基础卵泡刺激素水平对IVF／ICSI—ET超排卵周期卵巢反应的预测价值

目的：基础卵泡刺激素（bFsH）可以刺激精子生成和促进卵子成熟,是人体内重要的激素之一。本研究针对体外受精（IVF）周期bFSH水平的变化情况,探讨bFSH对卵巢反应的预测价值,为临床研究提供理论基础。方法：回顾性分析2012年1月-2012年12月在我院生殖医学中心接受体外受精．胚胎移植（IVF—ET）治疗的154例患者的临床资料,根据基础卵泡刺激素水平分为A组CoFSH≥10IU／L）、B组（8≤bFsH≤10IU／L）和c组（bFSH〈8IU／L）。对比分析三组对象的年龄、基础窦卵泡数（bAFC）、黄体生成素（LH）含量、FSH／LH值、促性腺激素（Gn）的用量、使用时间、受精率及临床妊娠率等。结果：三组患者的年龄、bAFC及FSH／LH相比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;三组的Gn用量和时间、获卵数及妊娠率比较,差异显著且具有统计学意义（P〈0．05）;三组基础LH值及超排卵周期受精率无显著差异（P〉0．05）。结论：基础卵泡刺激素（bFSH）对体外受精女性的卵巢储备功能具有一定的预测价值,bFSH水平的高低可作为预测女性不孕患者超排卵周期卵巢反应性的一项重要指标,值得临床推广和应用。     

基础窦卵泡数对IVF/ICSI-ET超排卵周期卵巢反应的预测价值*

摘要目的：窦卵是女性宫腔内的泡状细胞,与女性卵巢的发育及功能密切相关。本研究针对体外受精(IVF)周期中基础窦卵泡数 (antral follicle count, AFC)的变化情况,探讨AFC 对卵巢反应的预测价值,为临床研究提供理论基础。方法：回顾性分析2012 年1 月至2012 年12 月在我院生殖医学中心接受体外受精- 胚胎移植的157 例患者的临床资料,根据基础窦卵泡数将所选病例分为 A 组(bAFC逸10)和B组(bAFC＜10)。对比并分析两组研究对象的促性腺激素(Gn)的用量及使用时间、获卵数、人绒毛膜促性腺激 素(HCG)注射日的血清中雌激素(E2)水平、受精率、临床妊娠率等。结果：A 组患者的Gn 用量、HCG日E2 值、获卵数及临床妊娠 率均显著高于B 组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的年龄和基础卵泡刺激素水平差异显著且具有统计学意义(P<0.05); 两组患者的不孕原因、不孕年限及助孕方式无明显差异(P>0.05)。结论：基础窦卵泡对体外受精女性促排卵周期的卵巢反应及助 孕结局具有一定的预测价值,其数量的多少可作为促排卵过程中评价卵巢反应性的参考指标,应在临床进一步推广。     

基础窦卵泡数对IVF／ICSI-ET超排卵周期卵巢反应的预测价值

目的：窦卵是女性宫腔内的泡状细胞,与女性卵巢的发育及功能密切相关。本研究针对体外受精（IVF）周期中基础窦卵泡数（antral follicle count, AFC）的变化情况,探讨AFC 对卵巢反应的预测价值,为临床研究提供理论基础。方法：回顾性分析2012 年1月至2012 年12 月在我院生殖医学中心接受体外受精- 胚胎移植的157 例患者的临床资料,根据基础窦卵泡数将所选病例分为A 组（bAFC逸10）和B组（bAFC＜10）。对比并分析两组研究对象的促性腺激素（Gn）的用量及使用时间、获卵数、人绒毛膜促性腺激素（HCG）注射日的血清中雌激素（E2）水平、受精率、临床妊娠率等。结果：A 组患者的Gn 用量、HCG日E2 值、获卵数及临床妊娠率均显著高于B 组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;两组患者的年龄和基础卵泡刺激素水平差异显著且具有统计学意义（P〈0.05）;两组患者的不孕原因、不孕年限及助孕方式无明显差异（P〉0.05）。结论：基础窦卵泡对体外受精女性促排卵周期的卵巢反应及助孕结局具有一定的预测价值,其数量的多少可作为促排卵过程中评价卵巢反应性的参考指标,应在临床进一步推广。     

