有机相酶催化中溶剂工程的进展

阐述了有机溶剂和水对有机相酶催化性质的影响,并评述了这一领域的应用现状和今后的发展方向：将溶剂对酶催化行为的影响定量化;改善酶与有机溶剂的不相容性;研究更多的酶以及多酶体系的催化性质;以底物活度进行动力学研究 。     

有上相酶催化中溶剂工程的进展

阐述了有机溶剂和水对有机相酶催化性质的影响,并评述了这一领域的应用现状和今后的发展方向：将溶剂对酶催化行为的影响定量化;改善酶与有机溶剂的不相容性;研究更多的酶以及多酶体系的催化性质;以底物活度进行动力学研究。     

有机溶剂对缢蛏碱性磷酸酯酶分子构象和催化活力的影响

本文初步研究了三种有机溶剂甲醇、二甲基甲酰胺、二氧六环对缢蛏碱性磷酸酯酶(ALP)分子构象和催化活力的影响。发现在有机溶剂作用下,ALP的荧光发射光谱、紫外差光谱、园二色光谱都发生了显著的变化,而酶经甲醇、二甲基甲酰胺预处理后酶活力提高,经二氧六环预处理后活力下降,但当测活体系中有三种有机溶剂存在时,酶的活力却被大大抑制。     

有机溶剂/水两液相体系中甾体激素的生物转化

对有机溶剂,水两液相体系中甾体激素的生物转化进行了综述,主要包括有机溶剂,水两液相体系中甾体生物转化的特征、有机溶剂的选择、细胞的固定化、影响甾体激素转化率的因素以及反应器的设计等。     

有机介质中的固定化酶反应

近年来非水介质中的酶催化反应正获得越来越多的研究和应用。使用有机介质替代传统的水溶液作为酶反应的介质,通常是为了增加疏水性底物或产物的溶解度,或者是为了促使水解反应逆向进行,以便利用水解酶催化合成一些非常有用的化合物。有机介质包括合少量有机助溶剂的均相水溶液系统、水／有机溶剂双相系统,以及含微量水的有机溶剂均相系统等几种类型[1],具体使用时要根据生物催化剂的性质、反应物的溶解性和反应器的型式等特点细加选择。尽管在有机溶剂中可直接使用酶粉作催化剂[k],但是效果并不太好。一方面天然酶在有机溶剂中容易变…     

有机溶剂微扰葡萄糖淀粉酶时的紫外、荧光和红外光谱

本文结果表明:(1)酶体系中随有机溶剂含量增加,紫外吸收亦随之增加,表明芳香氨基酸更充分地暴露,分子更趋于伸展;(2)酶的荧光发射随有机溶剂量增加而稍有变化,但当溶剂量达到一定值时[对乙二醇为35％(V/V)],荧光发射强度显著增加,表明酶分子构象受溶剂影响有一个极限值;(3)酶的傅立叶红外光谱表明,有机溶剂侧链的疏水性愈强,微扰后C=O,C—N,O—H等共价键的吸收峰变得愈宽,愈强,肽链愈伸展。     

耐有机溶剂脂肪酶的研究进展

脂肪酶是一种重要的酶,在有机介质中脂肪酶能催化某些特定的化学反应。获得具有较高催化活性的耐有机溶剂脂肪酶具有重要的价值。该文概述了一些具有代表性的耐有机溶剂脂肪酶,介绍了耐有机溶剂脂肪酶的特性和应用,并对耐有机溶剂脂肪酶的筛选途径和分子改造方法进行了分析。今后有机溶剂耐受性脂肪酶的研究将集中在酶的利用、微生物筛选、脂肪酶表征和基因克隆、酶的分子改造等方面。     

