通过基因分析开发吗啡处方支援试剂盒

东京都精神医学综合研究所的池田和隆室长等人（分子精神医学研究部门）与日本东京大学医学科学研究所医院手术部的林田真和部长（副教授）等人着手开发的试剂盒可以从作为吗啡（morphine）作用点的Mu阿片受体（Mu-opioidreceptor）的基因多态性中寻找吗啡的适宜量。目前据说正在为产品的开发与数家公司交涉共同研究的问题。     

荧光基因探针定量PCR诊断试剂盒产业化

中山大学达安基因股份有限公司（以下简称达安公司）是一个以生物学技术为指导的集研究、开发、中试、生产和应用为一体的生物医药高科技企业．目前主营业务为荧光PCR检测技术研究、开发和应用以及荧光PCR检测试剂盒的生产和销售。     

在基因检查用样品中剪下的指甲碎屑引人注目 它是心理抵触最小的活体样本

在进行基因检查时很重要的是活体样品的采取。此前利用的是血液以及口腔细胞，但是使用指甲进行身体基因检查的试剂盒最近将面世。心理抵触最小的指甲会促进基因检查产业的发展吗？[编者按]     

猪链球菌2型荚膜基因PCR快速检测方法的建立及试剂盒的研制

根据猪链球菌2型的荚膜基因2H序列设计一对引物,成功地扩增了荚膜基因,并建立了检测猪链球菌2型的PCR方法。用ScaI进行确认,获得了与预期大小一致的389bp和300bp的两个片段。然后对该方法的敏感性、特异性进行了研究。结果表明,敏感程度可达10个细菌;对其他细菌PCR检测结果均呈阴性,表明建立的猪链球菌2型荚膜基因的PCR检测方法,其特异性和敏感性均很高,可作为猪链球菌病快速诊断的方法。在建立PCR方法的基础上,研制成试剂盒,并对试剂盒的特异性、敏感性和稳定性进行了研究。     

人指甲中特征脂类成分GC／MSD分析

目的：阐明正常健康成年人指甲特征性脂类化学成分,方法：溶剂法提取脂类成分,经酯化后,采用气相色谱－质谱－计算机联用技术分离鉴定,归一化法计算相对百分含量。结果：从正常健康老年人指甲中鉴定出17种成分,占总脂的89．431％,其中脂肪酸类12种（占40．838％）,酚类1种,蒽酮类1种,甾醇类1种,芳香酯1种,多烯类1种,结论：正常健康成年人指甲中的特征性脂类成分之一为角鲨烯,含量达37．172％。     

中德生物STR荧光ZDgenetype 9+1基因分型试剂盒应用结果分析

目的:确证中德生物STR荧光ZDgenetype 9 1基因分型试剂盒应用于个体基因分型的准确性和重复性。方法:应用中德生物ZDgenetype 9 1 STR荧光基因分型试剂盒扩增100例无关个体样本,建立扩增产物在ABI 310遗传分析仪上基因分型的方法,相同样本扩增结果与AmpFLSTR Identifiler基因分型结果进行比较。结果:ZDgenetype 9 1荧光基因分型试剂盒对100例无关个体血样进行复合扩增并实现了在ABI 310遗传分析仪上进行基因分型,其结果与AmpFLSTR Identifile扩增相同样本的基因分型结果吻合率为100%。结论:中德生物ZDgenetype 9 1 STR荧光基因分型试剂盒适用于法庭科学日常办案和科研使用。     

核糖核酸酶保护分析试剂盒的研制与质量检测

目的:开发核糖核酸酶保护分析(RPA)试剂盒,用于组织和细胞mRNA定量分析。方法:参考国外RPA实验方法和试剂盒配方配制RPA试剂盒;以国外同类产品为标准,采用同位素标记探针检测该试剂盒的质量。结果:采用自行研制的核糖核酸酶保护实验试剂盒,检测β-肌动蛋白和亲环蛋白mRNA在小鼠肝脏的表达,其灵敏度与美国Ambion公司的RPAⅢ试剂盒相似。结论:研制的RPA试剂盒可用于组织和细胞mRNA的定量分析,其质量能够达到国外同类产品的标准。     

