细胞注入鼠的胚胎中 ,继而植入雌性鼠体内让其生长发育 ,然后在发育…  相似文献   

8.
目的:探讨不同声强超声对孕鼠子宫收缩及胎鼠神经损伤的影响及机制。方法:将32只孕鼠随机分为A(0)组、B(2)组、C(4)组、D(8)组,每组各8只,分别接受声强为0 W cm~(-2)、2 W cm~(-2)、4 W cm~(-2)和8 W cm~(-2)的超声辐照20 min。记录孕鼠子宫收缩及子宫平滑肌ATP酶的活力,检测胎鼠大脑皮层与海马神经元凋亡及胆碱能神经系统相关酶的活力。结果:超声增加孕鼠子宫收缩频率、收缩幅度、收缩张力和子宫活动度(P均0.05),降低孕鼠子宫平滑肌中钠钾ATP酶、钙ATP酶和钙镁ATP酶的活性(P均0.05)。超声降低胎鼠大脑皮层和海马中Bcl~(-2)水平(P0.05),增加Bax和Caspase-3水平(P均0.05)。以及促进乙酰胆碱酯酶活力,降低乙酰胆碱和乙酰胆碱转移酶水平(P均0.05)。且4 W cm~(-2)和8 W cm~(-2)的超声比2 W cm~(-2)超声对这些指标的作用更强。结论:4 W cm~(-2)和8 W cm~(-2)超声可能通过降低ATP酶的活性促进孕鼠子宫平滑肌收缩,并可引起胎鼠大脑皮层和海马神经元损伤,机制可能与胆碱能神经元系统失衡有关,2 W cm~(-2)声强的超声对胎鼠神经元损伤甚小。  相似文献   

9.
鼠兔核质杂交胚胎早期发育的研究   总被引:12,自引:1,他引:12  
细胞核移植技术已被证明是研究发育中核质相互关系的非常重要的手段之一,电融合技术也是近十年发展起来的新型细胞融合技术也是近十年发展起来的新型细胞融合技术,本实验运用这两项技术,进行了鼠、兔目间核质杂交实验,小鼠8-细胞核在激活的兔去核卵母细胞中,发五了染色体超前凝聚及核膨胀,融合卵移植到小鼠输卵管4.5天后,冲洗出,有5.4%的重构卵发育到囊胚期,通过染色体检查,囊胚细胞中均为小鼠染色体,其中一个囊  相似文献   

10.
通过往孕鼠体内连续注入BrdU和小鼠胚胎细胞在含BrdU培养基中培养,证明小鼠胚胎细胞的NOR活性明显地被BrdU所抑制;当洗去BrdU后,NOR活性可逐步恢复,怀孕早中期胚胎NOR活性被抑制引起小鼠胚胎器官发育的异常:胎儿流产和出生后幼鼠死亡的比例明显增加;出生的幼鼠眼球晶状体上皮细胞异常地出现1-3个直径平均为0.3μm的不透明颗粒。经组织切片蛋白质特经学显色表明,这些颗粒全为蛋白质颗粒。随着  相似文献   

11.
目的:观察电磁脉冲(electromagnetic pulses,EMP)对清醒大鼠动脉血压和心率的影响。方法:适应性血压测量1周后的14只健康成年雄性SD大鼠按体重随机分为假辐照组和辐照组,每组7只,在锥形平板GTEM小室内接受EMP辐照,EMP辐照参数为:场强200 kV/m,脉冲前沿3.5 ns,脉宽14 ns,重复频率1 Hz,辐照后用无创性尾套式血压测量仪测量2 hr至1 wk内大鼠动脉血压和心率变化规律。结果:照后3 d大鼠动脉血压(收缩压、舒张压和平均动脉压)与假辐照组相比下降显著(P0.05),12 h有下降趋势,其他时间未见显著性差异(P0.05);辐照对大鼠心率也无明显影响(P0.05)。结论:EMP辐照可以引起大鼠血压一过性降低;对大鼠心率无明显影响。  相似文献   

