TiO2膜吸附固定糖化酶特性的研究

分别以醋酸纤维素TiO2膜(AC.TiO2膜)、羧甲基纤维TiO2膜(CMC.TiO2膜)和聚丙烯TiO2膜(PP.TiO2膜)为载体吸附固定糖化酶,并与醋酸纤维素、羧甲基纤维素和聚丙烯固定糖化酶的性能进行了比较,得出以AC.TiO2膜和PP.TiO2膜对糖化酶的吸附性能及稳定性能均较好,PP.TiO2膜固定的糖化酶使用8次后其剩余酶活仍能保持在72%.     

用纸浆代棉花合成CMC

羧甲基纤维素(CMC)系天然纤维素的衍生物。它是由天然纤维素分子上引入强极性羧甲基钠而得到的。我们采用纸浆为原料替代棉花生产CMC,测试了其性能,并讨论了反应温度、反应时间和碱用量对粘度的影响。结果表明:此法简化了工艺,原料来源广泛,产品性能优良,成本低,能满足使用要求。     

产糖化酶黑曲霉固定化方法比较的研究

采用海藻酸钙凝胶电埋法、以沸石、多孔聚酯等材料为固定化载体的吸附法固定黑曲霉（Aspergillus niger AS3.4309)菌丝细胞,以游离菌丝体作为对照,进行发酵产糖化酶的比较,结果表明：以聚酯泡沫作为固定化载体吸附固定化菌丝细胞产糖化酶活力最高。在产糖化酶的发酵过程中,与游离菌丝体细胞相比,固定化黑曲霉持续产酶时间有一定程度的延长。     

哈氏噬纤维菌吸附纤维素的影响因素

[目的]探索哈氏噬纤维菌(Cytophaga hutchinsonii)吸附纤维素的作用机制.[方法]通过比较不同因素对哈氏噬纤维菌吸附纤维素的影响,包括:菌龄、pH、温度、表面电荷、细胞活力、细胞表面蛋白、细胞表面多糖以及纤维素类似物等,寻找在吸附过程中起重要作用的细胞成分.[结果]菌体经蛋白酶及热处理,对纤维素的吸附能力完全丧失;叠氮化钠、甲醛和戊二醛处理对菌体吸附能力影响不明显;菌体经刚果红和高碘酸钠处理,吸附能力变化不大;菌体对纤维素底物的吸附具有特异性,吸附作用不受纤维二糖和羧甲基纤维素的抑制.[结论]实验表明,哈氏噬纤维菌吸附纤维素的能力与菌体表面蛋白密切相关,而受细胞的代谢活性和胞外多糖影响较小,推测细胞表面可能存在特异性的纤维素结合蛋白.     

用于直接固定全细胞中mRNA的快速吸印技术

溶于NaI的信使RNA(mRNA)将吸附在硝酸纤维素膜上。在低温下,核糖RNA、天然DNA和变性DNA的结合是很少的。固定的mRNA使用于分子杂交,并可被翻译成蛋白质,或反转录成DNA。     

PP/PP-g-DBM/CaCO_3复合材料的力学性能研究

以聚丙烯接枝马来酸二丁酯(PP-g-DBM)作为聚丙烯(PP)/CaCO_3复合材料的界面改性剂,研制了PP/PP-g-DBM/CaCO_3复合材料,并且讨论了PP-g-DBM对聚丙烯/CaCO_3复合材料的力学性能的影响。结果表明:当CaCO_3含量为30%时,其抗冲性能达到6 kJ/m~2,相对于原料聚丙烯提高了20%;且较大程度地改善了分散相CaCO_3在连续相聚丙烯中的分散状态。     

水不溶酶的研究II．对氨基苯磺酰乙基纤维素-葡萄糖淀粉酶的制备

1．用甘蔗渣纤维素及对-β-硫酸酯乙砜基苯胺为原料,研究了ABSE-纤维素的制备条件,探讨了黑曲霉(Asp. Niger)粗制糖化酶共价键台到重氮化的ABsE一纤维素上的影响因子。获得ABSE-纤维素糖化酶合适的制备方法。 2．ABSE-纤维素糖化酶含3.7-6.4％蛋白量,酶活力约为10000单位／克,以淀粉为底物,与自然酶比较,相对活力为20—30％,满联时加入适量的硫酸铵能提高相对活力至43．9％。该水不溶酶最高活力是在pH4.5和65～70℃(对淀粉)。在55℃淀粉化液液中稳定性良好。 3．将ABSE-纤维素糖化酶(33912单位)装柱,在55℃,以25．4毫升／小时的流速通过pH 4．5的3l～34％的淀粉液化液进行连续糖化,218小时内得到DE值为93．9的葡萄糖液,326小时后不溶酶柱仍保持原活力的74．9％。而搅拌糖化在140小时后只保持64.8％原活力．     