高粱抗蚜基因的RAPD分析

应用RAPD技术BSA法,对高梁抗蚜基因进行分析,筛选了500个随机引物,共扩增出1614条谱带,得到了10个具有稳定多态性标记的引物,分别为OPA－01、OPP－09、OPP－14、OPH－19、OPN－08、OPN－07、OPN－20、OPY－14、OPS－20、OPJ－06。     

差异表达基因分析

细胞在增殖,分化及对外界刺激反应过程中,可伴随某些特殊基因的表达,利用这一特性,通过比较细胞在不同状态及不同分化阶段基因表达的差异,可以发现与细胞分化／生长相关的基因,近年来国外学者发展了几种能有效进行差异表达基因分析的技术和方法,包括差异显示PCR,代表性差异分析,抑制性消减杂交及DNA微阵列等。本文主要对目前主要技术方法作一综述。     

人基因组连锁分析和基因定位

连锁分析是确定基因之间连锁关系的统计学方法,是目前进行基因定位的重要手段,ＬＯＤ法是最为常用的有效的连锁分析的方法,本文连锁分析原理,方法和应用成果及前瞻等三方面进行了介绍。     

对一未知动物材料Cytb基因分析及初步鉴定

采用通用引物L14724,H15149和PCR直接测序技术对一未知动物材料的Cytb基因进行分析,获得了425bp 的DNA序列,比较发现与獐亚科的獐只存在2个碱基差异,NJ和UPGMA法构建的分子进化树一致,均表明其首先与獐聚类,初步推测其为獐。     

大肠杆菌ubiC基因的克隆及序列分析

研究以克隆得到正确序列的大肠杆菌ubiC基因目的,实验通过PCR方法从大肠杆菌基因组中扩增得到了ubiC基因,扩增产物克隆到pUC118载体,转化大肠杆菌JM109,DNA序列分析结果表明克隆得到的大肠杆菌ubiC基因碱基序列正确。     

小麦矮秆基因Rht3的RAPD和RFLP标记分析

利用PCR和RFLP技术分析了小麦赤霉酸反应不敏感的矮秆基因Rht3的近等基因系及其分离群体,RAPD分析从310条随机引物中,筛选出3个引物可以在高矮亲本中稳定地扩增出多态带,连锁分析表明仅S10601900和S10602000扩增片段与Rht3;连锁,遗传距离分别为7．1cM和9．2cM.RFLP分析选用了主要位于第4部分同源群短臂上的53个探针,其中Xper584,XksuF8和Xcdo38 3个探针在高矮亲本中揭示出多态性,;连锁分析表明仅Xper584与Rht3基因连锁,遗传距离为8．0cM。     

甘薯叶绿体rbcL基因的克隆与序列分析

根据烟草、水稻和菠菜叶绿体的全基因组序列设计引物,以甘薯的叶绿体基因组DNA为模板,PCR扩增包舍甘暑叶绿体rbcL完整基因(GenBank登录号为AY942199)在内的一段序列.序列分析表明:此片段的全长为1 627 bp,包括1 443bp的编码区序列在内.推测编码480个氨基酸,同时构建了此片段的限制性酶切图谱.相似性比较显示,此基因编码区序列与烟草、菠菜、小麦、水稻、玉米、矮牵牛、紫花苜蓿、拟南芥、莨菪、葡萄以及甜菜的rbcL基因核苷酸的同源性为85%～98%,氨基酸的同源性为92%～95%.     

