细茎石斛拟原球茎生长与有效成分积累的关系

目的 :研究细茎石斛拟原球茎生长规律及其与两种有效成分总生物碱和可溶性多糖积累的关系。方法 :采用液体静止培养方法培养细茎石斛拟原球茎 ,在一个周期 ( 60天 )内 ,每隔 1 0天取样 ,测定拟原球茎的鲜、干重 ,总生物碱含量和可溶性多糖含量。结果 :液体培养的细茎石斛拟原球茎生长曲线大致呈“S”型 ,拟原球茎经过 1 0d左右的延迟期后进入对数生长期 ,第 5 0d左右达到生长高峰 ,此后 ,生长缓慢 ,进入静止期。拟原球茎中总生物碱和可溶性多糖含量随着拟原球茎的生长逐渐积累 ,在培养的第 40d左右达到高峰 ,之后含量有所下降 ,这两种有效成分的积累与生长基本同步 ,且拟原球茎中两种有效成分的含量接近或超过野生植株茎中的含量。结论 :液体培养的细茎石斛拟原球茎生长曲线大致呈“S”型 ,总生物碱和可溶性多糖的积累与生长基本同步 ,且拟原球茎中两种有效成分的含量接近或超过野生植株茎中的含量     

天然有机物对铁皮石斛原球茎生长及有效成分的影响

为铁皮石斛原料药的生产提供一种新方法。以MS为基本培养基,探讨天然有机附加物与培养时间对铁皮石斛原球茎(PLBs)生长及主要药用成分石斛多糖和总生物碱的影响。研究结果表明:在添加不同浓度土豆汁的培养基中,以250 g/L效果最好,其干物率和多糖含量均在30天时达最大值,分别为8. 944%和17. 921%,增殖率在培养50天时最高,为1 028. 94%,而总生物碱含量在40天时积累最多,达0. 031 61%。增殖率、多糖和总生物碱含量均显著高于添加激素的对照组。添加番茄汁的培养基中各指标变化与土豆汁的类似,但原球茎长势差,颜色泛黄,增殖能力较添加土豆汁的差。综上,MS+250 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂条有利于铁皮石斛PLBs生长和有效成分的积累,可考虑作为石斛多糖和石斛碱的生产来源,对铁皮石斛主要药用成分的生产具有重要的实践意义。     

水杨酸对霍山石斛类原球茎细胞生长及多糖合成的影响

本研究考察了水杨酸对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长、多糖合成、碳代谢的影响,并研究了细胞生长、多糖合成以及蔗糖消耗的动力学。结果表明,水杨酸对霍山石斛类原球茎细胞生长有轻微的抑制作用,但能够显著改善类原球茎对碳源的利用,提高胞内可溶性糖的含量,从而促进多糖的合成,其中以添加100μmol/L浓度的水杨酸效果最好,培养18d时,多糖产量达到3.129g/L,为对照的1.63倍。建立的培养动力学模型能较好地反映水杨酸调控霍山石斛类原球茎悬浮培养过程中细胞生长、多糖合成和蔗糖消耗特性。     

脱落酸处理对铁皮石斛类原球茎体耐脱水性的影响

脱落酸（abscisic,ABA）预处理可以显著提高铁皮石斛（Dendrobiumc andidum）类原球茎体（protocrom-like bodies,PLBs）的耐脱水性,其中以5μmol／L的ABA预处理24h效果最好．经2h快速脱水后,类原球茎体存活率约为对照的10倍,达到50％左右。预处理期间细胞相容性物质含量的研究表明,ABA预处理过程中可溶性总糖、蔗糖、可溶性蛋白质及脯氨酸含量均无明显变化,而可溶性多糖含量明显增加,作者认为可溶性多糖的积累是类原球茎体耐脱水性提高的原因之一。     

