人血浆中血管紧张素Ⅱ放射免疫直接测定法

应用优质抗血清、高比放射度~(125)I·ATII及双抗体分离技术,建立了直接测定0.5毫升人血浆中血管紧张系Ⅱ(ATII)的放射免疫分析法。竞争抑制曲线的最小检出量3.6±1.6微微克,精密度4.7±1.4%(28次的m±S.D.)。血浆测定的变异系数为批内7～14%,批间8.7～18%。加入血浆中的ATII可定量回收(97～117%)。随待测血浆加入量增大(0.1至1.5毫升/孵育管),测得ATII量线性增加。8种肽类激素、人血浆及使用的酶抑制剂未显示出明显的干扰。正常人普通饮食时外周静脉血浆ATII浓度:卧位1.5小时以上后26±10微微克/毫升(n=54),与24小时尿钠排出量呈负相关(p<0.01);立位2小时后46±22微微克/毫升(n=17)。低钠饮食或肌肉注射速尿引起血浆中ATII显著激发(p<0.01)。本法可灵敏、精密、特异地正确度量微量ATII,操作简单,每批可测标本数较大。本法的建立有助于各领域中涉及肾素——血管紧张素系统之临床或实验研究工作。     

人血浆中血管紧张素Ⅱ放射免疫直接测定法

应用优质抗血清、高比放射度~(125)Ⅰ·ATII及双抗体分离技术,建立了直接测定0.5毫升人血浆中血管紧张素Ⅱ(ATII)的放射免疫分析法。竞争抑制曲线的最小检出量3.6±1.6微微克,精密度4.74±1.4%(28次的m±S.D.)。血浆测定的变异系数为批内7～14%,批间8.7～18%。加入血浆中的ATII可定量回收(97～117%)。随待测血浆加入量增大(0.1至1.5毫升/孵育管),测得ATII量线性增加。8种肽类激素、人血浆及使用的酶抑制剂未显示出明显的干扰。正常人普通饮食时外周静脉血浆ATII浓度:卧位1.5小时以上后26±10微微克/毫升(n=54),与24小时尿钠排出量呈负相关(p<0.01);立位2小时后464±22微微克/毫升(n=17)。低钠饮食或肌肉注射速尿引起血浆中ATII显著激发(p<0.01)。本法可灵敏、精密、特异地正确度量微量ATII,操作简单,每批可测标本数较大。本法的建立有助于各领域中涉及肾素——血管紧张素系统之临床或实验研究工作。     

人血浆亮脑啡肽样物质放射免疫测定法及其临床初步应用

本文报告了血浆亮脑啡肽样物质(LEK)的放射免疫测定法。用 TG-ECDI-LEK 背部皮内多点免疫家兔,获得高特异性的抗 LEK 血清,最小检出量5pg,多种肽类及吗啡、纳洛酮对此均无明显干扰。血浆迅速酸化及抑肽酶等能有效防止脑啡肽(EK)的降解。血浆 EK 可被 XAD-2树脂吸附和用水合甲醇洗脱。本法测定人血浆 LEK 为127.9±5.4pg/ml(m±S.E.M,n=61).作者观察到胰岛素低血糖休克后血浆 LEK 增加,嗜铬细胞瘤患者血 LEK 增加,提示肾上腺體质可能是它的来源之一。     

人绒毛膜促性腺激素(HCG)的放射免疫测定法

六十年代初期,出现了利用同位素技术和免疫反应以测定痕量蛋白质激素的一种新方法,这就是放射免疫测定法。大家知道,在这以前,要测定蛋白质激素的活力或效价,唯一的方法只有通过生物检定:选择相当数量的某种动物,注射一定剂量的某一蛋白质激素,看它对动物靶器官的效应怎样?比方说,测定促滤泡激素(FSH),可用未成年雌大鼠的子宫或卵巢重量     

