完整分离围着床期小鼠子宫内膜方法的建立

目的　为了获得组织结构完整、功能正常的子宫内膜样本以进行胚胎着床的体外研究。方法　作者比较了剪碎法、刮取法和挤压法取得子宫内膜的效果。结果　挤压法得到的小鼠子宫内膜呈圆形条状;子宫内膜组织结构完整,具有内膜上皮并包含腺体、血管的基质;意外发现子宫系膜侧的子宫内膜缺损。结论　挤压法是获取子宫内膜进行相关研究的理想方法。     

着床期小鼠子宫内膜Le^y糖蛋白的动态变化

为了解子宫内膜Ｌｅ＾ｙ糖蛋白在胚泡着床期间的变化,以及与胚泡表面阶段特异性Ｌｅ＾ｙ抗原出现的关系,应用对Ｌｅ＾ｙ寡糖特的ＡＨ－６单抗为探针,通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ免疫酶标染色,观察了小鼠子宫内膜Ｌｅ＾ｙ糖蛋白在着床期的动态变化和分布特点,结果表明：（１）未孕及着床前后的小鼠子宫内膜均含Ｌｅ＾ｙ糖蛋白Ｍｒ５０～２００ｋＤ,未孕内膜的含量明显高于着床期间的样品;（２）在着床日（Ｄ     

卵巢激素对人子宫内膜FUT9基因表达的调控

新近发现α1,3岩藻糖基转移酶 (FUT9)参与LeX 寡糖的合成。通过逆转录 聚合酶链式反应、免疫印迹分析和免疫组化等方法 ,研究了在不同激素状态下人子宫内膜FUT9基因的表达 ,以及LeX 寡糖表达的调控机制。结果显示 :FUT9基因在人子宫内膜中表达 ,且其mRNA在分泌期的表达水平高于增生期 ,口服米非司酮(mifepristone)后 ,增生期内膜的表达量增加 ;LeX 寡糖主要分布在人子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞表面 ,在不同生理时期其变化趋势与FUT9基因相似 ,并且口服米非司酮后 ,分泌期内膜的表达量减少 ;在内膜中检测到 3种(33kD、35kD和 85kD)LeX 寡糖蛋白 ,口服米非司酮后 35kD的LeX 寡糖蛋白消失。结果表明 :FUT9基因在人子宫内膜中有明确表达 ,且其表达受卵巢激素的调节 ,孕激素对其有上调作用 ;卵巢激素在转录水平上实现对LeX 寡糖表达的调节。     

FUT4过表达促进胚胎细胞与子宫内膜细胞的黏附

胚胎与子宫内膜上皮细胞之间的黏附是胚胎成功植入的关键. 岩藻糖基转移酶Ⅳ （FUT4）对胚胎细胞与子宫内膜细胞黏附的影响未见报道.本研究以人子宫内膜细胞 (HEC-1A)和胚胎细胞(JAR)为体外着床模型,观察上调HEC-1A细胞中FUT4表达对JAR细 胞与HEC-1A细胞黏附的影响.RT-PCR和免疫细胞化学检测结果显示,FUT4过表达增加 HEC-1A细胞中FUT4基因及蛋白的表达;免疫细胞化学及Western印迹结果表明,上调HEC-1A细胞中FUT4增加细胞表面LeY的合成;细胞黏附实验结果显示,与未转染组相比较,FUT4过表达增加了JAR细胞与HEC-1A细胞的黏附率.本研究证明,FUT4过表达可以增加细胞表面LeY寡糖抗原的合成,从而促进胚胎细胞与子宫内膜细胞的黏附.     

