人脊髓前角运动神经元190KD蛋白的初步研究

本研究采用ＳＤＳ凝胶电泳方法从人脊神经前根中分离出人脊髓前角运动神经元特有的蛋白—１９０ＫＤ。将该蛋白作为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,经杂交瘤技术,获得了抗１９０ＫＤ蛋白的单克隆抗体。免疫细胞化学检测表明,１９０ＫＤ单抗与脊髓灰质前角神经元、前根及肌支发生阳性反应。实验结果提示,１９０ＫＤ蛋白分布在脊髓运动神经元胞体及脊神经的前根和肌支纤维中。     

阿尔茨海默病(AD)早老蛋白-1(PSl)变异有新发现

编码ＰＳｌ的基因突变是导致家族性阿尔茨海默病(ＡＤ)的最普遍的原因。这种突变常常使该型ＡＤ的病程不同于散发型和另一种由β淀粉样前体蛋白引起的家族性ＡＤ。美、意、日等国的研究者在《自然》杂志上联合报道,有一种特殊的缺少前10个氨基酸的淀粉样蛋白集聚于带有ＰＳｌ突变基因患者的脑组织内,该蛋白的积蓄量比在其他类型ＡＤ时显著增多。研究资料表明,在ＰＳｌ的基因突变中,至少有两种与过量的氨基末端截短的淀粉样和低浓度全长蛋白有关。ＰＳｌ基因突变可影响β和γ两种分泌酶的活性。免疫印迹法显示,无论散发性ＡＤ,或者是家族性与…     

淀粉样前体蛋白和Alzheimer‘s病

淀粉样前体蛋白（ＡＰＰ）与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ病（ＡＤ）的发病机制关系密切,本文综述了近年来对ＡＰＰ的分子研究,包括ＡＰＰ的分子特性,生理功能和代谢过程,ＡＰＰ与β－淀粉样蛋白（β／Ａ４）的关系,ＡＰＰ异常代谢及其与ＡＤ的关联等。     

β淀粉样蛋白与Alzheimer病

Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病是当今颇受人们关注的疾病,近年来对其发病的分子机制俐较为深入。目前的研究热点集中在β淀粉样蛋白ｔａｕ蛋白和ＡＤ的发病关系上。本文就β淀粉样蛋白的来淅,其前体蛋白的基因突变,代谢加工途径,神经毒性作用以及转基因动物诸方面与ＡＤ的发病关系作一综述。     

脑啡肽酶（neprilysin）和阿尔茨海默病

由于阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)的病因不明和到目前为止仍缺乏根治的办法 ,加之全世界范围的老龄化和ＡＤ的高发病率 ,一些科学家预言ＡＤ可能是本世纪最可怕的老年病。ＡＤ的数十年的漫长病程一般从 β淀粉样肽 (Ａβ)在脑中沉着开始 ,Ａβ是一个生理性多肽 ,它是淀粉样前体蛋白(ＡＰＰ)的水解产物。它的合成和分解代谢的平衡决定它在体内有一个稳定的水平。研究证明 ,由于基因突变导致的特殊形式的Ａβ的产生增加 50 %就能引起ＡＤ ,Ａβ代谢平衡的轻微改变不仅能影响ＡＤ的病理过程 ,而且能影响这个疾病的发…     

早老蛋白与淀粉样沉淀前体蛋白相互作用及Aβ的形成

Ａβ在脑内的沉积是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的病理现象。对Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的研究揭示Ａβ的生成与早老蛋白和淀粉样沉淀前体蛋白相互作用密切相关。早老蛋白和淀粉样沉淀前体蛋白基因的突变均能改变淀粉样沉淀前体蛋白的正常切割,使得Ａβ的生成量增加。     

聚ADP核糖聚合酶的结构及基因表达和调控

聚ＡＤＰ核糖基化反应是在细胞内聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）的催化下,以ＮＡＤ为底物,将聚ＡＤＰ核糖多聚体共价连接到接受体蛋白上去的过程．这种蛋白质的转译后修饰形式参与细胞内很多重要的生物事件．本文对催化聚ＡＤＰ核糖基化反应的ＰＡＲＰ酶的结构特性、编码ＰＡＲＰ基因的表达与调控,以及ＰＡＲＰ酶对细胞内其它基因表达的影响进行了综述。     

鸡减蛋综合征病毒（EDSV）主要蛋白的结构分析

鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国株ＡＡ－２基因组全长为３２８３８ｂｐ,其编码病毒主要结构蛋白（５２／５５Ｋ、Ⅲａ、五邻体、ｐⅦ、ｐⅥ、六邻体、１００ｋ、ｐⅧ以及纤维蛋白等）的基因依次排列在基因组的中部,Ｅ２区编码ＤＮＡ结合蛋白、ＤＮＡ多聚酶、末端前体蛋白及ＩＶａⅡ的基因也分别排列在ＥＤＳＶ基因的负链上。对这些蛋白的氨基酸序列进行同源性比较后发现,ＥＤＳＶ的主要蛋白与羊腺病毒（ＯＡＶ）同类物存在不同     

