SV40 DNA Hind Ⅲ B片段增强人β干扰素基因在大肠杆菌中的表达

近年来发现,许多DNA和RNA肿瘤病毒具有一种可以增加某些基因转录活性的调控序列,称为增强子。但增强子只在真核细胞才起作用。侯云德等在研究SV40 72bp重复序列对干扰素基因在原核细胞中表达的影响时,发现SV40 DNA Hind Ⅲ B片段对人αD型干扰素基因在原核细胞中有顺式(cis)的增强作用。本文进一步观察到,该片段对人β干扰素基因在大肠杆菌中的表达也有类似的增强作用。     

RNA干扰介导原核细胞适应性免疫

RNA干扰广泛存在于真核细胞中, 其作用机制已得到比较清楚阐明.虽然在原核细胞中已发现微小RNA(miRNA)参与的基因沉默调节细菌基因表达, 但尚未发现小干扰RNA (siRNA)参与的基因沉默机制.近年在原核细胞基因组中发现一类新的成簇的规律间隔的短回文重复序列 (clustered regularly interspaced short palindromic repeat, CRISPR)和与其相关的基因.生物信息学分析和预测表明两者构成的CRISPR相关系统介导原核细胞RNA干扰, 进而发挥免疫防御功能.这一假说新近得到了实验证实, 与此同时首次揭示了原核细胞的适应性免疫机制.这种防御机制不同于真核细胞适应性免疫机制, 除具特异性外, 还具有遗传性.     

重组小牛胸腺核组蛋白的初步研究

将遗传信息从一个世代传递到另一个世代,并对活细胞的复杂功能进行控制的基因,均由DNA构成,这早已是人们普遍接受的概念。但是,从原核细胞裸露的DNA纤维,发展到真核细胞DNA同组蛋白、非组蛋白蛋白及少量RNA紧紧包扎而成的染色体,这一飞跃的奥秘还远未揭开。近年来,随着分子生物学的发展,组蛋白、非组蛋白蛋白以及RNA如何维持染色体的复杂结构,并如何对基因活性进行调节控制的研究,已日益成为现代生物学中最富挑战性的课题之一。     

质粒的简介

<正> 一、细菌染色体 原核细胞如一般称为细菌的单细胞生物,在显微镜下观察时,虽然有核样物质存在,但不象真核细胞(高等生物细胞)那样,在核与细胞质之间存在着清楚的核膜。另外,真核细胞在分裂时,出现由DNA遗传基因凝缩而形成的具有特殊结构的染色体。而原核细胞则看不到类似结构。但在原核细胞中可以看到链状排列的基因连锁,如大肠菌、沙门氏菌、枯草菌等就存在着单一的环状连锁。近来,随着核酸技术的发展,已证明这种DNA是一个环状分子。遗传基因的排列和DNA的构造相对应。在真核细胞的形态学研究中,已经发现了遗传基因的排列与染色体横的构造相对应。因此染色体     

MAR的结构、功能及其应用研究现状

真核细胞表达外源基因克服了原核细胞表达外源基因的种种不足(如mRNA的成熟、翻译后的加工),因而得到广泛应用。但真核细胞表达外源基因也有不足之处,即表达效率低。造成真核细胞外源基因表达效率低的原因有很多,如基因结构、表达载体、调控元件等,而宿主细胞染色质DNA对外源基因的影响是一个不可忽视的原因。人们在通过载体将外源基     

质体遗传的新进展——关于质体基因的易位和易位子

质体(plasmid)是染色体外的遗传因子,能自主性地进行复制,控制着寄主细胞一定的遗传特性。例如细菌的抗药质体控制着细菌的抗药性,直接影响药物对疾病的治疗效果。又如F因子控制着细菌致育性(fertility),直接与细菌杂交有关,质体由DNA组成,分子量比染色体小得多,它的长度为染色体DNA的百分之一至千分之一,它不仅是分子遗传学中研究基因复制及基因表现的好材料,而且是遗传工程(体外DNA分子重组)中重要的分子载体之一。     

DNA碱基组成的比较研究

当把各种生物的DNA中碱基鸟嘌呤和胞嘧啶(G+C)含量进行比较时,可以看出病毒DNA和原核细胞细菌DNA中G+C含量变化范围非常宽,分别为30.9一73％和22.8—73％。真核细胞原生生物的DNA中G+C含量变化范围也呈类似情况,G+C占碱基组成的     

