柳叶白前化学成分研究

从柳叶白前根和茎中分离并鉴定了7个化合物,分别为β-谷甾醇（β-sitosterol,1）,2,4-二羟基苯乙酮（1-（2,4-dihydroxphenyl）ethanone,2）,间二苯酚（resorcinol,3）,4-羟基-3-甲氧基苯乙酮（1-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）e-hanone,4）,4-羟基苯乙酮（1-（4-hydroxyphenyl）ethanone,5）,齐墩果酸（oleanolic acid,6）,蔗糖（sucrose,7）。其中化合物2-7为首次从该植物中分得。     

利用重组大肠杆菌产聚-4-羟基丁酸的研究

重组大肠杆菌 E.coli XL-1 Blue（pKSSE5.3）携带Ralstonia　eutropha　H16的 PHA聚合酶基因（phaC）和Clostridium kluyveri的4-羟基丁酸:CoA转移酶基因（orfZ）,可以利用葡萄糖和4-羟基丁酸为碳源合成均聚的聚-4-羟基丁酸[P（4HB）]。优化培养基和培养条件后,进行了补料分批培养。结果表明,经68h左右培养,E.coli XL-1 Blue（pKSSE5.3）的发酵液中菌体干重达13g/L,P（4HB）的密度达5g/L,P（4HB）百分含量为36％。从收获的冻干细胞中提纯得到40g均聚的P（4HB）,为进一步分析检测P（4HB）生物、理化、加工特性及其应用价值成为可能。     

中药大蓟化学成分的研究

从大蓟的50％乙醇提取物中分离得到2个木脂素：（-）2-（3’-甲氧基4’-羟基-苯基）-3,4-二羟基4-（3＂-4＂-羟基-苄基）-3-四氢呋哺甲醇（1）和络石苷（2）,以及另外6个化合物：蒙花苷（3）、柳穿鱼叶苷（4）、粗毛豚草素（5）、芹菜素（6）、咖啡酸（7）和对-香豆酸（8）。本文首次在蓟属植物中发现木脂素类成分,化合物7也为首次从本植物中分离得到,通过体外玻片法对化合物1—8进行凝血活性测定,发现化合物3、4具有一定的促凝血作用。     

头花马先蒿和管花马先蒿的化学成分

从头花马先蒿全草中发现13个化合物,经波谱分析鉴定为：（±）-松脂素（1）、金合欢素（2）、木犀草素（3）、7．去氧栀子新苷（4）、yuheinoside（5）、euphroside（6）、mussaenosidic acid（7）、莫桑苷（8）、桃叶珊瑚苷（9）、角胡麻苷（10）、异角胡麻苷（11）、贞桐苷A（12）和开德苷元（13）。从管花马先蒿全草中发现4个化合物,经鉴定为：（＋）．dehydrovomifoliol（14）、催吐萝芙木醇（15）、ω-hydroxypropioguaiacone（16）和3-hydroxy-1-（4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl）-1-propanone（17）。所有化合物均为首次在该种中发现。     

黑盖地花菌中一个新的grifolin衍生物

从黑盖地花菌（Albatrellus yasuda）中分离得到4个grifolin衍生物：grifolene（1）,grifolin（2）,grifolicacid（3）和neogrifolin（4）,其中1为新化合物,它的化学结构通过波谱学方法鉴定。     

组胺H4受体在胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的：研究胃癌腺癌（gastric adenocarcinoma,GAC）中组胺H4受体的表达水平及其临床意义。方法：60例GAC组织（病例组）与配对癌旁组织（adjacent normal tissue,ANT）中应用免疫组织化学技术检测组胺H4受体的表达,应用实时荧光定量RT-PCR方法检测组胺H4受体mRNA的表达,统计分析组胺H4受体表达与临床病理特征之间的关系。结果：①胃腺癌组织中组胺H4受体蛋白的阳性表达率（11.7%）显著低于癌旁正常组织（96.7%）。②胃腺癌组织中组胺H4受体mRNA水平较癌旁组织明显降低（p〈0.001）。③组胺H4受体蛋白和mRNA表达异常和肿瘤的病理分级有相关性（p=0.0027和p=0.0011）,也与有无胃周淋巴结转移有关（p〈0.001和p=0.0049）。结论：组胺H4受体在胃腺癌组织有表达异常,表达量与病理分期相关。组胺H4受体表达异常和组胺水平紊乱可能在胃癌发生发展过程中有重要作用。     