围植入期小鼠子宫内膜中整合素β3亚基的表达

目的 研究整合素β3亚基与胚泡植人的相关关系。方法 取未孕动情期、真孕及假孕3-6天小鼠子宫作切片,用免疫组织化学和图像分析法检测整合素β3亚基围植人期子宫内膜的表达状况和变化规律。结果 整合素β3亚基仅分布于子宫内膜腺上皮的细胞膜。在真孕组小鼠,受精后第4天,整合素β3亚基含量明显上升,第5天达到高峰,第6天又突然回落;假孕组小鼠,只有第5天时呈弱阳性表达,其余各天的表达均降至检测水平之下。结论 ①整合素β3亚基在真孕小鼠子宫内膜的表达与植人窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志。②启动整合素β3亚基表达变化的信号不仅受母体因素调控,还与胚泡刺激有关。     

子宫内膜异位症的激素治疗对卵巢纤维化和卵巢储备的影响

摘要 目的：探讨子宫内膜异位症的激素治疗对卵巢纤维化和卵巢储备的影响。方法：选取2019年9月-2021年8月西安国际医学中心医院收治的86例子宫内膜异位症患者,将其随机分为四组（A、B1、B2、C）,A组未接受任何激素治疗,B1组和B2组接受炔诺酮孕激素治疗,C组接受促性腺激素释放激素（GnRH）治疗。比较四组24个月复发率、复发期间肿瘤直径大小、抗苗勒激素（AMH）和促卵泡激素（FSH）水平以及血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果：与治疗前相比,A组斑点样出血以及痛经情况未发生变化（P>0.05）,B1、B2和C组斑点样出血升高,痛经情况降低（P<0.05）;治疗后,B1、B2和C组较A组斑点样出血升高、痛经情况降低,C组较B1、B2组升高（P<0.05）。与治疗期间对比,四组子宫内膜异位症复发率均发生变化（P<0.05）。在治疗期间,与A组相比,B1组、B2组和C组子宫内膜异位症复发率降低,且B1组、B2组较C组降低;在随访期间,B1组、B2组复发率低于C组（P<0.05）。与治疗期间相比,A组随访期间子宫内膜瘤直径比较无差异（P>0.05）,B1、B2和C组增大（P<0.05）。B1、B2和C组较A组子宫内膜瘤直径减小（P<0.05）,而C组较B1、B2组增大（P<0.05）。与治疗前相比,四组治疗后血清FSH水平升高,血清AMH水平降低（P<0.05）;治疗后,B1、B2和C组较A组血清FSH水平降低,AMH水平升高（P<0.05）。各组治疗后较治疗前TGF-β1和α-SMA的蛋白表达降低（P<0.05）;治疗后B1、B2和C组较A组TGF-β1和α-SMA蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：与GnRH相比,孕激素可能是子宫内膜异位症术后卵巢储备和纤维治疗的更好选择。     

着床期小鼠子宫内膜中EGF及其受体转录和表达状况的研究

为探讨表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)在胚泡着床过程中的作用。本文应用原位杂交和免疫组织化学方法,检测了EGE及其受体在胚泡着床前后小鼠子宫内膜中的转录和表达。结果显示：未孕和受精后第4-5天,子宫内膜表面上皮和腺上皮细胞仍呈EGF,EGFR原位杂交和免疫组化阴性着色,受精后第4-5天子宫内膜基质细胞EGF及其受体转录和表达较未孕期增强,受精后第6天,EGF及其受体免疫组化和原位杂交阳性着色主要分布于初级蜕膜带（primary decidual zone,PDZ);随着胚泡植入的进行,PDZ区蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达明显减少,而PDZ周围蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达增强,结果提示,EGF是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子。     