霍山石斛类原球茎二步法培养细胞生长和多糖合成的动力学研究

磷是调控类原球茎细胞生长和多糖积累的有效因素。为了获得较高的多糖产量,根据霍山石斛类原球茎生长和多糖积累的动力学特性,提出了二步培养方式,采用了补料策略,研究了其培养过程的动力学特性,并建立了相关模型。结果表明,采用二步法培养,生物量从28.7g DW/L提高到44.2g DW/L, 多糖产量从1.86g/L提高到5.22g/L,多糖含量从6.4%提高到11.9%。建立的模型基本反映了类原球茎生长和多糖积累的动力学机制。     

霍山石斛类原球茎二步法培养细胞生长和多糖合成的动力学研究

磷是调控类原球茎细胞生长和多糖积累的有效因素。为了获得较高的多糖产量,根据霍山石斛类原球茎生长和多糖积累的动力学特性,提出了二步培养方式,采用了补料策略,研究了其培养过程的动力学特性,并建立了相关模型。结果表明,采用二步法培养,生物量从28·7gDW/L提高到44·2gDW/L,多糖产量从1·86g/L提高到5·22g/L,多糖含量从6·4%提高到11·9%。建立的模型基本反映了类原球茎生长和多糖积累的动力学机制。     

磷对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响

在确定了最适接种量和外植体细胞生理时间的基础上,研究了在不同起始磷浓度下,霍山石斛类原球茎生长、碳、氮消耗和多糖积累的动力学特性。以生长30d的类原球茎为材料,在接种量为100g/L时,类原球茎生长的最佳起始磷浓度为2.5mmol/L,培养36d时,类原球茎鲜重达496.5g/L。动力学分析表明,磷是霍山石斛类原球茎生长的限制性因素,胞内磷的积累水平与细胞生长具有相关性,2.5mmol/L的磷酸盐有利于碳、氮等营养物质的吸收;而多糖积累的最佳起始磷浓度为0.312mmol/L,培养36d时,其产量为2.22g/L。     

精胺对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响

研究了在添加外源精胺时,霍山石斛类原球茎细胞生长、多糖积累、主要营养物质消耗以及细胞内多胺含量的变化。结果表明,0.6mmol/L的精胺明显促进霍山石斛类原球茎细胞的生长和多糖的合成。细胞的比生长速率从0.046d-1提高到0.054d-1。培养30d时,类原球茎干重达32.4gDW/L,多糖总产量为2.46g/L,分别是对照的1.32和1.31倍。添加外源精胺能够提高内源多胺的含量,同时,蔗糖酶和硝酸还原酶等相关代谢酶的活性增强,促进了碳、氮的吸收和利用。     

硝普钠、植酸和水杨酸对悬浮培养的霍山石斛原球茎生长和生理活性的影响

在建立霍山石斛的液体悬浮培养技术的基础上,添加诱导子硝普钠（SNP）、植酸（PA）和水杨酸（SA）。3种诱导子均可促进霍山石斛原球茎中生物碱的积累,0.1mmol·L-1SNP、7.5g·L-1PA和100μmol·L-1SA处理的原球茎,其生物碱含量分别为不作处理的2.02倍、1.84倍和1.62倍。促进霍山石斛生物碱积累的适宜诱导子为SNP,其适宜浓度为0.1mmol·L-1。高浓度的3种诱导子均导致培养液酸化,原球茎的相对电导率上升,其生物量和生物碱含量明显下降。     

两种黄芪主根内部构造和有效成分含量变化规律的研究

对膜荚黄芪和蒙古黄芪主根内部结构和有效成分含量变化规律的研究发现,由于两种黄芪个体发育节律的不同,其主根内部结构和养分累亦遵循各不同的变化规律,有效成分黄芪甙和总多糖含量亦随这种营养生长和生殖生长交替规律的不同而变化,并且与养分的积累与消耗呈正相关,两种有成分的含量在萌动期前和枯萎期后达到高峰。     