一种改良的双峰驼血浆促黄体素放射免疫分析方法

本研究用单峰驼LH标准品CamLH、CamLH NZY01和人的LH（hLH)或人绒毛膜促性腺激素（hCG)作为标准品,^125I-hLH或^125I-hCG作为标记品,抗hLH或hCG血清作为抗血清,组成了不同的双峰驼血浆促黄体素放射免疫分析的组合系统,通过血浆样品稀释曲线,比较了hLH和hCG抗原抗体与CamLH,CamLH NZY01的交叉反应,选择出测定双峰驼血浆促黄体素交叉反应较强的异种抗原抗体反应系统,即用CamLH作为标准品,^125I-hLH作为标记品,抗hLH血清作为抗血清组成的测定系统,并通过血浆中添加标准参考品后的回收实验及母驼垂体兴奋实验等证明了该方法的特异性、准确性和可靠性。说明该方法可以用于测定双峰驼血浆促黄体素的浓度,是研究双峰驼生殖内分泌学的可靠手段之一。     

一种快速、可靠的性甾体激素放射免疫测定法

性甾体激素放射免疫测定方法已有大量报道。我们在爱克斯勒(Exley)等人方法的基础上,经多年改进,发展了一种方便、可靠的放射免疫测定方法。实践证明,用同一缓冲液,同一分离试剂,同一温育时间和同样操作步骤,可测定雌二醇、雌酮、孕酮和睾酮。温育时间只需     

神经激肽是人膀胱的刺激物

P 物质、神经激肽 A(neurokinin A,NKA)和神经激肽 B(NKB)是存在于神经元中的三种神经激肽,它们在中枢神经系统和外周器官中可能起着神经递质的作用。用人的被分离的膀胱逼尿肌观察这三种肽的作用。逼尿肌(1.5～2.0cm)取自4名志愿者的膀胱,悬吊于32℃、供氧的 Tyrode 液中,以记录(?)运动。实验结果表明,这三种神经激肽都能使膀胱平滑肌收缩,其作用强度为:NKA>NKB>P 物质。比较这三种神经激肽的类似物,也得到相似的结果:NKA 受体激动剂[Nle~(10)]NKA 4-10的作用虽然比天然的     

芒柄花素的放射免疫测定法

本文建立了芒柄花素(formononetin)的放射免疫测定法(RIA)。该方法利用芒柄花素的衍生物作为同位素示踪物,获得的针对芒柄花素—7-O—羧甲基—牛血清白蛋白(BSA—F)的抗血清对芒柄花素具有高的亲和性(Ka=6.8×10~9 L/M)。方法的检出限量为3.5±1.24 ng(n=13),检出范围为3.5—100 ng。用此方法测定红三叶草(Trifolium pratense L.)中的芒柄花素含量,批内、批间的平均误差分别为6.5％和11.9％,加样回收率平均为98.5％。红三叶草中芒柄花素含量为0.1305±0.495％(n=12)。南京地区夏季杂牧草饲料中芒柄花素含量为0.0062±0.030％(n=6)。并用此方法测定了饲喂红三叶草的湖羊血清中芒柄花素的血浓-时间曲线图。     

血管舒缓激肽是一种生理性痛递质吗?

基于损伤组织中有大量血管舒缓激肤(bradykinin,BK),以及外周给予 BK 可引起剧痛等事实,认为 BK参与炎症痛的发生过程。最近,美国 Steranka 等的研究表明,BK 可能是一种生理性痛递质。他们用放射自显影等方法,研究豚鼠 BK 受体分布,发现 BK 受体有选择地集中分布在与痛觉传递相关的部位,如脊髓背角线层及无髓神经纤维、脊神经节小神经元及其所属轴、树突、星状神经节及其投射到三叉神经胶状质神经元的纤维。在体实验分为两部分:(1)BK 引起的血管性疼痛。首先在大鼠右颈总动脉向心端插管,管子作皮下埋置,开口于颈部。     

