生物发光分析中细菌荧光素酶及其与黄酶在琼脂糖4B上固定条件的研究

一、引言生物发光分析中常用的两个发光系统是荧火虫荧光素酶和发光细菌的荧光素酶。萤火虫酶发光系统已被广泛应用来定量检测各种样品中的ATP,细菌发光系统可用来检测NADH、FMN、乳酸脱氢酶等多种酶和底物。生物发光分析具有特异性强、灵敏度高、速度快等优点。近年来建立的固定酶法,与可溶性酶法相比,具有酶可重复使用、稳定性好,催化效率高等特点。本文报道细菌荧光素酶及其与黄酶(代替NADH:FMN氧化还原酶)用琼脂糖4B固定,各种条件对生物发光分析的影响。二、材料和方法化学试剂:琼脂糖4B(pharmacia Fine che-     

科技文摘

发光烟草最近,美国加利福尼亚大学的科学家利用基因工程技术成功地将控制荧光素酶产生的荧火虫基因移植到烟草植物中,培育出发光烟草。荧光素酶能使荧火虫发光,科学家们将荧光素酶基因移入烟草植物后再     

观察生物发光现象的好材料——发光细菌

生物发光是生物界的普遍现象。人们最常见的是萤火虫的发光。然而,在辽阔的自然界,发光生物何止萤火虫,例如,在微生物中,就有能发光的细菌。这种细菌寄生或共生于各种海洋动物如各种鱼类的体表、内脏或专门的发光器官中。一旦条件适宜就能发出蓝绿色的光     

生物超微弱发光

萤火虫发光是一种广为人知的生物发光现象。自然界中能够发光的生物成千上万,不胜枚举:在海洋中有造成“海火”奇观的发光浮游生物;在森林里有晶莹闪烁的发光蘑菇;在草地上有发光的软体动物;在空中有形形色色的发光昆虫。这些发光生物都有一个共同的特点,它们所发出的光都...     

生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展

生物发光和化学发光在生物医学领域内的应用主要包括细胞学检测,分子生物学、卫生学检测,生物传感器、脂质过氧化检测和药物筛选等六个方面,其中细胞学检测主要是利用细胞内ＡＴＰ导致的虫荧光素酶发光进行活细胞计数,目前已实现快速、动态、单细胞分析;同时发现了一些新的与生物或化学发光有关的细胞学指标。分子生物学领域内的应用主要为报告基因和分子杂交,近年来又有人推出了生物发光实时ＤＮＡ测序技术。卫生学检测则主要     

真菌发光途径的研究与应用进展

真菌发光途径(fungal bioluminescence pathway, FBP)是一种来源于真菌的生物发光代谢途径。其能够利用FBP途径基因簇表达的蛋白,以咖啡酸为底物,合成真菌荧光素,在真菌荧光素酶的催化下,生成不稳定高能小分子,之后分子能量衰减释放出波长约为520 nm的绿色荧光。在发光真菌中,真菌发光途径基因在进化上非常保守。与其他生物发光系统不同的是,真菌发光途径适合于真核生物,特别是植物中的工程化应用。目前,经过代谢路径优化的发光植物可以持续发出肉眼可见光,照亮周围环境。该发光系统在生物检测、生物传感器、发光园艺植物培育和绿色照明等领域具有广阔的应用前景。     

生物发光协助净化环境

对释放入环境的工业污染物数量的关注激励科研人员研制用于检测毒素,特别是重金属的简便而又精确的方法。微生物学家现已提供了一种新的检测毒素和重金属的途径,即利用依据其所处环境中的金属浓度发光或不发光的生物发光细菌。 David Holmes及其在Clarkson大学(Potsdam,NY)的同事将一种生物发光海洋细菌费氏弧菌(Vibrio fischeri)的发光基因与其它相应于存在铜或汞的生物基因融合,制备了检测铜和汞的遗传工     

水母为什么会发光?

正自然界中有许多动物能发光,它们大多是因为体内有荧光素或荧光酶,经过氧化作用就会发出光来。然而水母的发光系统却不同于其他动物,它是依靠一种奇妙的蛋白质来发光的。值得一提的是,只要水母活着,就会一直发光。【知识布丁】Q:水母的触手断掉后会怎样?A:水母的触手断掉后会重新长出来,而且在新触手长出之前,剩下的触手为了使水母的身体保持     

生物发光技术在生命科学中的应用

随着发光（luminescence）技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光（bioluminescence）技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。     

令人“眼花缭乱”的奇异鱼类

水母会发光,这不是什么奇怪的现象,许多人都知道。然而,有一种彩虹水母能发出彩虹般的亮光,却是第一次被发现。 这种水母其实并不像其他发光生物一样自己发光,相反,它的彩虹光是来自它身体上的绒毛对光的反射——那些像毛发的突起物同时拍水使其能够在水中前进。     

植物细胞Ca2+荧光蛋白指示剂研究进展

Ca2+作为第二信使参与了植物生长和发育过程的调控,不同生物和非生物胁迫信号均可诱导胞内Ca2+变化.对Ca2+在信号转导作用中的认识主要来自于细胞内Ca2+浓度测定.水母发光蛋白和基于荧光蛋白的Ca2+荧光指示剂作为检测细胞Ca2+信号的手段是近年发展起来的新方法.本文综述了水母发光蛋白和基于荧光蛋白的Ca2+荧光指示剂的发展、测量原理、优点与不足及其在细胞Ca2+信号转导中的应用研究进展.     