12.
小鼠胚胎徒手分割技术的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究不同分割液和分割前胚胎去致密化与否对昆明白系小鼠的桑椹胚和囊胚的徒手分割以及分割后胚胎移植的影响。方法 在mPBS、1 2 5 %蔗糖液和进口分割液三种不同分割液中对桑椹胚和囊胚进行徒手分割。结果和结论 在蔗糖液与进口分割液中分割桑椹胚 ,成功率显著高于mPBS处理组 (6 9 5 3%、77 4 0 %vs5 6 82 % ) (P <0 0 5 ) ,而半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数三组差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;在蔗糖液与进口分割液中分割囊胚 ,分割后半胚培养的囊胚发育率显著高于mPBS处理组 (72 38%、74 2 9%vs 5 6 2 0 % ) (P <0 0 1 ) ,而分割成功率及囊胚细胞数三组差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;各处理组半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数都显著低于对照组体外培养桑椹胚的囊胚发育率 (98 70 % )和囊胚细胞数 (6 3 6 7± 5 78) (P <0 0 1 ) ;桑椹胚经去致密化处理后分割 ,其分割成功率显著高于未处理组 (82 90 %vs 5 6 6 0 % ) (P <0 0 1 ) ,处理组半胚培养的囊胚发育率也显著高于未处理组 (73 80 %vs 4 6 80 % ) (P <0 0 1 ) ;共移植 1 4 2枚 2分胚形成的囊胚移植于 1 1只受体 ,其中 3只妊娠 ,分别产仔 2只、3只和 4只  相似文献   

13.
目的:研究电磁辐射对体外培养骨髓来源的内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附能力的影响,并探讨其与肾脏疾病的可能关系。方法:密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞(MNCs),接种至纤维连接素包被的培养板上,培养6d后进行免疫细胞化学和免疫荧光鉴定EPCs。采用MTT比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验,观察平均功率密度为65mW/cm2,时间20min的电磁辐射对EPCs的增殖、迁移、黏附能力的影响;同等剂量全身照射大鼠,光镜和透射电镜观察大鼠肾脏组织学和超微结构的变化。结果:从大鼠骨髓能成功分离培养获得EPCs。EPCs的增殖、迁移、黏附能力较对照组显著下降;大鼠接受全身照射后各时相点无明显组织学改变,但超微结构显示在照射后3h后开始出现肾小球毛细血管袢足突肿胀,12h后出现部分足突融合。结论:电磁辐射导致EPCs生物功能显著减弱,肾小球超微结构改变,电磁辐射可能与起肾脏疾病的发生有关。  相似文献   

14.
乙醛磺酸对小鼠胚胎细胞遗传和胚胎发育影响的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
王永红  赫荣乔 《遗传学报》1997,24(4):305-310
本文报道乙醛磺酸(SAD)不仅会降低小鼠胚胎细胞的rRNA基因转录活性,而且还明显提高了胚胎细胞姐妹染色单体互换(SCE)频率,导致胚胎发育停滞和胎儿死亡,最终使幼鼠出生率明显下降。当SAD浓度为10-5mol/L时,小鼠胚胎细胞rRNA基因转录活性降低为正常值的15%,并引起SCE频率成倍增加,幼鼠出生率仅为正常值的50%;当SAD浓度增至10-3mol/L时,此时rRNA基因转录活性完全被抑制,而且SCE频率增加为正常值的4.8倍,幼鼠出生率从正常值100%降为4%。SAD对小鼠胚胎细胞这种细胞遗传学效应和对胚胎发育影响的程度与该药浓度成正相关。此外,我们还对rRNA基因转录活性和SCE的改变与哺乳类胚胎发育之间的关系进行了初步的讨论。  相似文献   