ICAM在着床期小鼠PBLC及EC／DC中表达的研究

细胞粘附分子（CAM）可介导细胞间及细胞与间质之间的相互作用并传导信息,参与机体胚胎发育、免疫调节、炎症反应、组织修复及肿瘤转移等生理和病理过程。细胞间粘附分子－1（ICAM－1）是主要的CAM分子之一,可表达于活化的细胞,内皮细胞等。人膜是母体与胚胎滋养层直接接触的特殊组织、已发现蜕膜细胞在着床过程中参与了局部免疫耐受的形成,但对着床期ICAM－1在蜕膜细胞表达的动态研究鲜见报道。本研究采用免疫荧光、多参数流式细胞术,分别从整体和局部角度、着床过程中外周血淋巴细胞（PBLC）及子宫内膜／蜕膜（EC／DC）细胞ICAM－1的不同表达特点进行了动态观察和对比性分析。结果发现,ICAM－1在着床期PBLC中的表达于妊娠第一天（D1）即开始降低。D2降至最低;与此不同,ICAM－1在EC／DC中的表达于D2开始降低,D4降低最低,D5开始恢复,但尚未恢复到对照水平。结果表明,ICAM－1在蜕膜局部的表达调节方式不同于外周血;ICAM－1表达阳性的外周血,淋巴细胞和蜕膜细胞均代表着活化的功能性细胞,这些细胞表面ICAM－1在着床期D2－D4降低,使由ICAM－1介导的静息淋细胞的活化及白细胞与血管内皮细胞的粘附、游走等作用受到抑制,而这种抑制作用参与胚泡着床过程中局部免疫耐受的形成。     

妊娠小鼠子宫内膜LIF基因表达的研究

本文对妊娠第4天(Ⅰ组)、第7天(Ⅱ组)、第10天(Ⅲ组)的小鼠(各20只)子宫内膜LIF基因表达进行了研究。Ⅰ组20只小鼠子宫内膜全部存在LIF基因的表达、Ⅱ组有5只小鼠表达、Ⅲ组仅有1只小鼠表达。文中对不同孕期LIF基因的表达程度与胚胎着床的关系进行了讨论。 Abstract:Leukemia inhibitory factor(LIF)is a glycoprotein with multiple activities and is essential for blastocyst implantation in mouse.We have examined LIF gene expression in mice endometrium on day 4(group Ⅰ),day 7(group Ⅱ),day 10(group Ⅲ)of pregnancy.In group Ⅰ all had LIF gene expression,5 mice had LIF gene expression in group Ⅱ,only one mouse had LIF gene expression in group Ⅲ.We discussed the relation between level of LIF gene expression and embryonic implantation.     

小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库构建

按照LongSAGE文库构建原理,先后经子宫内膜总RNA提取、cDNA合成、130bp双标签的产生、PCR扩增、34bp双标签形成、连接成串联体、与载体连接、转化大肠杆菌等相关步骤构建小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库。经证实所构建文库的阳性克隆率达100%,克隆中插入的串联体长度介于400￣500bp之间,成功构建了小鼠胚泡着床期子宫内膜LongSAGE基因文库。     

小鼠卵巢促性腺激素受体的免疫组化定位

目的探明小鼠两种促性腺激素受体(FSHr、LHr)在卵巢的位置分布,揭示促性腺激素(GTH)调节卵巢机制及与卵泡发育分化的关系。方法运用免疫组化ABC法对小鼠卵巢FSHr、LHr分别进行定位染色,结合图像分析系统处理分析阳性切片。结果①FSHr阳性物质主要见于GC、TC、卵母细胞及间质细胞。随卵泡的发育,FSHr、LHr阳性细胞数量呈增长趋势,卵泡早期与中期之间阳性细胞数量差异显著,平均吸光度变化差异不显著。②LHr阳性物质主要见于卵泡TC、间质细胞、GC、卵母细胞,阳性物质着色以卵泡中、晚期较强,阳性细胞数量以卵泡中期与晚期之间差异显著。平均吸光度变化差异不显著。结论卵泡颗粒细胞、膜细胞上受体是接受促性腺激素的主要调节部位,受体数量与卵泡大小和发育程度有一定的正相关。     

KAI1/CD82 在早孕小鼠子宫内膜组织的表达研究

目的：观察KAI1／CD82 mRNA和蛋白在小鼠妊娠D1-D8子宫内膜组织的表达。方法：以胚胎与肿瘤同源性为理论基础,胚胎植入与肿瘤侵袭转移相似为切入点,采用免疫组化和RT-PCR技术。结果：KAI1／CD82 mRNA和蛋白在早孕子宫中,KAI1／CD82mRNA的表达渐增多,蛋白表达的量和范围也渐增强。结论：KAI1／CD82mRNA和蛋白在早孕子宫组织中的动态表达,提示它在胚胎精确侵袭子宫内膜的调节中发挥作用,是滋养层细胞精确侵袭调控的分子机制之一。     