基础卵泡刺激素水平对IVF/ICSI-ET超排卵周期卵巢反应的预测价值

目的:基础卵泡刺激素(bFSH)可以刺激精子生成和促进卵子成熟,是人体内重要的激素之一。本研究针对体外受精(IVF)周期bFSH水平的变化情况,探讨bFSH对卵巢反应的预测价值,为临床研究提供理论基础。方法:回顾性分析2012年1月-2012年12月在我院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的154例患者的临床资料,根据基础卵泡刺激素水平分为A组(bFSH≥10 IU/L)、B组(8≤bFSH≤10 IU/L)和C组(bFSH8 IU/L)。对比分析三组对象的年龄、基础窦卵泡数(bAFC)、黄体生成素(LH)含量、FSH/LH值、促性腺激素(Gn)的用量、使用时间、受精率及临床妊娠率等。结果:三组患者的年龄、bAFC及FSH/LH相比较,差异具有统计学意义(P0.05);三组的Gn用量和时间、获卵数及妊娠率比较,差异显著且具有统计学意义(P0.05);三组基础LH值及超排卵周期受精率无显著差异(P0.05)。结论:基础卵泡刺激素(bFSH)对体外受精女性的卵巢储备功能具有一定的预测价值,bFSH水平的高低可作为预测女性不孕患者超排卵周期卵巢反应性的一项重要指标,值得临床推广和应用。     

卵泡刺激素和雌激素对培养的鸡胚卵巢生殖细胞增殖的影响

在动物体内多种激素共同调控着卵巢生殖细胞的生长、发育和成熟,其中促性腺激素起着至关重要的作用。本实验建立了鸡胚(18日胚龄)卵巢构建生殖细胞和体细胞的共培养模型,并研究卵泡刺激素(FSH)、17B雌二醇(E2)以及二者联合处理对生殖细胞增殖的影响。结果发现FSH(0．25-1．0IU／mL)、E2(10-1000ng／mL)处理48h后均可显著促进生殖细胞的增殖,FSH与E2共同处理作用更加显著且高于其单独处理组,表明FSH和E2可协同刺激鸡胚卵巢生殖细胞的增殖,FSH可能是通过促进雌激素或其受体的合成而发挥作用。     

OCT4 介导卵泡刺激素对永生化人卵巢上皮细胞株增殖、 凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨OCT4基因对卵泡刺激素作用下的永生化人卵巢上皮细胞株(Moody细胞)增殖、凋亡和侵袭能力影响。方法:将不同浓度的FSH(0、25、50、100mIU/ml)作用于Moody细胞48小时,应用Western-blot技术检测OCT4表达情况。采用慢病毒介导将重组质粒OCT4稳定转染至人卵巢上皮细胞株中,应用Western-blot法鉴定OCT4蛋白表达情况。FSH以50 mIU/ml作为工作浓度,实验对象分为4组:①siCon组,转染空载体的阴性对照组;②OCT4组:稳定转染OCT4基因的Moody细胞组;③FSH+siCon组:以FSH处理的siCon组;④FSH+OCT4组:以FSH处理的OCT4组。采用MTT比色法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果:(1)随着FSH浓度的增加,Moody细胞中OCT4蛋白表达逐渐增高,在FSH浓度为50 mIU/ml时达最高;(2)OCT4基因成功转染至Moody细胞中,经Western-blot检测该基因在细胞中进行蛋白高表达;(3)FSH+OCT4组细胞增殖活性明显增高,同时凋亡率降低,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05);(4)在FSH作用下,转染OCT4后明显增强了细胞的侵袭能力,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:OCT4介导了FSH对人卵巢上皮细胞增殖、凋亡、侵袭活性的调控。     

药学角度探讨和分析不同来源卵泡刺激素对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:比较基因重组卵泡刺激素(r-FSH)及高纯度尿源性卵泡刺激素(HP-u FSH)对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响,结合临床表现从药学角度探讨和分析。方法:回顾分析具IVF/单精子卵细胞浆内显微注射授精(ICSI)指诊并首次接受IVF/ICSI助孕的不孕症患者235例,以给予的FSH药物种类不同分为2组:HP-u FSH组(n=135)和r-FSH组(n=100)。主要研究指标为出生率,次要研究指标为临床妊娠率,流产率及着床率。结果:HP-u FSH组外源性促性腺激素(Gn)总量和FSH量均多于r-FSH组(P0.01),获卵数和可移植胚胎数较r-FSH组少(P0.01),受精率较r-FSH组低(P0.05)。两组平均Gn刺激天数,妊娠结局及中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率均无统计学差异(P0.05)。对患者年龄35岁和≥35岁分别进行分组发现,年龄35岁患者中的HP-u FSH组较r-FSH组平均年龄更大,不孕年限更长,基础窦卵泡数(AFC)更少(P0.01),≥35岁患者中的HP-u FSH组与r-FSH组的基本特征(年龄,不孕年限,AFC)无统计学差异(P0.05);无论年龄35岁或年龄≥35岁,HP-u FSH组的Gn量和FSH量较r-FSH组均更大,获卵数及可移植胚胎数更少(P0.01)。结论:在IVF/ICSI周期治疗中,国产HP-u FSH与r-FSH进行COS具有等同的IVF临床妊娠率及出生率。     

