大鼠肺内NOS之分布及缺氧对其活性的影响

本文以组织化学方法对大鼠肺内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）进行定位研究,并观察了不同时间（８小时～２８天）缺氧时肺内ＮＯＳ活性的变化。结果显示：①正常大鼠各级支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞呈ＮＯＳ强阳性反应;肺血管内膜呈ＮＯＳ阳性反应。②缺氧８小时,肺血管内膜ＮＯＳ阳性反应开始降低,并缺氧时间越长,ＮＯＳ阳性反应越低、③缺氧１４天时,肺泡间质和肺血管周围炎性细胞呈ＮＯＳ阳性反应;缺氧２８天时,炎性细胞ＮＯＳ阳性反应增强。④缺氧对支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞ＮＯＳ的活性无明显影响。从而提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理学作用,而且可能参与缺氧时肺的某些病理学过程。     

纤维结合素分子中Asp1961～Glu1978序列对三结构域多肽在大肠杆菌中表达的影响

构建了人纤维结合素（ＦＮ）的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒,分别编码两个重组多肽：ＣＨ６２（ＦＮ的Ｐｒｏ１２３９～Ｓｅｒ１５１５经Ｍｅｔ和Ａｌａ１６９０～Ｖａ１２０４９相连）和ＣＨ６３（从ＣＨ６２中删除了Ｉｌｅ１８５０～Ｇｌｕ１９７８）．ＣＨ６２在大肠杆菌中的表达效率很低,而ＣＨ６３的表达效率则很高,结果提示ＦＮ分子中的Ａｓｐ１９６１～Ｇｌｕ１９７８序列是影响三结构域多肽在大肠杆菌中表达的关键结构．ＣＨ６３经过溶解和复性后,可通过肝素－琼脂糖亲和层析得到纯品,所得纯品具有结合肝素和结合细胞的功能,且结合细胞的能力比双结构域ＦＮ多肽更强,表明两个结合细胞的功能结构域均有活性．ＣＨ６３的制备为进一步研究具有更强的抑制肿瘤转移作用的基因工程制品奠定了基础．     

慢性缺氧对大鼠肺内皮素表达的影响

本文以ＡＢＣ法和原位杂交技术,观察了慢性缺氧时大鼠肺组织内内皮素－１（ＥＴ－１）的表达情况,结果发现：①正常肺血管内皮细胞有少许ＥＴ－１样阳性染色物质呈现。②缺氧ＩＷ后,肺内ＥＴ－１含量增加,主要位于肺血管内皮细胞和支气管粘膜上皮细胞。③缺氧２Ｗ和３Ｗ后,ＥＴ１阳性免疫物质进一步增加,于肺泡细胞内也见到阳性染色。④缺氧１Ｗ后肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达增加,缺氧２Ｗ和３Ｗ后,ＥＴ－１ｍＲＮＡ的表达进一步加强。提示缺氧可刺激肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ的表达,慢性缺氧时肺内ＥＴ－１持续分泌增加,这可能是缺氧性肺动脉高压发生的重要因素之一。     

急、慢性缺氧对大鼠凝血机能的影响

本文讨论了实验性缺氧对大鼠凝血机能产生的影响。实验结果表明,大鼠在模拟8000米高度两小时后,血小板凝聚性、血小板因子3活性明显增加,纤溶活性下降,同时,纤维蛋白原含量和因子X也明显下降。大鼠在模拟7000米经36天间歇性慢性缺氧,血小板计数、血小板凝聚性,血小板因子3活性、纤维蛋白原含量、因子X活性均显著增加,部分凝血活酶时间缩短、纤溶活性下降,明显地出现凝血增强的趋势。本文还讨论了抗缺氧药物复方党参、异叶青兰对人鼠急性缺氧时凝血机能的影响。     

