ABRA在正常成年大鼠大脑皮质和海马区的表达

目的观察ABRA(Actin binding Rho activator)在成年大鼠大脑皮质和海马中的表达。方法制备成年大鼠脑的冰冻切片,采用共聚焦免疫荧光技术和免疫荧光强度测量检测ABRA在大鼠大脑皮质和海马区的表达。结果 ABRA在神经元的胞核、胞浆、突起内可见,其中胞核着色最强。在大脑皮质,ABRA阳性的神经元胞体和突起广泛分布于皮质的分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层、多形细胞层,其免疫荧光强度分别为129.22±16.94、125.39±29.83、117.67±22.50、105.85±17.65、103.90±18.00、100.23±20.38,ABRA阳性细胞率分别为0.51±0.01、0.69±0.02、0.64±0.03、0.58±0.05、0.65±0.09、0.63±0.01。在海马,ABRA均匀分布于海马各部,阳性神经元集中于锥体细胞层,而其阳性突起弥散分布于海马分子层和多形层。海马锥体细胞层、分子层、多形层免疫荧光强度分别为141.19±35.48、53.19±10.38、43.32±9.59,ABRA阳性细胞率分别为0.62±0.04、0.27±0.07、0.25±0.03。结论 ABRA广泛表达于大鼠大脑皮质和海马各层,提示ABRA可能在大鼠这些部位的神经细胞功能活动方面起重要作用。     

大鼠脑内代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)定位分布的免疫细胞化学研究

本研究用免疫细胞化学技术观察了大鼠脑内参与兴奋性突触传递的代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)的精确定位分布.mGluR5阳性浓染的神经元胞体和纤维密集地分布于大脑皮质浅层、嗅球、伏核、尾壳核、前脑基底部、隔区、苍白球、腹侧苍白球、海马CA1和CA2区、下丘中央核、被盖背侧核和三叉神经脊束核尾侧亚核浅层;淡染而稀疏的mGluR5阳性神经元胞体和纤维见于屏状核、终纹床核、杏仁中央核、丘脑部分核团、上丘浅灰质层、外侧丘系背侧核和延髓中央灰质.     

新生儿大脑皮质含小白蛋白(Parvalbumin)神经元的免疫组织化学研究

小白蛋白(parvaibumin PV)是一种水溶性低分子量的钙结合蛋白,本实验用免疫疫组化法研究了新生儿大脑皮质含 PV 神经元的分布。PV 阳性神经元为非锥体型,主要分布于中央后回、听皮质及视皮质(17区),在中央前回,wernicke's 区与海马 PV 阳性神经元的数目较少,前额叶很少见到 PV 阳性神经元。在听皮质及中央后回,阳性神经元主要集中于Ⅳ层,少数在Ⅴ、Ⅵ层;在视皮质则分布在Ⅴ、Ⅵ、层及ⅣB 层;wernieke's 区深层(Ⅴ、Ⅵ层)及海马锥体细胞层可见部分阳性神经元。在上述皮质区第Ⅰ层亦可观察到阳性纤维与散在阳性神经元.此外,在中央后回及听皮质的白质内有许多 PV 阳性纤维和终末样结构.     

非基因型雌激素膜性受体GPR30在生后雌性大鼠海马内的发育学表达与亚细胞水平定位研究

为了研究非基因型雌激素膜性受体GPR30对海马的结构和功能的调节作用,应用硫酸镍铵增强显色的免疫组化技术以及酶标免疫电镜技术,观察了生后雌性大鼠海马内GPR30表达的变化及其免疫阳性产物在神经元亚细胞水平的定位情况．结果显示,GPR30免疫阳性产物主要位于海马CA区的锥体层神经元与齿状回颗粒层的神经元内,其表达水平随发育呈增加趋势．P0时在雌性大鼠海马未发现明显GPR30免疫阳性反应,P7后免疫阳性物质开始在CA2出现,P14时见于 CA1、CA2和齿状回,P30和P60主要见于CA1、CA2、CA3和齿状回．在光镜下,GPR30免疫阳性产物位于细胞核外的胞浆中,细胞核未见免疫阳性反应．在透射电镜下可见其位于神经元的胞浆内,可能主要是粗面内质网,也可见于线粒体和细胞膜．以上结果证实,GPR30是一种位于细胞核外的、非基因型作用的雌激素受体,可能参与了雌激素对海马锥体神经元突触可塑性和学习记忆等功能的调节,还可能参与了对齿状回成年神经干细胞某些活动的调节．     