不同发育时期小鼠胚泡表面Lewis寡糖抗原的表达

在胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原 (LewisX ,LewisY)在胚胎发育以及着床过程中起重要作用 .应用免疫印迹和免疫荧光等方法对着床前小鼠胚泡表面的Lewis寡糖抗原进行分析 .结果发现 :小鼠胚泡LewisX寡糖蛋白有 2 7kD、2 9kD、6 8kD和 80kD 4种 ,LewisY寡糖蛋白有 70kD和 90kD 2种 ;2种寡糖抗原均在 8细胞时期开始表达 ,其中 ,LewisY寡糖抗原在胚泡表面的表达持续升高 ,直至胚泡着床 ;而LewisX寡糖抗原的表达则在桑椹期后逐渐降低 ,但仍在胚胎期的囊胚腔侧的顶端可见有部分表达 ;应用RT PCR的分析结果显示 ,LewisX合成的关键糖基转移酶FUT9基因在 4细胞及桑椹期高表达 ,到胚泡期虽然强度明显减弱 ,但仍有表达 ;而LewisY合成关键酶FUT1基因在 4细胞未见表达 ,在桑椹和胚泡阶段均有表达并逐渐升高 ,表达趋势与相应寡糖的表达趋势基本一致 .结果说明 ,在小鼠胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原的表达受到相应糖基转移酶基因转录的调控     

早孕小鼠子宫内膜mTOR基因表达增高

利用实时荧光定量PCR、原位杂交法、免疫组化(SP法)和Western印迹法分别检测未孕、假孕及孕d3、d4、d5、d6、d7小鼠子宫内膜哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian tar get of rapamycin,mTOR)mRNA和蛋白质的表达,研究mTOR基因在早孕小鼠子宫内膜的表达规律.结果显示妊娠子宫内膜组织mTOR的表达较未妊娠的子宫内膜组织显著增加(P＜0.05);着床窗期表达最高(d4,d5),且与其他妊娠各期比较差异有统计学意义(P＜0.05);原位杂交和免疫组化分析显示mTOR mRNA和蛋白质表达主要在子宫内膜基质细胞,与上皮细胞各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).研究表明mTOR在子宫内膜基质细胞的规律性表达所调控的细胞生长、增殖和分化可能是胚胎正常着床的分子机制之一.     

妊娠期家兔子宫内膜的鞘糖脂表达

 妊娠期家兎子宫内膜的神经节苷脂(Gls)的含量明显低于动情期的,而中性鞘糖脂(NGSL)的含量则以妊娠中、晚期的最高,动情期最低。鞘糖脂组成变化最显著的是妊娠早期,由动情期到早孕GM_3从28.0％增加到52.7％,CMH.CDH由未测出分别增加到29.2％和21.9％,而糖链复杂的组分GD_3,GTlb和CPH的百分含量则明显减少,到妊娠中、晚期、短糖链组分逐渐减少,而复杂糖链组分渐增。中期妊娠内膜的(GIs)以GD_3为主要组分,占45％,明显高于其它各期。NGSL在妊娠中、晚期CPH增高达70％,与动情期水平相当。结果提示,妊娠期间子宫内膜的鞘糖脂含量与组成均发生明显变化,这些变化可能与子宫功能密切相关。特别是早孕对的变化,推测与子宫内膜和胚泡的识别,粘连特性的获得有关。     

Malacoplakia of the Uterine Cervix and Endometrium

A rare case of malacoplakia involving the female genital tract is presented. The characteristic granular histiocytes with intracytoplasmic Michaelis-Gutmann bodies were identified in a cervical smear. The cytological preparation also showed prominent capillary vessels and differed from biopsy material in that cytoplasmic bacteria were easily identified.