促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用

目的：观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素（FSH）在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法：将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组（CG）、玻璃化冻存对照组（VCG）、0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组（OG-FSH）,玻璃化冻存条件为小鼠卵巢入培养液在37℃二氧化碳培养箱培养60 min,接着入1.5 mol/L乙二醇中预渗透平衡8 min,再移入EG5.5-30玻璃化液渗透平衡3.5 min,之后投入-196℃的液氮罐中保存1 d,全过程在22~24℃下进行。每组20枚卵巢,10枚进行HE染色后的正常卵泡百分比计数,10枚进行免疫组织化学法观察。结果：与对照组（CG）比较,玻璃化冻存对照组（VCG）正常卵泡百分比显著降低,active caspase-3的表达量显著升高（P<0.05）;与玻璃化冻存对照组（VCG）比较,0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组（OG-FSH）组的正常卵泡百分比明显升高,active caspase-3的表达量显著降低（P<0.05）。结论：小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH干预可有效抵抗凋亡执行蛋白active caspase-3的表达,有利于卵巢组织形态结构的保护。     

早卵泡期长效长方案联合全程重组黄体生成素对卵巢高反应人群排卵和妊娠结局的影响

摘要 目的：探讨早卵泡期长效长方案联合重组黄体生成素（r-LH）对卵巢高反应人群排卵和妊娠结局的影响。方法：选入2019年1月~2023年3月在我院行早卵泡期长效长方案促排卵的卵巢高反应患者150例,根据是否添加r-LH分为对照组（未添加r-LH,n=75）和观察组（添加r-LH,n=75）。比较两组的促排卵相关指标和妊娠结局。结果：观察组Gn天数、Gn总量、HCG日血清LH水平、优质胚胎率均显著高于对照组,获卵数显著少于对照组（P＜0.05）。两组降调天数、Gn启动量以及HCG日E₂、P水平和子宫内膜厚度、临床妊娠率、活产率、流产率比较无差异（P>0.05）。结论：卵巢高反应患者行早卵泡期长效长方案促排卵时,添加r-LH可显著增加体内LH水平,提高优质卵泡率,对妊娠结局具有一定改善作用。     

来曲唑联合GnRH-a对多囊卵巢综合征患者雌激素水平及对排卵质量的影响

目的:研究来曲唑(Letrozole,LE)联合醋酸曲普瑞林(GnRH-a)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的临床疗效及对排卵质量的影响。方法:选取我院2014年8月到2016年1月收治的PCOS患者112例,随机将其分为对照组(50例)和观察组(62例)。在月经周期第3~7天时,观察组患者口服LE,2.5 mg/d;对照组患者肌肉注射人绝经期促性腺素(HMG),75 IU/d。当最大卵泡直径(MFD)≥18mm时,观察组患者皮下注射0.1 mg醋酸曲普瑞林诱发排卵,对照组患者肌肉注射6000~10000 IU人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱发排卵。比较两组患者诱发排卵日的排卵效果和血清各激素水平,并统计妊娠结局。结果:诱发排卵日,两组患者的子宫内膜厚度、成熟卵泡数目、血清黄体生成激素(LH)和孕酮(P)水平、排卵率、妊娠率及黄体功能不全发生率比较差异均无统计学意义(P0.05),观察组的优势卵泡数目、血清E2和T水平、多胎率、OHSS发生率及卵巢囊肿发生率均明显低于对照组(P0.05)。结论:LE联合GnRH-a可有效提高PCOS患者的排卵质量,降低血清雌激素水平,并能预防OHSS发生,改善妊娠结局。     