籼稻品种窄叶青8号抗稻瘟病基因分析

籼稻品种窄叶青８号是我国北方稻区水稻育种上重要的稻瘟病抗源之一。本文利用我国北方稻区的代表菌系中１０－８－１４和日本的代表菌系研５４－０４,对窄叶青８号与感病品种京系１７号和丽江新团黑谷的杂交Ｆ１Ｆ２、ＤＨ和Ｂ１Ｆ１群体进行抗病性鉴定,根据抗病性的分离,确认窄叶青８号的抗性由１对显性主效基因,即朱立煌等报道的Ｐｉ－ｚｈ基因控制。利用系研５４－０４接种窄叶青８号与９个具有已知抗病基因的鉴别品种杂交的Ｆ２群体,各群体都表现二基因的独立遗传,证明Ｐｉ－ｚｈ基因与Ｐｉ－ｉ、Ｐｉ－ｋｍ、Ｐｉ－ｚ、Ｐｉ－ｔａ、Ｐｉ－ｔａｚ、Ｐｉ－ｚｔ、Ｐｉ－ｋｐ、Ｐｉ－ｂ和Ｐｉ－ｔ等９个已知抗病基因间存在非等位关系,是新的抗稻瘟病基因。     

玉米花丝颜色基因qSC10精细定位及候选基因分析

为解析玉米花丝颜色性状的遗传机理,挖掘其候选基因及等位变异,本研究以郑58和昌7-2为亲本构建的重组自交系(RIL)群体为材料,对控制玉米花丝颜色QTL进行定位.利用郑58与控制玉米粉色花丝主效位点qSC10的近等基因系qSC10-NIL杂交构建F3作图群体,对主效位点qSC10进行精细定位,根据qSC10定位区间和N...     

一个新的水稻小粒矮秆基因的分子标记定位及效应分析

从水稻(Oryza safjva L．)半矮秆品种蜀恢I62中发现一份小粒矮秆突变体“I62d”。对I62d与4个半矮秆品种杂交F1和F2代的遗传分析表明,I62d的矮生性由一对隐性基因控制。以II-32B／162d F2代作定位群体,用分子标记将I62d突变基凶定位丁水稻第3染色体短臂,该基因与微卫星标记RM218和RMI57之间的遗传距离分别为3．5cM和10．0cM。同时,利用近等基因系分析了该基因的表型效应,结果表明它可使株高降为正常高度的1／4左右,籽粒降为正常大小的1／4左右,并使叶片显著缩短、加宽,结实率显著降低。我们认为162d突变基因是一个新的水稻小粒矮秆某因,暂命名为dI62(t）。     

药用寄生植物锁阳线粒体基因内含子序列分析

被子植物线粒体cox1基因的Group玉内含子常含有水平基因转移(horizontal gene transfer,HGT)现象。本研究对药用寄生植物锁阳(Cynomorium songaricum)线粒体基因cox1、cox2、nad1序列进行扩增分析,利用最大似然法对cox1和cox2基因内含子和外显子分别进行聚类分析,结果显示cox1内含子聚类结果与其他3个聚类结果不相符,说明该内含子可能存在水平基因转移现象。对比了锁阳6个不同居群间线粒体基因cox1、cox2、nad1外显子与内含子序列平均距离,发现6个不同居群间cox1基因内含子同源性高达100%,说明该基因内含子可能具有功能。结合生物信息学分析表明该内含子很有可能编码核酸内切酶,而DNA核酸内切酶被认为能促进内含子的转移。3'Co-conversion tracts(3'CCT)是被子植物内含子发生转移的痕迹,对锁阳cox1基因序列进行检测发现其含有3'CCT序列且长度为35 bp,RT-PCR实验验证得到cox1基因内含子可以独立转录m RNA。因此,锁阳cox1基因内含子很可能编码一个核酸内切酶,且促进了其内含子的转移。     

大肠杆菌nhaB基因的克隆及序列分析

采用PCR扩增的方法,从大肠杆菌DH5α中克隆获得了1.5kb的Na^ /H^ 反向运输体DNA片段,经过测序和序列分析,发现该基因片段包含了nhaB基因完事的读码框架。采用DNA序列同源性分析方法,结果显示大肠杆菌DH5α nhaB基因与E.-coliK12 nhaB基因同源性高达99%,与E.coli O157:H7和Shigella flexneri的同源性均为98%,与Salmonella enterica的同源性为79%,表明nhaB基因在细菌中是普遍存在的一种Na^ /H^ 反向运输体基因。nhaB基因与大肠杆菌的耐盐性有着密切的关系,编码的功能性蛋白可能在改良生物耐盐性方面具有重要意义。