大鼠海马触液神经元的分布特征及其纤维联系

本文应用ＨＲＰ追踪与电镜结合的方法研究了大白鼠海马接触脑脊液神经元的分布特征和皮质内联系。光镜观察在海马的多形细胞层和锥体细胞层等处可见散在的神经元被标记,而在室管膜层标记的细胞较多,它们分布于交织成网的阳性纤维中。透射电镜可见海马室管膜层的ＨＲＰ反应阳性的神经细胞、树突末稍及神经胶质细胞。在海马室管膜上也见到了被标记的神经纤维。同时在海马室管膜层内还发现未标记的阴性轴突与被ＨＲＰ标记的阳性树突构成的轴－树突触。上述结果提示海马为接触脑脊液神经元存在的部位之一,其接触脑脊液神经元并受到其它神经元的突触调控     

应用激光共聚焦扫描技术对海马脑片神经元内钙的观察

用微量注射法将荧光剂Ｆｌｕｏ－３注入大鼠海马,对神经元进行在体荧光标记,可清晰地标记多个神经细胞。联合应用激光共聚焦扫描显微镜,观察大鼠海马脑片ＣＡ１锥体细胞在青霉素,谷氨酸模拟致痫及缺糖缺氧时胞内钙的变化。结果显示：无镁时,谷氨酸和青霉素可致海马ＣＡ１锥体细胞胞内钙的缓慢增加;离体缺糖缺氧时ＣＡ１锥体细胞胞内钙亦增多。     

微管相关蛋白tau在不同年龄大鼠海马内的定位分布特点

目的 检测微管相关蛋白tau和Ser396/404位点磷酸化tau在胚胎期大鼠和出生后直至成熟期大鼠海马内的表达及变化规律,浅析与神经细胞分裂和分化的关系.方法 用免疫组织化学SABC法显示孕18d、出生后1d、1w、2w、2m的大鼠脑冠状切面总tau（R134d）、Ser396/404位点磷酸化tau（PHF-1）的表达.结果 ①胚胎期大鼠海马CA区的锥体细胞数量明显多于出生后,随着脑的发育,锥体细胞层的神经细胞数量逐渐下降;②孕18d大鼠海马内有丰富的总tau和PHF-1 tau的表达,并且海马内各区的阳性物质表达均匀,生后1d和1w两种物质表达仍然很强,阳性产物主要分布在海马CA1和CA2区以锥体细胞轴突为主要成分的始层,在锥体细胞树突集中的分子层和胞核内也有少量分布,而在生后2w和2m大鼠海马内各区均未见密集的阳性产物表达.结论 不同年龄大鼠海马内总tau和PHF-1 tau的表达和分布变化可能与神经系统发育过程中细胞的分裂和分化有关.     

生长抑素mRNA与神经肽Y，催产素在大鼠前脑内的分布及其共存现象──地高辛标记c－RNA探针原位杂交与免疫组化联合法

本实验应用地高辛标记ｃＲＮＡ探针原位杂交组化和免疫组化联合法在同一切片上先后显示了生长抑素ｍＲＮＡ神经元和催产素神经元,生长抑素ｍＲＮＡ神经元和神经肽Ｙ神经元。结果表明生长抑素ｍＲＮＡ及神经肽Ｙ广泛地共存于大鼠的大脑新皮质,尾壳核,以及海马等处的神经元中。所有位于大脑新皮质,尾壳核处的神经肽Ｙ神经元均含有生长抑素ｍＲＮＡ,部分位于海马的神经肽Ｙ神经元含有生长抑素ｍＲＮＡ,而所有位于下丘脑弓状核,室周核的神经肽Ｙ神经元均不含有生长抑素ｍＲＮＡ;生长抑素ｍＲＮＡ与催产素虽然共同分布于下丘脑许多核区,但未见共存于同一神经元。本文对地高辛标记ｃＲＮＡ探针原位杂交组化以及它与免疫组化联合法的技术问题进行了讨论。     

新型雌激素受体ER-α36在新生与成年大鼠海马和皮层中表达的比较北大核心CSCD

ER-α36是一种新型雌激素受体亚型,广泛分布于乳腺、子宫、消化道、呼吸道等组织和细胞中。本文旨在研究ER-α36在中枢神经系统中的表达和分布情况。采用免疫细胞/组织化学方法和蛋白质免疫印迹杂交比较ER-α36在新生(1日龄)与成年(12周龄)Sprague-Dawley(SD)大鼠海马及皮层区的表达和分布情况。研究显示,ER-α36在成年大鼠海马及皮层区均有表达,主要分布于锥体神经元。ER-α36在新生大鼠海马和皮层神经元中均定位于细胞膜。新生大鼠皮层神经元ER-α36蛋白表达高于海马,而成年大鼠皮层神经元ER-α36蛋白表达低于海马。与新生大鼠相比较,成年大鼠海马和皮层神经元ER-α36表达均显著提高。以上结果提示,ER-α36参与介导神经元膜雌激素信号通路的调节,且在大鼠出生后海马及皮层发育中发挥着重要作用。因此,ER-α36可能为学习记忆、神经系统退行性疾病等的防治提供潜在的药物靶点。     