试管牛和试管羊胚胎性别的鉴定

奶牛和山羊的卵母细胞经过体外成熟、体外受精和体外发育至桑椹期,在显微操作下,吸取4～6个胚胎细胞,应用巢式PCR技术对其DNA进行SRY基因的测定以进行胚胎性别鉴定。共有27枚转有外源基因的试管牛胚胎和207枚转基因试管羊胚胎进行了SRY基因检测。选取10枚经过性别鉴定的牛胚胎移植于8头受体母牛和124枚已知性别的羊胚胎移植于44头受体母羊,移植后妊娠率分别为37．5％（牛,3/8）和61．4％（羊,27/44）。最后产生1头分娩牛犊和2头流产胎牛以及14头分娩羊羔和2头流产胎羊,它们的性别与胚胎性别鉴定的结果完全相符。 Abstract: The oocytes of bovines and goats were subjected to in vitro maturation,in vitro fertilization(IVF)and in vitro development upto morula stage．4～6 embryonic cells were aspirated with micro-manipulating and the embryo sexes were identified by detecting SRY gene with nested PCR procedure．A total of 27 transgenic IVF bovine and 207 transgenic IVF goat embryos were performed SRY gene detection．10 bovine and 124 goat sexed embryos were selected to be transferred into 8 bovine and 44 goat recipients,respectively,leading to the pregnant rates of 37．5％( in bovine,3/8)and 61．4％(in goat,27/44)．In the end,1 cattle and 14 goatlets were born at term but 2 fetal bovine and 2 fetal goats were miscarried．Their sexes were fully in accordance with the embryonic sex predetermination．     

促排卵过程中添加重组人生长激素对卵巢储备功能低下患者IVF-ET结局的影响及妊娠结局的影响因素探讨

摘要 目的：探讨促排卵过程中添加重组人生长激素（r-hGH）对卵巢储备功能低下（DOR）患者体外授精-胚胎移植（IVF-ET）结局的影响,并分析妊娠结局的影响因素。方法：选择2021年1月至2022年1月徐州市中心医院拟接受IVF-ET治疗的DOR患者60例、徐州医科大学附属沭阳医院拟接受IVF-ET治疗的DOR患者36例,共计96例,采用随机数字表法分为两组,每组48例,对照组予以常规促排卵治疗,观察组促排卵过程中添加r-hGH治疗,比较两组促排卵、体外受精、胚胎移植以及妊娠相关指标。此外,根据妊娠结局将所有患者分成妊娠成功组和妊娠失败组,采用多因素Logistic回归分析IVF-ET结局的影响因素。结果：观察组胚胎种植率、临床妊娠率高于对照组（P＜0.05）;观察组与对照组注射重组人促卵泡激素（Gn）天数、Gn用量、人绒毛膜促性腺激素（HCG）日雌二醇（E2）水平、HCG日黄体生成素（LH）水平、HCG日子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵数、受精率、卵裂率、可移植胚胎数、优质胚胎数、移植胚胎数、早期流产率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。单因素分析结果显示：妊娠失败组女方平均年龄大于妊娠成功组,基础卵泡刺激素（FSH）水平、IVF周期≥2个的患者比例高于妊娠成功组,促排卵应用了r-hGH的患者比例低于妊娠成功组,HCG日子宫内膜厚度小于妊娠成功组,基础窦卵泡数（AFC）个数、成熟卵数、优质胚胎数少于妊娠成功组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：女方年龄≥35岁、基础FSH≥14.40 IU/L、HCG日子宫内膜厚度＜10 mm、基础AFC＜5.5个是DOR患者IVF-ET妊娠失败的危险因素,而促排卵应用r-hGH治疗是保护因素（P＜0.05）。结论：促排卵过程中增加r-hGH治疗可提高DOR患者IVF-ET胚胎种植率、临床妊娠率。女方年龄、基础FSH和AFC、HCG日子宫内膜厚度、r-hGH治疗均与IVF-ET妊娠结局有关。     

Spontaneous and sperm-induced activation of oocytes in LT/Sv strain mice

The oocytes of LT/Sv strain mice are unique in that a high proportion of them (∼40% in this study) are ovulated before reaching metaphase of the second meiotic division (metaphase II). The remaining oocytes of LT/Sv mice are ovulated at metaphase II, as in other strains of mice. When recently ovulated oocytes were cultured in vitro for 11–12 h, those ovulated at metaphase II remained at this stage, whereas those ovulated at metaphase of the first meiotic division (metaphase I) commonly resumed meiosis during in vitro aging. These oocytes extrude the polar body and form a diploid pronucleus. This oocyte activation is not coupled with cortical granule exocytosis. The oocytes ovulated at metaphase II are fully capable of normal fertilization, whereas those ovulated at metaphase I are not. Approximately 50% of metaphase I oocytes penetrated by spermatozoa remain at this stage, and sperm nuclei frequently undergo premature chromosome condensation. Only 13% of spermpenetrated metaphase I oocytes formed a diploid female pronucleus and a haploid male pronucleus by 4 h after insemination. These results demonstrate that the two types of ovulated LT/Sv oocytes have different potentials to undergo either spontaneous or sperm-induced activation.     

