人P40T细胞生长因子辅助红细胞克隆的生成

人P40T细胞生长因子,可通过与刺激人IL-3依赖性白血病细胞系(M-OTE)的生长活性进行分离,Donahue等发现,该因子能支持正常的外周血和骨髓红细胞前体生长及分化,故将其命名为白细胞介素-9(IL-9)。虽然M-OTE细胞来源于巨核细胞白血病患者,但目前尚未证实IL-9是巨核细胞的生长和成熟     

TNF-α刺激大鼠骨髓间充质干细胞的机制研究

目的:研究肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激大鼠骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymalstem cells,MSCs)的作用机制。方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(MSCs)。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,用TNF-α刺激骨髓间充质干细胞(MSCs),通过酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)观察比较不同组别细胞的生长因子分泌和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果:①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示骨髓间充质干细胞的培养成功。②无TNF-α刺激组与TNF-α刺激组比较,TNF-α刺激组的生长因子分泌显著性增加,而通过磷酸化IκB的表达量显著性增加提示NF-κB被激活(P<0.05);同时TNF-α刺激组与TNF-α+NF-κB抑制剂组比较,TNF-α+NF-κB抑制剂组的生长因子分泌显著降低,而通过磷酸化IκB的表达量显著减少提示NF-κB的活性被抑制(P<0.05)。结论:NF-κB对TNF-α刺激下的骨髓间充质干细胞分泌生长因子有关键性作用。     

人参总皂甙对人GM-CSF和GM-CSFR表达的调控

为探讨人参调控粒细胞发生的生物学机制,采用造血祖细胞和骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸分子原位杂交、免疫沉淀和蛋白印迹等现代生物学技术,研究人参总皂甙(total saponins of Panax ginaeng,TSPG)对人粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)表达的影响。结果：(1)经TSPG(50μg／m1)诱导制备的骨髓基质细胞、胸腺细胞、脾细胞、血管内皮细胞和单核细胞条件培养液可显著提高粒单系造血祖细胞(CFU-GM)的集落产率;(2)经TSPG(50μg/ml)诱导后,上述细胞的GM-CSF蛋白(诱导24h)和mRNA(诱导12h)表达显著提高;(3)经TSPG(50μg/ml)诱导24h骨髓造血细胞的GM-CSFRα蛋白表达增强;(4)经TSPG(50μg/ml)刺激后2min,GM-CSFRα和Shc发生酪氨酸磷酸化,5min时达高峰,随后去磷酸化。上述结果表明,TSPG可能通过直接和／或间接途径促进淋巴细胞与骨髓基质细胞合成与分泌GM-CSF,诱导骨髓造血细胞表达GM-CSFRα,并刺激GM-CSFRα和Shc的酪氨酸可逆磷酸化,从而通过调控GM-CSF的信号转导过程,促进CFU-GM的增殖。     

狗骨髓长期培养的贴壁层细胞及条件培养液对粒系祖细胞的影响

本文报告狗骨髓长期培养的初步研究结果。采用马血清与狗血清混合加入培养体系中,可建立起比较稳定的贴壁细胞层,可以维持19周以上。但是,这种贴壁层不能有效地维持造血干细胞的增殖与分化,上清液中血细胞与GM-CFU_C的数目,在第二次接种骨髓后2—3周即迅速下降。狗骨髓培养的条件液中存在着抑制GM-CFU_C生长的物质,但它对小鼠骨髓GM-CFU_C和CFU-S无影响。如以贴壁细胞作为底层,用双层琼脂平皿培养法与正常狗骨髓共同培养,发现贴壁细胞不仅没有抑制反而有加强CSF刺激GM-CFU_C生长的作用。因此对狗骨髓长期培养体系不能长期支持造血干细胞生长和繁殖的可能原因尚须作进一步探索。     

小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞贴壁层对红系祖细胞生长的影响

本实验以Dexter培养体系作小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞贴壁培养。在所获的基质细胞贴壁层上作红系造血祖细胞集落培养,观察两种来源造血基质细胞对红系集落生长的影响。实验结果表明,胎肝造血基质细胞贴壁层能明显促进早期红系造血祖细胞(BFU-E)形成集落,却不明显影响晚期红系造血祖细胞(CFU-E)的生长。成年小鼠骨髓造血基质细胞贴壁层对BFU-E和CFU-E均有刺激生长的作用;但对前者生长的刺激性影响较胎肝造血基质细胞贴壁层为弱。造血基质细胞贴壁层对红系集落生长的促进作用主要是通过体液因子实现的,细胞间短距离调节的影响亦不能除外。     