5-羟色胺和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水管周围灰质 和中缝核簇神经元内的共存

实验采用 NADPH组织化学和 5 - HT免疫组织化学双重显色方法研究了 5 - HT和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)和中缝核簇神经元的分布特征及共存情况。结果表明 ;(1 )在 PAG腹外侧区中观察到大量的 NOS阳性神经元和 5 - HT样免疫阳性神经元 ,但是 NOS/ 5 - HT双标神经元较少 ,仅占该区 5 - HT样免疫阳性神经元 2 0 .1 % ,并且主要分布在该区的内侧部 ;在 PAG的背外侧区中观察到密集的 NOS阳性神经元 ,但是几乎未见 5 - HT免疫阳性神经元分布。(2 )在中缝核簇的大多数亚核内均可观察到大量的 NOS神经元和 5 - HT免疫阳性神经元。在中缝背核的内侧部、中缝背核的尾侧部、中缝正中核、尾侧线形核、中缝大核和中缝隐核内双标神经元分别占所在部位中 5 - HT免疫阳性神经元的 44 .6 %、5 3.4%、 44 .4%、 2 6 .2 %、 2 6 .7%和 2 1 .8%。然而在中缝苍白核内仅偶见少数双标神经元。研究结果表明 ,在 PAG和中缝核簇的一些神经元内 5 - HT可以与 NOS共存 ,提示这两种神经活性物质在功能上可能存在着某种相关性 ,有关这些双标神经元的功能意义尚需进一步研究。     

人和猴T淋巴细胞表面TRBC受体和E受体的比较研究

TRBC受体不同于已知的全T细胞表面分化抗原CD2,CD3/TCR复合物,CD5,CD6和CD7。CD2分子不参与TRBC玫瑰花结的形成,也不是介导E花结的唯一分子。至少有两个或两个以上蛋白质与TRBC玫瑰花结和E花结的形成有关,其中有的分子为E受体和TRBC受体所共有。因此,很可能有不同于CD2的分子参与了TRBC玫瑰花结的形成。     

SYNTHESIS AND ADENOSINE RECEPTOR AFFINITY AND POTENCY OF 8-ALKYNYL DERIVATIVES OF ADENOSINE

Adenosine derivatives bearing different (ar)alkynyl chains at the 8-position were synthesized and tested at human adenosine receptors. Binding studies showed that all compounds possess affinity for the A₃ subtype in the high nM range. Moreover, guanosine 5′-O-(3-[³⁵S]thio)triphosphate binding assay indicated that the 8-alkynyl adenosines behaved as antagonists of NECA at A₃ receptors.     

瘦素及其受体在宫颈癌中的表达和意义

目的探讨瘦素(leptin)及其受体(OB-R)在宫颈癌中的表达与临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学技术检测10例慢性宫颈炎、12例宫颈上皮内瘤样病变、50例宫颈癌中leptin和OB-R的表达,利用CD34标记宫颈癌血管内皮细胞并计算微血管密度(MVD)。结果leptin和OB-R仅在10例慢性宫颈炎、12例上皮内瘤样病变的鳞状上皮层中呈弱阳性表达;50例宫颈癌中Leptin染色( )39例,OB-R染色( )33例;宫颈癌中leptin表达、MVD与肿瘤分化程度、浸润深度和是否远处转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄和肿瘤组织学分型无关(P>0.05);OB-R表达与浸润深度和是否远处转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤分化程度和组织学分型无关(P>0.05);leptin或OB-R染色( )MVD明显高于染色(-)者。结论Leptin是宫颈癌重要的血管生长因子,瘦素及其受体和MVD与肿瘤的恶性程度密切相关。     