尿激酶抗人交联纤维蛋白-D-二聚体单抗化学偶合体的制备

利用双功能试剂Ｎ－琥珀酰亚胺－３（２－二硫吡啶）丙酸酯（ＳＰＤＰ）作交联剂,合成了尿激酶（ＵＫ）－抗人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体单抗（ＭＡ－ＨＩＤ１）化学偶合体（ＵＫＭＡ－ＨＩＤ１）,并用苯甲脒－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ及人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱纯化,获得偶合体产物．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ呈现一条带,其分子量约为２０００００．纤维蛋白平板法测活结果显示,偶合体中酶比活为５３０００ＩＵ／ｍｇ尿激酶蛋白,与偶联前的５４３００ＩＵ／ｍｇ蛋白相仿．ＥＬＩＳＡ测试显示,偶合体对人交联纤维蛋白降解物Ｄ－二聚体有免疫反应性,并且与偶联前的抗Ｄ－二聚体单抗对此抗原的反应性相当     

中枢多巴胺转运蛋白的结构功能与调控

中枢多巴胺 (ＤＡ)能系统信号传递决定于突触间隙ＤＡ的浓度水平。ＤＡ在完成神经信息传递后 ,通过重摄取和酶解二种途径灭活以终止信息传递。其中大部分ＤＡ为位于突触前膜上的中枢多巴胺转运蛋白 (ＤＡＴ)所摄取 ,转运至突触前神经元以备再次利用。近年来研究发现 ,ＤＡＴ并不只是简单地重摄取ＤＡ ,ＤＡＴ同时又是调控突触间隙ＤＡ水平和维系突触前ＤＡ合成、储存功能的关键因素[1] 。另外 ,ＤＡＴ还是许多精神药物潜在的作用靶位点。因此 ,研究ＤＡＴ结构、功能及其调控 ,有助于阐明ＤＡＴ与ＤＡ系统精神神经疾病的关系和探索治疗策略。…     

阿片成瘾与中脑边缘DA系统的适应性变化

中脑－边缘ＤＡ神经阿片奖赏效应中起着关键性作用。长期应用阿片类药物可引起该系统靶神经元独特的适应性改变。主要包括：（１）中脑腹侧被盖区（ＶＴＡ）的ＴＨ被诱导增加、ＧｌｕＲ１受体上调、神经纤维丝蛋白的减少以及ＤＡ神经元的形态萎缩等；（２）伏核（ＮＡｃ）ＤＡＤ１受体超敏、Ｇｉ／ｏα亚单位的减少，ｃＡＭｐ－ＰＫＡ系统活性上调以及ｃＡＭＰ反应元蛋白（ＣＲＥＢ）和ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达的改变等。阿片     

HCV NS5A基因表达及其在血清学检测中的应用评估

人丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)感染可引起丙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌[1] 。丙型肝炎病毒是单股正链ＲＮＡ病毒 ,基因组约长 9.5ｋｂ ,仅有一个开放阅读框 ,编码一个大的聚蛋白前体 ,由宿主蛋白酶和病毒编码的蛋白酶加工成多个成熟蛋白。非结构蛋白ＮＳ5Ａ分子量为 56ｋＤ/ 58ｋＤ。目前对ＮＳ5Ａ蛋白的功能尚不清楚 ,ＮＳ5Ａ蛋白可降低干扰素治疗效果[2 ] ;ＮＳ5Ａ蛋白含核定位序列 ,因此人们推测它在ＨＣＶＲＮＡ复制过程中可能起一定的作用[3～ 4 ] 。本研究在大肠杆菌中表达全长ＮＳ5Ａ蛋白 ,提纯后ＮＳ5Ａ蛋白能与大多数丙肝阳性血清起强烈…     

铁氧还蛋白—NADP还原酶参与的循环电子传递

铁氧还蛋白－ＮＡＤＰ还原酶的专一抑制剂－肝素在低浓度下可以强烈抑制菠 菜类囊体中铁氧还蛋白介导的ＮＡＤＰ光还原,以及类囊体中Ｆｄ／ＮＡＤＰ诱导的延迟发光增加。     

粘虫核型多角体病毒包涵体蛋白的性质及其对几种肿瘤细胞生长的抑…

ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳分析表明粘虫核型多角体病毒的包涵体蛋白由几种多肽组成,其中分子量为３２ｋＤ的主带为多角体的主要结构多钛,经Ｓｅｐｈａｃｅｙｌ Ｓ－２０柱层析纯化后分析了其氨基酸组成,证明此包涵全蛋白是一种疏水氨基酸为主要组成的特异性蛋白。我们发现３２ｋＤ蛋白对Ｈｅｌａ,ＨＬＡＭＰ、ＨＩＣＡＭ等三种肿瘤细胞的生长有不同程序的抑制,用＾３Ｈ－ＴｄＲ标记核酸合成代谢的Ｈｅｌａ细胞的放射活性证实了这种观     