采用β-葡萄糖苷酶两相催化法水解栀子苷的研究

本研究探索采用有机溶剂/水两相系统作为反应体系来进行栀子苷的酶解反应。以栀子苷和京尼平在水相溶剂中的分配系数作为考察指标,从4种有机溶剂/水两相系统中筛选适合采用两相催化反应体系水解栀子苷的两相溶剂系统。经筛选发现,正丁醇/水两相系统为最佳反应系统,其中栀子苷在水相中的分配比为74.2%,而京尼平仅为22.1%。以正丁醇/水两相系统作为的反应体系,采用β-葡萄糖苷酶催化栀子苷水解,酶解条件为反应温度为50℃,pH为5.0,转速为180 rpm,并采用HPLC-UV对反应过程进行检测。栀子苷转化率在反应10 h后达到86.6%。     

海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶催化内吗啡肽的合成

反应体系以乙腈作为有机介质,在微水有机溶剂体系中以Boc-Trp-OH和Phe-NH2为底物,用海藻酸钠 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶催化合成Trp-Phe-NH2时,产率为27.8%．在这一合成反应中,对pH值、离子强度、溶液含量、反应温度、酶用量和反应时间进行正交试验,证明pH是本合成过程的最重要影响因素．反应体系以乙腈为有机介质,在微水有机溶剂体系中以 Boc-Tyr-Pro-OMe和Trp-Phe-NH2为底物,用IPSAC催化合成Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2,产率为35~2%．     

辣根过氧化物酶同工酶在不同介质中的动力学

本文研究了辣根过氧化物酶［ＥＣ１．１１．１．７］同工酶的联苯胺动力学。结果表明：其酸性酶和碱性酶的最适ｐＨ均为５．８左右。二者最适有机溶剂浓度略有差异：酸性酶最适乙醇浓度为５０％,最适二氧六环浓度为４０％;而碱性酶则分别为６０％和５０％。在水溶剂中,酸性酶为米氏酶,碱性酶为正协同的别构酶;在有机溶剂（如：乙醇、二氧六环）中,酸性酶为正协同的别构酶,碱性酶则仍为正协同的别构酶。即有机溶剂可能使酶构象发生变化。     

有机溶剂中青霉素酰化酶催化的动力学与热力学

用电泳纯巨大芽孢杆菌胞外青霉素酸化酶,研究其在乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、二氧六环、四氢呋喃等有机溶剂存在下的动力学和热力学特性,并与相应的溶液酶作比较,探讨溶剂酶（有机溶剂存在下的酶）和溶液酶在催化活性及分于构象方面的特性。     

辣根过氧化物酶同工酶在不同介质中的动力学

本文研究了辣根过氧化物酶［ＥＣ１．１１．１．７］同工酶的联苯胺动力学。结果表明：其酸性酶和碱性酶的最适ｐＨ均为５．８左右。二者最适有机溶剂浓度略有差异：酸性酶最适乙醇浓度为５０％,最适二氧六环浓度为４０％;而碱性酶则分别为６０％和５０％。在水溶剂中,酸性酶为米氏酶,碱性酶为正协同的别构酶;在有机溶剂（如：乙醇、二氧六环）中,酸性酶为正协同的别构酶,碱性酶则仍为正协同的别构酶。即有机溶剂可能使酶构象     

低共熔溶剂对酶的影响及应用研究*

低共熔溶剂是由一定化学计量比的氢键受体和氢键供体组合而成的新型绿色溶剂,具有成本低、易制备、环境友好等特点,可以作为普通有机溶剂和离子液体的替代溶剂。酶作为生物催化剂时反应条件温和,对反应底物专一性高,并且具有极高的催化效率和反应速度。酶促反应通常发生在水溶液体系,但近年来发现在低共熔溶剂中酶促反应也能有效进行。综述酶与低共熔溶剂共同作用的机理以及低共熔溶剂在酶促反应中的应用,展望未来的研究方向,为酶促反应体系的进一步开发奠定理论基础。     