慢性缺氧对大鼠膈肌组织化学和超微结构影响的研究

研究慢性缺氧和参麦注射液治疗对大鼠膈肌组织化学和超微结构的影响,结果显示：缺氧使膈肌ＳＤＨ活性降低,Ⅰ类纤维极显著减少,运动终板ＣｈＥ活性极显著降低,线粒体肿胀变性,神经肌肉运动终板突触前部囊泡减少,突触间隙模糊,终板模电子密度降低;参麦治疗可恢复缺氧膈肌的ＳＤＨ活性及Ⅰ类纤维数目,显著提高终板ＣｈＥ活性,线粒体结构恢复正常,运动终板突触前部囊泡丰富,突触间隙清晰,终板膜电子密度正常。表明慢性缺氧降低膈肌有氧氧化能力,影响其能量代谢及神经冲动的传递,从而减弱其收缩力,而参安治疗可改善缺氧造成的上述损害,为其临床应用提供了实验医学依据。     

亲和素结合蛋白性质的研究

前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白,在分离纯化ＡＢＰ的基础上,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量,并做了糖蛋白染色及等电点测定,实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－硫基乙醇处理的ＤＤＢＰ仍能与亲和素结合,提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结     

化脓性链球菌纤维粘连蛋白结合蛋白的研究进展

本文介绍化脓性链球菌纤维粘连蛋白（ＥＢＰ）结合蛋白的最新研究进展，对链球菌的粘附机理、纤维粘连蛋白结合蛋白的分子生物学结构特征、在粘附过程中的作用以及其临床意义作了扼要阐述。     

瑞香素的抗整体小鼠缺氧作用

灌服瑞香素300和600mg/kg能延长断头小鼠张口动作持续时间,延长KCN或NaNO_2中毒小鼠的存活时间,且具有一定的量效关系。瑞香素虽不延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间,但能对抗异丙肾上腺素的加速常压密闭缺氧小鼠耗氧速度和缩短存活时间的作用。     

亲和素结合蛋白性质的研究

前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白（ＡＢＰ）。在分离纯化ＡＢＰ的基础上,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量,并做了糖蛋白染色及等电,大测定。实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－巯基乙醇处理的ＡＢＰ仍能与亲和素结合,提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结合。氨基酸修饰剂ＮＡＩ、ＤＴＮＢ、ＮＥＭ及ＮＢＳ对ＡＢＰ与亲和素的结合有不同程度的影响,而ＨＮＢＢ、ＴＮＢＳ及ＩＡＡ对ＡＢＰ与亲和素的结合无影响,提示ＡＢＰ分子中氨基酸残基Ｔｙｒ、Ｃｙｒ是ＡＢＰ与亲和素结合所必需的,可能参与结合位点的形成。另外,测得ＡＢＰ与亲和素结合的结合常数为１．４×１０~（－７）ｍｏｌ／Ｌ。     

缺氧对大鼠海马脑片诱发电位的影响

在脑缺氧损伤的研究中,离体海马切片既可排除血脑屏障,又保持原有神经环路,所得实验结果接近在体实验,是研究脑缺氧的理想模型。近几年来国外已有人报道了缺氧时海马脑片诱发电位的变化;但同时用两个脑片比较不同程度的低氧对脑片诱发电位的影响,却少有报道。本实验采用自行设计的双孔脑片电生理实验系统,用不同浓度的低氧混合气造成不同程度的缺氧环境,以探明不同缺氧程度影响脑片电反应的时间曲线,寻求海马脑片缺氧损伤的特征性反应与不可逆损伤发生的临界值。     

钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪对海马脑片缺氧损伤的保护作用

为了研究钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(trifluoperazine, TFP)抗缺氧脑损伤的作用,应用海马脑片胞外记录技术和高效液相检测技术,研究了TFP对缺氧时脑片群峰电位(population spikes, PS)以及脑片孵育液中氨基酸含量的影响。结果表明, 50 滋mol/L TFP灌流的脑片,缺氧后PS的平均消失时间与缺氧组相比有显著差异(P<0.05);复氧后脑片PS的平均恢复程度为52.8%±14.3%,与缺氧组20.5%±9.8% 相比有非常显著差异(P<0.01);同时,TFP也可显著地抑制缺氧所致脑片孵育液中兴奋性氨基酸含量的增加(P<0.05)。由此可见,TFP对脑缺氧损伤有明显的保护作用,其作用机理可能与抑制海马组织兴奋性氨基酸的释放有关。     