香烟烟雾暴露对大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血4-HNE和γ-GCS表达的影响

目的研究香烟烟雾暴露对大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）及外周血4-羟基壬稀醛（4-hydroxynonenal,4-HNE）和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（gamma-Glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）表达的影响,探讨4-HNE及γ-GCS在COPD氧化$抗氧化失衡发病机制中的作用。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为不吸烟组、吸烟6周组和吸烟12周组;采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ABC-ELISA）法分别检测各组大鼠BALF及外周血4-HNE和γ-GCS的含量。结果 （1）与不吸烟组（15.917±1.584;12.305±1.822）比较,吸烟6周组（21.376±2.80;18.333±2.585）和吸烟12周组（28.634±2.999;22.754±3.882）大鼠BALF和外周血中4-HNE含量明显增加,差异均有统计学意义（P均〈0.01）;吸烟12周组与吸烟6周组比较有所增加,差异也有统计学意义（P〈0.01）。（2）与不吸烟组（13.525±2.311;11.847±1.171）比较,吸烟6周组（15.802±1.647;16.221±1.577）大鼠BALF和外周血中γ-GCS的表达明显增加,差异均有统计学意义（P〈0.05;P〈0.01）;与不吸烟组比较,吸烟12周组（11.527±1.606;9.015±1.569）的表达明显减少,差异也有统计学意义（P〈0.05;P〈0.01）。（3）吸烟6周组BALF及外周血4-HNE和γ-GCS的表达呈正相关（r=0.764,r=0.674）,吸烟12周组BALF中4-HNE和γ-GCS表达呈负相关（r=-0.777）,差异均有统计学意义（P均〈0.05）,而外周血中二者表达无显著相关性。结论香烟烟雾暴露可使大鼠体液4-HNE及γ-GCS的表达水平增高,随着吸烟时间延长,γ-GCS逐渐降低,提示二者在COPD氧化$抗氧化失衡中发挥一定的作用。     

朗德鹅胆汁的化学成分及金属蛋白酶抑制活性研究

应用多种色谱技术进行分离纯化,从朗德鹅胆汁85％乙醇提取物中分离得到6个化合物。经理化性质和光谱数据分析鉴定为苯乙酸（1）、鹅去氧胆酸（2）、鹅去氧胆酸乙酯（3）、棕榈酸-α-单甘油酯（4）、顺-6-十八碳烯酸（5）、（4E）-2-[2＇-hydroxyhexadecanoylamino]-4-octadecane-1,3-diol（6）。化合物1、3、4和6为首次从该属动物胆汁中分得,其中化合物6为首次从陆生动物胆汁中分得的一种神经酰胺类成分。首次对化合物2、4和5进行抑制金属蛋白酶活性的实验,评价了三个化合物的生物活性。     

青藤碱对人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度影响的体外研究

目的探讨青藤碱（SIN）对人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度的体外影响及其效应机制。方法建立体外人外周血CD4^＋T淋巴细胞模型,分别作以下处理：（1）空白对照组;（2）环孢素（CsA）组（50ng／m1）;（3）低浓度SIN组（10μmol／1）;（4）中浓度SIN组（200μmol／1）;（5）高浓度SIN组（1000μmol／1）。分别用MTT比色法和流式细胞术（FCM）检测CD4^＋细胞增殖和细胞内Ca^2＋荧光强度。采用方差分析比较各组间差异的统计学意义。结果（1）高浓度SIN组、中浓度SIN组与其他各组细胞增殖抑制率存在差异（F=1444．228,P=0．000）;（2）FCM检测细胞内Ca^2＋浓度结果：中浓度SIN组、高浓度SIN组与其他各组差异有统计学意义（F=479．055,P=0．000）;（3）经SIN处理后,人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2＋浓度之间存在负相关r=-0．836,P=0．005）。结论SIN能浓度依赖性地抑制人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度升高,人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2＋浓度之间存在显著性负相关。     