脂染色体与真核细胞基因工程

本文着重介绍以脂染色体(Lipochromosome)作载体将一种真核基因转移至另一真核细胞的新技术(脂染色体的制备及其检测、脂染色体转移基因及其检测)。脂染色体不但能促进基因转移和提高基因的稳定性,而且还能提高基因组活性。将基因导入真核细胞的现有技术,一般需要贵重的原料和设备,并且仅限于特殊的细胞类型。而脂染色体转移基因技术较为简单,各种不同类型的细胞均可作为靶细胞。基于上述这些独特优点,在真核细胞基因工程中它将成为一种极为有用的工具。     

人胰岛素基因的核苷酸顺序已经解决

美国加州大学旧金山分校的Bell等人继解决大鼠胰岛素基因核苷酸顺序后,于今年三月宣布他们又解决了人胰岛素基因的核苷酸顺序。他们先从人胰岛素瘤提取胰岛素的信使核糖核酸(mRNA),经反向转录得到与此胰岛素mRNA互补的脱氧核糖核酸(cDNA)。为了得到更多量的cDNA,他们将其组入细菌质体(plasmid)DNA中,利用质体的     

微生物基因组研究进展

微生物基因组研究近年来发展很快,借助基因测序技术已完成多种微生物基因组测序。原核细胞生物基因组与真核细胞基因组具有各自特点。许多由基因控制的细菌遗传性状与细菌毒力有关,选择合适的靶基因研究可用于发展疫苗和开发新的诊断工具。同时,加快基因组功能性研究迫在眉睫。     

细胞核的功能

真核细胞的显著特点之一是具有膜包裹着的细胞核,其主要功能是将基因的转录和信使核糖核酸指导合成蛋白质这2个过程在空间上分隔开。最初为蛋白质编码的RNA序列可能是被不为蛋白质编码的RNA序列所隔断的,这些非编码区后来成为DNA分子中基因里的内含子。原核细胞为了节省资源,已基本清除了基因中的内含子。而真核细胞则利用内含子,用同一个基因合成多种蛋白质,这就需要细胞核阻止含有内含子的m RNA与合成蛋白质的核糖体接触。     

超氧化物歧化酶的结构与功能

“1969年McCord和Fridovich首先从牛红细胞中发现了超氧化物歧化酶活力。有关氧代谢的分子生物学方面的研究工作,可与DNA双螺旋结构学说的成就相比拟。”超氧化物歧化酶(EC 1.15.1.1)是一类金属酶,按金属辅基成份不同分为三类,第一类含Cu和Zn(简称CuZn-SOD),主要存在于真核细胞的细胞浆中;第二类含Mn(Mn-SOD),存在于真核细胞的线粒体和原核细胞中;第三类含Fe(Fe-SOD),只存在于原核细胞内。这三类SOD都催化超氧化物阴离子自由基(O_2~-)发生歧化反     

线粒体DNA聚合酶的起源与演化

随着新的DNA聚合酶A家族成员的加入,家族内部的系统发育关系需要重新检查,来自大肠杆菌DNA聚合酶I(DNA Pol I)和它的细菌、噬菌体和真核细胞同源物被用来重建这个家族的系统发育史.分析显示:在真核生物演化的不同阶段,线粒体DNA聚合酶基因可能通过水平基因转移方式起源于不同类群的生物.原始真核生物线粒体DNA聚合酶基因可能来源于细菌,植物线粒体DNA聚合酶基因可能从质粒获得,而真菌和动物线粒体DNA聚合酶基因可能起源于T3/T7相关噬菌体.     

胁迫诱导抗性基因转移导致细菌耐药的分子机制研究进展

抗性基因转移是细菌形成耐药性的重要原因.近年来的研究表明胁迫因子可通过多种机制诱导抗性基因转移.DNA损伤可导致细菌产生SOS应激反应,进而诱导接合DNA介导的抗性基因转移.在一些缺乏SOS系统的细菌中,抗生素胁迫可诱导细菌建立自然转化感受态.此外,作者最近的研究表明普通胁迫应答因子RpoS调控一种由双链质粒DNA介导的固体基质表面的抗性基因转移方式.本文在总结SOS依赖和非依赖型胁迫因子诱导细菌接合和转化介导的DNA转移以及RpoS调控固体基质表面双链质粒DNA转移的基础上,提出今后需重点研究胁迫因子如何激活关键调控蛋白以及这些调控蛋白如何影响DNA转移相关基因表达等关键问题.解决上述问题将为寻找合适的分子靶标用于防控抗性基因转移导致的细菌耐药奠定基础.     