前列腺素、(PGs)的放射免疫测定法

一、抗体制备 以结合抗原PG-BSA(17∶1)免疫8个月后所得兔抗PG血清的最终工作稀释度及相对交叉反应分别为:4号兔抗PGE_2血清,1∶450;PGE_1 100％,PGA 3％,PGF_(2α) 0.75％。7号兔抗PGE_2血清,1∶1,500;PGA 100％,PGE_1 17.3％,PGF_(2α) 0.39％。5号兔抗 PGF_(2α)血清,1∶900;PGF_(2α) 100％,PGA<0.01％,PGE_1 0.52％。     

血浆激肽释放酶新底物PK—120的研究

血浆激肽释放酶新底物ＰＫ┐１２０的研究蒲小平（军事医学科学院基础医学研究所,北京１００８５０）关键词血浆激肽释放酶底物１．发现补体系统由２０余种血浆蛋白组成,在机体防御和炎症应答反应中起重要作用。１９８９年Ｈａｍｍｅｒ等在用Ｃ４ｂ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ...     

葡萄糖修饰人血浆载脂蛋白的肽类标志物

目的:研究葡萄糖对血浆中载脂蛋白的修饰作用,寻找标志性肽段,作为临床诊断糖尿病以及衰老相关疾病的生物标志物。方法:将蛋白质组学和生物信息学相结合,采用LC/MS联用技术寻找差异肽段。结果:载脂蛋白(APOA1)与葡萄糖发生糖基化反应,导致正常肽段的含量发生变化,并生成早期糖基化产物果糖胺。而糖尿病人体内的APOA1也同样会发生这种非酶糖基化修饰,其中的一些肽段也出现类似的变化情况。结论:筛选出五个肽段,将有可能作为临床诊断糖尿病以及与衰老相关疾病的生物标志物。     

促肾上腺皮质激素释放激素放射免疫测定法的建立及其应用

用本室制备的兔抗羊促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）多克隆抗体和￣（１２５）Ｉ标记的Ｔｙｒ°－ｒＣＲＨ建立了ＣＲＨ放射免疫测定法。并用该方法测定了人胎盘组织和大鼠脑及胸腺组织ＣＲＨ含量。所得抗体与ｒＣＲＨ的亲合常数Ｋａ＝５．３×１０￣９Ｌ／ｍｏｌ,与促肾上腺皮质激素、血管紧张素Ｉ、β－内啡肽、生长激素释放因子、血管活性肠肽、胆囊收缩素、加压素等１８种肽没有交叉反应。￣（１２５）Ｉ－ｒＣＲＨ的比放射性为４１６３ｋＢｑ／μｇ。建成的ＣＲＨ放射免疫测定法取代比率为２．２９,灵敏度为４０ｐｇ,ＥＤ＿（５０）约为６５０ｐｇ,百分精密度和百分准确度分别为３．８４％和１０．３６％。用该法所测人胎盘和大鼠组织ＣＲＨ含量的结果表明,分娩胎盘组织ＣＲＨ含量远高于妊娠６─７周者,约相当于后者的１５倍;大鼠组织ＣＲＨ含量以下丘脑最高,垂体次之,然后依次是海马、胸腺和大脑皮质;且下丘脑和垂体的ＣＲＨ含量雄鼠明显高于雌鼠。     

生长激素和催乳素放射免疫测定法的建立与应用

目的：建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素（GH）和催乳素（PRL）含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定（RIA）法;研究急性低氧对垂体激素GH和PRL的作用。方法：用氯胺－T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定。结果：用该方法测定急性低氧（0．5h）时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高（P＜0．05）,血浆则相反;7km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量（P＜0．01）;而5km低氧对GH和PRL的作用与对照组比无统计学差异。结论：本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌。     

一种简化的细胞电泳装置

细胞电泳装置是通过测量细胞表面电荷以研究细胞功能及膜结构变化的仪器。由于技术的不断改进,细胞电泳技术已经用于临床实践,并初步证明在冠心病、血栓闭塞性脉管炎等疾病的诊断以及对祖国医学中瘀症的本质、活血化瘀的探讨上的实用价值。在装置的改进中,梁子钧等创用的方形毛细管细胞电泳装置为国内的工作开展奠定了基础。但是,所用的电源、计时器等,仍被人     