中国南海豆荚软珊瑚(Lobophytum sp.)中倍半萜化学成分的研究

用硅胶柱层析和凝胶对柱层析对豆荚软珊瑚（Lobophytum sp．）的乙醚提取物进行分离纯化,得到6个倍半萜类似物;根据其化学性质,结合波谱技术（MS,NMR等）,它们分别鉴定为：（＋）-alismol（1）,alismoxide（2）,entspathulenol（3）,（＋）-10α,4β-aromadendranediol（4）,4α,10α-aromadendranediol（5）及aromadendrane-10α, 4β-dilo（6）。这些化合物均系首次从该属珊瑚中分离得到。     

过表达LeNLP4转录因子提高番茄抗低温胁迫能力

NAC（NAM-ATAF1,2-CUC2）转录因子在植物胁迫响应中起重要作用。为了探讨三舭丹基因在番茄抗低温胁迫中的功能,分离了番茄LeNLP4转录因子基因,并获得转正义LeNLP4基因番茄植株。荧光定量PCR分析表明,LeNLP4的表达受低温诱导。与野生型植株相比,在4℃胁迫下转基因植株具有较高的生长量和光系统II（PSH）最大光化学效率（Fv／Fm）、过氧化氢（H2O2）和超氧阴离子（O2-）清除速率、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,以及较低的丙二醛（MDA）含量和相对电导率（REC）。过表达株系中SICBF1的表达高于野生型。上述结果表明,LeNLP4的过表达提高了转基因番茄抗低温胁迫能力。     

APETALA1启动子驱动AtlPT4在转基因拟南芥中表达导致花和花器官发育异常

细胞分裂素对拟南芥（Arabidopsis thaliana）花分生组织细胞的分裂和分化具有重要作用。本研究利用APETALA1（AP1）特异启动子在花分生组织和第1、2轮花器官中表达细胞分裂素合成酶（isopentyl transferase,IPT）基因IPT4,研究细胞分裂素对花和花器官发育的影响。在pAP1∷IPT4转基因植株中出现了花密集和花器官数目增多等现象。原位杂交和GUS组织染色结果发现,在pAP1∷IPT4转基因植株中,花分生组织特征决定基因LEAFY（LFY）与花器官特征决定基因AP1、PISTILLATA（PI）和AGAMOUS（AG）的表达量均有不同程度的提高。研究结果表明在拟南芥中表达pAP1∷IPT4影响其花和花器官的正常发育。     

APETALA1启动子驱动AtIPT4在转基因拟南芥中表达导致花和花器官发育异常

细胞分裂素对拟南芥（Arabidopsis thaliana）花分生组织细胞的分裂和分化具有重要作用。本研究利用APETALA1（AP1）特异启动子在花分生组织和第1、2轮花器官中表达细胞分裂素合成酶（isopentyl transferase,IPT）基因IPT4,研究细胞分裂素对花和花器官发育的影响。在pAP1∷IPT4转基因植株中出现了花密集和花器官数目增多等现象。原位杂交和GUS组织染色结果发现,在pAP1∷IPT4转基因植株中,花分生组织特征决定基因LEAFY（LFY）与花器官特征决定基因AP1、PISTILLATA（PI）和AGAMOUS（AG）的表达量均有不同程度的提高。研究结果表明在拟南芥中表达pAP1∷IPT4影响其花和花器官的正常发育。     

许树中苯乙醇苷类化合物的研究

用层析方法从许树Clerodendrum inerme的乙醇提取物中分离得到9个糖苷类化合物,通过光谱分析,鉴定结构为毛蕊糖苷（verbascoside,1）、异毛蕊糖苷（isoverbascoside,2）、脱咖啡酰基毛蕊糖苷（decaffeoylverbascoside,3）、campneosideI（4）、cistanosideE（5）、markhamiosideF（6）、isocistanosideF（7）、benzyl glucoside（8）和purpureasideB（9）。其中化合物4—9为首次从该植物中分离得到。     

