美研制脂类包衣血红蛋白代用品

美国体细胞遗传工程公司与美国海军研究署合作,正在研制一种脂类包衣的重组血红蛋白(rLEH)作为人血红蛋白的代用品。据称,人血红蛋白的代用品比人红血细胞产物有更多的优点。例如贮存期长,不需鉴定血     

修饰血红蛋白作为红细胞代用品的研究进展和挑战

血源紧缺和病毒污染问题推动了血液代用品的研究,以血红蛋白为代表的红细胞代用品成为研究的重点。为克服血红蛋白直接使用的毒副作用,各种修饰技术得到了迅速发展,其中包括双阿司匹林交联、戊二醛交联、棉子糖交联、聚乙二醇偶联、脂质体包埋、生物可降解高分子包埋等。其中一些技术已经形成规模化制备工艺,产品进入临床试验,有的已在个别国家上市。鉴于这项研究意义重大,我国有关研究已经起步并正在迅速发展,各国同行的研究有重要的参考价值,因此有必要对近年来血红蛋白作为红细胞的代用品研究状况进行分析,明确面临的挑战,这将有利于发展更全面和有效的研究方案,以期取得突破性进展。     

血红蛋白的化学修饰与血液代用品

血液代用品系指具有携氧扩容功效的溶液,包括：氟碳化合物、脂质体包封血红蛋白（hemoglobin,Hb)、微囊化血红蛋白和无细胞基质血红蛋白（化学修饰Ｈb、基因重组Ｈb、化学合成Ｈb和转基因动物人Ｈb）。通过化学修饰稳定血红蛋白结构以避免其肾毒性,并延长循环半寿期是利用无基质血红蛋白制备血液代用品的主要研究内容,通常采用交联、聚合、偶联等方法完成。     

人工血液的开发

科学家们重新设计了使血液变红的色素,用于制造人工血液,以减少因输血而感染HIV的风险。利用蛋白质工程,科学家们重新设计出血红蛋白,并移植到大肠杆菌中,以产生血液代用品。预计全球人工血液的市场为万亿英磅。在最近出版的《自然》杂志中,在Cambridge Laboratory工作的Colorado子公司Somatogen的Dr Kiyoshi Nagai描述了如何用蛋白质工程设计血红蛋白的结构,以解决用血红蛋白作血液代用品的二个问题。虽然利用遗传工程方法能够很容易地用细菌制备血红蛋白,但血红蛋白与氧结合的太紧密,不能     

在酵母中制备rDNA血红蛋白

Delta Biotechnology(Nottingham,U.K.)已被列入生产基于rDNA血红蛋白的血液代用品的公司中.Delta,包括酿造公司Bass plc(London,U.K.)的子公司和Stroh Brewery公司(Detroit,MI)的部分,该公司已经成功地在酵母中生产出人血红蛋白. 该公司称,他们生产的rDNA血红蛋白与从红血球中提取的血红蛋白完全相同,而且约每克只需50便士(约0.93美元),是由红血球中提取的血红蛋白价格的1/10.最近,Som-     

医药其它

931310资白工程:作为血液代用品的改良血红蛋白〔英〕/Jessen,T.H.…1 Angew.Chem.Int.Ed。Engl一2902,31(7)。一545~549[译自DBA,1992,11(21),92一11833〕 在大肠杆菌、酿酒酵母及转基因的小鼠和猪中完成了全功能人血红蛋白的表达。这些重组的血红蛋白在未修饰的情况下不能作为血液代用品,因为在缺乏2,8一二确酸甘油酸时该蛋白具太高的氧亲和性,并分裂为二聚体。上述向题已通过蛋白工程解决了。通过甘氨酸残基将2个a链中的1个的C一末端与另一个相连接,这个C一末端的3一维结构与其它a蛋白链的N一末端相近。该融合子不能使血红蛋白的亲…     

取自转基因猪的血液代用品

美国科学家已生产了一种转基因猪,可望用之减缓对输血用人血的短缺。这种猪可表达人血红蛋白基因,研究者的想法是从猪血中提取人血红蛋白,纯化后以无细胞溶液的形式作为血红细胞代用品的部分使用。用来产生转基因猪的基因构建物含有人β-珠蛋白位置控制区(LCR),两个α1基因和一个β(?)基因。     

PCR定点突变血红蛋白基因的克隆和筛选

为开展以基因重组血红蛋白为基础的血液代用品研究,我们首先用PCR 突变法扩增出含血红蛋白α、β珠蛋白的串联基因片段,经测序表明,所克隆的α、β基因符合预期设计结果,未发生意外突变。     

血红蛋白的分子杂交

血红蛋白的“分子杂交”,实际上就是两种血红蛋白在解离再结合过程中发生亚单位的交换。由于交换亚单位后产生的“新分子”,各有一半来自原来的血红蛋白分子,这与生物界的杂交现象有些类似、与血红蛋白的分子遗传学关系也一致,故简称为血红蛋白“杂交”或“分子杂交”。这种分子杂交技术,将人们从过去     

