CYP3A基因表达与调控的分子机制

Ｐ４５０３Ａ是参与药的氧化代谢的重要酶系,在肝脏及肠道中含量丰富。人体内参与药物代谢的ＣＹＰ３Ａ亚系为ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７。其中ＣＹＰ３Ａ７主要存在于胚胎肝脏。ＣＹＰ３Ａ的主要调控位于５端,其中某些转录调控因子结合位点与ＣＹＰ３Ａ在组织中的特异性表达有关。５端有两个特殊结构ＮＦＳＥ与ＨＦＬａＳＥ分别为ＣＹＰ３Ａ４与ＣＹＰＡ３Ａ７所独有,可能与基分别在成人及胚胎计中的特异性表达有     

亚洲棉Ｃ４Ｈ同源cDNA的分离和表达特征分析

根据Ｐ４５０保守序列设计简并引物,从亚洲棉（Gossypium arboreum L.)cDNA库中分离到两个肉桂酸－４－羟化酶（Ｃ４Ｈ）同源cDNA克隆。这两个棉花Ｐ４５０被划分到ＣＹＰ７３Ａ亚族中,分别被命名为ＣＹＰ７３Ａ２５和ＣＹＰ７３Ａ２６。它们各编码５０５个氨基酸残基,彼此之间的氨基酸序列同源性为９１．３％。它们与其他植物Ｃ４Ｈ的同源性高达９０％以上。ＲＴ－ＰＣＲ分析表明,ＣＹＰ７３Ａ２６在棉花的花瓣、花萼果皮以及发育种子中均有较高水平的表达。ＣＹＰ７３Ａ２５在花瓣、花萼和果皮中有较强表达,而在种子中表达很弱。     

S－美芬妥英羟化代谢多态性的分子机制研究进展

人群中存在着Ｓ－美芬妥英羟化代谢多态性。从人肝微粒体已分离出Ｓ－美芬妥英羟化酶。在基因克隆研究中已分离出与该羟化酶活性有关的Ｐ４５０ｃＤＮＡ,属Ｐ４５０２Ｃ１９。最近报道,人肝中Ｐ４５０２Ｃ１９的含量和催活Ｓ－美芬妥英羟化活性密切相关,其弱代谢者主要由于ＣＹＰ２Ｃ１９的外显子５单碱基对（Ｇ→Ａ）的变异,使核苷酸序列错位而产生无功能的Ｐ４５０蛋白的结果。     

CYP2D基因位点的XbaI 44kb片段存在分子异质性

ＣＹＰ２Ｄ基因位点的ＸｂａＩ　４４ｋｂ片段存在分子异质性异喹胍氧化酶（ＣＹＰ２Ｄ６）的活性具有明显的个体差异、种族差异和底物依赖性。因此，异喹胍、司巴丁、美多洛尔、美沙芬和可待因等３０多种药物在个体或种族间的氧化代谢呈遗传多态性；肝内缺乏ＣＹＰ２Ｄ６...     

1α羟化酶活性和血钙水平对24羟化酶基因表达的影响

目的:研究肾脏24羟化酶基因表达的影响因素。方法:采用两种基因敲除小鼠。每种小鼠又分两种饲养方式。用生化分析仪测定小鼠血钙浓度。用半定量RT-PCR法研究小鼠肾脏组织中1α羟化酶和24羟化酶基因的表达。结果:1α羟化酶基因敲除小鼠体内血钙低于野生型小鼠(78±10.4 mg/Lvs111±16.5 mg/L,P<0.05.),测不出24羟化酶基因表达。维生素D受体基因敲除小鼠有很高的1α羟化酶表达,小鼠血钙也显著低于野生型小鼠(68±9.8 mg/Lvs111±16.5 mg/L,P<0.05),测不出24羟化酶表达。但给予高乳糖饲料后,两种基因敲除小鼠血钙都上升到与野生型小鼠一致水平。此时,24羟化酶基因的表达与野生型也基本一致。结论:血钙是调节24羟化酶基因表达的直接因素,1α羟化酶对24羟化酶的正向调节作用是通过升高血钙来实现的。     

细胞周期调控基因——p21^CIP1／WAF1

Ｐ２１＾ＣＩＰ１／ＷＡＦ１基因编码的产物是一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白。它通过调控细胞周期的进程,参与细胞的生长,衰老及死亡。在细胞ＤＮＡ损伤反应及肿瘤的发生、发展中也占且席之地。本文对Ｐ２１基因的发现,基因及蛋白南结构、生物化学特性、生物学特性以及研究前景概述。     