15.
目的:探讨甲状腺功能亢进(甲亢)孕妇经治疗后,其体内25-羟维生素D(25-(OH)D3)水平对42天婴儿胫骨声波的传导速度(speed of sound,SOS)值、骨代谢生化指标的影响。方法:选取我院门诊及住院确诊的甲亢孕妇40例为甲亢组(T组),随机抽取健康孕妇40例作为对照组(C组),甲亢组给予丙硫氧嘧啶治疗后,监测两组孕妇25-(OH)D3水平与生后42天婴儿的胫骨SOS值、骨代谢生化指标,并进行对比观察、统计分析。结果:甲亢组孕妇在产后42天体内25-(OH)D3的水平比其在产后第1天升高(P〈0.05),甲亢组孕妇在产后42天体内25-(OH)D3水平接近对照组(P〉0.05),在产后42天婴儿的胫骨SOS值接近对照组(P〉0.05),甲亢组产后42天婴儿的血清钙(Ca)及血清碱性磷酸酶(AKP)接近对照组(P〉0.05)。结论:甲亢组孕妇给予丙硫氧嘧啶治疗后,甲状腺功能恢复正常,其体内25-(OH)D3水平升高,所产42天婴儿的骨密度也随着升高。  相似文献   

16.
The expressions of the c- and N- myc proto-oncogenes during oral development of midgestational mouse embryos were examined by in situ hybridization in order to analyze their roles. In the mandibular rudiment, c- myc RNA was strongly expressed in the mesenchymal condensation around the ossification center in which high-level expression of 2 ar (osteopontin) was detected. In tooth germs, c- myc was strongly expressed in the epithelia at the bud stage, and its expression gradually became restricted to the inner enamel epithelia from the cap to bell stages. In contrast, N- myc expression was detected in the undifferentiated mesenchymal cells of the dental papilla. Incorporation of BrdU was examined immunohistochemically to study the relationship between the expressions of c- and N- myc and cell proliferation. Unexpectedly, the distribution of BrdU labelled regions was not coincident with the expressions of c- and N- myc . These results suggest that the level of myc expression is not necessarily related to cell proliferation.  相似文献   

17.
小鼠胚胎体外发育培养基中氨基酸含量变化   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过检测哺乳动物早期胚胎体外发育过程中可以消耗或生成某些氨基酸的含量,可以了解胚胎的发育潜能。利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测KSOMaa培养基中17种氨基酸含量的变化,了解昆明小白鼠(Mus musculus)植入前胚胎体外培养过程中氨基酸含量的变化,旨在寻找一种能有效支持昆明小鼠胚胎体外发育的培养基氨基酸组成,优化小鼠胚胎体外培养体系。将180枚原核胚分为9组,体外培养至囊胚,分别于胚胎发育不同时期取样做高效液相色谱分析。这些氨基酸在胚胎发育不同时期的培养基中含量变化可分为5种类型:①在2细胞期增加但在4细胞期、8~16细胞期减少,囊胚期又增加的氨基酸(甘氨酸、亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸);②在胚胎发育各个时期均下降(谷氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、组氨酸);③在胚胎发育各个时期均增加(丝氨酸、赖氨酸、丙氨酸);④2细胞期含量减少而在其他时期持续增加(天冬氨酸、脯氨酸、色氨酸);⑤囊胚期减少,其他时期都有增加(异亮氨酸)。  相似文献   