东方弧菌的无细胞系统的发光：一种由长链脂肪醛启动的生物发光

采用常规的硫酸铵分级沉淀和DEAE-纤维素柱层析从东方弧菌(Vibrio otientalis)518菌株的细胞裂解液中分离到一种组分,仅需长链脂肪醛就可以启动发光。对其反应的动力学、生物发光光谱、荧光激发光谱．荧光发射光谱和吸收光谱等作了研究。其生物发光的衰减为一级反应,速度常数K=0．1 49秒。生物发光光谱与发光细菌的活体发光光谱一致。荧光光谱和吸收光谱的持征表明,该组分与细菌发光反应的中间产物11相似。用本菌株的COS制备物作对比,表明该组分确与COS的发光反应所需的条件不同。     

昆虫的发光及其应用

<正> 生物发光现象(Bioluminescence)是众所周知的,早在1700年前我国就有“车胤聚萤夜读”等记载。除萤火虫外,其它动物、植物、微生物也有一些发光的类群。近来人们还发现越来越多的生物反应都能发射很弱的光,这种低水平的发光被称为生物的化学发光(Chemilumi-nescence)。本文仅就昆虫的发光加以简介。 一、发光昆虫的类群及其研究状况 昆虫的发光可分为两大类,一类是由于发     

微生物学的发光仪器

生物发光和化学发光的仪器已有很多应用.这里,我们坚持使用“发光仪”这个词来命名这类仪器,虽然也有人偶尔用辐射仪或光度计等其他名称.这里“发光”一词仅包括生物发光和化学发光,不包括荧光、磷光等等.有好几家公司生产发光仪,本文结尾罗列了这些仪器.而所使用的非商品发光仪不在此列,因此论述将集中在适于工业化生产的发光仪的设计原则.当把生物和化学发光与微生物学联系在一起,人们习惯上会想到生物发光的ATP技术.可是近年来,免疫分析和DNA探针方法也在使用生物及化学发光标记.这些分析技     

荧光素酶研究进展

荧光素酶（Luciferase）可以分为萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶两大类。萤火虫荧光素酶是分子量为60－64kD的多肽链,在Mg^2 、ATP、O2存在时,催化D－荧光素（D－Luciferin）氧化脱羧,发出光（λ=550-580nm）。细菌荧光素酶是含α、β两个多肽亚基的加单氧酶,它催化长链脂肪醛、FMNH2和O2的氧化反应,发出绿蓝光（λ=490nm）。萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶可分别从萤火虫和发光细菌中直接提前,亦可用基因工程的方法进行生产。荧光素酶催化的发光反应能用生物发光检测仪进行灵敏、快速检测,因此该酶有多方面的途径,如应用于快速检测、报告基因分析、有毒有害物质分析等。     

生物发光和化学发光学术讨论会在苏州召开

1990年5月22—24日由中国生物物理学会光生物专业委员会和中国物理学会发光分科学会联合举办的生物发光和化学发光学术讨论会在苏州举行,参加会议的代表100多人,其中中青年科学工作者包括研究生过半数,代表来自全国16个省市,交流的论文达120篇(宣读了64篇),论文的内容覆盖面广,有生物发光、生物的超微弱发光、细胞化学发光、体表发光、化学发光和荧光标记、化学及荧光免疫分析法及测量发光的仪器仪表等。从人数、论文数来看,比1987年苏州光生物学会议增加了4倍,说明生物发光和化学发光这一新兴学科已在我国生根,并得到了迅速发展。     

渤海水母体细菌的微生态分布及弧菌生物学特性

采用稀平板法对我国辽宁渤海海域水母体中细菌的微生态分布进行了考察,结果表明,在渤海水母体中各部位均有腐生性细菌及弧菌生长,其中腐生性细菌主要存在于水母体现,而弧菌除存在于水母体表外,有的则能在水母体内深层生长,水母体细菌微生态研究结果表明,弧菌的占细菌总数的90％以上,通过改进TCBAS培养基,从水母体中分离得到6株优势类群的细菌,对其菌落特征、菌体形态、生理生化特性进行了研究,它们都具备弧菌属的共同特点：革兰氏阴性,氧化酶阳性,兼性厌氧,TCBS培养基上能生长,对O／129敏感,初步鉴定为弧菌属,研究还发现,这几株菌都能产蛋白酶,其中JF2、JF4、JF5、JF6产蛋白酶的能力明显较强,它们极有可能是导致水母捕捞后快速解体腐败的主要原因。     

微弱发光分析技术原理及应用实例(一)

微弱发光分析技术近年得到迅速发展,在自由基、活性氧分析、化学发光分析、生物的超微弱发光分析、发光免疫分析、生物发光分析等领域得到广泛应用.简要介绍了微弱发光分析技术的测量原理,并以一些研究成果为实例讲解如何应用微弱发光分析技术进行研究和实践.     

萤火虫荧光素酶和荧光素酶基因

自然界有一些能自身发光的昆虫。其中,以北美萤火虫(Photinus Pyralis)研究得较为广泛和透彻。早在1956年,Green和McElroy就得到了荧火虫荧光素酶(Luciferase)的结晶。次年,Bilter和McElroyS~得到了荧光素(Luciferin)的结晶。1961年,White等测定了荧光素的结构,并化学合成了荧光素。随后,生物学家们一直致力于研究荧光素酶的催化反应机制。     

基因工程学家的新目标——发光植物

在自然界,能发光的生物有某些细菌、甲壳动物、软体动物、昆虫和鱼类,但能发光的植物却不多见。基因工程的发展使科学家了解到,生物冷光也是由DNA分子中的基因协调控制的基因工程学家已能把发光基因导入植物细胞中,培育出夜晚能发磷光或萤光的植物。