新型蛋白质修饰剂的合成及修饰牛血红蛋白的初步研究

以L-谷氨酸和己二酸为原料合成了一种新型的四官能团蛋白质修饰剂,并用核磁共振和红外光谱对其结构进行了表征。然后以其为修饰剂,对牛血红蛋白的化学修饰进行了初步的研究,并通过高效液相色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和血氧分析仪对交联牛血红蛋白的分子量和携氧性能进行了表征。结果表明,该修饰剂可以使牛血红蛋白同时在分子内和分子间发生化学交联,并较好地保持携氧能力（P50:21.7mmHg,Hill系数:2.01）,因此在众多用于开发人工血液代用品的化学修饰剂中该修饰剂具有良好的应用前景。     

在中国发现的异常血红蛋白的化学结构研究

1957年,Ingram首次应用“指纹图谱法”(高压电泳和层析双向分离法)测定了HbS的化学结构。二十多年来,异常血红蛋白结构分析技术不断改善,迄今世界范围内已经鉴定了化学结构的异常血红蛋白达400多种。在国内,1979年上海市儿童医院医学遗传研究室发表了血红蛋白结构分析技术,以及HbS,Hb Siriraj和HbE的化学结构分析结果。以后,又有其它异常血红蛋     

西康玉兰

西康玉兰(Magnolia wilsonii)也称西康木兰。星散分布于四川西部至西南部大相岭、小相岭、大凉山和滇北、滇中以及贵州西部之部分湿润山地林间。由于茎皮作为中药“厚朴”的代用品,所以资源破坏严重,加之森林被伐,生境恶化,自然更新不良,目前成年植株已很稀少,自然分布范围愈渐缩小,已处于渐危状态。 西康玉兰为木兰科落叶小乔木,树高可达10米左右;树皮灰褐色,有木栓质;小枝褐色,     

中药房里的化石——龙骨

本文从中医史角度介绍了“龙骨”(古哺乳动物骨骼化石)的种种医药用途,读来颇有兴味。但必须指出:各种古哺乳动物化石乃属国家保护之列,为确保进行科学研究之用,严禁私人随意挖掘盗卖;有关医药部门应尽量采用代用品。     

豆根瘤血红蛋白的结构与进化(英文)

本文分别从不同的植物中分离出豆根瘤血红蛋白,对这些不同来源的豆根瘤血红蛋白的结构以及免疫化学性能进行了比较研究。取得豆根瘤血红蛋白的植物是:三种不同栽培品种的大豆,三种不同栽培品种的三叶草、蛇豆、蚕豆、白羽扇豆以及serradella等共十种植物。检验过的性质包括:免疫化学交叉反应、吸收、热能差异,偏光圆二色性光谱以及这些光谱的配体粘合效应等。这篇报告里还提出了两种新的大豆的豆根瘤血红蛋白的氨基酸序列。 这些豆根瘤血红蛋白都具有比较稳定的。螺旋成份而且含量很高(60—70％),这表明这些豆根瘤血红蛋白的整个分子是摺叠的。这些摺叠的分子性状,不但彼此类似,而且与较高级的肌红蛋白与血红蛋白相一致。可是,血红素部分,在豆根瘤血红蛋白中的位置却与较高级的肌红蛋白不相同,在肌红蛋白这一类较高级的高分子化合物里,血红素是紧密地与蛋白质“口袋”联系在一起的,这种“口袋”是比较容易吸水的;而豆根瘤血红蛋白中的血红素与其蛋白质“口袋”的联系就不那么紧密。两者间的这种差异,就可能说明豆根瘤血红蛋白所具不寻常的配体粘合性能,包括它的高度氧亲合力。 在从同一株植物体内所分离出来的各组豆根瘤血红蛋白或从同一种的不同栽培品种植物所分离出来的各组豆根瘤血红蛋白间,存在着完     

人造血管移植物自然内皮化的研究

人造血管移植作为自体血管代用品已被广泛使用了解内皮细胞的功能,来源,血管内皮化的过程,形成机理及影响内皮化的因素,对防治血栓形成,内膜增生,维持移植血管通畅率有重要意义。     