18.
为探讨多花地宝兰(Geodorum recurvum)胚胎发育的系统分类学意义,采用石蜡制片法对多花地宝兰胚囊和胚的发育进行解剖学观察。结果表明,在开花前,多花地宝兰胚珠原基发育缓慢,开花授粉后胚珠原基快速发育成"树状二杈分枝结构",随后在"分枝结构"末端形成孢原细胞,开始胚囊发育。多花地宝兰的胚囊发育属于单孢蓼型胚囊,胚珠具有双层珠被。孢原细胞形成后,经过细胞膨大延长发育形成胚囊母细胞,胚囊母细胞经过减数分裂形成线性四分体,在珠孔端形成1个功能大孢子,功能大孢子经过3次有丝分裂形成8核胚囊。多花地宝兰的胚发育具有藜型和紫苑型两种方式。双受精完成后,多花地宝兰合子进行一次橫裂后形成基细胞和顶细胞;基细胞经过多次分裂形成细胞团,细胞团中的细胞向不同方向膨大延长形成多个胚柄细胞;顶细胞有两种分裂方式,一种是横裂形成藜型胚,一种是纵裂形成紫苑型胚。因此,推测多花地宝兰在兰科植物系统分类学上属于较为原始种。  相似文献   

19.
基因型和胚龄对小麦未成熟胚离体培养反应的影响   总被引:22,自引:0,他引:22  
本文对34种基因型的小麦未成熟胚在离体培养中的反应进行了比较。结果表明,94%的供试基因型愈伤组织诱导率都可达到80%以上,若排除供体植株环境条件的不同和接种过程中的人为因素可能造成的影响,不同基因型的愈伤组织诱导率看来没有根本的差异。愈伤组织分化率因基因型的不同变动在0—60%之间,平均为32.7%。虽然同一基因型的盾片愈伤组织分化率在不同年份中有所不同,但是愈伤组织是否具有再生能力?看来是个稳定的遗传性状。因此小麦未成熟胚对愈伤组织诱导的反应和愈伤组织的再生能力可能具有不同的遗传基础。本文的结果还表明,虽然最适于培养的未成熟胚的大小为1毫米左右,伹小至0.3毫米的未成熱胚仍能以几乎100%的频率形成愈伤组织,60%左右的愈伤组织能分化出再生檀株,只是所需的时间比1毫米左右的胚较长。  相似文献   

20.
目的 采用模式动物斑马鱼作为研究对象,观察氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)暴露对胚胎和幼鱼早期神经发育的影响.方法 在一般毒性评价的基础上,通过整体胚胎细胞凋亡检测和脑组织病理学检查,了解CPZ对神经发育的器质性改变;采用神经行为学方法,包括幼鱼触动逃避反应、自发运动以及惊恐逃避反射等,研究氯丙嗪暴露所致的神经发育功能性障碍.结果斑马鱼胚胎受精后6 h(6 hpf)~72 hpf暴露于CPZ(≥5 mg/L)可引起胚胎和幼鱼死亡、致畸和幼鱼孵化延迟,并呈浓度和时间依赖性;采用吖啶橙染色检测36 hpf整体胚胎凋亡细胞,发现凋亡细胞主要集中在胚胎中脑、后脑、丘脑以及中后脑连接区、脊索和尾部等处;脑组织病理学检测发现,7dpf幼鱼颅腔增大、脑体积减小、脑细胞缩小且细胞间隙增宽.6~72 hpf CPZ(≥0.0625 mg/L)暴露后,幼鱼神经行为学研究发现,CPZ(≥0.125 mg/L)可引起3dpf幼鱼触觉运动能力下降;CPZ(≥0 5 mg/L)可浓度依赖性地抑制幼鱼自发运动,并出现僵直不动、震颤或快速刻板式转圈运动等行为改变;光惊恐实验中,暗环境下各暴露组幼鱼对突发强光刺激均表现为惊跳逃避,并且暗-光交替期运动加速度变化与对照组无显著差异;在撤除光源后,1mg/L和2 mg/L暴露组幼鱼暗适应时程缩短,而0.125 mg/L和0.25 mg/L暴露组暗适应时程延长,提示CPZ对外界刺激引发的幼鱼活跃游动有抑制和促进双重毒性作用.结论 CPZ暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼具有明显的神经发育毒性作用.模式动物斑马鱼作为一种高通量筛选模型在外源性化合物神经发育毒性评价中具有较好的应用前景.  相似文献   

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