广东土牛膝的化学成分

广东土牛膝为菊科泽兰属植物华泽兰（Eupatorium chinense）的干燥根。从其甲醇提取物中共分离得到11个化合物,其中eupatorinA（1）为一新化合物,经波谱学方法鉴定为（threo）-3-O-acetyl-1-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-[4-（3-hydroxy-1-（E）-propenyl）-2,6-dimethoxyphenoxy]propyl-β-D-glucopy-ranoside。已知化合物分别鉴定为（threo）-3-hydroxy-1-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-[4-（3-hydroxy-1-（E）-propenyl）-2,6-dimethoxyphenox-y]-propyl-β-D-glucopyranoside（2）,ardisiacrispinA（3）,ardisiac-rispinB（4）,euparone（5）,3-（2,3-dihydroxy-isopen-tyl）-4-hydroxyacetophenone（6）,12,13-di-hydroxy-euparin（7）,gymnastone（8）,N-（2′-hydroxy-tetracosanosyl）-2-amino-1,3,4-trihydroxy-octa-dec-8-（E）-ene（9）,stigmasterol（10）和stigmasterol-3-O-β-D-glucopyranoside（11）。化合物2-4为首次从菊科植物,5-8为首次从泽兰属植物中分离得到。     

p-MAPK、CyclinD1和CDK4蛋白在大肠癌中的表达及相关性

目的 检测p-MAPK、CyclinD1和CDK4蛋白在大肠癌中的表达,并探讨其相关性.方法 选取78例大肠癌组织,距癌灶3 cm以外的癌旁组织,进行组织切片,HE染色进行病理分型,应用S-P免疫组化法对组织中的p-MAPK、Cyclin D1和CDK4进行检测.结果 病理分型后,78例大肠癌中p-MAPK、CyclinD1和CDK4蛋白的阳性表达率分别为67.9 %（53/78）、57.7 %（45/78）和39.7 %（31/78）;78例相应癌旁组织中阳性表达率分别为6.4 %（5/78）、10.3 %（8/78）和19.2 %（15/78）.三者阳性表达率和阳性强度均以大肠癌中为高（P＜0.01）;大肠癌中p-MAPK与CyclinD1表达呈明显正相关（P＜0.01）,而与CDK4蛋白表达无明显相关性（P＞0.05）,CyclinD1和CDK4表达呈正相关（P＜0.05）,RT-PCR检测结果与免疫组化相似,p-MAPK、CyclinD1和CDK4蛋白的阳性表达率分别为8.2 %（61/78）、67.9 %（53/78）和53.8 %（42/78）;相应癌旁组织中阳性表达率分别为3.8 %（3/78）、2.6 %（2/78）和6.4 %（5/78）.结论 MAPK活化可能是cylinD1激活的原因之一,并在大肠癌发生过程中可能起重要作用;而Cyclin D1 在细胞周期中可与CDK4 结合,从而促进细胞周期进程.     

卵巢上皮癌中ING4基因启动子的甲基化状态及其临床意义

目的：探讨卵巢上皮癌中ING4基因启动子的甲基化状态及其临床意义。方法：收集2005年7月至2012年6月哈尔滨医科大学附属第一医院行全面分期手术并经病理检查确诊的150例卵巢上皮癌组织标本,并以同期因子宫肌瘤或子宫腺肌症行子宫全切除术或次全切除术并经病理检查确诊为正常卵巢组织的150例标本作为对照组。采用甲基化特异性PCR（MSP）技术检测卵巢上皮癌组织与正常卵巢组织中ING4基因启动子的甲基化状态,蛋白印迹法检测1NG4蛋白的表达,并分析ING4基因启动子的甲基化状态与卵巢上皮癌临床病例特征的关系。结果：卵巢上皮癌组织中ING4基因启动子的甲基化阳性率为42．7％（64／150）,明显高于正常卵巢组织（4％,6／150）,差异有统计学意义（P〈0．05）。ING4基因启动子甲基化阳性的卵巢上皮癌组织中ING4蛋白表达阴性或弱阳性;1NG4基因启动子甲基化阴性的卵巢上皮癌和正常卵巢组织中ING4蛋白表达阳性;在64例1NG4基因启动子甲基化的卵巢上皮癌组织中,ING4蛋白表达强度与ING4基因启动子的甲基化程度呈负相关（r=-0．435,P〈0．05）。卵巢上皮癌组织中,1NG4基因甲基化的阳性率随着手术病理分期和组织学分级的增加而增加（P〈0．05）;卵巢透明细胞癌（55．6％,10／18）和卵巢子宫内膜样癌（59-3％,16／27）中ING4基因甲基化的阳性率显著高于浆液性囊腺癌（33．9％,20／59）和粘液性囊腺癌（39．1％,18／46）（P〈0．05）;ING4基因启动子的甲基化状态与患者的年龄、有无腹水及淋巴结转移均无显著相关性（P〉0．05）。结论：ING4基因启动子的甲基化可能促进了其在卵巢上皮癌组织中的表达失活,进而促进了卵巢上皮癌的生长和分化。     