人类细胞色素P450与药物氧化代谢遗传多态性分子机制的研究现状

近年,在表型及基因型上均发现存在药物氧化代谢多态性,特别是对于人类细胞色素Ｐ４５０氧化酶与药氧化代谢遗传多态性的关系进行了深入的研究。有关ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ１９等的突变已大多被鉴定;ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ１Ａ２等在表型存在多态性而确切的遗传机制尚不清楚。     

p21基因的克隆及其对肺癌细胞生长的抑制

用反转录ＰＣＲ从正常人胚胎肺细胞中获得了ｐ２１基因ｃＤＮＡ,将其插入真核表达载体ｐＭＳＣＶｎｅｏ,构建成重组质粒,ｐＭＳ２１,并将其转染至肺癌细胞株Ａ５４９。通过集落形成观察到ｐ２１对肺癌细胞具有明显的抑制作用,经ＲＮＡ狭缝杂交、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析和免疫细胞化学实验证实这是ｐ２１表达的结果。荷瘤裸鼠实验也进一步证实了ｐ２１对肺癌细胞具有明显的抑制作用。为ｐ２１的深入研究提供了基础。     

苯丙酮尿症分子遗传学研究进展

苯丙酮尿症是由于苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的常染色体隐性遗传病。文章综述了苯丙酮尿症中的苯丙氨酸羟化酶基因的定位、结构、突变、调控以及突变基因的体外表达和苯丙氨酸羟化酶的三维结构特点等分子遗传学进展,阐述了苯丙氨酸羟化酶基因的突变对苯丙氨酸羟化酶的体外表达及其三维结构的影响, 以及部分基因型与表型相关的分子机制。 Abstract: Phenylketonuria(PKU) is one kinds of autusomal recessive disease caused by phenylalanine hydroxylase(PAH) gene mutation. This article reviews the recent molecular heredity progress on the phenylalanine hydroxylase gene’s orientation、structureand gene mutation and gene regulation. At same time, mutation gene in vitro expression and the character of 3D structure of PAH in PKU are involved. In this paper, also discussed the inflence of vitro expression and 3D protein structure by gene mutations and the molecular mechanism of the relationship between genotype and phenotype in PKU patient.     

籼稻232蜡质基因转录起始位点的鉴定

Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析和蜡质基因ｃＤＮＡ的序列分析表明水稻蜡质基因的转录本可能延伸到翻译起始密码子（ＡＴＧ）上游１２ｋｂ处。据此设计了２１Ｎｔ的寡核苷酸引物,并以籼稻２３２胚乳ＲＮＡ为模板,以引物延伸法确定籼稻２３２蜡质基因的转录起始点,籼稻蜡质基因的转录起始旁邻顺序ＣＴＣＡＣＣＡ与高等植物基因的转录起始点一致顺序ＣＴＣＡＴＣＡ仅相差１个碱基。通过顺序比较,对东乡野生稻蜡质基因中的转录起始位点的位置,以及对此两稻种中ＴＡＴＡ盒的可能顺序进行了讨论。     

用丰富培基作为选择压力在酿酒酵母PRO+转化子中稳定遗传的分泌型表达载体

构建了一个含酿酒酵母ＰＲＯ３基因的分泌型表达载体ｐＣＢｙ３１０,在ｐＣＢｙ３１０上插入 βＨＣＧ（人绒毛膜促性腺激素β亚基）－ｃＤＮＡ以形成一个重组质粒ｐＣＢｙ３１４。利用酿酒酵母脯 氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性,即它们不能在丰富培基中生长,ｐＣＢｙ３１４在酿酒酵母 Ｐｒｏ３~－缺陷株（ＭＢ２９９－Ａ）的转化子可以在丰富培基中生长,而且保持有丝分裂稳定性。在优 化条件（但尚非最佳条件）下,βＨＣＧ在培液中的产量是６５０μｇ／Ｌ。说明ＹＰＤ可以用为选择培 基,而且酿酒酵母在ＹＰＤ中比在选择培基中生长更旺盛,可以提高表达产物的产量,加之 ＹＰＤ的成分简单又便宜。因此得出结论,ＰＲＯ基因可以广泛地用于构建在酿酒酵母中克隆和 表达外源基因的载体,以便用丰富培基作为选择压力直接筛选。     

小麦—簇毛表6VS／6AL易位系可转化人工染色体（TAC）文库的构建

可转化人工染色体（Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ,ＴＡＣ）是具有克隆和转移大片段基因能力的新型载体,是植被基因克隆和转化的有效工具。为了克隆泪科抗白粉病基因和其它基因,本研究用ＴＣＡ载体ｐＹＬＴＡＣ１７构建了带有抗白粉病基因Ｐｍ２１的小麦＝簇毛麦６ＶＳ／６ＡＬ易位系的基因组ＤＮＡ文库。该文库包含２１０万个克隆平均插入征段３５ｌｂ,相当于     

植物脂肪酸的生物合成与基因工程

植物脂肪酸既具重要生理功能,又有巨大食用和工业价值。其生物合成途径较为复杂,涉及乙酰－ＣｏＡ羟化酶、脂肪酸合成酶、脂肪酸去饱和酶和脂肪酸延长酶等一系列酶。近年来,对脂肪酸生物合成途径进行了大量研究,克隆出许多相关基因,初步阐明了脂肪酸合成规律,并在此基础上开展了利用基因工程技术调控脂肪酸合成研究,取得可喜进展。本文详细介绍了植物饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和超长链脂肪酸的生物合成与基因工程研究的新结果     