猪PDGF的部分纯化

对猪血小板衍生的生长因子(PDGF)进行了部分纯化。通过对提取的猪血小板进行冻融裂解、CM-Sephadex C-50离子交换吸附、Blue-Sepharose柱层析和羧甲基纤维素CM-52柱层析等较简单的纯化步骤将猪PDGF提纯到6250倍。     

α淀粉酶与糖化酶的共固定化研究

以纤维素为载体用重氮化法同时固定了糖化酶和α淀粉酶,确定了共固定化的最适条件,研究了共固定化酶的性质,发现共固定化酶较固定化单酶能更好地发挥协同效应,能在较低温度下将淀粉一步水解为葡萄糖。共固定化酶在３０℃下的操作半寿期可达９２０小时。     

IDA型固定化镍离子金属螯合亲和膜色谱对人血清白蛋白的分离纯化

采用自制的固定化镍离子亚氨二乙酸(IDA)型复合纤维素金属螯合膜色谱对药用人血清白蛋白的进一步纯化进行了研究。考察了Ph对HAS吸附效果的影响。经一步纯化,商品药用HAS中的许多杂蛋白可被除去,经毛细管电泳分析,纯度与Sigma公司的电泳纯HAS相当,回收率可达85%以上。纯化蛋白液中的镍离子经过自制的N,N,N′-三羧甲基乙二胺(TED)型螯合柱处理后可较好地除去。     

用免疫点试验检测未浓缩的杂交瘤培养上清液中的同型和轻链型鼠单克隆抗体

<正>长期以来生物化学家们在核酸的工作中就广泛利用硝酸纤维素滤膜作为一种固相支持物以吸附和固定核酸。Towbin等(1979)首先证实它在从聚丙烯酰胺胶转移或贴印蛋白的用途,随后又用于检测抗体。Sharon等(1979)和Hawkes等(1982)介绍了一种点-免疫结合试验,直接应用硝酸纤维膜中的抗原点来筛选单克隆抗体和其它抗体。 单克隆抗体技术的广泛应用,在许多实验室就产生了一种需要,即从大量的单克隆蛋白中简便地检查鼠免疫球蛋白同型物(isotype)和轻链类。生产抗同型血清既费力又费钱。如果将抗体固定在硝酸纤维膜上     

水不溶酶的研究I．用DEAE-葡聚糖凝胶作载体制备水不溶葡萄糖淀粉酶

在我们试验的几种离子交换剂中,DEAE-葡聚糖凝胶是制备不溶性糖化酶的较好载体。其吸附的最适pH为4.5—6.0,每克载体吸附50000单位酶量为宜。DEAE-葡聚糖凝胶糖化酶与自然酶比较最适pH与最适温度基本相同,而米氏常数明显增加,前者为0．023(％),后者为0.005 7(％)。采用搅拌糖化方式,以30％淀粉为原料,葡萄糖值能达95以上,连续使用10次原活力仍能保持63％。     

区域选择性改性的纤维素和壳聚糖衍生物及其血液相容性

通过对纤维素和壳聚糖的区域选择性改性,将内皮细胞表面硫酸乙酰肝素（ES—HS）分子结构中对其血液相容性有重要影响的官能团引入纤维素和壳聚糖的分子结构中,并将其通过离子键固定在部分阳离子化的纤维素膜上,以期模拟ES—HS的血液相容性。血小板吸附结果表明,6位改性的纤维素衍生物的吸附程度较高。在五种壳聚糖衍生物中,2位的NS03／NAc为6／4的衍生物表现出最低的血小板吸附。当保持壳聚糖2位的NS03／NAc值不变时,对6位进行完全磺酸酯化,也可有效减少血小板的吸附。     

Pluronic和纤维素类对杂交瘤细胞保护特性的研究

利用鼠鼠杂交增2F7细胞(分泌IgG2a单抗)研究了Pluronic F-68、甲基纤维素、羧甲基纤维素及聚醚多元醇与杂交瘤细胞生物相容性及添加限制浓度;研究了添加浓度对葡萄糖的利用及氨的生成影响}在高速搅拌、高剪切力下考查添加剂的保护效果。结果表明,O·05—0·10％(w／V)Pluronic F-68、O．10—0．20％(w／V)甲基纤维素能较好地保护杂交瘤细胞;高浓度Pluronic F-68增加了葡萄糖的比消耗速率及氨的比生成速率;高浓度甲基纤维素增加了氨比生成速率;羧甲基纤维素添加浓度低于0．1％不影响细胞生长,也无保护作用,羧甲基纤维素不影响细胞对葡萄糖的比消耗速率,但增加了氨比生成速率,聚醚多元醇分解细胞。在1．5升GemlliGen生物反应器中,培养基添加0．10％Pluronic F-68、搅拌转速70r／min下细胞正常生长。     