脂质体包埋猪血红蛋白的制备及其注入小鼠体内的初步试验

 为探索一条研制猪血红蛋白 (pHb)为基础的血液代用品新途径 ,开发了干膜超声法将猪血红蛋白和别构效应剂、超氧化物歧化酶等联合包埋于脂质体的技术 .考察了氢化大豆卵磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 甲氧基聚乙二醇和维生素E等在制备脂质体包埋血红蛋白 (LEH)中的作用 .通过控制磷脂与其他成分的配比 ,制得包埋率为 10 3%,pHb浓度达 16 %的稳定的LEH ;进一步将pHb微囊通过小鼠尾静脉多次注入其体内 ,检测受试小鼠血液中红细胞和白细胞数、抗体滴度、血小板聚集率及肾脏组织学等方面的变化 .小鼠体内试验表明了所制备的LEH具有低免疫原性、对肾脏无明显损害等特点 .脂质体包埋pHb是一种极具开发前景的稳定的人工载氧系统     

血红蛋白A_2现象发生机制的研究——“红细胞HbA_2”为HbA_2与HbA的结合产物

为了弄清血红蛋白A_2现象的发生机制,我们对“红细胞HbA_2”的化学组成进行了分析。“红细胞HbA_2”的双向电泳结果表明,它含有两种血红蛋白成分:一种相当于HbA,另一种很可能是溶血液HbA_2。其单向二次电泳结果也证明,它是由溶血液HbA_2和HbA所组成。结果初步说明,盘红细胞中HbA_2可能与HbA结合存在。两者可能有相互作用,也许这是产生血红蛋白A_2现象的原因。     

几种盖玻片的代用品

在显微镜观察实验中,临时制作装片需要盖玻片。由于盖玻片脆、薄,极易损坏。购买盖玻片价格较贵。经过实验,我们找到了以下几种盖玻片的代用品,效果较好。凡是较硬、透明的塑料片均可作为盖玻片的替代品。如广告装璜公司废弃的玻璃纸,仪器、衣服等包装、垫衬用的硬塑料片,废塑料饮料瓶(可乐瓶、矿泉水瓶、食用油瓶等),制作幻灯片的材料——明胶片的“下脚料”及医院和照相馆废弃的胶片(放10%NaOH溶液中浸泡一段时间后,用水冲洗并抹去药膜,即得透明塑料片)。把上述材料洗净,晾干,剪成盖玻片大小即可使用。几种盖玻片的代用品@陈瑜$湖南省冷…     

辛二酸二琥珀酰亚胺酯交联血红蛋白制备红细胞代用品

探索了用辛二酸二琥珀酰亚胺酯(DSS)作为分子内交联剂交联血红蛋白的亚基, 以制备新型红细胞代用品. 采用多角度激光散射检测器(MALLS)与高效液相色谱(HPLC)连接进行检测, 辅之以变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析反应产物组成. 实验在局部百级的洁净室内进行, 低温4℃下反应1 h, 交联产物中83.8%为重均分子量(Mw)66.8 kD的分子内交联血红蛋白, 16.2%是Mw为146.6和306.4 kD的低聚血红蛋白. 通过流动相中添加1 mol/L MgCl₂的凝胶过滤色谱验证, 交联后的血红蛋白在生理环境下不会解聚. 联用反相高效液相色谱与质谱(RP-HPLC-MS)初步确定, 交联为非定点反应, 主要在a-a亚基间进行. 交联反应增强了血红蛋白亚基的疏水性, 影响了血红蛋白的载氧活性, P₅₀和Hill系数由交联前的21.8和2.22 mmHg分别降至14.3和1.41 mmHg, 仍具有一定的载氧能力. 等电聚焦(IEF)电泳表明, 制备的DSS交联血红蛋白的等电点降至4.6 ~ 5.2之间, 接近于不透过血管壁的血清白蛋白. 产品经小鼠异常毒性试验证实具有一定的生物安全性, 大鼠的换血试验表明DSS交联血红蛋白并未引起血压升高, 也未见其他明显的副作用. 还对DSS交联血红蛋白与文献已有的双阿司匹林交联血红蛋白的产物特性进行了比较.     

血红蛋白 A_2现象——Ⅰ.A_2现象的发现及其初步应用

1.本文报告作者实验室所发现的一种自然现象,并暂时命名为“血红蛋白A_2现象”。2.所谓“血红蛋白A_2现象”,就是溶血液中HbA_2与红细胞中“HbA_2”的差异。这里主要指的是电泳行为不同。3.将正常成人红细胞与其本身的溶血液并排电泳(薄层淀粉胶电泳)时,二者的HbA、碳酸酐酶电泳位置相同,只有HbA_2不一样。与溶血液中HbA_2相比,红细胞中的“HbA_2”电泳速度(向阳极)稍快。4.红细胞及溶血液中的HbF、HbN 包头、HbD 包头及HbE,都没有上述差异,而且它们对“HbA_2现象”没有影响。5.“HbA_2现象”的机制尚待阐明,但已经发现了它的应用。众所周知,HbE 与A_2的电泳行为及层析性质是相同或相近的,鉴别起来比较困难,现在我们可以利用“HbA_2现象”来区分这两种血红蛋白。如上所述,HbA_2有“HbA_2现象”,而HbE 本身则没有这类现象。