《生物工程讲座》(Ⅳ)——基因工程的理论及应用(三)真核细胞的基因转移技术及其应用

真核细胞基因的转移可以通过转移整个染色体组,也可以转移一组染色体或重组的DNA分子到细胞中去,这些,若从方法学上加以分类有: 1.细胞杂交法; 2.微细胞(microcell)融合; 3.染色体介导的基因转移; 4.DNA介导的基因转移; 5.细胞微量注射法。用细胞杂交方法可以转移整个基因组,而用微细胞转移基因则是用微细胞作供体。在微细胞中有一个或几个染色体与遗传性完整的受体融合,因此,在微细胞系统中只有一个或很少的染色体转移到受体中去。用染色体转移基因是由受体细胞经细胞内吞作用(endocytosis)来     

对抗生素抗性蔓延的畏惧

给家畜饲喂抗生素可以导致人体产生抗生素抗性。伊利诺斯大学的Abigail Salyers断定抗生素抗性基因能够从猪、羊和牛消化道内的细菌中转移到人体内的远缘细菌中。由于抗生素抗性有扩散到人类病原体中的危险,Salyers认为必须花时间重新评价给动物饲喂大量抗生素这一事实。 经鉴定发现分离自家畜肠道细菌的四环素抗性基因(tetQ)的DNA序列与引起人牙周病的细菌的tetQ基因完全一致。Salyers从家畜肠道Prevotella、人肠道Bacteroides和人口腔Prevotella intermedia中获得12种tetQ基因,有3个基因具98%的DNA序列相似性,最低的相似性为94%。Prev-     

生命的“第三形态”

早在1937年,就有了原核细胞和真核细胞的说法.但是一直到分子生物学发展起来后,才真正注意到这两种细胞之间的区别,并把这两种细胞组成的生物称作两种不同的生命形态.最近美国伊利诺斯大学教授沃斯(C.R.Woese)鉴别了一种产生甲烷的微生物——产甲烷生物(methanogen).他们认为,产甲烷生物与其他细菌有着许多不同点,似乎可以把它们从原核细胞生物中分出来,与原核细胞生物、真核细胞生物并排,把它称作生命的“第三形态”.     

一组有关人白细胞溶菌素-2(Interleukin-2,简称IL-2)基因工程情况的报导

日本东京味之素公司: 取得三方面成就:1、由该公司实验室从人细胞中分离到纯的人白细胞间溶菌素基因。2、鉴定得知它的基因产物是133个氨基酸构成的蛋白质。3、通过DNA基因重组技术将此基因转移到大肠杆菌中得到了由细菌产生的人白细胞间溶菌素。味之素公司付总裁认为,在今后4到5年,此产品可望成批生产。 日本林原生物化学公司: 他们将立即开始生产能提高对癌症免疫性能的物质一人白细胞间溶菌素。该公司的方法是将人的淋巴细胞植人到仓鼠之中,仓鼠细胞就会大量分泌人的IL-2,不过大规     

细菌遗传物质的结构及在遗传工程中的作用

在电镜下观察,细菌细胞中不存在真正的核,DNA被局限在细胞的中心部位,它被细胞的其他部分所包围。与真核细胞相比,这个局限细菌DNA的区域常常被称为细菌的“核”;而细胞的其余部分常常被称为细菌的“细胞质”。在这种核与细胞质之间,不存在使二者隔离的膜,即细菌没有核膜。而细菌的DNA,尽管并没有象真核细胞的DNA那样与蛋白质结合,也常常被称为细菌的“染色体”,其分子量大约是1～6×10~9道尔顿。在这种染色体上,排列着细菌遗传的全部或大部分基因,它是细菌赖以生存的基本遗传物质。     

大肠杆菌R40质体的鉴别、转化及其分子量

用Qβ噬菌体鉴别出太肠杆菌PH116为F-菌株。此菌株抗四环素,对利福平敏感。通过与菌株W1177F-Tets RifR 的接合转移试验,肯定了PH116菌株的四环素抗性基因位于R40质体上。R40质体的接合转移频率为10-7。除接合转移外,R40质体还可通过转化途径进行传递。R40 质体DNA分子呈超线团状及开放形环状。测量了103个R40质体DNA的外形长度,求得平均长度为1．03微米+0．10。R40质体DNA的分子量为2×106道尔顿左右。