赤霉酸对枯草杆菌A_(17)的碱性磷酸酯酶的作用

赤霉酸(GA_3)能够刺激枯草杆菌A_(17)α-淀粉酶形成,这种作用可被天门冬酰胺阻抑。已有报导,GA_3也可以增强大麦种子糊粉层细胞内酸性磷酸酯酶的形成及向细胞的释放。但是,所释放的酶不含有碱性磷酸酯酶。革兰氏阳性细菌枯草杆菌产生许多胞外酶,这些胞外酶的结构基因,在一定的生长时期和生长条件下可以表达,合成这些酶蛋白质。枯草杆菌的胞外酶中只含有碱性磷酸酯酶而不含有酸性磷酸酯酶。本文初步报导外源GA_9对枯草杆菌A_(17)碱性磷酸酯酶的形成的刺激作用。     

施用甲醇刺激矮牵牛的生长效应与其代谢关系初探

大量研究表明施用甲醇能够促进多种植物的生长,在甲醇刺激植物生长的机理中,支持碳源假说的证据最多。该研究通过考察矮牵牛甲醇代谢与甲醇刺激其生长的相关性,对碳源假说进行验证。结果表明:(1)在MS固体培养基上添加2和6mmol/L CH3OH均可促进矮牵牛的生长和叶绿素含量增加,但2mmol/L CH3OH(低浓度)效果好于6mmol/L(高浓度),而且添加6mmol/L CH3OH会诱发较强的氧化胁迫。(2)进一步用13 C-NMR分析矮牵牛对不同浓度13 CH3OH的代谢作用发现,6mmol/L 13 CH3OH处理矮牵牛中[U-13 C]Fruc和[U-13 C]Gluc的生成量显著大于2mmol/L 13 CH3OH处理,即来自甲醇的碳源在代谢过程中虽被卡尔文循环同化为糖类物质,但这部分碳源对甲醇刺激矮牵牛的生长贡献不大。这些证据表明CH3OH代谢与其刺激矮牵牛生长的效果没有关联性,该实验结果不支持碳源假说。     

机械拉伸对骨髓间充质干细胞迁移行为的影响

目的:研究机械拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞迁移行为的影响并探讨其相关分子机制。方法:应用单轴机械拉伸加载装置考察不同条件的周期拉伸刺激对大鼠骨髓间充质干细胞迁移行为的影响,采用Transwell和划痕法评价细胞迁移能力,采用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)表达的变化。结果:适宜的拉伸刺激可以明显促进大鼠骨髓间充质干细胞的迁移能力,1 Hz、10%应变拉伸8 h后可以使细胞迁移数量增加到对照组的1.58倍。拉伸刺激诱导骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)表达。抑制剂GM6001抑制了拉伸诱导的MMP-2,-9分泌增加,同时抑制了拉伸刺激对细胞迁移的促进作用。结论:机械拉伸刺激影响大鼠骨髓间充质干细胞的迁移行为,MMP-2,-9在此过程中可能起着重要介导作用。     

Cetus克隆菌落刺激因素-1

编码菌落刺激因素-1(CSF-1)的人体基因已由Cetus公司(埃默里维尔,加利福尼亚)首次克隆并得到表达。CSF-1与巨噬细胞上的特定受体相结合。它刺激骨髓中未分化的前体细胞生长和发育,如巨噬细胞和单核细胞。此外 ,CSF-1诱导血液中成熟单核细胞的增殖和血管外成熟巨噬细胞的增殖。它也促使干扰素、肿瘤坏死因素和粒细     

影响骨髓间充质干细胞增殖的调节因素及其信号转导途径

骨髓间充质干细胞是一类骨髓来源的成体干细胞,其生长、增殖行为受到多种环境因素的影响.胞外基质、细胞因子、机械刺激等理化因素对骨髓间充质干细胞的生长和增殖起着重要的调节作用,这些调节因素通过不同的信号转导途径影响骨髓间充质干细胞增殖,但又常常出现交叉对话、相互影响.就胞外基质、细胞因子和机械刺激影响骨髓间充质干细胞的增殖及其相应信号转导途径的研究进展作一简要综述.     