大鼠肺内表皮生长因子(EGF)之分布及缺氧对其含量的影响

本文用免疫体金银法对大白鼠肺内表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)进行了定位研究,并观察缺氧时肺内 EGF 含量的变化。结果显示正常大鼠肺泡细胞、支气管粘膜及肺内血管壁上均含有 EGF 免疫阳性反应物质;缺氧时,肺内 EGF 含量增加。这提示 EGF 不仅对肺具有一定的生理学影响,而且可能参与缺氧时肺的某些病理学过程。     

整合素相关激酶在糖尿病肾病的表达及其意义

目的探讨整合素相关激酶(Integrin-Linked Kinase,ILK)在糖尿病肾病患者肾组织中的表达及其意义.方法对3例正常肾组织,14例糖尿病肾病患者肾穿刺活检标本,应用免疫组织化学方法检测ILK和FN在肾组织的阳性表达强度,并作图像分析处理.结果在正常肾组织,ILK主要表达于肾小球脏层上皮细胞,系膜细胞和小管上皮细胞呈弱表达.在糖尿病肾病,ILK表达于肾小球脏层上皮细胞和系膜细胞,在萎缩变性的肾小管上皮细胞表达增强.在肾小球结节硬化时,ILK表达明显减少.此外,ILK和FN的表达量在糖尿病肾病早、中期成正相关(P<0.001),在糖尿病肾病晚期成负相关(P<0.05).结论 ILK在糖尿病肾病肾组织中表达量显著增加,并与FN的表达有一定的相关性,说明其可能通过促进细胞外基质FN等的积聚,在糖尿病肾小球硬化过程中发挥重要作用.     

纤粘连蛋白对小鼠胚胎体外发育和体外着床的作用

应用小鼠胚泡和外胎盘锥体外培养的方法,研究了纤粘连蛋白对小鼠胚泡发育及胚泡或外胎盘锥粘附和扩展的影响。结果显示,纤粘连蛋白对小鼠胚泡发育有一定的促进作用;对胚泡及外胎盘锥的粘附和胚泡初生滋养层细胞及外胎盘锥次生滋养层细胞扩展均有显著促进作用。纤粘连蛋白分子活性位点的合成肽段精－苷－天冬－丝氨酸可有效抑制纤粘连蛋白对胚泡或外胎盘锥发育、粘附和扩展的促进作用。结果表明,纤粘连蛋白在小鼠胚胎发育和着床过     

慢性缺氧对自发性高血压大鼠血液动力学和血管反应性的影响

本研究观察了鼠龄10周的自发性高血压大鼠(SHR)在慢性缺氧条件下(模拟海拔5000m,15d)体动脉压(SBP)、平均肺动脉压(MPAP)、左、右心室收缩指数(LVIC、RVIC)和舒张指数(LVIR、RVIR)以及血管反应性的变化。结果表明,慢性缺氧明显阻抑SHR大鼠SBP升高(P<0.05),但使SHR大鼠MPAP升高(P<0.001)。慢性缺氧还可增大SHR大鼠LVIC和LVIR,增强SHR大鼠胸主动脉对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应,减弱其对5-羟色胺(5-HT)的收缩反应。SHR大鼠肺动脉对ACh和5-HT的反应则与主动脉相反。实验结果提示,慢性缺氧阻抑SHR大鼠血压升高与血管反应性的改变有关。     