一个新的蛋白质剪切系统及其剪切条件的研究

将含麦芽糖结合蛋白－内蛋白子－几丁质结合区（简称ＭＹＢ）基因的重组质粒ｐＭＹＢ１２９转入Ｅ．ｃｏｌｉ２４２６,在ＬＢ培养基中发酵,ＩＰＴＧ低温诱导表达,菌体超声破碎,离心,上清液经直链淀粉糖亲和层析,获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳纯的前体蛋白ＭＹＢ．ＭＹＢ中内蛋白子的Ｎ端可被还原剂ＣｙＳＨ、ＤＴＴ、β－巯基乙醇等诱导发生剪切反应．结果表明,三种还原剂中以ＤＴＴ为最佳．同时对剪切过程中温度、ｐＨ值等影响进行了研究     

汉滩病毒核蛋白的分段表达及抗原表位分析

在大肠杆菌中对汉滩病毒Ｓ基因４种不同长度片段的重组表达质粒进行诱导表达。结果表明表达的４种ＧＳＴ－ＮＰ融合蛋白均以不溶性包含体形式存在于茵体细胞内,表达量分别占菌体蛋白总量的２９－３６％,分子量分别约为７２ｋＤ、６６ｋＤ、５４ｋＤ和４４ｋＤＤ。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ显示５４ｋＤ和７２ｋＤ融合蛋白用酶标记汉滩病毒ＮＰＭｃＡｂｌＡ８和抗ＧＳＴ ＭｃＡｂ ３Ｃ１１染色呈阳反应。６６ｋＤ和４４ｋＤ融合蛋     

SMAD3与细胞周期蛋折CyclinB的相互作用

ＳＡＭＤｓ是ＴＧＦβ家族的细胞内信号介导。为了研究ＳＭＡＤ３的信号传递过程,我们以ＳＡＭＤ３为诱饵蛋白用酵母双杂交系统筛选与ＳＡＭＤ３相互作用的蛋白,发现Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ可以与ＳＭＡＤ３发生相互作用,并在ＣＯＳ７细胞中证实了该相互作用。提示ＴＧＦβ可能通过ＳＭＡＤｓ与细胞周期素的相互作用来调节细胞周期的变化。     

利用杆状病毒在昆虫细胞内表达

苏云金杆菌以色列亚种（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓｖａｒｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）的分子量为２７ｋＤ的δ－内毒素蛋白基因,与一个拷贝杆状病毒ｇｐ６７信号肽基因连接后,被插入苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ）基因组。在筛选出的３种不同的重组病毒株ＡｃＢＴＩ５－１、ＡｃＢＴＩ５－３和ＡｃＢＴＩ６－３中,前两种表现为多角体阳性,后者为多角体阴性,ＡｃＢＴＩ５－１和ＡｃＢＴＩ６－３在Ｓｆ细胞中表达产生分子量为２６～３０．５ｋＤ的４种与２７ｋＤδ－内毒素蛋白有关的多肽。在ＡｃＢＴＩ５－３感染的细胞中未检测出类似的多肽。粉纹夜蛾在吃了涂有ＡｃＢＴＩ５－１感染的细胞收集物的饲料后,表现典型的苏云金杆菌δ－内毒素中毒症状。被ＡｃＢＴＩ５－１感染的粉纹夜蛾幼虫血淋巴与２７ｋＤδ－内毒素蛋白抗血清呈阳性反应。     

血管紧张素II和阿片肽对Fos蛋白表达的影响

利用抗体免疫沉淀技术研究了血管紧张素ＩＩ,δ受体激动剂和ｋ受体激动剂对大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达的影响,结果表明,０．１μｍｏｌ／Ｌ ＡⅡ可显著刺激脑组织中Ｆｏｓ蛋白的表达,０．１μｍｏｌ／ＬＤＰＤＰＥ和０．１μｍｏｌ／Ｌ ＮＤＡＰ对Ｆｏｓ蛋白的表达亦有一定的诱导作用。ＡＩＩ与ＤＰＤＰＥ或ＮＤＡＰ共同处理组织,Ｆｏｓ蛋白表达水平低于ＡＩＩ单独诱导的水平,结果表明阿片肽可抑制ＡＩＩ对Ｆｏｓ蛋白     

脑缺血/再灌对蒙古沙土鼠海马突触体酪氨酸磷酸化的影响

用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎（ＢＣＡＯ）前脑缺血模型,研究缺血／再灌对海马突触体蛋白酪氨酸磷酸休的影响及ＮＭＤＡ受体（ＮＲ）非竞争性拮抗剂氯胺酮（Ｋｅｔａｍｉｎｅ,ＫＴ）、Ｌ－型电压门控钙离子通道（Ｌ－ｔｙｐｅ ｖｏｌｔａｇｅ ｇａｔｅｄｃａｌｃｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ,Ｌ－型ＶＧＣＣ）拮抗剂硝苯吡啶（ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ,ＮＤ）及非ＮＲ拮抗６,７－二硝基喹恶啉上卫四（６,７－ｄｉ－ｎｉｔｒｏｐｕ