血小板生成素的研究进展

自１９９４年ＤｅＳａｕｖａｇｅ等克隆出了人的血小板生成素（ＴＰＯ）的ＣＤＮＡ后,对ＴＰＯ的结构与功能的研究有了突破性的进展。本综述了近几年对ＴＰＯ研究的最新献,较系统地介绍了ＴＰＯ基本结构、ＣＤＮＡ、ＴＯＰ受体的基因结构特征和ＴＰＯ基因的染色体定位及生物学作用。     

中国棉铃虫P450家族的CYP6B2基因与抗药性关系

运用ＲＴ－ＰＣＲ技术从棉铃虫五龄幼虫扩增到一个６２７ｂｐ的ＤＮＡ片段,测序表明这一片段为ＣＹＰ６Ｂ２基因的功能保守区,以这一片段为探针对棉铃虫除除虫菊酯抗性（Ｒ）及敏感（Ｓ）品系的总ＲＮＡ进行点杂交。ＲＮＡ点杂交表明未经氰戊菊酯诱导的情况下Ｒ品系的ＣＹＰ６Ｂ２基因的ｍＲＮＡ水平明显高于Ｓ品系,即为转录水平的调控,而经氰戊菊酯诱导后杂交表明Ｓ品系明显０被氰戊菊酯诱导,但Ｒ品系不被诱导。由此推测,棉铃     

熊猫等动物犬瘟热病毒附着蛋白基因的遗传多样性

为了研究犬瘟热病毒（ｃａｎｉｎｅ ｄｉｓｔｅｍｐｅｒ ｖｉｒｕｓ,ＣＤＶ）大熊猫株、小熊猫株和长春犬株附着蛋白（Ｈ）基因的遗传这异,对Ｈ基因进行了序列测定。上述３个ＣＤＶ毒株的Ｈ基因全长均为１９４６ｂｐ,开放阅读框架（ＯＲＦ）始于２１－２３位的ＡＴＧ,终止于１８４２－１８４４位的ＴＧＡ,编码６０７个氨基酸。与ＧｅｎＢａｎｋ中１５个ＣＤＶ株推导的Ｈ蛋白氨基酸序列比较发现,１６个野毒株潜在的Ｈ－联糖基     

人类基因组研究：——新的尚未知基因的寻找与识别

人类基因组研究──新的尚未知基因的寻找与识别吴学军,柴建华（复旦大学遗传所上海２００４３３）从１９８７年至今,已有七个年头了,在这些年中,美国和其他国家的科学家一起努力,使整个基因组的ＹＡＣ克隆覆盖率已达到了８０％,第２１号和Ｙ染色体已完成ＹＡＣ克隆...     

肿瘤易感基因BRCA1

ＢＲＣＡ１为一新的肿瘤易感基因，定位在１７ｑ２１，其ｃＤＮＡ可转录７．８ｋｂｍＲＮＡ，编码含１８６３个氨基酸残基的长多态，在遣传性乳腺卵巢癌中有高频率的ＢＲＣＡ１基因杂合性丢失，同时有多形式多位点的基因突变，符合肿瘤抑制基因特点。     

梅花类黄酮3′-羟化酶基因片段基于基因组DNA的简并PCR法克隆

用该研究设计的“预先去杂-SDS法”从梅花嫩叶提取到高质量的基因组DNA。根据11条已公开发表的并提交到GenBank的类黄酮3＇-羟化酶基因cDNA的假定氨基酸序列的保守区设计2个正向简并引物和3个反向简并引物组成6对引物,仅有1对引物能以PCR法同时从梅花‘南京红须’、‘南京红’和‘粉皮宫粉’的基因组DNA扩增到一个469bp的核苷酸片段,这3个片段在总体上有99．72％的一致性,与11条类黄酮3＇-羟化酶基因cDNA的相应区域有65．57％的一致性。同时,“GGEK”并非类黄酮3＇-羟化酶的特征性模体。这是首次从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3＇-羟化酶基因片段。该研究结果可为梅花类黄酮3＇-羟化酶基因全长的克隆奠定基础。     

梅花类黄酮3'-羟化酶基因片段基于基因组DNA的简并PCR法克隆

用本研究设计的"预先去杂-SDS法"从梅花嫩叶提取到高质量的基因组DNA.根据11条已公开发表的并提交到GenBank的类黄酮3'-羟化酶基因cDNA的假定氨基酸序列的保守区设计2个正向简并引物和3个反向简并引物组成6对引物,仅有1对引物能以PCR法同时从梅花'南京红须'、'南京红'和'粉皮宫粉'的基因组DNA扩增到一个469 bp的核苷酸片段,这3个片段在总体上有99.72%的一致性,与11条类黄酮3'-羟化酶基因cDNA的相应区域有65.57%的一致性.同时,"GGEK"并非类黄酮3'-羟化酶的特征性模体.这是首次从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3'-羟化酶基因片段.本研究结果可为梅花类黄酮3'-羟化酶基因全长的克隆奠定基础.