微生物嗜盐酶的研究进展

嗜盐酶一般来自于嗜盐菌,它的主要特点是严格依赖体系中一定的盐离子浓度,可以在高盐环境中维持其结构稳定,并且能够抵抗高温、p H和有机溶剂存在下的变性,因此在高盐、水/有机和非水介质环境的催化中具有重要的应用价值。本综述从盐对嗜盐酶活性和稳定性的影响、金属离子和有机溶剂对嗜盐酶的影响几个方面介绍了嗜盐酶的特点。在总结蛋白质数据库(PDB)中已有嗜盐酶的结构和特点的基础上,对嗜盐酶的嗜盐机制进行了分析,认为嗜盐酶不同于非嗜盐酶的特点在于盐桥和氢键明显增多,含有一些特殊的盐离子结合位点并且常以低聚体的形式存在,表面酸性氨基酸含量明显增多。最后对嗜盐酶的分子改造和应用进行了简要的介绍。     

微水——有机溶剂两相体系中消旋萘普生的酶法拆分

研究了微水－有机溶剂两相体系中固定化脂肪酶催化的萘甲酯的立体选择性水解反应,固定化酶活性受载体极性、水含量、有机溶剂的ｌｏｇＰ值,产物抑制的影响,据此构建了一种可以连续拆分产生（Ｓ）－（＋）－萘普生的微水－有机溶剂两相体系。反应在一个具有回路的连续流搅拌反应器中进行,反应器中添加有采用吸附法固定化的脂肪酶,截体为一种弱极性的合成载体,水相连同固定化酶颗粒一起永久保持在反应器中,有机流动相带入底物,     

有机溶剂对脂肪酶LipozymeIM催化活性的影响

脂肪酶LipozYmeIM经有机溶剂浸泡处理后活性显著提高。该文系统地探讨了有机溶剂特性、有机溶剂水含量以及有机溶剂浸泡温度和浸泡时间对LipozymeIM催化活性的影响。发现LipozymeIM经疏水性较强的有机溶剂浸泡处理后活性成倍增长;浸泡的最佳温度为60℃左右;浸泡时间对酶活影响不大;随着有机溶剂水含量的增加,酶活性急剧下降。     

微水-有机溶剂两相体系中消旋萘普生的酶法拆分

研究了微水-有机溶剂两相体系中固定化脂肪酶催化的萘普生甲酯的立体选择性水解反应。固定化酶活性受载体极性、水含量、有机溶剂的logP值、产物抑制的影响,据此构建了一种可以连续拆分产生(S)(+)萘普生的微水-有机溶剂两相体系。反应在一个具有回路的连续流搅拌反应器中进行,反应器中添加有采用吸附法固定化的脂肪酶,载体为一种弱极性的合成载体,水相连同固定化酶颗粒一起永久保持在反应器中,有机流动相带入底物,带出产物。固定化酶在该50mL反应器中30℃连续操作60d,仅损失活性25%,产生(S)(+)萘普生900mg,产物对映体过量值(ee_p)为95%。     

有机溶剂在酶反应中的应用

有机溶剂广泛应用于有机化学反应。但酶反应中却很少使用;尽管有时分离纯化某些酶时也使用酒精或丙酮,但十分慎重。事实证明大多数有机溶剂会引起酶蛋白变性,失活或抑制酶反应;并且有的有毒,易燃。因此,长期形成一种概念:酶反应需在水溶液中进行,避     

非水介质中的酶催化

传统理论认为,酶作为生物催化剂,在体外只能在水溶液环境才保持活性,而有机溶剂中酶则往往变性或失活。然而人们发现事实并非如此。如向酶溶液中加入能与水互溶的酒精、丙酮等,或制作乳化的酶水有机溶剂两相系统,甚至在几乎无水的有机介质中,酶仍能够具有催化活性。...     

有机溶剂对脂肪酶ipozyme^IM催化活性的影响

脂肪酶Ｌｉｐｏｚｙｍｅ＾ＩＭ经有机溶剂浸泡处理后活性显著提高。该文系统地探讨了有机溶剂特性,有机溶剂水含量以及有机溶剂包温度和浸泡时间对Ｌｉｐｏｚｙｍｅ＾ＩＭ催化活性的影响。发现Ｌｉｐｏｚｙｍｅ＾ＩＭ经疏水性较强的有机沉沦 泡处理后活性成倍增长;浸泡的最佳温度为６０℃左右,浸泡时间对酶活影响不大;随着有机溶剂水含量的增加,酶活性急剧下降。