木黄酮对哮喘豚鼠蛋白酪氨酸激酶JAK1和白介素-4表达的影响

目的：探讨支气管哮喘豚鼠肺组织中蛋白酪氨酸激酶（PTK）JAK1和白介素-4（IL-4）的表达及染料木黄酮的作用。方法：39只健康雄性豚鼠随机分为对照组（C组）、哮喘组（A组）和染料木黄酮干预组（G组）,以卵蛋白致敏法复制哮喘模型,ELISA法检测肺组织匀浆中IL-4浓度,Westernblot检测PTK-JAK1的表达。结果：肺组织中IL-4浓度与A组高于C组和G组;PTK-JAK1的表达A组高于C组和G组;PTK-JAK1的表达与IL-4的浓度呈正相关。结论：PTK-JAK1调控IL-4的表达而参与哮喘的炎症反应,染料木黄酮对其有抑制作用。     

卵巢上皮癌中ING4 基因启动子的甲基化状态及其临床意义

目的：探讨卵巢上皮癌中ING4 基因启动子的甲基化状态及其临床意义。方法：收集2005 年7 月至2012 年6 月哈尔滨医科 大学附属第一医院行全面分期手术并经病理检查确诊的150 例卵巢上皮癌组织标本,并以同期因子宫肌瘤或子宫腺肌症行子宫 全切除术或次全切除术并经病理检查确诊为正常卵巢组织的150 例标本作为对照组。采用甲基化特异性PCR（MSP）技术检测卵 巢上皮癌组织与正常卵巢组织中ING4 基因启动子的甲基化状态,蛋白印迹法检测ING4 蛋白的表达,并分析ING4 基因启动子 的甲基化状态与卵巢上皮癌临床病例特征的关系。结果：卵巢上皮癌组织中ING4 基因启动子的甲基化阳性率为42.7%（64/150）, 明显高于正常卵巢组织（4%,6/150）,差异有统计学意义（P<0.05）。ING4 基因启动子甲基化阳性的卵巢上皮癌组织中ING4蛋白 表达阴性或弱阳性;ING4 基因启动子甲基化阴性的卵巢上皮癌和正常卵巢组织中ING4 蛋白表达阳性;在64 例ING4 基因启动 子甲基化的卵巢上皮癌组织中,ING4 蛋白表达强度与ING4 基因启动子的甲基化程度呈负相关（r=-0.435,P<0.05）。卵巢上皮癌 组织中,ING4 基因甲基化的阳性率随着手术病理分期和组织学分级的增加而增加（P<0.05）;卵巢透明细胞癌（55.6%,10/18）和卵 巢子宫内膜样癌（59.3%,16/27）中ING4 基因甲基化的阳性率显著高于浆液性囊腺癌（33.9%,20/59）和粘液性囊腺癌（39.1%, 18/46）（P<0.05）;ING4基因启动子的甲基化状态与患者的年龄、有无腹水及淋巴结转移均无显著相关性（P>0.05）。结论：ING4 基 因启动子的甲基化可能促进了其在卵巢上皮癌组织中的表达失活,进而促进了卵巢上皮癌的生长和分化。     

植物RNA沉默的分子机制研究进展

RNA沉默（RNA silencing）是真核生物中的一种抵抗外源遗传因子（病毒、转座子或转基因）及调控基凶表达的防御机制。参与植物RNA沉默的酶及蛋白质主要包括6种RNA依赖的RNA聚合酶、4种Dicer-like（DCL）核酸内切酶和10种Argonautes蛋白。植物中4条RNA沉默途径分别由微小RNA（miRNAs）和3种小干扰RNA（siRNAs）介导,包括反式作用siRNAs（ta－siRNAs）、天然反义siRNAs（natsiRNAs）和异染色质siRNAs（hc-siRNAs）。在植物RNA沉默的系统性传播中,由DCL4或DCL2将dsRNAs裁剪为次级SiRNAS,以放大RNA沉默信号和增强沉默效应。