A preliminary report on the establishment of pregnancies in an in vitro fertilization (IVF) programme at the University of British Columbia (UBC)

Between July 1982 and November 1983, two pregnancies were established using in vitro fertilization and embryo transfer (IVF and ET) procedures with three different schedules to induce follicular maturation. All women were cycling normally and had inoperable or absent fallopian tubes. Of 83 oocytes aspirated from 24 patients (31 cycles), 75% were considered mature and 25% immature by the morphological characteristics of the oocytes and cumulus cells. Oocytes were preincubated for 6–24 hours, and after insemination, 60% cleaved to the two-to-four-cell stage. The superovulation induction schedule employing hMG administered according to the individually adjusted treatment scheme established two pregnancies. This schedule was considered the superior regimen, as it gave the highest proportion of mature oocytes (89%) which cleaved (78%). The pregnancy-attaining follicle showed a high progesterone:estradiol-17β ratio (P₄/E₂) in its microenvironment of aspirated follicular fluid, culture media of granulosa cells, and oocyte-cumulus complex. Our observations indicate a high P₄/E₂ ratio in the pregnancy-attaining follicle, and thereby reflect a further parameter in influencing maturation of the oocytes most likely to implant.     

心钠肽在小鼠卵巢中的表达及其对受精的影响

目的探讨心钠肽（ANP）在小鼠卵泡发育过程中的表达定位以及其对体外受精的影响。方法应用免疫组织化学对小鼠卵巢切片进行染色,检测ANP在卵泡不同发育阶段的表达情况。利用ANP受体A的拮抗剂anantin检测ANP在小鼠体外受精中的作用。结果在卵泡生长和分化期,ANP广泛地存在于间质细胞、内膜细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵母细胞以及黄体细胞的胞质中,特别是在排卵前卵泡中的卵丘细胞上其表达最强;经ANP受体A的拮抗剂anantin孵育后的小鼠精子,其体外受精的卵裂率与对照组相比显著下降（58.7±4.3 vs.92.3±2.1,P〈0.01）,但是对胚胎后来的发育没有影响。结论卵丘细胞中表达的ANP可能通过受体A参与了小鼠的受精过程。     

卵泡内环境对猪卵泡卵体外成熟和发育的影响

研究卵泡内环境对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育的影响。主要结果如下：直径≥5mm、4－4.9mm、3－3.9mm和2－2.9mm的卵泡卵母细胞体外成熟率分别为90.5%、89.7%、85.4%和67.4%,体外受精后,卵母细胞的发育能力随卵泡直径的增大而增强,直径≥5mm和4－4.9mm卵泡卵的2－细胞、3－4－细胞发育率显著高于直径2－2.9mm的卵泡卵（P＜0.05或0.01）。体外成熟培养36h、42h和48h,直径2－2.9mm卵泡卵的体外成熟率,体外受精后的卵裂率差异不显著（P＞0.05）。在体外成熟培养液中添加5％或15％的不同直径卵泡的卵泡液,各组间卵母细胞的体外成熟率,受精卵的体外发育率均无显著差异,结果表明：卵泡大小对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育有重要影响。     

Connexin 43 coupling in bovine cumulus cells,during the follicular growth phase,and its relationship to in vitro embryo outcomes

Gap junctional coupling between cumulus cells is required for oocytes to reach developmental competence. Multiple connexins, which form these gap junctions, have been found within the ovarian follicles of several species including bovine. The aim of this study was to determine the role of connexin 43 (CX43) and its relationship to embryo development, after in vitro fertilization (IVF). Cumulus?oocyte complexes (COCs) were obtained from abattoir sourced, mixed breed, bovine ovaries. COCs were isolated from follicles ranging from 2 to 5 mm in size, representing the preselected follicle pool. Immediately after isolation, two cumulus cell biopsies were collected and stored for analysis pending determination of developmental outcomes. Using in vitro procedures, COCs were individually matured, fertilized, and cultured to the blastocyst stage. Biopsies were grouped as originating from COCs that arrested at the two‐cell stage (low developmental competence [LDC]) or having developed to the late morula/blastocyst stage (high developmental competence [HDC]), after IVF and embryo culture. The expression level of CX43 was found to be significantly higher in cumulus cells from COCs that had an HDC when compared with those that had an LDC. Moreover, the gap junctional intercellular coupling rate was significantly higher in cumulus from COCs deemed to have an HDC. Significantly higher expression of the cumulus health markers luteinizing hormone receptor and cytochrome p450 19A1 was found in the cumulus originating from oocytes with HDC, suggesting that this system may provide a mechanism for noninvasively testing for oocyte health in preselected bovine follicles.