增容剂甲基丙烯酸丁酯接枝聚丙烯的研究

以甲基丙烯酸丁酯(BMA)为接枝单体,过氧化苯甲酰(BPO)为引发剂,采用固相接枝技术对聚丙烯(PP)进行改性,制备了BMA接枝PP(PP-g-BMA)。研究了接枝反应工艺条件对接枝率的影响,采用傅立叶变换红外光谱表征与分析了PP-g-BMA,并对PP-g-BMA在PP/聚对苯二甲酸乙二酯(PET)共混物中的增容作用进行了验证。结果表明,当反应温度为130℃、引发剂的质量分数为6%、单体BMA质量分数为10%,接枝反应3 h,成功制得了接枝率为3.75%PP-g-BMA;PP-g-BMA可明显改善PP/PET共混物的界面相容性,相对于PP-g-BMH,其增容的PP/PET共混物的力学性能和加工流变性能更好。     

聚丙烯二氧化钛负载膜固定化活性污泥对污水处理的研究

利用聚丙烯二氧化钛负载膜为载体,吸附固定活性污泥微生物,处理有机废水,考察了聚丙烯膜的组成、吸咐固定时间以及聚丙烯二氧化钛活性污泥负载膜对污水有机物的降解。由全有机碳分析仪对降解过程的有机物进行检测;结果表明;活性污泥负载膜处理废水8小时后,废水中的有机物含量下降达50％-60％,对所处理的废水的降解效果明显。     

葡萄糖淀粉酶在高压静电纺PEI/PVA纳米纤维膜上的离子吸附固定

旨在应用离子结合法将葡萄糖淀粉酶固定在PEI/PVA纳米纤维膜上并对其理化性质进行研究。采用高压静电纺丝技术制备聚乙烯亚胺(PEI)/聚乙烯醇(PVA)纳米纤维膜,采用热交联方法使其具备水稳定性后,再利用离子吸附法固定葡萄糖淀粉酶。结果显示,利用红外光谱(FT-IR)表征固定有葡萄糖淀粉酶的PEI/PVA纳米纤维膜,表明葡萄糖淀粉酶可成功固定在静电纺丝形成的PEI/PVA纳米纤维膜表面。通过固定化葡萄糖淀粉酶的酶学性质鉴定,发现固定化葡萄糖淀粉酶的最适反应温度为65℃,比游离的葡萄糖淀粉酶提高了6℃;固定化葡萄糖淀粉酶的适用p H值范围明显变宽;热稳定性和存贮稳定性显著增强且可以重复使用。利用离子吸附法能简便地将蛋白质分子固定于纳米纤维膜上,具有一定的应用前景。     

内切-1,4-β-葡聚糖酶在植物细胞生长发育中的作用

内切-1,4-β-葡聚糖酶(EGases)可以催化水解具有1,4-β-葡聚糖主链的多聚糖,如纤维素和木葡聚糖分子,从而参与对细胞壁的修饰.植物细胞中存在一个EGase蛋白家族,且多为分泌蛋白;在植物细胞中还存在另一类跨膜EGase,是细胞壁纤维素生物合成所必需的,但植物EGases在体外具有降解纤维素人造底物羧甲基纤维素(CMC)的能力,而绝大多数植物EGases在活体细胞中并不能有效地降解结晶态纤维素分子和木葡聚糖分子.本文就EGases在细胞伸长、果实成熟和组织器官脱落等发育过程中的作用,以及EGases在植物纤维素合成与降解中的作用进行综述.     

黑曲霉发酵菌渣对臧红T的吸附研究

将糖化酶发酵生产过程中产生的黑曲霉菌渣作为一种复合吸附剂进行了染料吸附研究,以挖掘其吸附潜力。首先对菌渣的理化性质进行了分析,然后以臧红T为模型染料,考察了几种因素(接触时间、溶液温度、吸附剂量、初始浓度和盐离子)对吸附的影响,并将所得数据用等温吸附方程、动力学方程和热力学方程进行了模型拟和。结果表明,吸附可在2 h内达到平衡,吸附过程符合准二级动力学模型,属于化学吸附,膜扩散模型比内扩散模型更适合解释吸附行为;温度对吸附有促进作用,吸附过程是一个自发的吸热反应;通过Langmuir方程可计算出最大单分子层吸附容量为166.67 mg/g,但Freundlich能更好的描述吸附行为,说明菌渣表面存在多个不同的吸附位点。此外,菌渣投加量和钠离子浓度均可影响吸附效果,染料去除率最高可达91%。     

羧甲基壳聚糖膜对皮肤成纤维细胞相容性研究

通过玻璃流延法制备不同分子质量的壳聚糖及羧甲基壳聚糖膜,以体外培养的人皮肤成纤维细胞作为对象,利用膜的浸渍液培养及膜表面直接培养法研究比较了两种多糖膜的细胞相容性.实验发现两种多糖膜的浸渍液对细胞均无毒性效应,生物安全性是小分子质量膜好于大分子质量膜,羧甲基壳聚糖膜好于壳聚糖膜.皮肤成纤维细胞在壳聚糖膜上的生长受到抑制,生长一段时间后细胞有聚集和脱落现象,而羧甲基壳聚糖膜上细胞能很好地贴附、生长,没有聚集和脱落现象.结果表明羧甲基壳聚糖膜具有比壳聚糖膜更优越的细胞相容性.