氮源和真菌诱导子对铁皮石斛原球茎悬浮培养的影响

利用正交实验设计研究不同种类和浓度的氮源对铁皮石斛原球茎生长的影响,利用完全随机实验设计研究不同真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响.结果表明硝态氮促进铁皮石斛原球茎鲜重和干重的增加( P ＜0.05);铵态氮促进铁皮石斛原球茎鲜重增加( P ＜0.05).无论鲜重还是干重,硝态氮和铵态氮的影响均不存在互作,最佳组合为:67-V培养液 100 mg/L (NH4)2SO4 800 mg/L KNO3 30 g/L蔗糖 200 g/L马铃薯提取汁.F检验的结果表明,14种真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物量的增加(鲜重与干重)均无显著性影响( P ＞0.05).但与对照铁皮石斛原球茎的多糖含量相比,真菌诱导子g6、g14、g5、g4处理可使其多糖含量分别提高14%、9%、6%、4%.本研究获得了有利于铁皮石斛原球茎生长的硝态氮和铵态氮的最佳搭配方案以及有利于铁皮石斛原球茎积累多糖的四种真菌诱导子,表明通过液体悬浮培养生产铁皮石斛原球茎及其多糖成分具有较好的开发应用前景.     

四种添加物对铁皮石斛原球茎生长及多糖含量的影响

为探讨铁皮石斛(Dendrobium officinale)培养基中添加物的作用,在1/2MS培养基中加入椰肉、甘蔗渣、香蕉皮和麦麸等4种添加物,研究不同浓度添加物和培养时间对原球茎生长和多糖含量的影响。结果表明,4种添加物对铁皮石斛原球茎的增殖、分化和多糖含量均有一定影响,其中添加15.0 g L–1甘蔗渣,培养60 d能明显促进铁皮石斛原球茎的增殖与分化(146.1%);而添加20.0 g L–1甘蔗渣,培养40 d能显著提高铁皮石斛原球茎多糖含量(50.4%)。这说明甘蔗渣是培养铁皮石斛原球茎的适宜添加物,既能促进铁皮石斛原球茎的生长发育,还能降低生产成本。     

不同黄芪品种根中多糖的动态积累及多糖含量比较研究

多糖是药用黄芪根中的主要有效成分之一。本研究分析测定了分属于膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)和蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var.mongolicus)的6个品种在不同时期根中多糖含量的变化以及采收期根中多糖含量的差异和可溶性糖含量的变化。结果表明:各品种均从8月开始根中多糖迅速积累,至受霜害时多糖含量达到最高,受霜害后多糖含量迅速下降,可溶性糖含量上升;在初霜降时(10月4日)6个品种中以旬邑野生膜荚黄芪多糖含量最高。因此8月至初霜降是黄芪多糖积累的主要时期,黄芪的最佳采收期为初霜降前后。而旬邑野生膜荚黄芪是多糖含量较高的优良品种。     

同源四倍体铁皮石斛的生长及多糖积累

通过秋水仙素诱导铁皮石斛多倍体,以外观形态、气孔、染色体数目筛选多倍体植株,分析多倍化对铁皮石斛多糖累积及生长的影响。结果表明,同源四倍体铁皮石斛茎、叶及原球茎的多糖含量分别是二倍体的1.31、1．83及1．95倍,但生长速度显著或极显著低于对照。ISSR分析显示,同源四倍体植株产生较明显的基因变异。     

精胺对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响

研究了在添加外源精胺时,霍山石斛类原球茎细胞生长、多糖积累、主要营养物质消耗以及细胞内多胺含量的变化。结果表明,0.6mmol/L的精胺明显促进霍山石斛类原球茎细胞的生长和多糖的合成。细胞的比生长速率从0.046d^-1提高到0.054d^-1。培养30d时,类原球茎干重达32.4g DW/L,多糖总产量为2.46g/L ,分别是对照的1.32和1.31倍。添加外源精胺能够提高内源多胺的含量,同时,蔗糖酶和硝酸还原酶等相关代谢酶的活性增强,促进了碳、氮的吸收和利用。     