间断低氧对大鼠下丘脑超微结构及前增食欲素水平的影响

目的探讨睡眠中间断低氧对大鼠下丘脑前增食欲素及受体水平的影响以及下丘脑超微结构的变化。方法大鼠分成对照组、间断低氧组和持续低氧组,分别给予吸入空气,持续低氧和间断低氧气体,并在实验开始后1d、3d、1w和4w应用RT-PCR方法测定大鼠下丘脑前增食欲素及受体水平,分析其间的变化关系,电镜观察下丘脑的超微结构变化。结果与对照组和持续低氧组比较,间断低氧4w后大鼠下丘脑前增食欲素mRNA水平明显降低,受体水平升高,但在持续低氧和对照组之间无明显差异。在低氧后1d、3d、7d后大鼠下丘脑前增食欲素mRNA降低,受体水平升高,在4w后,持续低氧组则接近正常。急性持续低氧大鼠超微结构变化更严重,而慢性间断低氧变化更持久。结论慢性间断低氧可以引起下丘脑前增食欲素下降及受体水平升高,急性持续低氧也可引起上述变化,而慢性持续低氧未引起增食欲素改变;慢性间断低氧大鼠下丘脑超微结构表现为严重而持久的变化。     

根田鼠大脑内去甲肾上腺素水平的昼夜节律及低氧作用

研究表明, 哺乳动物脑中去甲肾上腺素(Norepinephrine, NE) 作为一种植物性神经信息传递的经典递质, 表现为水平波动的昼夜节律行为(李思嘉. 1982. 生理科学进展13 (2) : 189) , 该变化可能与机体生理机能改变相关。在低氧应激下, 脑内N E 的更新率升高, 可对脑中各脑区功能起到协调作用。根田鼠是青藏高原金露梅灌丛的优势小哺乳动物, 本文研究在自然光照下, 根田鼠大脑内去甲肾上腺素(NE) 水平的昼夜节律, 以及在模拟低氧5 000 m 和7 000 m 高度条件下的含量变化情况。     

缺氧对大鼠肺组织肺血管sis原癌基因和PDGF-BB蛋白表达的影响

为了探讨血小板生长因子ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）在缺氧性肺血管结构重塑中作用,通过建立大鼠缺氧性肺血管重塑动物模型,运用原位杂交技术和免疫组织化学染色技术检测不同缺氧时期大鼠肺组织中原癌基因ｓｉｓｍＲＮＡ和ＰＤＧＦ－ＢＢ蛋白表达。结果：（１）随着缺氧时间的延长,肺动脉壁肌层增厚,管腔变窄;（２）正常对照组肺组织及肺血管壁ｃ－ｓｉｓｍＲＮＡ和ＰＤＧＦ－ＢＢ蛋白质均极少表达（＋）;（３）缺氧３天后,两者表达均增多（）;（４）缺氧７天后其表达达高峰并持续至１４天（～）;（５）缺氧２１天后,两者表达均降低,但仍高于正常对照组（）。提示：缺氧可以刺激大鼠肺组织ｓｉｓｍＲＮＡ和ＰＤＧＦ－ＢＢ蛋白表达,其在缺氧性肺血管结构重塑形成中可能具有重要作用。     

低氧对大鼠颈动脉体培养细胞膜电位及输入阻抗的影响

本文采用离体培养的大鼠颈动脉体主细胞(glomus cell)的细胞群体和单细胞的标本,观察了不同程度的低氧对细胞膜电位(MP)和输入阻抗(Ri)的影响。在常氧(20％O_2,5％CO_2,75％N_2)条件下培养的细胞(常氧细胞)暴露在常氧中测得的MP和Ri值为对照值。当常氧细胞暴露在低氧(10％O_2,5％CO_2,85％N_2)时,MP幅度有的增加(超极化),有的减少(去极化),MP值增加和减少的细胞数各占细胞总数的百分比大体相同,当暴露在100％N_2中时,MP增加的细胞百分数明显高于MP减少的细胞百分数。在低氧条件下培养的细胞(低氧细胞),暴露在常氧中测得的MP和Ri值与对照值比较无显著性差别,但是,当低氧细胞暴露在低氧中时MP和Ri的值均明显增加(MP:P<0.01,Ri:P<0.05)。结果提示:颈动脉体的glomus细胞可能在感受pO_2变化中起重要作用。