肾上腺素受体和乙酰胆碱受体在血吸虫性肝纤维化肝脏组织中的表达研究

目的研究α1A-肾上腺素受体(α1A-AR)和M1型乙酰胆碱受体(mAChRM1)在日本血吸虫性肝纤维化小鼠肝脏组织中的表达情况,初步探讨神经递质受体在肝纤维化发生机制中的作用。方法清洁级昆明小鼠30只随机分为正常组(N组,10只)、模型组(M组,20只),模型组小鼠用腹部敷贴尾蚴法感染日本血吸虫制备肝纤维化模型。应用免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)等方法检测肝脏组织中α1A-AR和mAChRM1表达变化。结果模型组肝脏组织中α1A-AR和mAChRM1表达较正常组明显增加,其差异具有显著性统计学意义(P<0.05)。结论神经递质受体表达上调在血吸虫性肝纤维化发生发展中起一定作用。     

鸡视网膜谷氨酸受体和GABA受体在两栖类卵母细胞中的表达

本工作利用两栖类卵母细胞作为功能表达系统,对鸡视网膜中的谷氨酸受体和ＧＡＢＡ受体的类型和基本性质进行了研究。在注射鸡视网膜ｍＲＮＡ的卵母细胞上,谷氨酸受体有明显的表达。Ｌ－Ｇｌｕ及其类似物ＫＡ,ＡＭＰＡ,ＱＡ都毫无例外地能诱导卵母细胞产生快速平滑的去极化电流,而ＮＭＤＡ,Ｌ－ＡＰ４,ＡＣＰＤ以及天冬氨酸不能诱导明显的电流反应。并且ＡＭＰＡ,ＱＡ对ＫＡ反应存在一定的抑制作用,提示ＡＭＰＡ,ＱＡ可能与ＫＡ作用于同一受体。抑制性氨基酸ＧＡＢＡ的受体被证明大部分为ＧＡＢＡＡ亚型,但有小部分的ＧＡＢＡ反应不能为荷包牡丹碱（ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ）所阻断。     

间隙连接蛋白基因connexin43、ER、PR的表达在子宫平滑肌瘤中相关性研究

研究细胞间隙连接蛋白基因43（connexin43,CX43）及其蛋白、雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR）在子宫平滑肌瘤中的表达,从核酸及蛋白水平探讨在子宫平滑肌瘤发生中的相关关系。应用核酸原位杂交技术和SP免疫组织化学法,研究37例子宫平滑肌瘤、20例正常子宫平滑肌组织中cx43mRNA及其蛋白、ER、PR的表达规律。结果显示,cx43mRNA及其蛋白、ER、PR在子宫平滑肌瘤中的表达明显高于在子宫平滑肌组织中的水平,差异有显著性（P＜0.05）。cx43mRNA及其蛋白在子宫平滑肌瘤中的过度表达,是子宫平滑肌瘤发生过程的重要事件,与ER、PR水平升高呈现一致性,对进一步揭示子宫平滑肌瘤的复杂分子机制、寻求可靠的早期标志有重要意义。     

自分泌运动因子受体在大鼠胃肠的定位

目的 研究自分泌运动因子受体在大鼠胃肠的表达及分布特点。方法应用免疫组织化学方法染色。结果在大鼠胃壁内有自分泌运动因子受体的表达,免疫反应产物主要定位于胃底腺,阳性细胞胞体大,胞核呈阴性,小肠和大肠组织均呈阴性反应。结论正常大鼠胃底腺有自分泌运动因子受体的表达,提示可能参与胃腺的多种生理活动。     

胆管癌组织中层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的表达及其临床意义

目的 探讨层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的表达与胆管癌临床病理学行为的关系。方法 应用S-P免疫组化法对52例人胆管癌组织中层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的表达水平进行研究。结果 层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的高表达与胆管癌淋巴结转移呈明显相关,层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体阳性肿瘤淋巴结转移率（83％,55％）明显高于层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体阴性肿瘤（15％,20％,P〈0．05）,且层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的表达与胆管癌组织学类型、分化程度亦存在明显相关（P〈0．05）。结论 层粘连蛋白及67KDa层粘连蛋白受体的表达在胆管癌淋巴结转移中起协同作用。     

小鼠脾细胞糖皮质激素受体的鉴定及其半衰期的测定

用[~3H]Dex作为配体,证实小鼠游离脾细胞有[~3H]Dex特异结合部位,该部位有低容量(表观结合容量为10.70±2.35 fmol/10~6个细胞)、高亲和力(表观平衡解离常数为6.37±1.97 nM)、甾体结合特异性等特点,具备了作为GCR的基本判据。用CYCLO抑制蛋白合成的方法,测定了该GCR的半衰期。在蛋白质合成被抑制70%的情况下,GCR的半衰期为1.6±0.5h,降解速度常数为0.455±0.132h~(-1),表明GCR是代谢活跃的蛋白质,提示GCR不仅是激素信息的接受者和传递者,而且可能是激素反应的调节者。