新疆紫草毛状根总糖及多糖含量分析

采用超声提取法,对新疆紫草固体培养毛状根、液体培养毛状根以及2～3年野生根中的总糖和多糖进行了提取测定.结果表明:毛状根中水溶性总糖含量为25.573%,是野生根总糖含量的3.4倍;固体培养的毛状根多糖含量最高,达4.289%,是液体培养毛状根的3.37倍,是野生根的4倍.稳定性试验和重复性试验表明,该研究结果可靠性强,重复性好且稳定.研究发现,新疆紫草毛状根中水溶性总糖和多糖的含量高于野生根.     

建兰和秋兰原球茎的发生及其无性系的建立

本试验采用建兰[Cymbidium ensifolium(L.)SW.]大一白品种和秋兰[Cymbidium ensifolium (L.)CV.Qulan]为实验材料,切取茎尖或侧芽的分生组织,用W培养基,诱导原球茎形成。然后将原球茎培养在MS或W的液体培养基中,形成丛生形原球茎并能继续不断增殖生长,建立无性繁殖系。在丛生形原球茎增殖过程中不断分化出具芽和根的小植株。将小植株切下,培养在MS基本培养基上,待植株达3～4叶时即能转入盆栽。从原球茎开始增殖起不到一年就可出现具有花器官的植株,这些植株中,从小植物形成到花朵完全开放,时间最短的约只2个月。     

锗对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成及氧化还原态的影响

为解决霍山石斛类原球茎液体培养细胞生长缓慢和代谢水平低下的问题,研究了不同浓度的锗(GeO2)对霍山石斛类原球茎增殖、多糖合成及碳氮利用的影响,分析了类原球茎细胞内还原糖、可溶性蛋白质含量、抗氧化酶活性以及细胞氧化还原态的变化。结果表明,适当浓度的二氧化锗(4.0mg/L)显著促进霍山石斛类原球茎的增殖和多糖的积累,最大细胞干重为32.6g/L,最大多糖产量为3.78g/L;显著提高胞内还原糖和可溶性蛋白质含量,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性明显升高,而过氧化物酶的活性则有所降低;氧化还原态分析发现,二氧化锗处理的细胞内还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽的值明显提高,谷胱甘肽还原酶活性升高。添加适量的二氧化锗有利于细胞生长和多糖合成。     

蝴蝶兰原球茎液体增殖培养的研究

以茎尖诱导形成的原球茎为外殖体,采用液体培养方式探讨了不同浓度的激素配比、蔗糖浓度和添加不同量的新鲜液汁对蝴蝶兰原球茎增殖的影响,并比较了液体和固体两种培养方式的原球茎增殖特征.结果表明:不同浓度的外源激素及其配比对蝴蝶兰原球茎增殖影响不明显,但对原球茎生长影响较大,6-BA 2.0 mg/L+Ad 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的激素浓度组合比较适合蝴蝶兰原球茎增殖,蔗糖浓度对蝴蝶兰原球茎增殖和生长影响较大,适合蝴蝶兰PLBs增殖的蔗糖浓度为20 g/L,添加10 % ～40 %的新鲜椰汁对蝴蝶兰原球茎增殖生长有明显促进作用;原球茎液体增殖培养的时间不宜超过4周,5周内连续培养增殖曲线呈倒"V"字形;液体增殖培养的原球茎分化成苗的时间相对较晚.     

粗糙龙胆地下器官龙胆苦苷和可溶性糖含量的动态研究

对两个栽培地点北安和呼兰产粗糙龙胆的主要有效成分龙胆苦苷的含量和可溶性糖含量进行了研究。结果表明:龙胆苦苷含量随发育节律而波动,6月份虽然有一个积累高峰,但含水率高,不宜定为采收期,适宜采收期均应是花期和休眠期。可溶性糖含量相应在6月份出现先低后高的趋势,在生长后期则积累较多。