香菇菌丝深层培养的碳、氮源和生长因子

本文分别设计了生长刺激因子、碳、氮源试验基本培养基。结果表明在深层培养时,废糖蜜、粗制蔗糖、玉米浆、酵母粉、麸皮浸汁中含有刺激香菇菌丝生长的物质。而各种维生素(包括 B_1)、氨基酸、有机酸、植物生长激素等均无明显的作用。在上述生长因子的促进下,香菇菌丝可利用无机或有机氮源。无机氮源以 NH_4NO_3,最好,其次为(NH_3)H_2PO_4、NH)4Cl 等。有机氮源以玉米浆、酵母粉最好。碳源以玉米淀粉最好。本文并介绍了一种廉价的、良好的香菇菌丝液体培养配方,可以稳定地培养出细小均匀的菌丝球、生长丰满稠密的液体菌种。     

小鼠脾脏与骨髓细胞在微核试验和染色体畸变分析中的应用

由于小鼠骨髓多染红细胞微核(PCEMN) 试验法具有简便快速等优点,在遗传毒理学研 究中得到了广泛应用,但与中期细胞染色体畸 变（CA）分析法相比,能检测的染色体畸变类 型较少〔11。虽然小鼠骨髓染色体畸变分析可弥 补其不足,但认为难以得到足够的分裂相C2)。自 Nowell发现植物血凝素（PHA）在体外有刺 激细胞分裂的能力［19I; Moorhead等建立人外 周白细胞培养以来〔33, PHA 已广泛用于血细胞 转化试验。作者受吴氏启发‘31,应用PHA直接 注射于小鼠背部皮下,刺激脾胜、骨髓淋巴细胞 转化,有效地提高了它们的分裂指数,观察到 PHA对脾脏、骨髓PCEMN 和CA无任何影 响。经丝裂霉素C (MMC)验证表明,此法可 同时完成细胞染色体畸变率和微核率两项指标 的观察,不仅有利于活体样本中微核（MN）和 CA的相关性研究,而且脾脏和骨髓可以相互 替代,为评价被检物的毒理效应提供了方便。     

烟草GA合成调控转录因子RSG应答甲醇和乙醇刺激的分子机理初探

为了考察甲醇或乙醇促进植物生长与赤霉素(GA)的合成关系,该研究在MS固体培养基中培养并添加外源GA和GA合成抑制剂多效唑(PAC),分析其对2mmol/L甲醇或乙醇促进烟草生长的影响及GA合成调控转录因子RSG(for repression of shoot growth)应答甲醇或乙醇刺激的分子机理。结果显示:(1)外源添加GA可增强甲醇或乙醇对烟草生长的刺激作用,而添加PAC却抑制甲醇和乙醇对烟草生长的刺激作用。(2)14-3-3蛋白与RSG结合抑制RSG进入细胞核及其转录调控活性;甲醇和乙醇诱导烟草14-3-3基因的转录和表达,对RSG蛋白表达也有诱导作用。(3)甲醇和乙醇可降低14-3-3蛋白与RSG的相互作用,同时增强RSG与GA20ox1启动子的结合。研究表明,甲醇和乙醇刺激烟草的生长可能通过增加RSG表达,且减弱RSG与14-3-3蛋白的结合来增加RSG细胞核定位作用,从而增强RSG与GA20ox1启动子的结合,最终增加GA的合成,从而促进烟草的生长,这可能是甲醇和乙醇促进烟草生长的一种重要的分子机制。     

尼可刹米和卡地阿佐对于某些化学感受器的影响

本项工作研究了尼可刹米和卡地阿佐刺激猫的颈动脉体、脾臟、小赐和骨髓化学感受器对于呼吸血压的影响。(一)5％尼可刹米0.2—0.4毫升注入颈动脉竇灌注液内,就能作用于颈动脉体化学感受器产生暂短的呼吸抑制。25％的溶液0.1—0.2毫升,或出现暂短的呼吸抑制或暂停,或在抑制之后产生轻度的呼吸兴奋。卡地阿佐对于颈动脉体化学感受器的作用也相似地不明显:(二)2—5％尼可刹米或卡地阿佐0.2一O.4毫升注入脾臓灌注液内,能作用于脾臟 化学感受器产生呼吸兴奋与血压升高。1—2％的溶液0.4—0.5毫升洼入小肠灌注液内,产生与脾臟化学感受器完全相同的结果。(三)0.1—0.2％尼可刹米或卡地阿佐0.1毫升直接注入胫骨骨髓腔内,能作用于骨髓化学感受器而产生呼吸兴奋和血压升高(四)尼可刹米和卡地阿佐对于脾臟、小肠和骨髓化学感受器的作用,当向灌注液内注入适量的奴佛卡因时会被消除,待奴佛卡因的作用消失后,这些药物的作用又恢复。从上述结果得出结論,尼可刹米和卡地阿佐一样,对于颈动脉体化学感受器无明显作用。与此相反,它们却刺激脾臟、小肠和骨髓化学感受器产生反射性呼吸兴奋及血压升高。     

