简易电泳洗脱蛋白方法

制备电泳的连续洗脱与切下目的蛋白谱带洗脱是从聚丙烯酰胺凝胶回收蛋白质常用的两种方法。切带回收蛋白可采用浸泡提取,化学解聚凝胶及电泳洗脱多种途径。相对比较,电泳洗脱蛋白回收率较前二者高些,因此人们多采用此法。但是,目前广泛使用     

快速简易凝胶板干燥方法

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳广泛应用于生物化学及免疫化学等研究方面。人们希望能将电泳凝胶板制成干片,以便进行放射自显影或使电泳结果可以长期保存。国内外已有凝胶真空干燥器生产,可以使凝胶板在加热和真空情况下迅速干燥。但价格昂贵,而且每次只能干燥1—2片,不能适应大量干燥凝胶板的需要。虽然Ginlian和王育东在室温下用简易方法干燥凝胶板,但凝胶板需先用甘油预处理     

聚丙烯酰胺凝胶固定核酸方法及其应用

固相核酸已被广泛用于DNA/cDNA微阵列、固相PCR及其它核酸与生物分子检测的传感技术中.和硬质玻璃载片相比,三维聚丙烯酰胺凝胶作为固定核酸的载体具有结合核酸容量高、利于反应的类似液相环境和较少的空间效应等优点.综述了丙烯酰胺凝胶作为固定核酸载体的发展历史.着重介绍了丙烯酰胺修饰核酸直接聚合固定的方法以及在DNA芯片、焦测序、固相PCR(克隆)、及全基因组测序等核酸分析中的应用.     

垂直平板凝胶真空干燥的简易方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳已被广泛应用于生物化学的各个领域。因垂直平板凝胶电泳和圆盘凝胶电泳相比,具有实验误差小、效率高、操作方便等优点,近年来发展较快。对于平板凝胶图谱,一般保存在7%的乙酸溶     

从凝胶上洗脱收集叶绿素蛋白质复合体的再电泳法

叶绿体中的叶绿素均与特殊蛋白质相结合,组成了在结构上和功能上都迥然不同的三类叶绿素蛋白质(chl-protein)复合体,后者在光合作用的光能捕获、传递、分配和转换过程中起着非常重要的作用。对叶绿素蛋白质复合体进行深入的研究,对于人们更好地阐明光合作用中能量转换的机理有着十分重要的理论意义和实践意义。为研究叶绿体中的叶绿素蛋     

凝胶柱层析测定半乳糖苷转移酶的简易方法

半乳糖苷转移酶催化转移UDP-半乳糖上的半乳糖苷到葡萄糖或乙酰氨基葡萄糖上,形成乳糖类化合物。本法采用一根Bio-gel P-2小玻璃柱(0.3×45cm)可以将产物乳糖与底物清楚地分开,为该酶活性的测定提供了一个简便的精确的新方法。     

一种简易的聚丙烯酰胺凝胶脱色方法

PAGE是蛋白质分析、比较和特性鉴定的有效方法,常规SDS-PAGE分析蛋白过程中考马斯亮蓝色素脱除过程耗时低效。改变脱色液配方,使用20%的乙醇和10％冰醋酸作为脱色剂,在脱色液中放置3-5片纸巾吸附色素,并在脱色过程中换纸1-2次,可缩短脱色时间3-4h,减少脱色液用量2-3倍。     

电泳后琼脂糖凝胶中DNA的洗脱

序言 基因组的结构和功能的研究,很大程度上依赖于特定的DNA片段的分离和分析。凝胶电泳是一种以DNA片段大小为依据的,简单而且分辨力很强的一种分离特殊DNA片段的方法浓度为2.5％—0.1％的琼脂糖凝胶电泳可分辨出从150到880000硷基对的DNA片段,而在20％—3％的丙烯酰胺凝胶上,对20—2000硷基对的DNA片段分辨效果更好。     