一种快速微量蛋白测定法

以往报道Lowry法的呈色反应通常须30min。本文介绍一种利用人工还原剂促使该反应迅速完成的改良法。笔者对这一方法进行了实验评价,初步探讨了二硫苏糖醇还原Folin试剂所形成的吸收光谱以及选用650um波长的机理。实验结果证明本法与对照法相关良好。     

太行山猕猴血浆胰岛素的放射免疫分析

猕猴是人类的近亲,其形态结构、生理机能及生化代谢等与人类相似,因而长期以来被广泛用于医学科学实验研究。太行山猕猴是我国北方分布的一种数量最多的猕猴,许多学者对其形态、生理、生殖和遗传等做了大量研究,但未见有关血浆胰岛素含量的报道。本文以放射免疫法测定了太行山猕猴胰岛素含量,并与人血浆胰岛素含量进行比较,以便有效地利用猕猴探讨糖尿病的发病机理。1　材料与方法(1)动物来源　用于实验的29只猕猴均产于我国太行山区河南省济源市和辉县市境内。捕获后入河南师大猕猴养殖场饲养,经检疫和健康检查均系健康者。其中雄14只,雌15…     

一种新的人泛肽交联酶的cDNA的克隆

ｐ５３可以同细胞内的许多种蛋白质形成复合物从而参与细胞周期调节、基因表达调控、细胞分化、细胞程序化死亡和抑制肿瘤的发生等各项生理过程。为了筛选与ｐ５３作用的蛋白质因子,利用酵母双杂交（ｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄ）系统,筛选了ＨｅＬａ细胞的ｃＤＮＡ文库。在１．５×１０６个转化子中筛选到６个阳性克隆。经ＤＮＡ全序列分析,结果表明５个阳性克隆中的ｃＤＮＡ序列编码产物均由１５８个氨基酸构成,分子量为１７ｋＤ的人泛肽交联酶。同源性比较表明,该泛肽交联酶与人的ＵＢＣ９（９７％）、线虫的ＵＢＣ（７６％）、裂殖酵母的ＨＵＳ５（６６％）、拟南芥菜的ＵＢＣ（６６％）和啤酒酵母的ＵＢＣ９（５６％）有较高的同源性。进行了１６种正常人组织和７种肿瘤细胞株的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析,结果显示：它在心脏、胎盘、胸腺、睾丸、卵巢、结肠和外周血白细胞中的表达较在肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、前列腺和小肠中为高,而在脑和肺中则检测不到表达。它在宫颈癌细胞株、乳腺癌细胞株、淋巴瘤细胞株和畸胎瘤细胞株中的表达较高,而在肺癌细胞株、肝癌细胞株和神经胶质瘤细胞株中则无明显表达。     

一种简单实用的谷氨酸浓度测定法

谷氨酸和茚三酮可以发生特有的显色反应 ,在 pH 5～ 6时产物蓝紫色最明显。其颜色深浅与谷氨酸浓度大小有关。用分光光度计可以在其最大光吸收波长处测定其OD值。分别以OD值和相应的一系列浓度的L谷氨酸纯品浓度值为纵坐标和横坐标 ,绘制出 1条标准曲线。谷氨酸发酵液中的谷氨酸含量值即可通过分光光度计测得它与茚三酮在最适 pH处反应得到的蓝紫色产物的OD值 ,然后从上述标准曲线上查到。误差率在 1 0 %左右。这为谷氨酸定量测定提供了一种简单实用的方法。     

双峰驼血浆促卵泡素的放射免疫分析法

用单峰驼促卵泡素标准品（ＣａｍＦＳＨ）,ｈＦＳＨ抗血清和＾１２５Ｉ－ｈＦＳＨ建立了测定双峰驼血浆ＦＳＨ的放射免疫分析方法,并通过一系列实验证明,该方法可以用于测定双峰驼血浆ＦＳＨ,是研究双峰驼生殖内分泌学的可靠手段之一。