高氧抑制LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞的焦亡

目的:研究不同浓度的氧气在LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞焦亡中的作用。方法:提取C57BL/6小鼠的骨髓源性巨噬细胞,用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激细胞24 h,用5 mM三磷酸腺苷(ATP)刺激细胞4 h,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-1β水平的变化。用5 mM ATP刺激细胞后,给予细胞40%、60%和100%的氧气处理1.5 h,ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β水平的变化。结果:1μg/mL LPS和5 mM ATP先后刺激下,骨髓源性巨噬细胞培养上清液中IL-1β的水平明显升高(P0.001),用caspase-1特异性抑制剂AC-YVAD-CMK刺激骨髓源性巨噬细胞后IL-1β水平明显降低(P0.001)。5 mM ATP刺激之后给予细胞不同浓度的氧气干预1.5 h后,细胞培养上清液中IL-1β的水平明显下降。结论:高氧抑制LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞的焦亡。     

皮层重复电刺激对诱发电位的强化和阻抑作用

实验在家兔(用氯醛糖和氨基甲酸乙酯混合液麻醉)和猫(施行“隔离脑”手术)身上进行。用多点记录法在动物皮层的视区或听区引出诱发电位后,即在某一记录点附近给以3秒钟的重复弱电流刺激,可以观察到两种不同的效应:(一)阻抑作用:始于刺激后的半分钟左右,诱发电位迅即被完全阻抑,2至3分钟后电位渐渐增大,并增大到超出刺激前的水平,以后才逐渐恢复正常。全部阻抑过程历时约30分钟。改变刺激强度或麻醉深度对阻抑作用的影响不大。阻抑以每秒2—8毫米的速度向四周扩散,但不向对侧皮层扩散。皮层局部用10%普鲁卡因涂敷后,电刺激就不能引起阻抑扩散。 (二)强化作用:在适当的刺激条件下,刺激后立即出现诱发电位的强化现象,其时程不超出40秒,以后紧随着就出现电位的阻抑作用。越接近刺激点,强化的效应就越大,但强化不向四周扩散。强化作用的出现主要取决于刺激的频率,其他如麻醉深度、刺激波宽和强度等都具有一定的影响。利用巴比妥钠和10%普鲁卡因可以使诱发电位的强化和阻抑现象分别地表现出来。由此推论,强化作用和扩散性阻抑的发生机制是不相同的。     

机械刺激对匍匐茎型植物蛇莓(Duchesnea indica)克隆可塑性的影响（英文）

机械刺激(mechanical stimuli, MS)在自然界的分布较为普遍,然而关于机械刺激对匍匐茎型克隆植物影响的研究相对较少。为此,实验对匍匐茎型克隆植物蛇莓(Duchesneaindica)进行了对照(无机械刺激)、克隆片段顶部刺激、半克隆片段刺激和整克隆片段刺激共四个水平的机械刺激处理,通过研究蛇莓克隆生长的响应,探讨机械刺激对其作用机理。结果表明:与对照相比,机械刺激导致蛇莓产生较多的分株、较多的匍匐茎、短而细的叶柄及较多的根生物量分配。同时,不同作用位点的机械刺激对各生理生长指标的效应差异并不显著。另外,通过对各生长指标表型可塑性指数的分析发现,分株数具有较高的可塑性指数。上述实验结果表明,蛇莓可以较好地适应机械刺激干扰的生境,其分株数可以作为其响应程度的较好的指示指标。     

骨髓干细胞对终末期肝病治疗的临床研究进展

目前利用骨髓干细胞(BMSC)治疗终末期肝病越来越受到关注,且大多数研究表明BMSC能有效改善患者的肝功能,然而其具体机制尚不清楚。目前采集BMSC的方法有多种,比如可以采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员BMSC至外周血,然后通过外周血采集干细胞,或者直接从骨髓中采集干细胞。BMSC主要含骨髓造血干细胞(HSC)和间充质干细胞(MSC),哪种干细胞是促进肝功能恢复的主要细胞目前仍有争论。因此,本文将从临床研究总结BMSC在终末期肝病治疗中的研究进展。     

小鼠骨髓源性树突状细胞的体外扩增、鉴定及生物学特性研究

目的:对树突状细胞体外大量扩增及树突状细胞的临床应用提供理论基础.方法:以重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白介素-4(rmIL-4)和重组小鼠肿瘤坏死因子-α(rm TNF-α)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,流式细胞术分析细胞表面分子,并应用混合淋巴细胞反应检测其刺激T淋巴细胞的增殖能力.结果:经体外诱导培养第2天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,DC成熟,具有典型的形态,同时DC可以显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖.结论:体外诱导培养可以获得大量小鼠骨髓来源的DC,可广泛应用于临床实验及实验研究.