电泳后琼脂糖凝胶中DNA的洗脱

序言 基因组的结构和功能的研究,很大程度上依赖于特定的DNA片段的分离和分析。凝胶电泳是一种以DNA片段大小为依据的,简单而且分辨力很强的一种分离特殊DNA片段的方法浓度为2.5％-0.1％的琼脂糖凝胶电泳可分辨出从150到880000硷基对的DNA片段,而在20％-3％的丙烯酰胺凝胶上,对20-2000硷基对的DNA片段分辨效果更好。     

一种从凝胶简单快速回收核酸的好方法

从凝胶中分离DNA或DNA片断是基因工程中常用的手段.在重组DNA、分子杂交、基因诊断等实验中,经常需要从凝胶中分离并回收核酸或核酸片断.目前分离DNA片断的方法很多.常用的如电洗脱法、冻融法等操作烦琐且得率较低;低融点琼(王旨)糖法得率较高,但价格昂贵,特别是回收的DNA片断常混有细小琼(王旨)糖颗粒,影响以后的酶切、连接等.我们摸索了一种简便方法,能够从琼(王旨)糖凝胶中高纯度、高得率地分离核酸或核酸片断,回收所得的DNA片断可以直接用于各种酶切反应和基因重组实验.现以分离P~(ZB24)重组质粒中2.3kb的大R蠖核多角体基因片断为例,说明如下:     

自红曲中分离红曲霉的简易方法

红曲是我国传统的发酵产品,其产生菌是我国重要的、独特的菌种之一。红曲主要含有红曲霉和酵母菌,也有很少的黑曲霉等。红曲用于酿酒,制备腐乳,食品着色和作为中药等。近几年来又开展了用红曲霉提取红色素和制备红曲霉制剂等的研究,而目前酿酒     

凝胶干板的简易制备法

聚丙烯酰胺凝胶干板的制备方法,国内外已有许多介绍,但由于条件限制和操作复杂,总不尽如意。本文介绍三种较为简易的凝胶平板干燥制板方法,以供大家参考。     

平板凝胶简易快速干燥法

本文介绍一种简易凝胶快速干燥法,无需抽真空、恒温水浴和电炉等装置。制成的干胶无气泡、无皱褶,图谱清晰,可永久保存。用这种方法制作干胶,成品率高。即使凝胶本已有少许破裂,但在干燥过程中裂缝不会继续加深。如果操作过程中不小心使凝胶和玻璃纸之     

简易聚丙烯酰胺凝胶干燥法

这里我们介绍一种简易聚丙烯酰胺凝胶干燥法,该法无需特殊设备,操作条件可灵活掌握。比已报道的凝胶干燥简易方法更为简便易行。操作如下: 1.用三合板或五合板锯成一个内边长为17厘米,外边长为23厘米的正方形木框。     

高浓度聚丙烯酰胺凝胶电泳中一种简易的凝胶移出方法

高浓度(T≥15％)的聚丙烯酰胺凝胶适于小分子量(MW≤10.000)多肽和带电物质的分离。然而采用圆盘凝胶电泳法时,这种小孔胶则难从管中取出。本文介绍一种简易的“涂蜡法”,解决了这一问题。它比Bio-Rad玻管破碎法和Ghadge聚酯树脂片法更简单、效果更好。一般实验室均可采用。 “涂蜡”玻璃管制备方法如下:将石蜡(熔点60-62℃)置烧杯中熔化,玻璃管(8×0.6cm)浸入70℃熔化的石蜡中,迅速取出(约3-5秒),直立放置水     

凝胶中痕量蛋白质和核酸的银染色法

高灵敏度的蛋白质银染色法最初是由Switzer和Merril于1979年建立的,其后Oakley、入江伸吉等人加以改良和简化,使检测的灵敏度提高到ng水平,可与放射自显影媲美。后来Somerville和Wang将该法扩大应用于聚丙烯酰胺凝胶中DNA和RNA的染色,山崎健一等又将该法推广到琼脂糖凝胶中DNA和RNA的染色。银染色法的突出优点是灵敏度高,用于蛋白质染色,比考马斯亮蓝染色感敏约50—100倍;用于RNA染色,比亚甲蓝染色敏感100—1000倍;用于DNA染色,比溴化乙锭染色敏感10—20倍。现将该法的要点和笔者的经验介绍如下。